式二份以2微克、4微克和8微克的量加载到条带上（每 单位量蛋白质两个条带）。在样品中的蛋白质通过电泳分离并且转移到硝化纤维膜，如示例 1中那样。然后将膜切成两半并且利用两种不同的抗体探测。
[0117] 膜的一半被1:1000稀释的抗GAPDH的兔初级抗体探测。然后施加以1:5000稀释 的次级抗体（山羊抗兔HRP结合体），并且使用Clarity化学发光底物（Bio-Rad)检测蛋白 质（图6)。膜的另一半利用1:1000稀释的抗a/b-微管蛋白的兔初级抗体来探测。使用相 同的二次抗体和化学发光底物（图6)来探测在这半部上的蛋白质。 氺氺氺
[0118] 在本发明所附权利要求中，术语"一"意图表示"一个或多个"。术语"包括"和其 变型诸如"包含"和"具有"当在陈述步骤或元件之前时意图表示另外的步骤或元件的添加 是可选的并且不排除。
[0119] 本文所引用的所有文献（例如，专利、专利申请、书、期刊文章或其它出版物）以全 文引用的方式并入到本文中并且用于所有目的，如同每个单独文献具体地并且单独地指示 为以全文引用的方式并入到本文中用于所有目的的程度。就所引用的这些文献与说明书中 所包含的公开相互矛盾的情况下，预期以说明书为主和/或说明书优先于任何有矛盾的资 料。
[0120] 在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明做出许多修改和变型，如 对于本领域技术人员显然。本文所描述的具体实施例仅以举例说明的方式提供并且绝不以 任何方式具有限制意义。预期说明书和示例被认为只是说明性的，本发明的真实的精神和 范围由所附权利要求指示。
【主权项】
1. 一种用于浇制和保持电泳凝胶带的模具，所述模具包括： 细长泳道腔阵列，每个泳道腔具有顶端、底端和两个或更多个侧部，各所述泳道腔彼此 平行定向； 基质，其包括至少一种固体材料并且沿着所述泳道腔的侧部设置，所述基质使各所述 泳道腔彼此分开，并且使所述泳道腔与在所述模具外部的空间分开；以及 多个窗口，其中，两个窗口与每个泳道腔相关联并且设置于所述泳道腔的相对侧上，每 个窗口沿着所述泳道腔在长度方向上延伸并且穿入所述基质，从而形成从所述泳道腔经由 所述基质到达相邻泳道腔或所述模具外部空间的通路。2. 根据权利要求1所述的模具，其特征在于，还包括：可移除的基座，其将所述泳道腔 的所述底端与所述模具外侧的空间密封隔离。3. 根据权利要求1所述的模具，其特征在于，还包括：可移除的窗口覆盖物，所述可移 除的窗口覆盖物接触所述基质并且与至少一个窗口对准，其中所述窗口覆盖物防止物质或 电流穿过所述窗口覆盖物所对准的所述窗口。4. 根据权利要求1所述的模具，其特征在于，还包括：转接器，所述转接器包括多个孔， 其中所述转接器设置于所述泳道腔的顶端附近，使得所述转接器的所述孔与所述泳道腔对 准并且所述孔构造成便于凝胶前体倾倒至所述泳道腔内以浇制凝胶带或者在浇制后将样 品加载到所述凝胶带上。5. 根据权利要求1所述的模具，其特征在于，至少一个泳道腔在所述顶端为锥形以便 于凝胶前体倾倒至所述泳道腔内以用于浇制凝胶带，或者在浇制后将样品加载到所述凝胶 带上，使得： 所述至少一个泳道腔的宽度在所述顶端处大于所述泳道腔的平均宽度；或者 对于所述基质的第一部分，所述第一部分分隔所述至少一个泳道腔与相邻泳道腔，所 述第一部分的在所述至少一个泳道腔的顶端处的厚度小于所述第一部分的平均厚度；或者 对于所述基质的第二部分，所述第二部分分隔所述至少一个泳道腔与所述模具外部空 间，所述第二部分的在所述至少一个泳道腔的顶端处的厚度小于所述第二部分的所述平均 厚度。6. 根据权利要求1所述的模具，其特征在于，还包括：储器，其中所述储器设置于所述 泳道腔的顶端附近并且构造成保持液体。7. 根据权利要求1至6中任一项所述的模具，其特征在于，所述细长泳道腔的阵列是一 维的，并且与每个泳道腔相关联的所述窗口形成从所述泳道腔经由所述基质到所述模具外 部空间的通路。8. 