片，包括底板1，上盖2及无菌培养基；所述底板1及上盖2为形状相适应，可上下咬合的多 环齿状结构，所述多环齿状结构为上下起伏的连续结构；底板1的多环齿状结构中部凹陷 形成培养室3,为方便叙述，将培养室3分作底面31和侧面32 ;相应地，上盖2的多环齿状 结构中部凸起形成培养室盖4 ;培养室底面31与侧面32的角度为30-80°，侧面32最高点 垂直于底面31的高度不小于0. 3cm;所述培养室3用于放置无菌培养基，培养室3底面31 内表面采用静电吸附膜制作或覆盖有静电吸附膜；所述无菌培养基为静电吸附式无菌培养 基，放置在培养室内。 阳131] 所述多环齿状结构的高度为0. 4cm到Icm ;
[0132] 所述培养室面积为25-180cm2;
[0133] 所述多环齿状结构为2环；
[0134] 底板底面与侧面的角度可W保证无菌水与培养基混合后，在常溫下形成的固体培 养基与底板紧密结合，不会在打开该多环测试片时从底板上脱落；
[0135] 所述微生物快速检测测试片的材质要求：透明，防水材料； 阳136] 所述底板1与上盖2的结合方式为分体； 阳137] 所述多环齿状结构的纵截面为相互配合的多个楠圆形的一部分；
[0138] 所述底板1及上盖2厚度分别为0.Imm-O. 6mm;微生物快速检测测试片长度 5-15cm，宽度 5-14cm。
[0139] 微生物快速检测多环测试片的制备可W包括如下步骤：
[0140] 多环测试片培养室底面内表面采用静电吸附膜制作或覆盖有静电吸附膜，W培养 室面积为SOcm2为例，称取膜蛋白腺0.Ig,酵母浸膏0. 05g，葡萄糖0. 02g，冷水可凝胶0. 2邑， 加入多环测试片底板的培养室中，高频振荡使培养基粉在静电的作用下均匀吸附于培养室 底面上，盖上上盖，密封后福照灭菌，保存； 阳141] 冷水可凝胶选自结冷胶，卡拉胶，瓜尔胶，黄原胶，刺槐豆胶，鼠李聚糖胶中至少一 种。
【主权项】
1. 一种微生物快速检测测试片，包括底板，上盖及无菌培养基；所述底板及上盖为形 状相适应，可上下咬合的多环齿状结构，所述多环齿状结构为上下起伏的连续结构；底板的 多环齿状结构中部凹陷形成培养室；相应地，上盖的多环齿状结构中部凸起形成培养室盖； 培养室底面与侧面的角度为30-80°，侧面最高点垂直于底面的高度不小于0. 3cm;所述无 菌培养基为凝胶分离式无菌培养基，包括无菌高浓度液体培养基和冷水可凝胶，冷水可凝 胶与复原后无菌高浓度液体培养基的质量体积比为：〇.〇〇5-15g: 1L;无菌高浓度液体培 养基独立包装，与冷水可凝胶使用前隔绝，使用时混合；所述冷水可凝胶或无菌高浓度液体 培养基放置在培养室内或培养室外；使用时，将无菌高浓度液体培养基和冷水可凝胶在培 养室中混合。2. 根据权利要求1所述微生物快速检测测试片，其特征在于，所述培养室底面内表面 为静电吸附膜或底面内表面覆盖静电吸附膜。3. 根据权利要求2所述微生物快速检测测试片，其特征在于，所述无菌培养基为静电 吸附式无菌培养基。4. 根据权利要求1所述微生物快速检测测试片，其特征在于，所述底板及上盖横截面 为同心的圆形或矩形；所述多环齿状结构的横截面形状为圆形或矩形。5. 根据权利要求1所述微生物快速检测测试片，其特征在于，冷水可凝胶由如下质量 份数的原料组成：结冷胶：瓜尔胶：黄原胶为1 : 4 : 5。6. 根据权利要求5所述微生物快速检测测试片，其特征在于，所述冷水可凝胶包括冷 水可凝胶助溶剂；助溶剂为二氧化钛表面活性剂、二氧化硅表面活性剂、Bola表面活性剂 中至少一种，加入比例以冷水可凝胶计：0? 0005wt% -〇? 5wt%。7. 根据权利要求1所述微生物快速检测测试片，其特征在于，所述多环齿状结构不少 于1环。8. -种用于权利要求1所述微生物快速检测测试片的凝胶分离式无菌培养基，所述凝 胶分离式无菌培养基包括使用前互相隔绝的无菌高浓度液体培养基和冷水可凝胶，冷水可 凝胶与复原后无菌高浓度液体培养基的质量体积比为：〇.〇〇5-15g: 1L; 所述冷水可凝胶均匀涂抹于培养室的中央，或置于培养室中； 所述无菌高浓度液体培养基的制备方法，包括溶解，混匀，消毒灭菌，无菌灌装步骤； 所述溶解为：按照本领域常规的培养基配方，去掉琼脂，将各原料混合，按照本领域常 规加水体积的1% -10%加水溶解混匀，使最终液体培养基浓度为正常培养基的10-100倍。9. 