一种检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于医学检验领域，提供了一种快速检测体液中抗体物质的装置。更具体地说，本实用新型涉及一种试剂，制备该试剂的方法以及使用该试剂用于人口腔黏膜渗出液或血液HIV1/2抗体的检测。
[0002]本实用新型提供了一种检测方法，包括采用代表病原微生物的物质制备检测试纸条或者装置，并将采集自口腔黏膜渗出液或血液获得的含抗体样品用所述试纸条或者装置进行分析。
【背景技术】
[0003]艾滋病(AcquiredImmunodeficiency Syndrome，AIDS)，又称获得性免疫缺陷综合症，是一类世界范围内严重危害人类健康和生命的病毒性传染性疾病。在不到20年中，已使3000万人受到感染，1000万人失去生命。目前，世界上每天有万余人新感染艾滋病病毒。据统计，至2001年底，我国艾滋病的感染人数为100万左右，现进入快速增长期，根据卫生部的资料，2001年上半年报告的艾滋病病毒感染者数量与上一年相比上升了 67.4%。全球的研宄结果表明HIV1/2是通过被污染的血液、血液制品、输血或密切个体间接触而传播传染的，在特殊的人群中甚至出现交叉感染的迹象。不但医学界在竭尽全力研宄诊断预防治疗艾滋病，各国政府，社会各阶层都纷纷投入到抗击艾滋的运动。但到目前为止，人类还没有找到一种治疗此病的方法。因而早期诊断及时发现感染病人，控制其进一步传播仍然是艾滋病防治的重要手段之一。
[0004]近年来，国内外主要采用酶联免疫吸附法(ELISA)、PCR、细胞培养等方法检测HIV1/2抗体或病毒。这些方法都不同程度的存在一些缺点。如ELISA法操作程序较复杂，易造成假阳性和假阴性，并易造成操作者受害和环境污染，试验时间较长，需要两个小时以上才能得出检测结果。同时必须具备酶标仪和洗板机，这在基层实验室和小型门诊较难达到，且试验受温度等条件限制，给检测带来不便。
[0005]分子测试(简称PCR法)其检测时间长，试验步骤繁琐，同时需要使用特殊的仪器和设备，试剂需要冷藏，同时检测费用昂贵，限制了试剂的普及应用。IFA(荧光免疫检测法)必须具备荧光免疫显微镜和暗室条件，为获得良好的荧光观察效果必须配合合适的滤光片，实验时间需要两个小时，结果检测在荧光显微镜下进行，必须由有经验的专业技术人员判定检测结果。阴性的抗体测试结果不能排除是否感染，需要在超过21天后仍然阴性才能确定没有受到HIV1/2感染。
[0006]细胞培养是一种无菌操作技术，要求具备很高的实验工作环境和条件(无菌操作间、超净工作台、操作间等)，需要大量的仪器设备(培养箱、离心机、显微镜等)，需要大量的专业实验器材，实验技术复杂，需要有经验的技术人员操作，且实验周期很长，不适宜疾病的快速检测。凝聚试验包括明胶颗粒(PA)和乳胶颗粒(LAT)属半定量测定，须多次倍比稀释测定费试剂，且结果重复性差，且灵敏度低。
[0007]而免疫金标法技术(Immunochromatography Assay)是上世纪九十年代中期发展起来的，因其快速、操作简便、试剂稳定、可室温储运、不易污染的特点得到广泛的应用。它是免疫亲和技术、印迹技术、免疫标记技术和层析技术的组合。将包被抗体，胶体金标记抗体固相化，与样本吸附材料等组合在一起，制备为免疫层析诊断试纸条/板，使用时只需要把试纸条下插入样本溶液，数分钟就可以判断结果。与免疫渗滤法比较，稳定性好，操作更简便、快速，且由于为干试纸条/板形式，无需低温保存，储运方便。
[0008]目前，免疫胶体金技术在检测HIV1/2抗体的应用上局限于血清样本，检测须在获得授权的实验室并由有资格证书的医师或技术人员去完成。今年也有检测全血样本的试剂出现，须用锐器取样，由此引起的操作安全问题亦令人担心。
[0009]由于这些和其他原因，需要一种改进的试剂，用于可靠地检测在体液中微量存在的抗体物质，同时需要这样的试剂以某种方式包装，从而个人可以在家中的自我检测中容易地使用。
【实用新型内容】
[0010]本实用新型提供的主要技术方案，罗列如下。
[0011]一种检测试剂盒，其包括试纸条、溶液，试纸条包括在底板(8)上顺次相互搭接地粘贴样品垫(I)、胶体金垫(2)、包被膜(3)以及吸水垫(4)，包被膜(3)有检测区(5)和控制区(7)，检测区(5)包被HIV-1/2嵌合抗原，控制区(7)包被羊抗人IgG抗体；溶液包括裂解结合液、漂洗液A、漂洗液B、漂洗液C、洗脱液、磁珠液以及HIV核酸扩增试剂，HIV核酸扩增试剂包括RT-PCR反应液、酶混合液、HIV-内标、HIV定量参考品、阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品，拭子为口腔拭子或棉签类粘液样本采集装置，从人体身上采集体液样本，本实用新型测定的体液样本包括:唾液、尿液、血液，将所述体液样本转移到溶液中，将拭子采集的体液样本与所述溶液结合后，垂直插入试纸条对所述体液样本进行检测，插入深度不超过样品垫在样本中停留约5秒，垂直取出试纸，15分钟后观察结果。