根据权利要求7所述的模具，其特征在于，所述基质包括第一固体材料和第二固体 材料，所述第一固体材料使所述泳道腔彼此分开，并且所述第二固体材料使所述泳道腔与 所述模具外部空间分开。9. 根据权利要求8所述的模具，其特征在于，所述第一固体材料包括梳，所述梳包括多 个齿，并且所述泳道腔包括在所述齿之间的空间。10. 根据权利要求9所述的模具，其特征在于，所述第二固体材料包括两个窗口板，所 述窗口板结合到所述梳的相对侧上，并且每个窗口板包括所述多个窗口中的至少一个。11. 根据权利要求8所述的模具，其特征在于，所述第二固体材料包括至少两个部件， 并且第一固体材料夹在所述第二固体材料的两个部件之间。12. 根据权利要求1至6中任一项所述的模具，其特征在于，所述细长泳道腔的阵列是 二维的并且所述泳道腔以行和列布置于所述模具中。13. 根据权利要求12所述的模具，其特征在于，所述模具构造成保持在微量滴定板中。14. 根据权利要求12所述的模具，其特征在于，所述模具构造成分成泳道腔的一个或 多个子阵列，每个子阵列对应于所述模具中泳道腔的行。15. 根据权利要求14所述的模具，其特征在于，所述多个窗口中的某些形成位于相邻 行中泳道腔对之间的内部通路，使得：将所述模具分成一个或多个子阵列的操作会平分所 述内部通路，并且与每个子阵列的所述泳道腔相关联的所述窗口形成从所述泳道腔到所述 子阵列外部空间的通路。16. 根据权利要求1至6中任一项所述的模具，其特征在于，所述细长泳道腔的阵列是 二维的，并且所述泳道腔以圆布置于所述模具中。17. 根据权利要求1至16中任一项所述的模具，其特征在于，还包括：一个或多个电泳 凝胶带，其中，每个凝胶带保持在一个泳道腔中，基本上填充所述一个泳道腔和与所述一个 泳道腔相关联的窗口，并且具有第一端和第二端，所述第一端设于所述一个泳道腔的顶端 附近，并且所述第二端设于所述一个泳道腔的底端附近。18. -种使用权利要求17所述的模具来分离样品的分析物的方法，所述方法包括： 将样品加载到在所述模具的一个泳道腔中保持的电泳凝胶带的第一端上；以及 经由所述一个泳道腔，在所述凝胶带的所述第一端与第二端之间传递电流，从而将所 述样品抽吸到所述凝胶带内并且通过电泳分离所述样品的分析物。19. 根据权利要求18所述的方法，其特征在于，还包括：显示所述凝胶带中的所述样品 的分析物。20. 根据权利要求19所述的方法，其特征在于，通过与所述一个泳道腔相关联的窗口 之一来显示所述样品的分析物。21. -种使用电泳凝胶带和权利要求7的模具来分析样品的方法，所述方法包括： 将样品加载到在所述模具的一个泳道腔中保持的电泳凝胶带的第一端上； 经由所述一个泳道腔，在所述凝胶带的所述第一端与一第二端之间传递电流，从而将 所述样品抽吸到所述凝胶带内并且通过电泳分离所述样品的分析物； 移除在与所述一个泳道腔相关联的窗口上的任何密封剂或者窗口覆盖物；以及 使电流在与用于电泳的方向正交的方向上穿过与所述一个泳道腔相关联的窗口，从而 将分析物从所述凝胶带转移出来。22. 根据权利要求21所述的方法，其特征在于，移除在与这个泳道腔相关联的窗口上 的任何密封剂或者窗口覆盖物包括从保持所述模具的盒上移除所述模具。23. -种使用电泳凝胶带和权利要求14的模具来分析样品的方法，所述方法包括： 将样品加载到在所述模具的一个泳道腔中保持的电泳凝胶带的第一端上； 经由所述一个泳道腔，在所述凝胶带的所述第一端与第二端之间传递电流，从而将所 述样品抽吸到所述凝胶带内并且通过电泳分离所述样品的分析物； 使所述模具分成一个或多个一维子阵列，其中，一个一维子阵列包含所述一个泳道 腔； 移除在与所述一个泳道腔相关联的窗口上的任何密封剂或者窗口覆盖物；以及 使电流在与用于电泳的方向正交的方向上穿过与所述一个泳道腔相关联的窗口，从而 将分析物从所述凝胶带转移出来。24. 根据权利要求23所述的方法，其特征在于，移除在与所述一个泳道腔相关联的窗 口上的任何密封剂或者窗口覆盖物包括从保持所述子阵列的盒移除所述子阵列。25. 