得到半固态的糊状物；按加酶量2% (w/w)果胶酶：纤维素酶：碱性蛋白酶= 1:1:1添加至菜巧糊状物，在20巧m下揽拌混合，先40°C保持20min，溫度在20min内从40°C 升溫到60°C，6(rC下保持20min，梯度控溫充分发挥了酶的作用，显著提高了出油率；然后 3500rpm离屯、，将菜巧糊状物分离得到果渣和毛油；最后将毛油按0.化/kg油的加水量加入 水，在40°C下6500rpm离屯、分离得到菜巧清油，最后经过真空干燥得到最终的水酶法菜巧 油。
[0043] 实施例3 :半固态水酶法和传统水酶法、低水分水酶法菜巧油微量成分含量比较
[0044] 分别采用传统水酶法、低水分水酶法和本发明实施例1-2的半固态水酶法制备菜 巧油，分别测定油中生育酪、酱醇、酪类和β-胡萝l·素，结果如表1。
[0045]传统水酶法：油料破碎后加水，固液比1:4~6,加入果胶酶、纤维素酶、蛋白质酶 等，酶在水相中进行水解，使油脂从油料固体粒子中渗出。由于水的比例较高，蛋白溶液容 易与油形成乳化液，清油含量得率低，大约只有50%，给后续分离提取带来困难。
[0046]低水分水酶法，料液比1:0. 1~0. 4进行预处理后，采用有机溶剂进行油脂浸出， 提油率（制取得到的总油（包括清油和乳化的油）/菜巧颗粒里的总油质量）虽然提高，但 有机溶剂的脱除和残留仍然影响消费者的健康。
[0047] 表1不同水酶法制备得到的菜巧油微量成分含量比较
[0048]
[0049]
[0050] 由表1可知，本发明的半固态水酶法制得的菜巧油，微量活性成分含量显著高于 传统水酶法和低水分水酶法。
[00川实施例4 :提取工艺对菜巧油品质的影响
[0052] 采用本发明实施例1的方法，改变步骤（4)中油料与水的比例，其他步骤一致，结 果如表2所示。结果表明，采用本发明的半固态水酶法的1:1可W显著提高清油的率。清 油得率是离屯、得到的非乳化油/菜巧颗粒里的总油质量。
[0053] 表2固液比对清油得率的影响
[0054]
[00对实施例5凍巧油对高血脂大鼠影响
[0056]取正常SD(170 +lOg)雄性大鼠56只在实验环境下适应7天，然后将大鼠随机分 为7组：正常对照组、高脂猪油组、精炼菜巧油组、冷棒菜巧油组、热棒菜巧油组、半固态水 酶菜巧油组（使用本发明方法制备得到的菜巧油）和浸出菜巧油组，每组8只，除了正常组 给予正常饲料外，高脂猪油组给予高脂饲料（1 %胆固醇+0. 2胆酸钢巧0%猪油+10%蛋黄 粉+68. 85%基础饲料），其他5组用10%不同加工方式制得的菜巧油代替10%猪油，其他 条件不变。给予高脂饲料12周后，禁食12小时候后，称量大鼠体重。再W水合氯醒动物麻 醉后，屯、脏刺穿取血，离屯、取的血液上清液，分别W医用试剂盒测定血清中TC、TG、皿心(：、 LDkC等生化指标。取肝脏组织（1cmXlcm左右大小）置于4%的多聚甲醒固定溶液中进 行组织固定，石蜡切片和H/E组织染色的制作，W观察肝脏组织的形态。
[0057] (1)对体重、体质比的影响
[0058] 结果如表3所示，结果表明从表中显示，本发明的半固态水酶法制得的菜巧油能 明显抑制高脂大鼠体重、肝体比的增加。
[0059] 表3菜巧油对高血脂大鼠体重、体脂比的影响（X+S，η= 8)
[0060]
[0061] 肝体比：肝脏重量/体重
[0062] (2)对血液生化指标的影响
[0063] 表4菜巧油对高脂大鼠血清中TC、TG含量的影响（X+S，η= 8)
[0064]
阳0化]由表4显示与正常组相比，和给予高脂猪油饲料，W及其它给予不同加工方式制 取的菜巧油的大鼠相比较，W水酶法组大鼠血清中的TCH和TG水平为最低，其中血清中 TCH、TG含量于高脂猪油比较，分别降低达到28%和12%。
[0066] 表5菜巧油对高脂大鼠血清中LDkC、皿心0含量的影响（X+S，η= 8)
[0067]
[0068] 当机体LDkC(俗称坏胆固醇）含量过高，可沉积于屯、脑血管壁上，导致动脉粥样 硬化。表5表明与正常对照组相比，高脂组的LDL-C增加300% (P<0. 05) 水酶法组大鼠 血清中的LDL-C相较于高脂猪油组则降低水平为最低，可达36%。皿L-C水平两者之间 差异不明显。其他不同加工方式所得菜巧油组中，浸出组的LDkC水平最高和皿kC水平 最低。
[0069] (3)对病理组织学的影响
