一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法：取待检测样品，用水稀释，溶解时间t，过滤，向滤液中加入等反应量或过量的盐酸，加热反应，反应完成后，取出降温至室温，然后加入等反应量或过量的盐酸羟胺溶液，反应完成后，再加入1，10-菲啰啉溶液，反应生成桔红色配合物，然后用紫外-可见分光光度法测定在510nm波长处的吸光度，然后通过常规方法计算得到待检测样品中铁的含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。本发明的测定多糖铁复合物的溶出度的检测方法，专属性强，准确性好，实用简单，可用于溶出曲线及溶出度的测定，从而对批内及批间溶出一致性进行对比。
【专利说明】—种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法。
【背景技术】
[0002]多糖铁复合物是一种低分子多糖和铁的有机复合物，是用于治疗单纯性缺铁性贫血的药物。目前，对判断化学药物疗效一致的方法除了生物等效性实验外，溶出一致性是最科学合理有效的评价手段。目前，尚未有关于测定多糖铁复合物溶出度的方法，原研药物国内注册标准无溶出质量标准。因此，研发一种测多糖铁复合物溶出度的方法，并制定相关质量标准，是非常必要的。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于弥补技术空白，提供了一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，该方法专属性强，准确性好，实用简单，可用于溶出曲线及溶出度的测定，从而对批内及批间溶出一致性进行对比。
[0004]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0005]一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，如下:取待检测样品，用水稀释，溶解时间t,过滤，向滤液中加入等反应量或过量的盐酸,在70?100°C下水浴加热反应，反应完成后，取出降温至室温，然后加入等反应量或过量的盐酸羟胺溶液，反应完成后，再加入1，10-菲啰啉溶液，反应生成桔红色配合物，然后用紫外-可见分光光度法测定在510nm波长处的吸光度，然后通过常规方法计算得到待检测样品中铁的含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。
[0006]所述“通过常规方法计算得到待检测样品中铁的含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度”的具体方式为以下两种方式之一:
[0007](I)以标准铁溶液作为对照品，以水作为空白对照品，对标准铁溶液进行梯度稀释，然后做同待检测样品同样的处理，对水做同待检测样品同样的处理，并测定在510nm波长处的吸光度，制作标准铁溶液浓度-吸光度值的标准曲线，并计算得到线性回归方程，然后将待检测样品在510nm波长处的吸光度查标准曲线，从而得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，或将待检测样品在510nm波长处的吸光度值套入线性回归方程，通过常规方法计算得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。
[0008](2)以标准铁溶液作为对照品，以水作为空白对照品，对标准铁溶液、水做同待检测样品同样的处理，并测定在510nm波长处的吸光度，通过常规方法计算得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。
[0009]进一步地，本发明是通过以下技术方案实现的:
[0010](I)取待检测样品，以水500?IOOOml为溶剂，转速为每分钟50?100转，30?60分钟后,取溶液IOml,滤过,取续滤液作为供试品忙备液；[0011](2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置IOOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；
[0012](3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置IOOml量瓶中，加入lmol/L盐酸I?2ml，置水浴中70?100°C加热3?15分钟，取出降温至室温，加入5?15%盐酸羟胺溶液(质量百分比)I?5ml，放置2?lOmin，加入0.1%1，10-菲啰啉溶液(质量百分比)5?10ml，放置3?15min，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
[0013]本发明的优选技术方案为:
[0014](I)取待检测样品，以水900ml为溶剂，转速为每分钟100转，45分钟后，取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品贮备液；
[0015](2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置IOOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；
[0016](3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置IOOml量瓶中，加入lmol/L盐酸1ml，置水浴中90°C加热5分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液2ml，放置5min，加入0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置15min，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
[0017]本发明的优选技术方案还可以为:
[0018](I)取待检测样品，以水500ml为溶剂，转速为每分钟50转，60分钟后，取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品贮备液；
[0019](2)精密量取lmg/ml标准铁溶液30ml，置IOOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；
[0020](3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置IOOml量瓶中，加入lmol/L盐酸2ml，置水浴中100°C加热3分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液4ml，放置IOminJPA 0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置lOmin，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
[0021]本发明的优选技术方案还可以为:
[0022](I)取待检测样品，以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，30分钟后，取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品贮备液；
[0023](2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置IOOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；
[0024](3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置IOOml量瓶中，加入lmol/L盐酸1ml，置水浴中80°C加热10分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液2ml，放置5min，加入0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置lOmin，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
[0025]本发明所检测的目标样品——多糖铁复合物，是一种低分子多糖和铁的有机复合物，目前，国内有生产企业生产制剂和原料药，也有从国外进口的制剂。本发明的检测方法适用于所有的多糖铁复合物原料药和制剂。
[0026]本发明的测定多糖铁复合物的溶出度的检测方法，专属性强，准确性好，实用简单，可用于溶出曲线及溶出度的测定，从而对批内及批间溶出一致性进行对比，具有以下特 点。
[0027]1.本发明首次创立了多糖铁复合物的溶出度方法，填补了技术空白。
