氨苄青霉噻唑酸检测试剂盒和检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于酶联免疫试剂盒领域，具体涉及一种氨苄青霉噻唑酸检测试剂盒和检 测方法。
【背景技术】
[0002] 青霉素类抗生素具有杀菌活性强、毒副作用小等特点，在动物饲养中应用非常广 泛，主要用于治疗动物疾病，部分产品同时具有促进动物生长的作用。然而，动物性食品中 残留的抗生素进入人体后，具有一定的危害作用。一般来说，动物性食品中残留的抗生素对 人并不表现为急性毒性作用。人们长期摄入低剂量残留抗生素的食品，随着时间的推移，人 体内残留的抗生素逐渐蓄积，从而引起各种慢性毒性作用。某些过敏体质的人在接触残留 的抗生素后也可引起过敏（变态）反应。动物性食品中的抗生素残留对人体健康的影响广 泛，会造成人体胃肠道菌群失调，导致机会性感染的可能性增加，还可表现为过敏、毒性作 用、细菌耐药性、致畸、致突变和致癌作用等多个方面。
[0003] 氨苄青霉素为P-内酰胺类药物，其结构中的0 -内酰胺环不稳定，在碱性环境及 3 _内酰胺酶存在的情况下易发生断裂，生成氨苄青霉噻唑酸，不易被相应氨苄青霉素抗体 检出。而用其他检测方法，如薄层色谱法（TLC)和高效液相色谱法（HPLC)检测时，检测结 果易受流动相pH值、温度和其他因素的影响而开环，导致TLC和HPLC方法的稳定性和重现 性不好，回收率不高。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种氨苄青霉噻唑酸检测试剂 盒和检测方法，具有快速高效、灵敏度高、重现性好的特点。
[0005] 本发明所采用的技术方案为：
[0006] 一种杂交瘤细胞株，其保藏编号为CGMCCN0. 10112,保藏日期为2014年12月5 日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳 区北辰西路1号院3号。
[0007] -种由杂交瘤细胞株分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体。
[0008] 氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体在制备检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒方面的应用。
[0009] -种用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒，包括酶标板、封闭液、氨苄青霉噻唑酸标 准品、抗体工作液、酶标记抗体、显色液及终止液；所述抗体工作液为所述杂交瘤细胞株分 泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体的稀释液。
[0010] 一种用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒，还包括样品稀释液和浓缩洗涤液，所述 样品稀释液为PH6. 5-8. 5的磷酸盐缓冲液，所述浓缩洗涤液为样品稀释液与吐温20的混合 液。
[0011] 一种氨苄青霉噻唑酸试剂盒在检测动物性食品中的应用。
[0012] 本发明的有益效果为：采用特异性的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体，定量检测青霉 素类药物及其代谢产物在动物性食品中的残留；检测结果快速、准确度高、重现性好、检测 灵敏度高。
【附图说明】 图1是本发明进行精密度实验的实验数据。
【具体实施方式】
[0013] 本实验采用氨苄青霉噻唑酸偶联蛋白作为免疫原，从而获得氨苄青霉噻唑酸特异 性抗体。氨苄青霉素结构如（式1)所示，青霉素代谢产物青霉噻唑酸的结构如（式2)所 示，氨苄青霉噻唑酸结构式为（式3)所示。
【主权项】
1. 一种杂交瘤细胞株，其保藏编号为CGMCC NO. 10112。
2. -种由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体。
3. 根据权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒方面的应 用。
4. 一种用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒，其特征在于：包括酶标板、封闭液、氨苄青 霉噻唑酸标准品、抗体工作液、酶标记抗体、显色液及终止液；所述抗体工作液为如权利要 求1所述的杂交瘤细胞株分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体的稀释液。
5. 根据权利要求4所述的一种用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒，其特征在于：还包 括样品稀释液和浓缩洗涤液，所述样品稀释液为PH6. 5?8. 5的磷酸盐缓冲液，所述浓缩洗 涤液为样品稀释液与吐温20的混合液。
6. -种利用权利要求4-5任一项所述的用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒在检测动 物性食品中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种杂交瘤细胞株、杂交瘤细胞株分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体和单克隆抗体在制备检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒方面的应用。一种用于检测氨苄青霉噻唑酸的试剂盒，包括酶标板、封闭液、氨苄青霉噻唑酸标准品、抗体工作液、酶标记抗体、显色液及终止液；所述抗体工作液为所述杂交瘤细胞株分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体的稀释液。本发明还涉及一种杂交瘤细胞和杂交瘤细胞分泌的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体。本发明的有益效果为：采用特异性的氨苄青霉噻唑酸单克隆抗体，定量检测部分青霉素类药物及其代谢产物在动物性食品中的残留；检测结果快速、准确度高、重现性好、检测灵敏度高。CGMCC NO.1011220141205
【IPC分类】G01N33-577
【公开号】CN104614529
【申请号】CN201510018846
【发明人】陆彦, 吴国娟, 刘雨琦, 高琦, 王晶, 赵红玉
【申请人】北京农学院, 陆彦
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年1月14日