一种康肾颗粒指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱与流程

文档序号:11131672阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种康肾颗粒指纹图谱的构建方法,包括如下步骤:供试品溶液和对照品溶液的制备,高效液相色谱条件的确定,指纹图谱的确定;

所述供试品溶液的制备为取康肾颗粒样品0.5~5.0 重量份,加入50%~100%的甲醇15~50 体积份,提取15~60分钟,过滤,取续滤液,即得;

所述高效液相色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;检测波长为270 ~290nm;柱温为20~40 ℃; 流速为0.8~1.2 ml/min;流动相由流动相A和B组成,以乙腈为流动相A,以0.5~1.5%的甲酸水溶液为流动相B;进行线性梯度洗脱;

线性梯度洗脱条件为:

从0~35min,流动相A的体积分数为5~12%;流动相B的体积分数为95~88%;

从35~60min,流动相A的体积分数为12~20%;流动相B的体积分数为88~80% ;从60~85min,流动相A的体积分数为20~40%;流动相B的体积分数为80%~60% ;从85~100min,流动相A的体积分数为40~90%;流动相B的体积分数为60~10% ;从100~110min,流动相A的体积分数为90~95%;流动相B的体积分数为10~5% 。

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述提取的方法为超声提取法或加热回流法。

3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述供试品制备为取康肾颗粒样品2.0重量份,加入75%的甲醇25体积份,提取30分钟,过滤,取续滤液,即得;

所述高效液相色谱条件中检测波长为280nm;柱温为25 ℃; 流速为1.0 ml/min;流动相由流动相A和B组成,以乙腈为流动相A,以1.0%的甲酸水溶液为流动相B。

4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的供试品制备方法为取康肾颗粒样品5.0 重量份,加入100%的甲醇50 体积份,提取60分钟;所述高效液相色谱条件中检测波长为290nm;柱温为40 ℃; 流速为1.2 ml/min;流动相由流动相A和B组成,以乙腈为流动相A,以1.5%的甲酸水溶液为流动相B。

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的供试品制备方法为取康肾颗粒样品0.5重量份,加入50%的甲醇15体积份,提取15分钟;所述高效液相色谱条件为中检测波长为270nm;柱温为20 ℃; 流速为0.8 ml/min;流动相由流动相A和B组成,以乙腈为流动相A,以0.5%的甲酸水溶液为流动相B。

6.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述对照品溶液的制备为:分别取葛根素、咖啡酸、大豆苷、迷迭香酸、橙皮苷、大豆苷元对照品,加入甲醇,配制成浓度为葛根素90.0 μg/ml、咖啡酸52.6 μg/ml、大豆苷127.2 μg/ml、迷迭香酸80.4μg/ml、橙皮苷19.1 μg/ml、大豆苷元42.8 μg/ml的对照品溶液。

7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,高效液相色谱条件中进样量为10μL。

8.一种根据权利要求1所述的构建方法得到的康肾颗粒标准指纹图谱,其特征在于,含有27个共有峰,以葛根素峰为参照,27个共有峰相对保留时间比依次为:0.171~0.173,0.245~0.247,0.291~0.293,0.362~0.365,0.520~0.524,0.693~0.696,0.740~0.742,0.806~0.808,0.849~0.853,1.000,1.022~1.023,1.078~1.080,1.099~1.101,1.152~1.154,1.259~1.261,1.287~1.290,1.4996~1.502,1.545~1.550,1.758~1.766,1.889~1.900,1.979~1.990,2.086~2.098,2.121~2.137,2.168~2.182,2.181~2.196,2.349~2.367,2.700~2.719。

9.权利要求8所述的康肾颗粒标准指纹图谱在检测康肾颗粒质量中的应用。

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