[0028]2.该方法能客观反映多糖铁复合物的溶出行为，可以简便、快速、准确地测定多糖铁复合物的溶出度及溶出曲线，从而更加科学合理的控制产品质量，保障科学用药。
[0029]3.该方法专属性强，线性关系好，准确度，精密度，范围等均符合要求。
[0030]4.分析方法采用分光光度法，简便、快速、准确。
【专利附图】
【附图说明】
[0031]图1:标准铁溶液吸光度值与浓度线性关系图。
[0032]图2:多糖铁复合物胶囊溶出曲线图。
【具体实施方式】
[0033]下面结合实验例及实施例对本发明作进一步的说明。
[0034]实验例I
[0035]1.仪器与试剂
[0036](I)仪器:PHARMTEST610半自动溶出仪，SHIMADZUUV-2550紫外-可见分光光度计，METTLERT0LED0XS205 电子天平。
[0037](2)试剂:所用试剂均为分析纯，水为纯化水。
[0038]线性关系考察与标准曲线的制备
[0039]精密量取标准铁溶液(lmg/ml) 10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别量取该对照品贮备液0.2、0.5、1、1.5、2、2.5、3ml，置100ml量瓶，分别加入10%盐酸羟胺溶液2ml，放置5nin，加入0.5%1，10-菲啰啉溶液5ml，放置5min,加水至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述各溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV A)，在510nm波长处分别测定吸光度。以对照品浓度(μ g/ml)为横坐标、吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，并对测得的数据进行回归分析，回归方程为y=0.20364x-0.00613，相关系数R2=0.99998，结果表明，浓度在0.2~3.0 μ g/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系，结果见表1、图1。
[0040]表1线性关系考察试验数据
[0041]
【权利要求】
1.一种利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:步骤为:取待检测样品，用水稀释，溶解时间t，过滤，向滤液中加入等反应量或过量的盐酸，加热反应，反应完成后，取出降温至室温，然后加入等反应量或过量的盐酸羟胺溶液，反应完成后，再加入1，10-菲啰啉溶液，反应生成桔红色配合物，然后用紫外-可见分光光度法测定在510nm波长处的吸光度，然后通过常规方法计算得到待检测样品中铁的含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。
2.根据权利要求1所述的利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:所述“通过常规方法计算得到待检测样品中铁的含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度”的具体方式为以下两种方式之一: (1)以标准铁溶液作为对照品，以水作为空白对照品，对标准铁溶液进行梯度稀释，然后做同待检测样品同样的处理，对水做同待检测样品同样的处理，并测定在510nm波长处的吸光度，制作标准铁溶液浓度-吸光度值的标准曲线，并计算得到线性回归方程，然后将待检测样品在510nm波长处的吸光度查标准曲线，从而得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，或将待检测样品在510nm波长处的吸光度值套入线性回归方程，通过常规方法计算得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度； (2)以标准铁溶液作为对照品，以水作为空白对照品，对标准铁溶液、水做同待检测样品同样的处理，并测定在510nm波长处的吸光度，通过常规方法计算得到待检测样品中铁的浓度或/和含量，进而得到待检测样品在时间t时的溶出度。
3.根据权利要求1或2所述的利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:具体步骤如下: (1)取待检测样品，以水500~1000ml为溶剂，转速为每分钟50~100转，30~60分钟后，取溶液IOml,滤过,取续滤液作为供试品忙备液； (2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品备液；` (3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置100ml量瓶中，加入Imol/L盐酸I~2ml，置水浴中70~100°C加热3~15分钟，取出降温至室温，加入5~15%盐酸轻胺溶液I~5ml,放置2~IOmin,加入0.1%1，10-菲卩罗啉溶液5~IOml,放置3~15min,加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
4.根据权利要求3所述的利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:具体步骤如下: (1)取待检测样品，以水900ml为溶剂，转速为每分钟100转，45分钟后，取溶液10ml，滤过,取续滤液作为供试品贮备液； (2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品备液； (3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置100ml量瓶中，加入Imol/L盐酸1ml，置水浴中90°C加热5分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液2ml，放置5min，加入0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置15min，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
5.根据权利要求3所述的利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:具体步骤如下: (1)取待检测样品，以水500ml为溶剂，转速为每分钟50转，60分钟后，取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品贮备液； (2)精密量取lmg/ml标准铁溶液30ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品备液； (3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置100ml量瓶中，加入Imol/L盐酸2ml，置水浴中100°C加热3分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液4ml，放置IOminJPA 0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置lOmin，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
6.根据权利要求3所述的利用紫外-可见分光光度法测定多糖铁复合物溶出度的方法，其特征在于:具体步骤如下: (1)取待检测样品，以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，30分钟后，取溶液10ml，滤过,取续滤液作为供试品贮备液； (2)精密量取lmg/ml标准铁溶液15ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品备液； (3)精密量取供试品贮备液、对照品贮备液、水各1ml，分别置100ml量瓶中，加入Imol/L盐酸1ml，置水浴中80°C加热10分钟，取出降温至室温，加入10%盐酸羟胺溶液2ml，放置5min，加入0.1%1，10-菲啰啉溶液10ml，放置3min，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液、对照品溶液和测定用空白溶液；取上述三种溶液，照紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，然后通过常规方法计算待检测样品的溶出量。
【文档编号】G01N21/31GK103743687SQ201310744769
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年12月27日 优先权日:2013年12月27日
【发明者】田红伟, 姜作玲, 展筱林, 程宏霞, 王冬, 王海清 申请人:青岛国风药业股份有限公司