5~1. 5g/L、硫酸镁0. 5~5g/L、氯化钾1. 0~10g/L、硫酸亚铁1~ 5g/L、鹿糖10~30g/L、琼脂15g;
[0031] 2)二级培养：将步骤1)中的一级斜面种子孢子接种于液体培养基中，装液量为 50~100mL/500mL，25°C~35°C、160~300rpm/min条件下培养48~55h得到二级种子 液；液体培养基为按下述比例配制的混合液：玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/L、葡萄 糖3~12g/L、胰蛋白胨10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸镁1~ 5g/L、碳酸|丐1~5g/L;
[0032] 3)三级扩大培养：将步骤2)中得到的二级种子液体积百分比0.5%~10%接种 于发酵罐内，在液体培养基中25°C~35°C、160~300rpm/min条件下培养20~36h，得到三 级种子液；液体培养基为按下述比例配制的混合液：玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/ L、葡萄糖3~12g/L、胰蛋白胨10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸 镁1~5g/L、碳酸|丐1~5g/L;
[0033] 4)固体发酵：将步骤3)的三级种子液的液体培养基按1 %~10%的重量比接入 固体发酵培养基中，培养基含水量为49 %~58%，pH为5. 0~7. 0,曲房相对湿度保持在 95%以上，料温为30°C~45°C，采用固体发酵48~72h;固体发酵培养基为按下述质量比 配制：麸皮30%~40%，玉米粉1 %~5%，豆柏粉30%~40%，葡萄糖0. 1 %~2%，氯化 钠2%~5%，磷酸氢二钾0.2%~1%，硫酸锰0. 1%~0.5%，碳酸钙0.5%~2%，氯化铵 0· 5%~1%，ρΗ5· 0~7. 0 ;低温淀粉酶酶活达到4500U/g。
[0034] 实施例2
[0035] 本实施例的一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法，包括以下步骤：
[0036] 1) -级斜面培养：将低温淀粉酶产酶菌种接种至斜面培养基上，25°C~35°C培养 4~8d，得到一级斜面种子孢子；斜面培养基为按下述比例配制的混合液：硝酸钠3. 0~ 5.Og/L、磷酸氢二钾0. 5~1. 5g/L、硫酸镁0. 5~5g/L、氯化钾1. 0~10g/L、硫酸亚铁1~ 5g/L、鹿糖 10 ~30g/L、琼脂 15g;
[0037] 2)二级培养：将步骤1)中的一级斜面种子孢子接种于液体培养基中，装液量为 50~100mL/500mL，25°C~35°C、160~300rpm/min条件下培养48~55h得到二级种子 液；液体培养基为按下述比例配制的混合液：玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/L、葡萄 糖3~12g/L、胰蛋白胨10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸镁1~ 5g/L、碳酸|丐1~5g/L;
[0038] 3)三级扩大培养：将步骤2)中得到的二级种子液体积百分比0.5%~10%接种 于发酵罐内，在液体培养基中30°C~45°C、160~300rpm/min条件下培养20~36h，得到三 级种子液；液体培养基为按下述比例配制的混合液：玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/ L、葡萄糖3~12g/L、胰蛋白胨10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸 镁1~5g/L、碳酸|丐1~5g/L;
[0039] 4)固体发酵：将步骤3)的三级种子液的液体培养基按1 %~10%的重量比接入 固体发酵培养基中，培养基含水量为49 %~58%，pH为6. 0~7. 0,曲房相对湿度保持在 95%以上，料温为30°C~45°C，采用固体发酵48~72h;固体发酵培养基为按下述质量比 配制：麸皮55%~70%，豆柏10%~30%，玉米粉1%~5%，麦芽糊精1%~5%，碳酸钙 1%~5%，蔗糖0. 1%~1%，乳糖0. 5%~1. 5%，葡萄糖0. 1%~1%，酵母膏0. 1%~1%， ρΗ5· 0~7. 0 ;低温淀粉酶酶活达到4000U/g。
[0040] 实施例3
[0041] 本实施例的一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法，包括以下步骤：
[0042] 1) -级斜面培养：将低温淀粉酶产酶菌种接种至斜面培养基上，25°C~35°C培养 4~8d，得到一级斜面种子孢子；斜面培养基为按下述比例配制的混合液：硝酸钠3. 0~ 5.Og/L、磷酸氢二钾0. 5~1. 5g/L、硫酸镁0. 5~5g/L、氯化钾1. 0~10g/L、硫酸亚铁1~ 5g/L、鹿糖 10 ~30g/L、琼脂 15g;