根据权利要求8所述的凝胶分离式无菌培养基，其特征在于， 冷水可凝胶由以下方法制备：培养基装量与培养室面积的比优选〇.25mL/cm2,根 据培养室面积，按照冷水可凝胶与无菌高浓度液体培养基的比例，称取经辐照后的冷 水可凝胶粉，成分为瓜尔胶：黄原胶：结冷胶：助溶剂Bola表面活性剂，质量比例为 80 : 100 : 19 : 1;加入多环测试片底板的培养室中，加入0. 006ml/cm2无菌水，迅速圆周 振荡溶解并均匀铺于培养室底面上，烘干后盖上上盖，密封后辐照灭菌，保存； 或者，冷水可凝胶由以下方法制备：以培养室面积SOcm2为例，，称取0. 2g冷水可凝 胶粉，冷水可凝胶粉的成分为瓜尔胶〇. 〇99g，黄原胶0.lg，助溶剂二氧化硅表面活性剂 0. 001g，加入多环测试片底板的培养室中，加入0. 5ml无菌水，迅速圆周振荡溶解并均勾铺 于培养室底面上，冷冻干燥后盖上上盖，密封后辐照灭菌，保存； 或者冷水可凝胶将冷水可凝胶，通过加热融化、压制、覆膜工艺制成胶膜，包装后通过 射线灭菌制成无菌冷水可凝胶膜； 所述无菌高浓度液体培养基的制备方法，包括如下步骤： 在溶解混匀步骤，加入稳定剂和/或消泡剂，以复原后无菌高浓度液体培养基体积计， 稳定剂用量为0.001-0.lg/L，消泡剂用量为0.001-0.lg/L;稳定剂为黄原胶，果胶，柠檬 酸，羧甲基纤维素钠中至少一种，消泡剂为乳化硅油，聚二甲基硅氧烷，高碳醇脂肪酸酯中 至少一种。10.权利要求8或9所述凝胶分离式无菌培养基的制备方法，包括如下步骤： 冷水可凝胶由以下方法制备：取〇. 2g经辐照后的冷水可凝胶粉，成分为瓜尔胶0. 08g， 黄原胶0.lg，结冷胶0. 〇19g，助溶剂Bola表面活性剂0. 001g，加入多环测试片底板的培养 室中，加入0.5ml无菌水，迅速圆周振荡溶解并均匀铺于培养室底面上，烘干后盖上上盖， 密封后辐照灭菌，保存； 或者，冷水可凝胶由以下方法制备：以培养室面积为SOcm2为例，称取0. 2g冷水可凝 胶粉，冷水可凝胶粉的成分为瓜尔胶〇. 〇99g，黄原胶0.lg，助溶剂二氧化硅表面活性剂 0. 001g，加入多环测试片底板的培养室中，加入0. 5ml无菌水，迅速圆周振荡溶解并均勾铺 于培养室底面上，冷冻干燥后盖上上盖，密封后辐照灭菌，保存； 或者将冷水可凝胶，通过加热融化、压制、覆膜工艺制成胶膜，包装后通过射线灭菌制 成无菌冷水可凝胶膜； 无菌高浓度液体培养基的制备方法，包括溶解，混匀，消毒灭菌，无菌灌装步骤；所述溶 解为：按照本领域常规的培养基配方，去掉琼脂，将各原料混合，按照本领域常规加水体积 的1% -10 %加水溶解混匀； 灭菌采用如下方法； 121°C或115°C高温高压灭菌15分钟； 无菌灌装，包装形式可为瓶装或袋装； 或者，无菌高浓度液体培养基的制备方法中，消毒灭菌按如下步骤进行： 对于培养基中易受温度或压力影响的成分，经过滤除菌，不易受温度或压力影响的成 分经热力灭菌，之后将二者混合；滤膜的孔径优选为0. 22微米； 或者，无菌高浓度液体培养基的制备方法，采用本领域常规的培养基配方，去掉琼脂， 将各原料，及以复原培养基计，〇. 〇〇lg/L的稳定剂和0. 001g/L的消泡剂混合装瓶，辐照灭 菌，之后按照本领域常规加水体积的1 % -10%加无菌水溶解混匀，使最终液体培养基浓度 为正常培养基的10-100倍；无菌灌装、包装； 所述凝胶分离式无菌培养基包括使用前隔绝的无菌高浓度液体培养基和冷水可凝胶， 冷水可凝胶与复原后无菌高浓度液体培养基的质量体积比为：〇.〇〇5-15g: 1L。
【专利摘要】本发明涉及一种微生物快速检测多环测试片、测试片中包含的无菌培养基，并涉及无菌培养基的制备方法，属于微生物检验技术领域。微生物快速检测测试片，包括底板，上盖及无菌培养基；底板及上盖为形状相适应，可上下咬合的多环齿状结构，底板的多环齿状结构中部凹陷形成培养室；相应地，上盖的多环齿状结构中部凸起形成培养室盖；培养室底面与侧面的角度为30-80°，侧面最高点垂直于底面的高度不小于0.3cm；培养室用于放置无菌培养基；无菌培养基为凝胶分离式无菌培养基或静电吸附式培养基。本发明使检测工作简便快速，多环齿状结构能够有效的保持培养基水分不流失，同时提供微生物生长需要的气体成分，有利于微生物检测工作的开展。
【IPC分类】C12M1/34, C12Q1/04
【公开号】CN105219634
【申请号】CN201510366781
【发明人】原春锋
【申请人】原春锋
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年6月30日