[0012]试纸条，用于测定；拭子，用于取样；溶液，用于从拭子上转移样品。包被膜(3)可由尼龙膜或羧化纤维素膜或纯纤维素膜作为替代材料。
【附图说明】
[0013]构成本实用新型的一部分的附图用来提供对本实用新型的进一步理解，本实用新型的示意性实施例及其说明用于解释本实用新型，并不构成对本实用新型的
[0014]图1是本实用新型的结构示意图；
[0015]图2是图1的A-A线剖视图。
【具体实施方式】
[0016]如图1、图2所示，本实用新型的疫苗保护性抗体快速检测试剂盒包括底板8，在底板8上顺次相互搭接地粘贴样品垫1、胶体金垫2、包被膜3以及吸水垫4，包被膜3有检测区5和控制区7，检测区5包被HIV-1/2嵌合抗原，控制区7包被羊抗人IgG抗体；溶液包括裂解结合液、漂洗液A、漂洗液B、漂洗液C、洗脱液、磁珠液以及HIV核酸扩增试剂，HIV核酸扩增试剂包括RT-PCR反应液、酶混合液、HIV-内标、HIV定量参考品、阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品。
[0017]本实用新型的工作原理是:用拭子从人体身上采集体液样本，本实用新型测定的体液样本包括:唾液、尿液、血液，将所述体液样本转移到溶液中，将拭子采集的体液样本与所述溶液结合后，垂直插入试纸条对所述体液样本进行检测，插入深度不超过样品垫在样本中停留约5秒，垂直取出试纸，15分钟后观察结果。
[0018]本实用新型测定的样本是:唾液、尿液、血液。
[0019]本实用新型检测和结果判定:
[0020]1、间接法、捕获法、夹心法:质控线、检测线都显色，则为阳性，表明检测样品中疫苗的抗体达到保护性水平；如质控线显色、检测线不显色，则为阴性，表明样本中疫苗的抗体未达到保护性水平；质控线、检测线都不显色，表明试纸条失效。
[0021]2、竞争法:质控线显色、检测线不显色，则为阳性，表明检测样品中疫苗的抗体达到保护性水平；如质控线显色、检测线显色，则为阴性，表明样本中疫苗的抗体未达到保护性水平；质控线、检测线都不显色，表明试纸条失效。
[0022]以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
【主权项】
1.一种检测试剂盒，其包括试纸条，溶液，其特征在于:试纸条包括在底板(8)上顺次相互搭接地粘贴样品垫(I)、胶体金垫(2)、包被膜(3)以及吸水垫(4)，包被膜(3)有检测区(5)和控制区(7)，检测区(5)包被HIV-1/2嵌合抗原，控制区(7)包被羊抗人IgG抗体；溶液包括裂解结合液、漂洗液A、漂洗液B、漂洗液C、洗脱液、磁珠液以及HIV核酸扩增试剂，HIV核酸扩增试剂包括RT-PCR反应液、酶混合液、HIV-内标、HIV定量参考品、阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品，拭子为口腔拭子或棉签类粘液样本采集装置，将所述拭子采集的体液样本与所述溶液结合后，垂直插入试纸条对所述体液样本进行检测，插入深度不超过样品垫，在样本中停留约5秒，垂直取出试纸，15分钟后观察结果。
2.根据权利要求1所述的一种检测试剂盒，其特征在于，所述拭子采集的体液样本包括:唾液、尿液、血液。
3.根据权利要求2所述的一种检测试剂盒，其特征在于，所述包被膜(3)可由尼龙膜或羧化纤维素膜或纯纤维素膜作为替代材料。
【专利摘要】本实用新型公开了一种检测试剂盒，艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS)，又称获得性免疫缺陷综合症，是一类世界范围内严重危害人类健康和生命的病毒性传染性疾病。在不到20年中，已使3000万人受到感染，1000万人失去生命。目前，世界上每天有万余人新感染艾滋病病毒。据统计，至2001年底，我国艾滋病的感染人数为100万左右，现进入快速增长期，根据卫生部的资料，2001年上半年报告的艾滋病病毒感染者数量与上一年相比上升了67.4％。全球的研究结果表明HIV1/2是通过被污染的血液、血液制品、输血或密切个体间接触而传播传染的，在特殊的人群中甚至出现交叉感染的迹象。不但医学界在竭尽全力研究诊断预防治疗艾滋病，各国政府，社会各阶层都纷纷投入到抗击艾滋的运动。但到目前为止，人类还没有找到一种治疗此病的方法。因而早期诊断及时发现感染病人，控制其进一步传播仍然是艾滋病防治的重要手段之一。
【IPC分类】G01N33-571
【公开号】CN204575662
【申请号】CN201520114625
【发明人】黄竹英, 汪平帮, 李松, 金爱群, 湛东进, 蹇小乐
【申请人】长沙市中医医院（长沙市第八医院）
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年2月25日