1-烷基化瑞香烷型二萜及其在制备抗艾滋病毒药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属中药制药领域，涉及1-烷基化瑞香焼型二聰化合物及其在制备抗艾滋 病毒药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 研究报道了艾滋病（AID巧是由艾滋病毒化IV)引起的危害极大的传染性疾病，对 艾滋病的治疗无疑是当今世界医学界一大难题。由于HIV的变异极快，疫苗研究困难，所W 对艾滋病的治疗和预防一直未能取得突破性进展。
[0003]目前治疗艾滋病的有效治疗方案是将HIV逆转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂合用 的鸡尾酒疗法。尽管鸡尾酒疗法可W将艾滋病患者血液病毒水平降低到检出水平W下，但 实践证明不能彻底清除送一恶性病毒。由于艾滋病毒进入体内后大部分会先进入潜伏期， 而处于潜伏期的病毒可W躲过免疫系统和药物的攻击而不受影响，送成为了将艾滋病毒彻 底根除的最大障碍。所W开发研制能够作用于潜伏期的HIV病毒的新药向药物化学工作者 提出了挑战。在筛选抗HIV新药的过程中，越来越多的药物化学工作者把注意力转向了植 物来源丰富、价廉易得、毒副作用小、分子结构复杂多样的天然化合物。
[0004] 瑞香狼毒（Stellerachamaejasme)俗称断肠草、優头花、山萝h等，为瑞香科 CThymelaeaceae)狼毒属（Stellera)多年生草本植物，是我国草地危害较为严重的有毒植 物之一，全草有毒，常使家畜误食中毒，且由于生命力强，周围草本植物很难与之抗争，在一 些地方甚至被视为草原荒漠化的"警示灯"，其资源非常丰富，广泛分布在我国东北、西北、 西南及尼泊尔等地。瑞香狼毒W根入药，具有逐水巧姨、破积杀虫的功效，主治水肿腹胀、咳 嗽气喘等症，现代药理实验发现其具有明显的抗肿瘤和抗病毒作用，
[0005] 本申请的发明人拟提供具有很强抗HIV活性的瑞香狼毒中的1-烷基化瑞香焼型 二聰类及其在制备抗艾滋病毒药物中的用途。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供1-烷基化瑞香焼型二聰类化合物及其在制备抗艾滋病毒药 物中的用途。
[0007] 本发明应用现代药理筛选方法，从瑞香科狼毒属（Stellera)植物瑞香狼毒 仅chamaejasme)中提取1-烷基化瑞香焼型二聰类化合物并经实验证实其具有很强的抗 艾滋病毒活性。
[0008] 本发明所述的1-烷基化瑞香焼型二聰类化合物具有如下式I的化学结构。
[0009]
[0010]本发明所述的瑞香焼型二聰为瑞香内醋F(stelleralide巧（1)、瑞香内醋 G(stelleralideG) (2)和瑞香内醋H(stelleralideH) (3)。
[0011] 本发明的化合物通过下述方法制备：
[0012] 取瑞香狼毒根40kg，95 %己醇加热回流提取，提取物浓缩后用石油離萃取，共得 浸膏400g，取350g干法上样进行硅胶柱色谱，W石油離-丙丽梯度洗脱，将石油離；丙丽 巧：1~2:1)流份减压回收溶剂后进行快速中压硅胶柱色谱，用石油離-己酸己醋系统 (20:1~10:1~5:1~2:1~1:1)进行梯度洗脱，共收集洗脱液15份，每份2000ml，将第 8~13份合并，减压回收溶剂后再用Se地adexLH-20柱色谱分离，用环己焼/二氯甲焼/ 甲醇（4:5:1)洗脱，共收集洗脱液20份，每份80ml，将第9~14份合并，减压回收溶剂，经 MCI柱（甲醇/水（4:1))除去色素，再经Cis柱用甲醇/水化0:40~100:0)梯度洗脱，其 中甲醇/水（75:25)洗脱下来的流份用反相高效液相纯化，W己腊/水化0:40~85:15)梯 度洗脱，分离得到化合物stelleralideF(l)、stelleralideG(2)和stelleralideH(3);
[001引StelleralideF(1)，C46H560h巧 32)，白色无定型粉末， -7. 7(c0.lO'MeOH) ;IR(KBr)Vmax:3463(0H), 2925, 2860, 2360, 2340, 1731，1712, 145 7, 1384, 1279, 1025, 713cm1 ;UV(MeOH)AmaxQogO:230(4. 02) ;CD(0. 00048M，Me0H) 入max(A0 215 (1. 11)，236 (-1. 14)nm;化合物的iH和"cNMR数据如表 1 所示。
[0014]Stelleralide0似，〔5化8〇14(894)，白色无定型粉末，[?]: -16. ^cO. 12,MeOH); IR(KBr)Vmax:3453, 2934, 2854, 1715, 1451，1384, 1275, 1025, 712cm1 ;UV(Me0H) 入max(l〇邑 〇 :230(4. 15) ;CD(0. 00043M，Me0H)入max(A0215(1. 07)，237(-7. 4^nm;化合 物的的iH和"cNMR数据如表1所示。
[001引 Stelleralid細(3)心馬5012仍4)，白色无定型粉末，[ct货 +4.6(c0. 10，Me0H); IR(KBr)Vmax:3446. 80, 2927. 61，2858. 13, 1716. 54, 1451. 56, 1272. 53, 1112. 37 ，1023. 31，711. 85cm1 ;UV(MeOH)Amax(l0gO:230 (4. 31) ;CD(0. 00051M，Me0H) 入max(A0215(1. 16)，236(-5. 38);化合物的iH和"CNMR数据如表1所示。
