专利名称：姜半夏中总游离有机酸的含量测定方法
技术领域：
本发明涉及半夏饮片的质量标准检测方法，特别涉及姜半夏中总游离有机酸的含量測定方法。
背景技术：
半夏为天南星科半夏属植物三叶半夏Pinellia ternata (Thunb) Breit.的干燥块茎，首载于《神农本草经》，临床应用广泛。自古以来，半夏因其味辛辣、麻舌而刺喉，具有“戟人咽”的刺激性，被列为有毒中药，故临床多使用炮制品。《中华人民共和国药典》(一部) 2005年版收载的半夏炮制品有清半夏、姜半夏、法半夏3种，除法半夏单列外，清半夏与姜半夏均列于半夏炮制项下，生品及炮制品均没有含量測定项。2010年版药典已将清半夏、姜半夏自半夏炮制项下分离单列，半夏与清半夏增加总酸含量测定项，而姜半夏和法半夏仍没有明文规定总酸含量测定项，通常做法是遵循半夏的測定方法和质量标准进行測定。
发明内容
本发明的目的在于提供一种姜半夏中总游离有机酸的含量測定方法，相比现有通常做法而言所需姜半夏的量更少，測定周期更短。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为一种姜半夏中总游离有机酸的含量測定方法，包括以下步骤步骤I、试液的配制按照《中华人民共和国药典》中的滴定液配制方法配制O. lmol/L的氢氧化钠滴定液和O. lmol/L的盐酸滴定液；步骤2、供试品溶液的制备取过四号筛的姜半夏粉末约3g，精密称定，置锥形瓶中，加异丁醇和こ醇的混合液30ml加热回流O. 5h ;同上操作，再重复提取2次；放冷，滤过，合并滤液，蒸干，残渣精密加入O. lmol/L的氢氧化钠滴定液IOml，在超声功率800W，超声频率50kHz条件下超声处理30分钟，然后转移至50ml量瓶中，加入新沸过的冷水至刻度，摇匀，即得；步骤3、測定精密量取步骤2所得溶液25ml，按电位滴定法用O. lmol/L的盐酸滴定液滴定，记录滴定液消耗体积，以相邻2次的电位差ΛΕ与加入滴定液的体积差Λ V之比为纵坐标，以滴定液体积V为横坐标，绘制(Λ E/ Λ V)_V曲线，Λ E/ Λ V的极大值对应的体积即为滴定重点，并将滴定的结果用空白实验校正；每Iml氢氧化钠滴定液相当于5. 904mg的琥珀酸。经实验证明，采用异丁醇和こ醇的混合液来加热回流，尤其是采用异丁醇与こ醇的重量配比为I :7的混合液来加热回流，可以大幅度减少姜半夏的用量和缩短回流时间，同时本发明的測定方法准确可靠、灵敏度高，完全可作为姜半夏的总游离有机酸的含量测定方法。
图I所示为本发明的姜半夏总游离有机酸測定的(ΛΕ/AV) -V曲线。
具体实施例方式为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。 I、仪器与试药Phs_3C型酸度计；BP211D电子天平(德国Sartorius公司);HJ-1型磁力搅拌器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司);数显恒温水浴锅(上海申胜生物技术有限公司);5ml微量滴定管(天津市天玻玻璃仪器有限公司)。姜半夏3批(产地分别为贵州、四川、甘肃，批号分别为080714、080715、080716，来源于浙江中药饮片厂，按《中国人民共和国药典》方法炮制)；琥珀酸对照品(国药集团化学试剂公司，分析纯，纯度> 99. 5%，批号T20071108);邻苯ニ甲酸氢钾(国药集团化学试剂公司，分析纯，纯度> 99. 8%，批号F20090519);其他试剂均为分析纯。2、方法与结果2. I、试液的配制氢氧化钠滴定液(O. lmol/1)、盐酸滴定液(O. lmol/L)配制參照2005年版《中华人民共和国药典》(一部)滴定液(附录XVF)配制。2. 2、供试品溶液的制备取姜半夏粉末(过4号筛)约3g，精密称定，置锥形瓶中，加入异丁醇和こ醇的混合液(异丁醇与こ醇的重量配比为I :7) 30ml加热回流O. 5h ;同上操作，再重复提取2次；放冷，滤过，合并滤液，蒸干，残渣精密加入O. lmol/L的氢氧化钠滴定液10ml，在超声功率800W，超声频率50kHz条件下超声处理30分钟，然后转移至50ml量瓶中，加入新沸过的冷水至刻度，摇匀，即得；2. 3、测定方法精密量取上述溶液25ml，按《中华人民共和国药典》2005年版(一部)附录VDI A的电位滴定法，用盐酸滴定液(O. lmol/L)滴定过量碱液，记录滴定液消耗体积，以Λ E/Λ V(即相邻2次的电位差和加入滴定液的体积差之比)为纵坐标，以滴定液体积(V)为横坐标，绘制(AE/AV)-V曲线，ΛΕ/AV的极大值对应的体积即为滴定重点，并将滴定的结果用空白实验校正海Iml氢氧化钠滴定液相当于5. 