专利名称：一类4位n取代的蒽吡啶酮荧光染料、其制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及精细化工领域中一类新的荧光染料、其制备方法及应用，尤其是涉及一类蒽吡啶酮结构的染料在应用、其制备方法，以及利用该荧光染料、及其缀合物或其组合物在生物染色方面的应用。
背景技术：
荧光染料作为功能性指示剂在科学技术各个领域得到了广泛的应用，尤其是其在生命科学、临床医疗诊断、荧光免疫分析等方面的实际应用从而得到了全世界科学家的广泛关注。在细胞生物学领域，荧光染料被用于细胞内成分的位置和含量及其它变化情况，以及，细胞的辨别和分类也是依靠以荧光技术为核心的流式细胞计。目前，菲啶类、吖啶类、花菁类类等商品化荧光染料在基因组学、核酸检测、细胞分析等领域都起到了重要的作用。然而，这些染料都各自存在着应用上的局限性。这主要表现在大多数荧光染料受限于固定细胞样品。例如，溴乙锭(EB)，碘化丙锭(PI)等需要采用对细胞固定等使细胞膜崩解的方法才能将其应用于生物样品的荧光标记，但这种方法往往会对细胞或生物组织的真实形态产生破坏作用。同时，EB等吖啶、菲啶类染料具有很大的毒性和致癌作用。另外，还有一部分荧光染料的激发波长处于紫外区，由于紫外光的能量较大会对细胞内的核酸、蛋白等生物组分造成损伤；同时，长时间的光激发还会造成荧光染料的光漂白。这些都限制了这类染料在荧光成像中的应用。此外，紫外光作为激发波长时，由于生物样品本身在这个区间的吸收，使紫外光难以穿透生物组织样品内部，同时生物样品中的某些生物分子受紫外光激发会产生很强的荧光背景，使荧光检测困难。因此，需要开发出具有良好的荧光性能、活细胞通透性的荧光染料。这推动荧光检测技术和生命科学等学科发展的关键。
发明内容
本发明第一方面的目的在于提供一类合成简单、良好的光稳定性、较长的发射波长、且具有良好的细胞膜通透性的化合物用于固定细胞、活细胞和生物组织染色的化合物，本发明所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料，具有下列结构通式I :
权利要求
1.一类4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料，具有下列结构通式I :
2.根据权利要求I所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料，其特征在于所述的R选自二甲氨基、二乙氨基、二丙氨基、二丁氨基、二羟乙基氨基、三甲卤化铵基、氨基和盐酸胍基。
3.根据权利要求2所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料，其特征在于所述的R选自二乙氨基、二丙氨基、二丁氨基、二羟乙基氨基、三甲碘化铵基和盐酸胍基。
4.根据权利要求1、2或3所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料，其特征在于所述的n为2 6的整数。
5.权利要求I所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料的制备方法，是以式i的化合物与式ii的化合物为原料，在催化剂及缚酸剂存在条件下反应制备式I的化合物；
6.权利要求I所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料在生物染色上的应用。
7.根据权利要求6所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料在生物染色上的应用，其特征在于所述的荧光染料为C、D或F，
8.根据权利要求6所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料在生物染色上的应用，其特征在于所述的荧光染料为A、E或G，用于专一性对活细胞核仁和溶酶体荧光染色。
9.根据权利要求6所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料在生物染色上的应用，其特征在于所述的荧光染料为B，用于专一性对固定细胞核仁荧光染色。
全文摘要
一类4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料、其制备方法及应用，所述的化合物具有下列结构通式I通式I中，n为1～10的整数；R选自氢原子、甲基、羟基、氨基、二甲氨基、三甲卤化铵基和盐酸胍基。本发明所述的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料合成方法简单、具备良好的光稳定性和较长的发射波长，并且具有良好的细胞膜通透性，因此，本发明再一方面的目的在于提供上述本发明的4位N取代的蒽吡啶酮荧光染料在生物染色上的应用，可用于固定细胞、活细胞和生物组织染色。
文档编号G01N21/64GK102634224SQ20121007671
公开日2012年8月15日 申请日期2012年3月21日 优先权日2012年3月21日
发明者孙世国, 宋锋玲, 强新新, 彭孝军, 樊江莉, 王静云 申请人:大连理工大学, 大连科荣生物技术有限公司