% ;调节pH值6.0。培养条件为：通风比为1:0.5vvm，罐压 0.03Mpa，培养溫度26-28°C，培养6天左右即可得到种子液。将培养好种子液接种到灭菌后 5化发酵培养基，接种量15 %，发酵培养基组成为葡萄糖2%、酵母粉0.5 %、黄豆饼粉1.5 %、 憐酸二氨钟0.3 %、屯水硫酸儀0.3%、硫酸铜0.3%、豆油0.03% ;调节抑值6.5;通风比为1: 0.4vvm，罐压0.04Mpa，在27 °C下发酵培养6天后，放出20L的发酵液，补入20L灭菌后的发酵 培养基，继续发酵2天;如此不断放料、补料，反复3次，发酵结束可得发酵液11化，发酵周期 为12天。
[0029] 2)微滤过滤:分别将四次发酵后的桑黄发酵液20L、20L、20L和5化通过微滤过滤， 分别得到桑黄湿菌丝体1.624肖、1.5化肖、1.544肖、4.3化肖(含水量80%左右），微滤透析液 18.38Kg、18.44Kg、18.46Kg和50.64Kg，透析液的透光率为82-87 %，COD为30-60mg/L。微滤 过滤所用的膜材料是孔径为50nm的陶瓷膜，具体工艺条件是:操作溫度为50~6(TC，进压为 3. Obar，出压为1. Obar，压力差为2. Obar。
[0030] 3)低溫干燥:将步骤2得到的1.62kg、1.5化g、1.54kg、4.36kg桑黄湿菌丝体进入真 空烘箱进行烘干，得到0.334kg、0.320kg、0.31化g和0.894kg水分含量3.0%左右的桑黄菌 丝体，该菌丝体黄酬为0.3-0.5 %，多糖含量5-8%。依据Q/JSFF 0020S-2015标准方法检验。 具体干燥工艺条件是:干燥溫度65 °C，真空度为-ο. 085Mpa。
[0031] 传统生产工艺与本发明实施例1工艺产品产量、质量对比表
[0032]
[0034] 从上述表格可W看出采用传统工艺14天发酵2个批次，可获得菌丝体1.508kg;而 采用本发明工艺总发酵周期为12天，可获得4个批次的菌丝体1.864kg，发酵周期为传统的 86%，而获得菌丝体产量是传统的123.6%，并且菌丝体产品质量要高于传统工艺生产。因 此采用本发明工艺既可缩短发酵周期，提高产量和质量，降低生产成本。
[0035] 实施例2
[0036] 1)桑黄菌株(Phellinus igniarius)由中国科学院微生物研究所提供并鉴定，保 藏编号CGMCC NO.50095。将培养好的桑黄菌株种子液种到种子培养基，接种量是10%，种子 培养基组成为葡萄糖1.8%、蚕蛹粉0.7%、黄豆饼粉1.6%、憐酸二氨钟0.3%、屯水硫酸儀 0.2 %、硫酸铜0.3 %、豆油0.02 % ;调节pH值6.0。培养条件为：通风比为1:0.5vvm，罐压 0.03Mpa，培养溫度26-28°C，培养6天左右即可得到种子液。将培养好种子液接种到灭菌后 100L发酵培养基，接种量15%，发酵培养基组成为葡萄糖2%、酵母粉0.4%、黄豆饼粉 1.7 %、憐酸二氨钟0.3%、屯水硫酸儀0.3 %、硫酸铜0.3%、豆油0.03% ;调节抑值6.5;通风 比为1:0.4vvm，罐压0.04Mpa，在27 °C下发酵培养6天后，放出40L的发酵液，补入40L灭菌后 的发酵培养基，继续发酵2天;如此不断放料、补料，反复3次，发酵结束可得发酵液11化，发 酵周期为12天。
[0037] 2)微滤过滤:分别将四次发酵后的桑黄发酵液40L、40L、40L和11化通过微滤过滤， 分别得到桑黄湿菌丝体2.62kg、2.5化g、2.50kg、7.42kg(含水量76%左右），微滤透析液 37.38Kg、37.44Kg、37.5Kg和 104.58Kg，透析液的透光率为83-87 %，COD为30-50mg/L。微滤 过滤所用的膜材料是孔径为50nm的陶瓷膜，具体工艺条件是:操作溫度为50~6(TC，进压为 3. Obar，出压为1. Obar，压力差为2. Obar。
[003引 3)低溫干燥:将步骤2得到的2.62kg、2.5化g、2.50kg、7.42kg kg桑黄湿菌丝体进 入真空烘箱进行烘干，得到0.64化g、0.632kg、0.618kg和1.83化g水分含量3.2%左右的桑 黄菌丝体，该菌丝体黄酬为ο. 3-0.5 %，多糖含量5-8 %。依据Q/JSFF 0020S-2015标准方法 检验。具体干燥工艺条件是:干燥溫度65 °C，真空度为-0.085Mpa。
[0039] 传统生产工艺与本发明实施例2工艺产品产量、质量对比表
[0040]
