在本发明的一个实施方式中，活性成分可W选自蛋白质、核酸、肤、脂质、糖脂、 矿物质、糖、造影物、药物和化学化合物中的至少一种。在本发明的一个实施方式中，活性成 分可W是肤。在本发明的一个实施方式中，活性成分可W是细胞因子、抗体、抗体片段、治疗 酶、可溶性受体或配体。
[0088] 在本发明目前的描述中，本文公开的"细胞穿透肤"指可W在体外和/或体内将载 物转运到细胞内的肤。本文公开的"载物（cargo)"包含所有的通过与细胞穿透肤缀合而可 W转运进入细胞内的物质，例如，所述所有物质为意图增加细胞穿透效能的那些物质，特别 是药物，更特别是不能通过一般路径转运进入细胞内的物质，更特别是蛋白质、核酸、肤、矿 物质、糖(如葡萄糖）、纳米颗粒、生物制剂、病毒、造影剂或其他化学化合物，但不限于运些。
[0089] 本文公开的"药物"为广义概念，包括待转运用于缓解、预防、治疗或诊断疾病、伤 口或特定症状的物质。
[0090] 本文公开的"载体肤(carrier peptide)"为可W通过与活性成分缀合来将活性成 分转运至到祀向位点的肤。
[0091] 在本发明的一个实施方式中，作为载物的蛋白质或肤包含一种或多种激素、激素 类似物、酶、酶抑制剂、信号转导蛋白质（或肤）、抗体和疫苗，但不限于它们。在本发明的一 个实施方式中，核酸可W是自然的或人工的DNA或RNA分子，其为单链或双链。核酸分子可W 是一种或多种同类型的核酸(例如，具有相同的核巧酸序列）或不同类型的核酸。核酸分子 包含一种或多种 DNA、cDNA、诱巧 DNA、RNA、siRNA、miRNA、shRNA、stRNA、snoRNA、snRNA、PNA、 反义寡聚体、质粒和其它修饰的核酸，但不限于它们。在本发明的一个实施方式中，病毒包 含整个病毒或病毒核屯、（其包含病毒核酸）。在本发明的一个实施方式中，化学物质为广泛 指代，其包含可W充当药物的天然或合成的物质。
[0092] 在本发明的一个实施方式中，通过细胞穿透肤转运至细胞内的药物可包含一种或 多种药物转运体，诸如脂质体、微泡、纳米颗粒、磁性颗粒或量子点。
[0093] 在本发明的一个实施方式中，载物可W直接与所述肤结合。在本发明的另一个实 施方式中，载物可W通过多种类型的键结合所述肤，如共价键或非共价键。例如，在一个实 施方式中，载物可W被结合至肤的N端或者C端。例如，载物可W通过二硫键或共价键键合至 所述肤。共价键是载物可W键合至谷氨酸化)的N端的α-氨基或赖氨酸化)残基的C端的氨基 的键。同时，肤和载物可W通过非共价键结合，其可使肤或载物W胶囊形式封装另一者。
[0094] 在本发明的另一个实施方式中，肤可W通过接头（linker)结合载物。例如，在谷氨 酸N端的α氨基或赖氨酸残基C端的氨基引入例如Hynic(6-阱基化晚-3-簇酸)接头等接头 后，可通过将载物结合到接头而将载物与肤结合。
[00M]本文公开的载体肤为包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的肤、或与上述序列具有大 于80%同源性的氨基酸序列的肤、或者上述肤的片段，其可WWl:l的摩尔比例与载物结 合，但它可不是1:1的摩尔比例结合。例如，CPP和载物的摩尔比例可W大于2:1，特别是 大于2:1、大于3:1、大于4:1、大于5:1、大于6:1、大于7:1、大于8:1、大于9:1或大于10:1。运 意味着许多载体肤分子可W与一个载物分子结合。上述许多载体肤分子可连续或平行 方式结合。"连续结合"指载体肤和载物分子在末端氨基酸处结合。"平行结合"指它们可W 在除了末端氨基酸之外的位点处结合。另一方面，载体肤和载物的摩尔比例可大于1:2。其 意味着一个载体肤分子可W结合许多载物分子。例如载体肤和载物的摩尔比例可W为1:2， 特别是大于1:2、大于1:3、大于1:4、大于1:5、大于1:6、大于1:7、大于1:8、大于1:9或大于1: 10。
[0096]在本发明的一个实施方式中，提供使用肤作为药物递送载体来转运多于一个活性 成分，其中所述肤包含SEQ ID N0:1的氨基酸序列，或所述肤是上述肤的片段，或所述肤具 有大于80%的与上述肤的氨基酸序列同源性。
[0097] 在本发明的一个实施方式中，提供递送药物至受试者的方法，其包含施用包含药 物和肤的组合物的步骤;其中所述肤包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，或所述肤是上述肤的 片段，或所述肤具有大于80%的与上述肤的氨基酸序列同源性。
[0098] 在本发明的一个实施方式中，提供了包含组合物和说明书的用于将药物递送到受 试者的细胞内的试剂盒，其中所述组合物包含本发明的肤和用于递送的药物的缀合物，其 中所述肤包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，或所述肤是上述肤的片段，或所述肤具有大于 80%的与上述肤的氨基酸序列同源性，其中所述说明书包括施用剂量、施用路径、施用频率 及组合物的适应症中的至少一种。