904mg的琥珀酸。2. 4、精密度试验精密称取琥珀酸对照品87. 95mg，加氢氧化钠滴定液(O. 1013mol/l)50ml溶解，转移至250ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液6份，每份25ml，按2. 3项所述测定方法測定总游离有机酸的量，计算RSD=L 56%，表明本法精密度良好。2. 5、稳定性试验取姜半夏(四川080715)，按2. 2项所述供试品溶液制备方法制成供试液，然后按2. 3项所述測定方法进行測定，隔2h测一次，共测6次。结果表明，供试液中总游离有机酸含量在IOh内稳定，RSD=2. 81%。2. 6、重复性试验
取同一批号的姜半夏(四川080715)，按照2. 2项所述供试品溶液制备方法制备出6份供试液，然后分别对这6份供试液按2. 3项所述測定方法測定总游离有机酸的含量，结果表明该法重复性好，RSD=2. 02%,总游离有机酸的平均含量为O. 42%ο
2. 7、加样回收率试验取姜半夏(四川080715) 6份，每份约2. 5g，精密称定，置250ml，圆底烧瓶中，分别加入琥珀酸对照品，按2. 3项所述測定方法測定总游离有机酸的含量，计算回收率为95. 20%, RSD=L 81%，符合方法学考察要求，结果见表I。表I、姜半夏中总游离有机酸的加样回收率试验结果
·
样品重样品含量(以千燥加标量检出量回收率平均值 RSD
(g ) 品计，mg )(mg ) (mg )(% ) ( ) ( % )
2.4004 _8. 87__9.33 __ 17. 8015 —96.72 —
2.4586 _9. 08__9. 24 ——17. 9308 —96.76 —
2.52859.34918.0601 92. 20
-----95. 20 I. 81
2. 4952 _9. 22__9. 65 —_18. 3187 —95. 28 —
2. 5271 _9. 33__9. 89 —_18.5773 —94.40 —
2.47859. 169. 66 18. 3187812. 8、姜半夏总游离有机酸含量测定按照2. 2项所述供试品溶液制备方法制备供试液及2. 3项所述測定方法进行含量測定，含量測定结果见表2，姜半夏(四川080715)滴定曲线见图I。表2、姜半夏总游离有机酸含量測定结果
总游离有机酸含量
饮片
__贵州(080714 )—四川(080715 )—甘肃(080716)—
姜半夏_ 0.43_ O 48_ 0.50_由上述试验结果可知，本发明方法较现有的测定游离有机酸含量的方法更简便，供试品溶液制备方法不需静置过夜，制备时间缩短，方法准确可靠、灵敏度高，可作为姜半夏的总游离有机酸的含量測定方法。以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
权利要求
1.姜半夏中总游离有机酸的含量测定方法，其特征在于包括以下步骤 步骤I、试液的配制 按照《中华人民共和国药典》中的滴定液配制方法配制0. lmol/L的氢氧化钠滴定液和.0.lmol/L的盐酸滴定液； 步骤2、供试品溶液的制备 取过四号筛的姜半夏粉末约3g，精密称定，置锥形瓶中，加异丁醇和乙醇的混合液30ml加热回流0. 5h ;同上操作，再重复提取2次；放冷，滤过，合并滤液，蒸干，残渣精密加A 0. lmol/L的氢氧化钠滴定液IOml，在超声功率800W，超声频率50kHz条件下超声处理30分钟，然后转移至50ml量瓶中，加入新沸过的冷水至刻度，摇匀，即得； 步骤3、测定 精密量取步骤2所得溶液25ml，按电位滴定法用0. lmol/L的盐酸滴定液滴定，记录滴定液消耗体积，以相邻2次的电位差AE与加入滴定液的体积差A V之比为纵坐标，以滴定液体积V为横坐标，绘制(A E/ A V) -V曲线，A E/ A V的极大值对应的体积即为滴定重点，并将滴定的结果用空白实验校正；每Iml氢氧化钠滴定液相当于5. 904mg的琥珀酸。
全文摘要
本发明涉及姜半夏中总游离有机酸的含量测定方法，通过采用异丁醇和乙醇的混合液来加热回流，尤其是采用异丁醇与乙醇的重量配比为17的混合液来加热回流，可以大幅度减少姜半夏的用量和缩短回流时间，同时本发明的测定方法准确可靠、灵敏度高，完全可作为姜半夏的总游离有机酸的含量测定方法，使姜半夏质量达到稳定、可控、高效及安全。
文档编号G01N27/42GK102818835SQ201210299290
公开日2012年12月12日 申请日期2012年8月21日 优先权日2012年8月21日
发明者熊斌 申请人:熊斌