[0016] 本发明所述的1-烷基化瑞香焼型二聰经药理试验，结果表明，其有显著的抗HIV 作用，且有效浓度低、细胞毒性较小的特点（如表2所示）；其中，stelleralideF(l)、 stelleralideG(2)、stelleralideHO)的ECso分别为 0. 93、0. 73 和 0. 98nM,治疗指数 (SI)均大于10000,抗HIV活性和安全系数明显高于阳性对照药齐多夫定巧Cs。= 32nM，SI =116. 87)。
[0017] 表 1 化合物 1 - 3 的古化OOMHz)和"C(150MHz)NMR数据（CDCls，5inppm,Jin Hz)
[0018]
[0019]
[0020] 本发明的1-瑞香焼型二聰可进一步作为活性成分用于制备治疗艾滋病毒的药 物。
【附图说明】
[0021] 图1是瑞香狼毒中1-烷基化瑞香焼型二聰类成分提取分离工艺流程图，
[002引其中，A;石油離-己酸己醋B巧己焼-二氯甲焼-甲醇C;己腊-水D;甲醇-水。
【具体实施方式】
[0023] 实施例1制备瑞香狼毒中的1-烷基化瑞香焼型二聰
[0024] 取瑞香狼毒根40kg，95 %己醇加热回流提取，提取物浓缩后用石油離萃取，共得 浸膏400g，取350g干法上样进行硅胶柱色谱，W石油離-丙丽梯度洗脱，将石油離；丙丽 巧：1~2:1)流份减压回收溶剂后进行快速中压硅胶柱色谱，用石油離-己酸己醋系统 (20:1~10:1~5:1~2:1~1:1)进行梯度洗脱，共收集洗脱液15份，每份2000ml，将第 8~13份合并，减压回收溶剂后再用Se地adexLH-20柱色谱分离，用环己焼/二氯甲焼/ 甲醇（4:5:1)洗脱，共收集洗脱液20份，每份80ml，将第9~14份合并，减压回收溶剂，经 MCI柱（甲醇/水（4:1))除去色素，再经Cis柱用甲醇/水化0:40~100:0)梯度洗脱，其 中甲醇/水（75:25)洗脱下来的流份用反相高效液相纯化，W己腊/水化0:40~85:15) 梯度洗脱，分离得到瑞香内醋F(stelleralide巧（1)、瑞香内醋G(stelleralideG)似和 瑞香内醋H(stelleralideH)(3)。
[0025] 实施例2体外抗HIV实验
[0026] 应用HIV-1化4-3病毒株感染MT4细胞（感染倍数=0. 001)，同时加入不同浓度的 药物，感染48小时候加入含适宜浓度药物的新鲜基质W维持细胞的正常生长，4天后采用 P24ELISA试剂盒分析病毒的复制情况；实验W齐多夫定（AZT)为阳性对照药物；化合物的 6(：^指药物抑制^￥-1?24抗原产生降低至50%时的药物浓度，采用线性回归分析法求得 ECg。度iosoftsoftware)，结果如表2所示。表2化合物1 - 3抗HIV活性测定结果
[0027]
【主权项】
1. 具有如下化学结构的I-烷基化瑞香焼型二聰，2. 按权利要求1所述的1-烷基化瑞香焼型二聰，其特征在于，所述的瑞香焼型二 聰为瑞香内醋F(stelleralide巧（1)、瑞香内醋G(stelleralideG)似和瑞香内醋 H(stelleralideH)(3)。3. 按权利要求1所述的1-烷基化瑞香焼型二聰，其特征在于，按下述方法制备： 取瑞香狼毒根，95 %己醇加热回流提取，提取物浓缩后用石油離萃取，得浸膏，取干法 上样进行硅胶柱色谱，W石油離-丙丽梯度洗脱，将石油離；丙丽巧：1~2:1)流份减压 回收溶剂后进行快速中压硅胶柱色谱，用石油離-己酸己醋系统（20:1~10:1~5:1~ 2:1~1:1)进行梯度洗脱，收集洗脱液15份，，将第8~13份合并，减压回收溶剂后再用 S巧hadexLH-20柱色谱分离，用环己焼/二氯甲焼/甲醇（4:5:1)洗脱，收集洗脱液20份， 将第9~14份合并，减压回收溶剂，经MCI柱（甲醇/水（4:1))除去色素，再经Cis柱用甲醇 /水化0:40~100:0)梯度洗脱，其中甲醇/水（75:25)洗脱的流份用反相高效液相纯化，W 己腊/水化0:40~85:15)梯度洗脱，分离得到化合物StelleralideF(I)、stelleralide G(2)和StelleralideH(3)。4. 权利要求1或2所述的1-烷基化瑞香焼型二聰类化合物在制备抗艾滋病毒药物中 的用途。
【专利摘要】本发明属中药制药领域，涉及1-烷基化瑞香烷型二萜及其在制备抗艾滋病毒药物中的用途。本发明从狼毒属(Stellera)植物瑞香狼毒(S.chamaejasme)中提取到1-烷基化瑞香烷型二萜类化合物，经试验证实其具有显著的抗HIV活性，EC50值均低于0.001μM，且细胞毒性较小，CC50值大于11μM，与阳性对照药物齐多夫定相比具有明显的优势。本发明所述的1-烷基化瑞香烷型二萜化合物可作为活性成分用于制备抗艾滋病毒的药物。
【IPC分类】A61K31/357, C07D493/22, A61P31/18
【公开号】CN105198899
【申请号】CN201410308774
【发明人】陈道峰, 严敏, 卢燕, 李国雄
【申请人】复旦大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2014年6月30日