055]实施3
[0056]一、材料制备
[0057](I) GQDs的制备:取4g固体柠檬酸(CA)加入容积为5mL烧杯中，加热到250°C，柠檬酸(CA)熔化成液体，随后，柠檬酸(CA)液体从无色变到淡黄色，最后变成橙色液体。最后在剧烈的搅拌下，将浓度为IM NaOH溶液逐滴滴入橙色液体中，直至pH达到8，继续加热，最后制备成GQDs溶液，所得GQDs溶液质量为m。
[0058](2) CuFe2O4的制备:首先将 0.27g CuCl 2.2H20 和 0.65g FeCl3.6H20 加入到 20mL乙二醇(EG)中，搅拌至透明溶液，随后加入2.2g醋酸钠(NaAc)和0.7g聚乙二醇(PEG)搅拌30min，装入容量25mL的聚四氟反应釜，加热至250°C维持10h，反应后冷却至室温得到黑色产物，离心并用乙醇多次清洗，在温度为60°C下持续干燥6h，最终得到CuFe204。
[0059](3) CuFe204/GQDs 的制备:称取 90mg CuFe2O4加入到(m/400) g GQDs 溶液中，分散均匀，静置12h，使CuFe2O4和GQDs通过静电作用充分吸附；将所得的固体离心分离得到固体沉淀，并分别用二次蒸馏水、乙醇洗涤3次，最后在45°C下真空干燥24h，即得到CuFe2O4/GQDs复合材料。
[0060]二、吸光度与H2O2的浓度对应关系
[0061]比02浓度与吸光度的对应关系:首先将800μ L含有0.7mg TMB的0.1M PBS (pH=4)分别和 100 μ L 梯度浓度(I X 102、1X 11U X 10°、I X 10 \ I X 10 2、I X 10 3、I X 10 4、I X 10 5、I X 10 6mM)的H2O2混合均匀，然后分别加入20 μ L 5mg/mL的CuFe 204/GQDs溶液，混合均匀后在38°C下温育20min。最后，通过磁铁去除反应体系中的CuFe204/GQDs，拍照观察颜色变化，并在652nm波长下分别测量并记录不同浓度反应溶液的吸光度，绘制标准曲线。
[0062]三、有机磷农药的检测
[0063](I)酶抑制反应和双酶催化反应:每次称取0.Smg的乙酰胆碱酯酶分别与不同浓度ΟκδχιοΛιοΛδχιοΛιοΛιοΛιοΛκιομΜ)的有机磷农药常温下反应，排掉农药，并干燥排掉农药后的乙酰胆碱酯酶，干燥后将乙酰胆碱酯酶加入到200 μ L含有0.Smg的胆碱氧化酶(ChOx)和0.8mg乙酰胆碱的PBS(0.1M，pH = 4)并混合均勾，在38°C下，温育反应20min。
[0064](2)有机磷残留浓度与吸光度的对应关系:800 μ L含0.7mg TMB和20 μ L 5mg/mL CuFe204/GQDs的PBS(0.1M，pH = 4)，分别加入到步骤(I)温育后的溶液中，混合均匀，在38°C下温育20min。然后，通过外磁铁去除反应体系中的CuFe204/GQDs，拍照观察颜色变化，并在652nm波长下测量反应溶液的吸光度。最后，建立有机磷农药浓度与吸光度的对应关系，绘制标准曲线，得到在10_3?I μΜ有机磷农药范围内呈线性关系，检测限为3.3Χ1(Γ3μΜ0
[0065]实施例4
[0066]一、材料制备
[0067](I)GQDs的制备:取Ig固体柠檬酸(CA)加入容积为5mL烧杯中，加热到150°C，柠檬酸(CA)熔化成液体，随后，柠檬酸(CA)液体从无色变到淡黄色，最后变成橙色液体。最后在剧烈的搅拌下，将浓度为IM NaOH溶液逐滴滴入橙色液体中，直至pH达到6，继续加热，最后制备成GQDs溶液，所得GQDs溶液质量为m。
[0068](2) CuFe2O4的制备:首先将 0.135g CuCl 2.2Η20和 0.325g FeCl3.6Η20加入到 20mL乙二醇(EG)中，搅拌至透明溶液，随后加入1.4g醋酸钠(NaAc)和0.3g聚乙二醇(PEG)搅拌30min，装入容量25mL的聚四氟反应釜，加热至150°C维持6h，反应后冷却至室温得到黑色产物，离心并用乙醇多次清洗，在温度为60°C下持续干燥6h，最终得到CuFe204。
