微生物除臭复合菌剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及微生物技术处理领域，具体而言，设及一种微生物除臭复合菌剂及其 制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 随着经济的不断发展，人们生活水平的提高及城市化进程的不断加速，室内外环 境污染问题日益突出，城乡居民对生活环境的标准越来越高，对空气质量的要求越来越重 视。恶臭作为环境公害之一，直接影响人们的生活质量，甚至危害到人们的健康，已越来越 受到人们的关注。规模化畜禽养殖场是恶臭物质产生的重要来源，大量的畜禽粪便及生活 垃圾得不到充分有效利用，既浪费资源又污染环境，特别是夏秋之季，养殖场周围大多是臭 气熏天，蚊蛹肆虐。养殖场所产生的恶臭含有多种有毒有害成分，其中氨气、硫化氨、硫醇和 甲硫醇等是主要有害气体成分，恶臭的排放会对周边环境造成严重污染，人们长期吸入后 对身体健康造成严重伤害。养殖业所产生的恶臭已经成为一大公害，引起了各方面的关注， 因此，实施恶臭污染控制和管理，开展脱除恶臭气体的研究具有重要意义。
[0003] 近年来国内市场对畜禽养殖场除臭剂的需求不断增长，市场潜力巨大，但是目前 国内生产的除臭剂产品良莽不齐、质量不尽人意难W得到相关企业及单位的认可。其中，利 用微生物除臭是广泛应用的一种经济高效环保的方式。微生物除臭的实质是运用特定功能 的微生物将一些臭味物质分解转化为无臭的物质或者是抑制臭味物质的产生从而达到去 除臭味的目的。生物除臭由于具有无污染、持续性强等特点，己成为环境工作者研究的热点 之一。近年来国内研究者大部分集中在单一菌株的筛选，而将多种不同功能的微生物组成 微生物菌剂应用于实践中还很少有报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种微生物除臭复合菌剂及其制备方法和应用，该微生物 除臭复合菌剂对氨气和硫化氨具有较好的去除效果，且对环境无污染。
[0005] 为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了 一种微生物除臭复合 菌剂，包括：乳酸菌 4. 8X1〇8-10Xl〇Scfu/mL;毛霉菌 2X1〇6-5Xl〇6cfu/mL;酵母 菌 3. 9X107-7. 2Xl〇7cfu/mL;巨大芽胞杆菌 3X1〇6-1Xl〇7cfu/mL;枯草芽胞杆菌 7Xl〇6-lXl〇7cfu/mL;总菌数为 5. 31Xl〇S-10. 97Xl〇Scfu/mL。
[0006] 进一步地，该微生物除臭复合菌剂包括：乳酸菌4. 8Xl〇Sc化/mL;毛霉菌 2X106c化/mL;酵母菌3. 9X107c化/mL;巨大芽胞杆菌3X106c化/mL;枯草芽胞杆菌 7Xl〇6cfu/mL;总菌数为 5. 31Xl〇Scfu/mL。
[0007] 根据本发明的另一方面，还提供了一种微生物除臭复合菌剂的制备方法，包括如 下步骤：1)固体斜面培养：分别将巨大芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌接种于牛肉膏蛋白腺固体 培养基中，毛霉菌和酵母菌接种于上豆固体培养基中，乳酸菌接种于MRS固体培养基中，恒 溫培养W使菌株活化；2) -级种子培养：将经步骤1)中活化后的菌株分别相应地接种于牛 肉膏蛋白琼脂腺液体培养基、±豆液体培养基和MRS液体培养基中培养，即得一级种子；3) 二级种子培养：将步骤2)所得一级种子继续接种培养，即得二级种子液；4)将步骤3)中获 得的巨大芽胞杆菌种子液和枯草芽胞杆菌种子液混合发酵有氧培养，获得菌剂A;将步骤 3)中获得的乳酸菌种子液、毛霉菌种子液和酵母菌种子液混合发酵有氧培养，获得菌剂B; 5)将步骤4)中获得的菌剂A和菌剂B混合，得到微生物除臭复合菌剂。
[0008] 进一步地，步骤1)中菌株活化的条件为：28~32°C下恒溫培养4-6天；优选30°C 下恒溫培养1-2天；可选地，牛肉膏蛋白腺固体培养基的配方为：牛肉膏5g，蛋白腺lOg， 化Cl5g、蒸馈水1000血和固体加琼脂20g，抑值为7. 0-7. 2 ;±豆固体培养基的配方为： ±豆200g、葡萄糖20g、蒸馈水1000血和固体加琼脂20g，抑值为7. 0-7. 2 ;MRS固体培养 基的配方为蛋白腺lOg、牛肉膏lOg、酵母膏5g、葡萄糖20g、吐溫801. 0血、憐酸氨二钟2g、 醋酸钢5g、巧樣酸二锭2g、屯水硫酸儀0. 58g、四水硫酸儘0. 25g和蒸馈水lOOOmU抑值为 6. 2-6. 6。