[0042]从上述表格可W看出采用传统工艺14天发酵2个批次，可获得菌丝体3.364kg;而 采用本发明工艺总发酵周期为12天，可获得4个批次的菌丝体3.73kg，发酵周期为传统工艺 的86%，而获得菌丝体产量是传统工艺的110.9%，并且菌丝体产品质量要高于传统工艺生 产。因此采用本发明工艺既可缩短发酵周期，提高产量和质量，降低生产成本。
【主权项】
1. 一种快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是该方法包括下述步骤： 1) 桑黄半连续发酵液制备:将桑黄种子液接种到灭菌后的发酵培养基进行深层液态发 酵得到桑黄发酵培养液，接种量为体积含量的10~20%，通风比为1:0.1-1.Ovvm，罐压0.02 ~0.05Mpa，在20~30 °C下发酵培养3-7天后，放出培养器容积的10-50 %的发酵液，补入等 同体积的灭菌后的发酵培养基，继续发酵1-3天;如此不断放料、补料，每次补料继续发酵1-3天，反复多次，得到桑黄发酵液； 2) 桑黄发酵液陶瓷膜过滤:将步骤1)中所得的桑黄发酵液通过微滤膜得到发酵液的微 滤透析液和菌丝体，收集菌丝体； 3) 低温真空烘干:将步骤2)中所得的菌丝体在真空度为-0.065~-0.095Mpa，70~85°C 条件下进行干燥。2. 根据权利要求1所述的快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是所述的桑 黄种子液是通过以下方法制备得到的：桑黄种子培养基组成为葡萄糖1-3%、蚕蛹粉0. ΙΟ . 5 % 、 黄豆饼粉 0 . 5-2 % 、 磷酸二氢钾0 .1 -0 . 5 % 、 七水硫酸镁0 .1-0 . 5 % 、 硫酸铜0 .1- 0.5%、豆油0.01-0.05% ;调节pH值5.0-7.0;培养条件为：通风比为1:0.1-1. Ovvm，罐压 0.02~0.05Mpa，培养温度20~30°C，培养周期3-7天。3. 根据权利要求2所述的快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是所述的桑 黄种子液是通过以下方法制备得到的：桑黄种子培养基组成为葡萄糖1-3%、蚕蛹粉0. ΙΟ . 5 % 、 黄豆饼粉 0 . 5-2 % 、 磷酸二氢钾0 .1 -0 . 5 % 、 七水硫酸镁0 .1-0 . 5 % 、 硫酸铜0 .1- 0.5%、豆油0.01-0.05% ;调节pH值5.0-7.0;培养条件为：通风比为1:0.1-1. Ovvm，罐压 0.02~0.05Mpa，培养温度20~30°C，培养周期3-7天。4. 根据权利要求1所述的快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是所述的桑 黄发酵培养基组成为葡萄糖1-3 %、酵母粉0.1-1 %、黄豆饼粉0.5-2 %、磷酸二氢钾0 . ΙΟ. 5% 、七水硫酸镁 0.1-0.5% 、硫酸铜0.1-0.5% 、豆油 0.01-0.05% ; 调节 pH值 5.0-7. 0。5. 根据权利要求1所述的快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是该方法所 述的微滤膜为陶瓷膜或有机膜，其孔径在〇. 05~0.5μπι，操作温度为50~60°C，工作压力:进 压为2~4bar，出压为0~5bar。6. 根据权利要求5所述的快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，其特征是该方法所 述的微滤膜为陶瓷膜或有机膜，其孔径在50nm，操作温度为50~60°C，工作压力：进压为 3bar，出压为lbar。
【专利摘要】本发明公开了一种快速深层液态发酵生产桑黄菌粉的方法，该方法是将桑黄菌种采用半连续发酵工艺快速获取富含大量的菌丝体的发酵液，然后将发酵液通过微滤膜处理分离得到桑黄的菌丝体。本发明改变了传统桑黄间歇性的分批发酵工艺，并且菌丝体的分离采用高效的陶瓷膜微滤替代离心机分离方式。半连续发酵工艺克服了传统分批发酵工艺的工艺环节多，中间间隙时间长，设备效率低等缺点；而采用高效的陶瓷膜过滤发酵液，能够减少进入滤液的菌丝体，既能提高菌丝体的收率，降低滤液的COD，降低污水处理量，又不破坏细胞本身，保证胞内有效成分的全部回收。与传统的工艺相比，本发明具有显着的经济效益、社会效益和环保效益。
【IPC分类】C12R1/645, C12N1/14, C12N1/02
【公开号】CN105670943
【申请号】CN201610146345
【发明人】王文风, 徐国华, 徐玲, 杨亚威, 张芙蓉, 孙妮娜
【申请人】江苏神华药业有限公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年3月15日