[0069](3) CuFe204/GQDs 的制备:称取 99mg CuFe2O4加入到(m/1000) g GQDs 溶液中，分散均匀，静置12h，使CuFe2O4和GQDs通过静电作用充分吸附；将所得的固体离心分离得到固体沉淀，并分别用二次蒸馏水、乙醇洗涤3次，最后在45°C下真空干燥24h，即得到CuFe2O4/GQDs复合材料。
[0070]二、吸光度与H2O2的浓度对应关系
[0071]比02浓度与吸光度的对应关系:首先将800μ L含有0.5mg TMB的0.1M PBS (pH=4)分别和 100 μ L 梯度浓度(I X 102、1X 11U X 10°、I X 10 \ I X 10 2、I X 10 3、I X 10 4、I X 10 5、I X 10 6mM)的H2O2混合均匀，然后分别加入20 μ L 4mg/mL的CuFe 204/GQDs溶液，混合均匀后在37°C下温育15min。最后，通过磁铁去除反应体系中的CuFe204/GQDs，拍照观察颜色变化，并在652nm波长下分别测量并记录不同浓度反应溶液的吸光度，绘制标准曲线。
[0072]三、有机磷农药的检测
[0073](I)酶抑制反应和双酶催化反应:每次称取0.5mg的乙酰胆碱酯酶分别与不同浓度ΟκδχιοΛιοΛδχιοΛιοΛιοΛιοΛκιομΜ)的有机磷农药常温下反应，排掉农药，并干燥排掉农药后的乙酰胆碱酯酶，干燥后将乙酰胆碱酯酶加入到200 μ L含有0.5mg的胆碱氧化酶(ChOx)和0.5mg乙酰胆碱的PBS(0.1M，pH = 4)并混合均勾，在37°C下，温育反应15min。
[0074](2)有机磷残留浓度与吸光度的对应关系:800 μ L含0.5mg TMB和20 μ L 4mg/mL CuFe204/GQDs的PBS(0.1Μ，ρΗ = 4)，分别加入到步骤(I)温育后的溶液中，混合均匀，在37°C下温育15min。然后，通过外加磁场(磁铁)去除反应体系中的CuFe204/GQDs，拍照观察颜色变化，并在652nm波长下测量反应溶液的吸光度。最后，建立有机磷农药浓度与吸光度的对应关系，绘制标准曲线，得到在5X10_4?10 μΜ有机磷农药范围内呈线性关系，检测限为 1.67Χ1(Γ4μΜ。
[0075]实施例5
[0076]一、材料制备
[0077](I)GQDs的制备:取4g固体柠檬酸(CA)加入容积为5mL烧杯中，加热到250°C，柠檬酸(CA)熔化成液体，随后，柠檬酸(CA)液体从无色变到淡黄色，最后变成橙色液体。最后在剧烈的搅拌下，将浓度为IM NaOH溶液逐滴滴入橙色液体中，直至pH达到8，继续加热，最后制备成GQDs溶液，所得GQDs溶液质量为m。
[0078](2) CuFe2O4的制备:首先将 0.27g CuCl 2.2HzO 和 0.65g FeCl3.6H20 加入到 20mL乙二醇(EG)中，搅拌至透明溶液，随后加入2.2g醋酸钠(NaAc)和0.7g聚乙二醇(PEG)搅拌30min，装入容量25mL的聚四氟反应釜，加热至250°C维持10h，反应后冷却至室温得到黑色产物，离心并用乙醇多次清洗，在温度为60°C下持续干燥6h，最终得到CuFe204。
[0079](3) CuFe204/GQDs 的制备:称取 90mg CuFe2O4加入到(m/400) g GQDs 溶液中，分散均匀，静置12h，使CuFe2O4和GQDs通过静电作用充分吸附；将所得的固体离心分离得到固体沉淀，并分别用二次蒸馏水、乙醇洗涤3次，最后在45°C下真空干燥24h，即得到CuFe2O4/GQDs复合材料。
[0080]二、吸光度与H2O2的浓度对应关系
[0081]比02浓度与吸光度的对应关系:首先将800 μ L含有0.5mg TMB的0.1M PBS (pH=4)分别和 100 μ L 梯度浓度(I X 102、1X 11U X 10°、I X 10 \ I X 10 2、I X 10 3、I X 10 4、I X 10 5、I X 10 6mM)的H2O2混合均匀，然后分别加入20 μ L 4mg/mL的CuFe 204/GQDs溶液，混合均匀后在37°C下温育15min。最后，通过磁铁去除反应体系中的CuFe204/GQDs，拍照观察颜色