[0009] 进一步地，步骤2)中的培养条件为：25~35°C下，揽拌速度为160~20化pm下培 养2~3天，当液体培养菌密度0D600值达到0. 6~0. 8时停止培养；优选地，步骤2)中的 培养条件为：30°C和揽拌速率为18化pm下培养2天，当液体培养菌密度0D600值达到0. 7 时停止培养。
[0010] 进一步地，步骤3)中一级种子均W3~7%的接种量分别接种，于25~35°C且揽 拌速率为150~20化pm下培养2~3天；优选W5%的接种量分别接种，于30°C且揽拌速 率为18化pm下培养2天。
[0011] 进一步地，步骤4)中制备菌剂A的步骤包括：将步骤3)中制备的巨大芽胞杆菌种 子液和枯草芽胞杆菌种子液均W10~20%的接种量接种于发酵罐中，并在25~35°C、揽 拌速率为110~13化pm且通气量为1. 0~1. 5vvm下混合发酵有氧培养；优选地，将步骤3) 中制备的巨大芽胞杆菌种子液和枯草芽胞杆菌种子液均W15%的接种量接种，并在30°C、 揽拌速率为12化pm且通气量为1. 58vvm下混合发酵有氧培养；
[0012] 制备所述菌剂B的步骤包括：将所述步骤3)中获得的乳酸菌种子液、毛霉菌种子 液和酵母菌种子液W10~20%的接种量接种于发酵罐中混合发酵有氧培养，并于25~ 35°C、揽拌速率为110~13化pm且通气量为0. 8~1. 4vvm下混合发酵有氧培养；优选地， 将步骤3)中获得的乳酸菌种子液、毛霉菌种子液和酵母菌种子液W15%的接种量接种于 发酵罐中，并在30°C、揽拌速率为12化pm且通气量为l.Ovvm下混合发酵有氧培养。
[0013] 进一步地，按照质量百分含量计，混合发酵时的发酵培养基由2. 5%糖蜜、0. 12% 玉米粉、0. 33%硫酸锭、0. 07%憐酸二氨钟、0. 05%硫酸儀、0. 05%氯化巧及余量的水组成。
[0014] 进一步地，在步骤4)中，将菌剂A和菌剂BW体积比1:2~2:1混合；优选将菌剂 A和菌剂BW体积比1:1混合。
[0015] 根据本发明的又一方面，还提供了上述任一种的微生物除臭复合菌剂在畜禽养殖 场和垃圾填埋场中的应用；优选地，应用的方法为将微生物除臭复合菌剂用水稀释100倍， 按照0.化g/m2对待除臭区域进行喷洒。
[0016] 本发明的有益效果：
[0017] 1)本发明的微生物除臭复合菌剂由多种微生物菌种经过发酵制成，属于多菌型， 并且由于菌群组成、代谢类型、呼吸类型及作用功能多样性的特点，使得该微生物除臭复合 菌剂能够在粪污中良好生长，迅速稳定占据有利生态位，有效地抑制了产生恶臭物质的腐 败菌生长繁殖或对恶臭物质直接降解，实现了恶臭原位源头控制，并且对环境适应能力强， 应用范围广，除臭效果比较持久。
[0018] 2)该微生物除臭复合菌剂由乳酸菌、毛霉菌、酵母菌、巨大芽胞杆菌和枯草芽胞杆 菌等有益微生物构成，由于协调作用，有益菌在粪污中能够进行强有力的生长繁殖，有效地 改善了粪便生态环境，减少了粪便中抗生素的使用。
[0019] 根据下文对本发明具体实施例的详细描述，本领域技术人员将会更加明了本发明 的上述W及其他目的、优点和特征。
【具体实施方式】
[0020] 为了解决现有技术中对养殖业或者垃圾场所产生的恶臭处理效果不佳的问题， 本发明提供了一种微生物除臭复合菌剂，包括：乳酸菌4.8Xl〇S-10Xl〇Sc化/mL;毛霉菌 2X1〇6-5Xl〇6cfu/mL;酵母菌 3. 9X107-7. 2Xl〇7cfu/mL;巨大芽胞杆菌 3X1〇6-1XlO^cfu/ 血；枯草芽胞杆菌 7X1〇6-1XlO^cfu/血；总菌数为 5. 31Xl〇S-10. 97Xl〇Scfu/血。
[0021] 其中，乳酸菌J2化actobacillus)发酵产酸，能够抑制病原微生物的生长。毛霉菌 J3(Mucor)能糖化淀粉并能生成少量乙醇，产生蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、凝乳酶等。酵母菌 J6 (Saccharomycetes)是毕赤酵母菌，可W分泌激素等生理活性物质，为有益微生物繁殖提 供所需基质，在分解恶臭中起到增强功效。巨大芽胞杆菌LS-UBacillus megetarium)可 W产生多种酶，抑制腐败微生物如大肠杆菌，黄色葡萄球菌等的生长，减少臭味的产生。枯 草芽胞杆菌LS-2度acillus subtilis)可W产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肤 等活性物质，对腐败微生物具有抑制作用