一种血清淀粉样蛋白a测定试剂盒及其使用方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒及其使用方法。
【背景技术】
[0002]血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein，SAA)是急性期蛋白，在炎症、感染性和非感染性疾病期间，它在血液中的浓度能在数小时内急剧升高，可升高到最初浓度的1000倍；SAA与HDL有关，它能在炎症期间调节HDL的代谢，SAA 一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白A原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症；血清淀粉样蛋白A升高还见于动脉粥样硬化、糖尿病肾病、急性心肌梗死、冠心病、慢性肾脏疾病。在评价炎症、监控其活动及治疗中，SAA与CRP有相似的作用。SAA检测在诊断发生病毒感染、肾移植排斥反应的患者(特别是进行免疫抑制治疗的患者)以及肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比C反应蛋白检测更确凿。研究发现，在患关节炎的案例中，血清淀粉样蛋白A与疾病活动性的关系最密切。同时检测C反应蛋白和血清淀粉样蛋白A能提高对感染的诊断灵敏度。但目前所使用的关于血清淀粉样蛋白A测定试剂盒其准确性低，且操作复杂，不易推广。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
[0004]为了达到上述目的，本发明的技术方案是:
一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液Tris-HCl缓冲液、第一检测液叠氮化钠，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液Tris-HCl缓冲液97— 99%，第一检测液叠氮化钠1—3% ;第二检测液包括第二检测液Tris-HCl缓冲液、第二检测液叠氮化钠、包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液Tris-HCl缓冲液94一98%，第二检测液叠氮化钠I一3%，包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒I一3%。
[0005]第一检测液包括第一检测液Tris-HCl缓冲液、第一检测液叠氮化钠，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液Tris-HCl缓冲液98%，第一检测液叠氮化钠2% ;第二检测液包括第二检测液Tris-HCl缓冲液、第二检测液叠氮化钠、包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液Tris-HCl缓冲液96%，第二检测液叠氮化钠2%，包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒2%。
[0006]一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤:首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液250 μ L，蒸馏水8 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液250 μ L，标准液8 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液250 μ L，检测液8 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中血清淀粉样蛋白A的含量。
[0007]所述孵育时的温度均为37°C。
[0008]包被有血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体的胶乳颗粒，当与含有SAA抗原的检测液混合时，会发生凝集反应，从而引起吸光度的变化，其大小与检测液中SAA抗原含量成比例。将吸光度变化与已知浓度的标准液比较，可以定量得出检测液中血清淀粉样蛋白A的含量。
[0009]本发明的有益效果是:一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
【具体实施方式】
[0010]实施例1
一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液Tris-HCl缓冲液、第一检测液叠氮化钠，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液Tris-HCl缓冲液98%，第一检测液叠氮化钠2% ;第二检测液包括第二检测液Tris-HCl缓冲液、第二检测液叠氮化钠、包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液Tris-HCl缓冲液96%，第二检测液叠氮化钠2%，包被有抗人血清淀粉样蛋白A抗体的胶乳颗粒2%。
[0011]—种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤:首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液250 μ L，蒸馏水8 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液250 μ L，标准液8 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液250 μ L，检测液8 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入50 μ L混合均匀并孵育I分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中血清淀粉样蛋白A的含量。所述孵育时的温度均为37°C。
[0012]本实施例的一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
[0013]实施例2
一种血清淀粉样蛋白A测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液Tris-HCl缓冲液、第一检测液叠氮化钠，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液Tris-HCl缓冲液97%，第一检测液叠氮化钠