根据权利要求21或23所述的方法，其特征在于，还包括：在所述模具的所述一个 泳道腔中形成电泳凝胶带。26. 根据权利要求25所述的方法，其特征在于，所述形成过程包括将所述模具浸没于 凝胶前体中，并且允许所述凝胶带在所述一个泳道腔中凝固。27. 根据权利要求25所述的方法，其特征在于，所述形成过程包括将凝胶前体倾倒至 所述一个泳道腔内并且允许所述凝胶带凝固。28. 根据权利要求21或23所述的方法，其特征在于，还包括：在使电流穿过与所述一 个泳道腔相关联的所述窗口中的一个之前，将膜放置在所述窗口的所述一个附近，其中，所 述膜构造成接收从所述凝胶带转移出来的分析物。29. -种执行电泳的系统，所述系统包括： 盒，用来保持权利要求1所述的模具； 第一电极；以及 第二电极， 其中： 所述第一电极的极性与所述第二电极的极性相反， 当所述模具保持在所述盒中时，所述第一电极位于所述模具的泳道腔的顶端附近；以 及 当所述模具保持在所述盒中时，所述第二电极位于所述泳道腔的底端附近。30. -种执行电泳和印迹法的系统，所述系统包括： 盒，用来保持权利要求7所述的模具； 第一分离电极； 第二分离电极； 马达； 第一转移电极；以及 第二转移电极， 其中： 所述第一分离电极的极性与所述第二分离电极的极性相反， 所述第一转移电极的极性与所述第二转移电极的极性相反， 当所述模具保持在所述盒中时，所述第一分离电极位于所述模具的泳道腔的顶端附 近； 当所述模具保持在所述盒中时，所述第二分离电极位于所述泳道腔的底端附近；以及 所述马达构造成从所述盒移除所述模具并且将所述模具放置于所述第一转移电极和 所述第二转移电极附近，使得当所述模具从所述盒移除之后，所述第一转移电极和所述第 二转移电极位于所述泳道腔的相对侧上，在与所述泳道腔相关联的窗口附近。31.根据权利要求29或30所述的系统，其特征在于，所述盒构造成使得：当所述模具 保持在所述盒中时，所述盒接触所述模具的基质并且和与所述泳道腔相关联的所述窗口对 准，从而防止物质或电流穿过与所述泳道腔相关联的所述窗口。32. -种套件，包括： 根据权利要求1至17中任一项所述的模具， 用于保持所述模具的盒，其中，所述盒接触所述模具的基质并且和与至少一个泳道腔 相关联的窗口对准，从而防止物质或电流穿过与所述泳道腔相关联的窗口。33. -种套件，包括： 根据权利要求1至17中任一项所述的模具， 用于保持所述模具的盒，其中： 所述盒包括接触所述模具的基质的壁， 所述壁包括实心部分和通孔；以及 所述模具构造成在所述盒内沿侧向在闭合状态与打开状态之间移位，使得： 在所述闭合状态时，所述实心部分和与至少一个泳道腔相关联的窗口对准，从而防止 物质或电流穿过所述窗口；以及 在所述打开状态时，所述通孔与所述窗口对准，从而允许物质或电流穿过所述窗口。34. -种套件，包括： 根据权利要求3所述的模具；和 马达，所述马达构造成施加或移除所述可移除的窗口覆盖物。
【专利摘要】提供了一种用于浇制和保持电泳凝胶带的模具，以及用于执行电泳、电洗脱和/或电印迹的方法、套件和系统。根据一些实施例的模具包括：细长泳道腔阵列，每个泳道腔具有顶端、底端和两个或更多个侧部，各所述泳道腔彼此平行定向；基质，其包括至少一种固体材料并且沿着泳道腔的侧部设置，该基质使各所述泳道腔彼此分开，并且使该泳道腔与在所述模具外部的空间分开；以及多个窗口，其中，两个窗口与每个泳道腔相关联并且设置于所述泳道腔的相对侧上，每个窗口沿着所述泳道腔在长度方向上延伸并且穿入所述基质，从而形成从所述泳道腔经由所述基质到达相邻泳道腔或所述模具外部空间的通路。
【IPC分类】G01N27/447
【公开号】CN105378468
【申请号】CN201480031320
【发明人】W·斯特朗
【申请人】生物辐射实验室股份有限公司
【公开日】2016年3月2日
【申请日】2014年12月2日
【公告号】EP2986978A2, US20150153306, WO2015084887A2, WO2015084887A3