[0070] 大鼠病理组织学观察的显微镜图如附图1-7所示。可知，正常对照组大鼠肝脏细 胞呈放射状排列整齐，肝细胞质丰富，界限清晰；与其它方法制备所得菜巧油喂养的动物肝 脏组织相比，本水酶法组最为明显接近正常组织形态，即肝细胞保持放射状完整的细胞排 列和结构。然而高脂猪油组大鼠肝细胞胞浆内可见大小不等的脂滴空泡。精炼组和正己烧 浸出组，肝脏细胞内脂肪液滴较多偏大，细胞间间隙不清楚；冷棒组、热棒组和水酶组相对 脂肪液滴较少偏小。
[0071]虽然本发明已W较佳实施例公开如上，但其并非用W限定本发明，任何熟悉此技 术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范 围应该W权利要求书所界定的为准。
【主权项】
1. 一种半固态水酶法制备菜籽油的方法，其特征在于，所述方法是： (1) 将油菜籽清理干净，去除碎肩、瘪籽、杂质； (2) 对除去杂质的菜籽进行水分调制，使其水分含量为8-lOwt% ; (3) 对上一步得到的菜籽进行乳胚，得到菜籽胚片，对菜籽胚片于50°C-70°C进行调 制，使其水分含量为3. 5-4. 5wt%，得到熟胚； (4) 将熟胚粉碎过筛，得到油料；将油料与水按1:1的质量比例混合得到半固态的糊状 物；按总加酶量0. 5%~2%w/w添加质量比果胶酶：纤维素酶：碱性蛋白酶=1:1:1的酶至 菜籽糊状物，在40-60°C下搅拌混合l_2h;然后离心，将菜籽糊状物分离得到果渣和毛油； 最后将毛油按0. 2-0. 4L/kg油的加水量加入水，在40-60°C下离心分离得到菜籽清油，最后 经过真空干燥得到最终的水酶法菜籽油。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶解过程采用梯度控温的方法，40°C 保持20-40min，温度在20-40min内从40°C升温到60°C，60°C下保持20-40min。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述粉碎过筛得到粒度40~80目的油 料。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述40-60°C下搅拌混合是在10-20rpm 下搅拌。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述果渣和毛油的分离是在3500rpm下离 心。6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述菜籽清油是在6500rpm下离心得到 的。7. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4)具体是： 将熟胚粉碎过筛，得到粒度40~80目的油料；将油料与水按1:1的质量比例混合得 到半固态的糊状物；按加酶量〇. 5%~2%w/w果胶酶：纤维素酶：碱性蛋白酶=1:1:1添 加至菜籽糊状物，在40-60°C下用混合机在10-20rpm下混合l-2h;然后用两相离心机在 3500rpm下离心将菜籽糊状物分离得到果渣和毛油；最后将毛油按0. 25L/kg油的加水量加 入蒸馏水，在40°C下，用立式离心机离心，6500rpm分离得到菜籽清油，最后经过真空干燥 得到最终的水酶法菜籽油，无需任何精炼步骤。8. 根据权利要求1-7任一所述方法得到的菜籽油。9. 权利要求8所述菜籽油在食品或者饲料方面的应用。10. 权利要求8所述菜籽油在降低血脂、降低胆固醇、降低甘三酯或者降低体重方面的 应用。
【专利摘要】本发明公开了一种半固态水酶法制备菜籽油的方法，属于功能食品和保健品领域。本发明以半固态水酶法、以果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶复配进行酶解，从菜籽中提出的菜籽油，工艺简单、条件温和、安全，得到的菜籽油微量营养活性成分生育酚、甾醇、酚类、β-胡萝卜素保留较多。本发明制备的菜籽油可以添加到动物饲料中，能够辅助性地降低动物的血脂和体重，明显降低血清中总甘三脂(TG)、总胆固醇(TCH)和LDL-C含量，并升高血清中HDL-C的含量，并且以本水酶法制得的菜籽油能够改善高血脂大鼠肝脏脂肪变性。
【IPC分类】C11B1/06, C11B1/00
【公开号】CN105331438
【申请号】CN201510831700
【发明人】刘元法, 曹培让, 李进伟, 张亮
【申请人】江南大学
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年11月25日