[0099] 在本发明的一个实施方式中，提供了具有将活性成分递送至细胞内的良好活性的 药物组合物，该药物组合物包含肤与活性成分的缀合物，所述肤包含SEQ ID NO: 1的氨基酸 序列，或所述肤是上述肤的片段，或所述肤具有大于80%的与上述肤的氨基酸序列同源性。 [0100]在本发明的一个实施方式中，所述组合物包含0.化g/mg至Img/mg、特别是化g/mg 至0.5mg/mg、更特别是lOyg/mg至0.1 mg/mg的肤，所述肤包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列、包 含与上述序列具有至少80%同源性的氨基酸序列的肤、或上述序列的片段中的至少一种。 当所述肤包含在上述范围内，组合物的安全性和稳定性均可被满足，且所述范围在成本效 益方面是合适的。
[0101] 在本发明的一个实施方式中，所述组合物可具有包含人、狗、鸡、猪、牛、绵羊、豚鼠 和猴的所有动物的应用。
[0102] 在本发明的一个实施方式中，所述药物组合物可通过口服、直肠、经皮、静脉内、肌 内、腹膜内、骨髓内、硬膜外或皮下途径施用。
[0103] 口服施用的形式可W为但不限于：片剂、丸剂、软胶囊或硬胶囊、颗粒、粉末、溶液 或乳液。非口服施用的形式可W为但不限于:注射剂、滴剂、洗剂、软膏、凝胶、乳膏、悬浮液、 乳剂、栓剂、贴剂或喷雾。
[0104] 在本发明的一个实施方式中，在必要时，所述药物组合物可包含添加剂，如稀释 剂、辅料、润滑剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、分散剂、表面活性剂、染色剂、芳香剂或甜味剂。 在本发明的一个实施方式中，所述药物组合物可通过本领域的传统工业方法制造。
[0105] 在本发明的一个实施方式中，所述药物组合物的活性成分的剂量可根据患者的年 龄、性别、体重、病理学和状态、施用路径或处方者的判断而改变。根据所述因素的剂量可在 本领域技术人员的水平内确定，且每日剂量例如可为但不限于:0. lyg/kg/天至Ig/kg/天， 特别是化g/kg/天至1 Omg/kg/天，更特别是1 Oyg/kg/天至Img/kg/天，更特别是50yg/kg/天 至10化g/kg/天。在本发明的一个实施方式中，所述药物组合物可W但不限于每天1至3次施 用。
[0106] 本文使用的术语旨在用于描述实施方式，但不限制本发明。在术语前面没有数字 并非限制数量，而是表明可W使用多于一个该术语的事物。术语"包含"、"具有"、"包括"、 "含有"应该理解为开放式（即"包括但不限于"）。
[0107] 数值作为范围被提及的原因仅是因为W范围描述比个体的数字来描述方便。除非 另外提出，每个个体的数值可被理解为分别描述并被整合到说明书中。所有范围的阔值都 包括在内并且可W独立地组合。
[0108] 除非另外提出或语境中明显矛盾，本文提出的所有方法均W适当的顺序进行。除 非其被包含在权利要求中，使用"任何一个实施方式"和"所有实施方式"或者示例性语言 (例如，"诸如"、"如"）是用来更清楚地描述本发明，而不是限制本发明的范围。本文中除了 权利要求W外的任何语言均不应该被解释为本发明的必要条件。除非另外限定，此处使用 的科技术语具有本发明所属领域的技术人员通常理解的意义。
[0109] 本发明优选的实施方式包括发明人所知的本发明的最佳实施方式。优选实施方式 的变化形式在本领域技术人员阅读上述说明后可变得显而易见。本发明发明人希望本领域 技术人员可W充分利用所述变化形式，并且本发明可除了本文所列出W外的其它方式 进行实施。因此，本发明在专利法允许的情况下包括权利要求中所陈述的本发明的关键点 的等同形式、改造形式和变化形式。另外，在上述成分的任何组合内的所有可能的变化形式 都包括在本发明之内，除非另有明确声明或与上下文相惇。虽然已通过示例性实施方式描 述并展示了本发明，本领域技术人员可W清楚知晓，在不脱离本发明的主旨和后文权利要 求所限定的范围的情况下，可W进行形式和细节方面的各种变化。
[0110] 在下文中，将通过实施例和测试例详细描述本公开。但是，下列的实施例和测试例 仅W说明为目的，并且对于领域普通技术人员显而易见，本公开的范围不受所述实施例和 测试例所限制。
[0111] 在下列实施例中，通过制造具有SEQ ID NO: 1所公开的序列的肤(PEP98)和所述肤 和抗癌药物的缀合物来验证癌症特异性递送效果。
[0112] I.肤的制备
[0113] 实施例1:阳P98和阳P1肤的合成
[0114] SEQ ID N0:1(PEP98)的肤和用于比较的PEP1的肤根据固相肤合成的传统已知方 法合成。
[0115] 更具体地，利用ASP48S(Pept;ron , Inc . ,Dae jeon R0K)，通过Fmoc固相肤合成 (SPPS)从c端偶联每个氨基酸来合成所述肤。如下使用其第一个氨基酸在c端连接到树脂的 那些肤：
[0116] (N肥-Leu-2-氯Ξ苯甲基树脂）
[0117] 用W合成肤的所有氨基酸在N端通过化OC保护，所述氨基酸残基通过能溶解在酸 中的Trt、Boc、t-Bu( t-下醋）、化f (2，2，4，6，7-五甲基二氨-苯并巧喃-5-横酷基)保护。实例 包括W下：
[0118] 化〇(；-43]1(化1:)-(^、化〇(3-41日-0山化〇(3-4巧。6;1^ )-0山化〇(3斗116-0山化〇(3-1^611-OH、Fmoc-Lys(Boc)-〇H、Fmoc-Met-〇H、Fmoc-Gly-〇H、Fmoc-Val-〇H。
[0119] 作为偶联试剂，使用了皿TU[2-(1H-苯并；挫-1-基)-l，l，3,3-四甲基脈六氣憐酸 醋]/册Bt [ N-径基苯并Ξ挫]/NMM[ 4