[0043] 2)二级培养：将步骤1)中的一级斜面种子孢子接种于液体培养基中，装液量为 50~100mL/500mL，25°C~35°C、160~300rpm/min条件下培养48~55h得到二级种子液； 麦芽糊精5~20g/L、玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/L、葡萄糖3~12g/L、胰蛋白胨 10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸镁1~5g/L、碳酸|丐1~5g/L;
[0044] 3)三级扩大培养：将步骤2)中得到的二级种子液体积百分比0. 5%~10%接种 于发酵罐内，在液体培养基中30°C~45°C、160~300rpm/min条件下培养20~36h，得到三 级种子液；麦芽糊精5~20g/L、玉米淀粉5~40g/L、豆柏粉5~20g/L、葡萄糖3~12g/ L、胰蛋白胨10~25g/L、牛肉膏5~10g/L、磷酸二氢钾1~5g/L、硫酸镁1~5g/L、碳酸 I丐 1 ~5g/L;
[0045] 4)固体发酵：将步骤3)的三级种子液的液体培养基按1 %~10%的重量比接入 固体发酵培养基中，培养基含水量为50 %~65%，pH为5. 0~7. 0,曲房相对湿度保持在 95%以上，料温为30°C~45°C，采用固体发酵48~72h;固体发酵培养基为按下述质量比 配制：麸皮55%~70%，豆柏10%~30%，玉米粉1%~5%，麦芽糊精1%~5%，碳酸钙 1%~5%，蔗糖0. 1%~1%，乳糖0. 5%~1. 5%，葡萄糖0. 1%~1%，酵母膏0. 1%~1%， ρΗ5· 0~7. 0;低温淀粉酶酶活达到3500U/g。
[0046] 实施例4
[0047] 本实施例的一种畜禽饲料专用低温淀粉酶的制备方法，包括以下步骤：
[0048] Γ) -级斜面培养：将低温淀粉酶产酶菌种接种至斜面培养基上，25°C~35°C培 养4~8d，得到一级斜面种子孢子；斜面培养基为按下述比例配制的混合液：硝酸钠3. 0~ 5.Og/L、磷酸氢二钾0. 5~1. 5g/L、硫酸镁0. 5~5g/L、氯化钾1. 0~10g/L、硫酸亚铁1~ 5g/L、鹿糖 10 ~30g/L、琼脂 15g;
[0049] 2'）二级斜面培养：将步骤Γ)中的一级斜面种子孢子接种于内含斜面培养基的 二级茄形培养瓶斜面，25°C~35°C培养4~8d得到二级斜面孢子；斜面培养基为按下述比 例配制的混合液：硝酸钠3. 0~5. 0g/L、磷酸氢二钾0. 5~1. 5g/L、硫酸镁0. 5~5g/L、氯 化钾1. 0~10g/L、硫酸亚铁1~5g/L、鹿糖10~30g/L、琼脂15g;
[0050] 3'）固体发酵：将步骤2'）的二级斜面孢子制备为孢子悬液，按1个茄形培养瓶 孢子悬液接种于l〇〇kg固体发酵培养基中，培养基含水量为50 %~65%，pH为5. 0~7. 0， 曲房相对湿度保持在95 %以上，料温为30°C~45 °C，采用固体发酵48~72h;固体发酵培 养基为按下述质量比配制：麸皮55%~70%，豆柏10%~30%，玉米粉1 %~5%，蔗糖 0· 1 %~1 %，乳糖0· 5%~1. 5%，葡萄糖0· 1 %~1 %，酵母霄0· 1 %~1 %，ρΗ5· 0~7. 0 ; 低温淀粉酶酶活达到3000U/g。
[0051] 将以上实施例用于仔猪饲养的应用。
[0052] 选取实施例2的一种畜禽饲料专用低温淀粉酶，酶活性为4000U/g。选取28日龄 断奶仔猪128头，采取同窝分组的方式随机分成2组，即对照组与试验组，每组8个重复64 头，直至仔猪68日龄试验结束。试验期间，试验组日粮在对照组基础上添加低温淀粉酶500克/吨，两组饲养管理条件完全相同，于断奶后15天、断奶后40天分别个体称重，记录每组 耗料情况，统计试验期间日增重及料重比。试验结果如下：
[0053] 试验期增重情况见表1。
[0054] 表1 28-68日龄试验期间生产性能分析表
[0056] 注：1、起始重单位：kg;日增重单位：g;2、数字右肩上标字母a表示差异显著 (p〈0. 05)，数字右肩上标字母b表示差异极显著（p〈0. 01)。
[0057] 由表1可知，试验组的前期（28-43日龄）日增重比对照组高45g，说明低温淀粉酶 对断奶仔猪顺利过渡断奶应激有较大的帮助；整个保育期间（28-68日龄），与对照组相比， 试验组在增重上始终保持较大的优势，全程日增重提高16. 53%，说明在保育仔猪饲料中添 加一定量的低温淀粉酶有助于提高保育仔猪的生产性能。
[0058] 试验期耗料情况见表2。
[0059] 表2仔猪试验期耗料结果/kg
[0060]
[0061] 由表2可知，试验组头平耗料比对照组多了 3. 26kg，但其个体增重比对照组多了 2. 29kg，在料重比上占有绝对优势，在饲料转化率上试验组比对照组提高4. 02%。从而，可 以看出，低温淀粉酶对于提高保育仔猪肠道消化有明显促进作用，较好地提高了仔猪的饲 料转化与吸收能力。
[0062] 经济效益分析见表3。
[0063] 表3保育仔猪经济效益分析表kg、元/头
[0064]
[0065] 注：1、饲料单价核算：保育阶段三个料种，第一阶段6200元/吨，按每头仔猪均耗 料5kg;第二阶段4200元/吨，按每头仔猪均耗料9. 5kg计；第三阶段3700元/吨，根据实 际耗料计