一种体外测定ACAT2活性的方法及其检测系统与流程

文档序号:12357878阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种非治疗非诊断性的体外测定ACAT2活性的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)在培养体系中,在带有可检测标记物的含3-β-OH的固醇类的存在下,培养表达ACAT2的细胞一段时间T1;

(2)检测所述培养体系中位于所述细胞外部的且产生自所述可检测标记物的信号值S1;和

(3)基于上一步骤所检测的所述信号值S1,从而定性和/或定量确定ACAT2的活性。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,将所检测的所述信号值S1与标准值和/或对照值进行比较,从而确定ACAT2的活性。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述可检测标记物选自下组:发光团、荧光团、生色团、或其组合。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的表达ACAT2的细胞选自下组:人和非人哺乳动物细胞。

5.一种用于检测ACAT2活性的检测系统,其特征在于,所述系统包括:

(a)表达ACAT2的细胞;

(b)带有可检测标记物的含3-β-OH的固醇类;

(c)用于检测位于所述细胞外部的且产生自所述可检测标记物的信号值的检测仪器。

6.一种确定测试化合物是否是ACAT2抑制剂或促进剂的方法,其特征在于,包括步骤:

(a)在测试组中,在培养体系中,在带有可检测标记物的含3-β-OH的固醇类和测试化合物的存在下,培养表达ACAT2的细胞一段时间T1,检测测试组所述培养体系中位于所述细胞外部的且产生自所述可检测标记物的信号值S1’;

并且在不存在所述测试化合物且其他条件相同的对照组中,检测对照组所述培养体系中位于所述细胞外部的且产生自所述可检测标记物的信号值S1”;

(b)将上一步骤所检测的所述信号值S1’和S1”进行比较,从而确定所述测试化 合物是否是ACAT2抑制剂或ACAT2促进剂;

其中,如果信号值S1’显著高于S1”,则表示所述测试化合物是ACAT2促进剂;如果信号值S1’显著低于S1”,则表示所述测试化合物是ACAT2抑制剂。

7.一种分泌性脂蛋白复合物,其特征在于,所述复合物具有式I结构:

LP-(Y)m (I)

式中,

LP表示脂蛋白;

Y为带有可检测标记物的3-β-OH被酯化的固醇类酯;

m≥2。

8.一种权利要求7所述的分泌性脂蛋白复合物的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)在培养体系中,在带有可检测标记物的含3-β-OH的固醇类的存在下,培养表达ACAT2的细胞一段时间T1,从而形成所述的分泌性脂蛋白复合物;

(2)从所述培养体系中,分离出所述的分泌性脂蛋白复合物。

9.一种权利要求7所述的分泌性脂蛋白复合物的用途,其特征在于,所述复合物用于制备(a)用于检测ACAT2活性的试剂或试剂盒;(b)用于检测或辅助检测癌症或癌症易感性的试剂盒;(c)用于检测或辅助检测癌症转移的试剂盒;和/或(d)用于制备血清检测或血液检测的试剂盒。

10.一种非治疗非诊断性的体外测定ACAT2活性的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)提供一待检测样本;

(2)对所述样本进行处理,获得经处理的混合物,并检测所述混合物中权利要求7所述的分泌性脂蛋白复合物所产生的自所述可检测标记物的信号值S1;和

(3)基于上一步骤所检测的所述信号值S1,从而定性和/或定量确定所述样本中的ACAT2的活性。

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