北虫草工厂化生产方法及工艺的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种北虫草工厂化生产方法及工艺，包括以下步骤：引进分离母种；出草试验;母种扩繁；制作原种；制作液体栽培种，同时配置培养基；灭菌并冷却；接种；生产管理：发菌；见光培养；通风；杂菌、虫害防治；物理防治；化学防治；采收；采后管理；包装、运输；贮存；具有产量高，操作简单、效率高等好处，便于大规模生产，产出的北虫草经济实用，生产成本低、易于贮存与运输。
【专利说明】北虫草工厂化生产方法及工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品保健品加工【技术领域】，特别涉及一种北虫草工厂化生产方法及工艺。
【背景技术】
[0002]北虫草(scarlet caterpillar fungus)是北冬虫草的简称,也叫蛹虫草或蛹草，俗名不老草，是虫、菌结合的药用真菌，是蛹虫草的子座，即子实体，由已组织化的菌丝体组成。北冬虫夏草属于真菌门，子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草属，属于现代珍稀中草药，主要生长在我国的北方地区。北虫草不仅含有丰富的蛋白质和氨基酸，而且含有30多种人体所需的微量元素，是上等的滋补佳品。
[0003]北冬虫夏草含有丰富的蛋白质、18种氨基酸、17种微量元素、12种维生素:A、B1、B2、B6、B12、C、D、E等含量高于菇类，经香港、韩国、日本、加拿大、美国以及国内国十多个单位等世界各国的研究和检测证明，北虫草是传统冬虫夏草的最理想代用品，虫草素对人的鼻、咽癌(KD)细胞有很强的抑制作用。临床上使用虫草素多为辅助治疗恶性肿瘤，症状得到改善的在91.7%以上；主要用于鼻癌、咽癌，肺癌，白血病，脑癌、肠癌、胃癌以及其他恶性肿瘤的患者。
[0004]随着北虫草越来越多的药 用及食用价值的被发现，其需求也越来越高，但是由于虫草对于生产条件要求极其苛刻，所以一直以来都无法规模化生产，对于在可控的环境条件下，利用成套设施和综合技术实现周年性的规模化生产，更是很少有技术能够达到。
【发明内容】
[0005]针对现有技术无法满足社会需求、缺少有效的规模化生产北虫草技术的的上述缺陷和问题，本发明实施例的目的是提供一种北虫草工厂化生产方法及工艺，在可控的环境条件下，利用成套设施和综合技术实现周年性的规模化生产。
[0006]为了达到上述目的，本发明实施例提供如下技术方案:
[0007]一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，包括以下步骤:
[0008]Ql:引进分离母种:将经各种方法选育得到的、具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物挑选为母种，利用无菌操作的方法将所需要的母种从混杂的微生物群体中单独分离出来；
[0009]Q2:出草试验:经过栽培试验证明菌种在常规条件下可以产生农艺性状合格子实体；
[0010]Q3:母种扩繁:在无菌条件下，将分离的母种斜面培养物切割成6mm~8mm小块，转接到PDA斜面培养基上，18°C~22°C下进行暗培养，待菌丝长满试管后在4°C环境中保存；
[0011]Q4:制作原种；
[0012]Q5:制作液体栽培种，同时配置培养基；[0013]Q6:灭菌并冷却:高压灭菌温度达到121°C~126°C后，保持lh，然后将常压灭菌温度达到100°C~105°C，保持不低于8h，当灭菌锅内培养基温度降至40°C~50°C时出锅，移入接种室内，冷却至25°C以下进行接种；
[0014]Q7:接种:先将接种工具用酒精灯火焰灼烧灭菌，然后将液体生产种覆盖到冷却的固体培养基中，每瓶约含有35g固体培养基，可接种5ml液体栽培种；
[0015]Q8:生产管理:生产周期约为45天；
[0016]Q81:发菌:接种后的培养基于培养瓶中，用托盘乘放置于发菌室，可2~5层叠放，温度控制在18 °C~22 °C之间，空气相对湿度控制在60 %~70 %之间，黑暗培养，通风换气，保持空气新鲜；
[0017]Q82:见光培养:将暗培养条件下长满菌丝的培养瓶上架见光，人工控制室内温、湿度及光照强度，温度保持在18°C _22°C，湿度保持在60-75% ；
[0018]Q83:通风:保持室内空气新鲜，每日定时开窗通风；
[0019]Q84:杂菌、虫害防治:
[0020]Q841:物理防治:生产过程中调节好培养室内温湿度，避免过分干燥或潮湿，加强通风换气；
[0021]通风口安装纱网及紫灯外灭菌装置，防治螨类、虫类及杂菌进入；
[0022]生产车间内发现 污染源后立即清除并高压灭菌，防治二次污染；
[0023]在无培养物的条件下采用紫外光对整个培养室内进行消毒；
[0024]Q842:化学防治:在无培养物的条件下采用高效、低毒化学药剂进行彻底消毒；
[0025]Q9:采收:子实体长5cm以上，顶部形成孢子囊且无孢子飞散时采收；用手按住子实体基部采下，盛器以小盘为宜，以免挤压；采后管理:将采收后的培养瓶清空、洗刷灭菌，可重复利用；
[0026]QlO:包装、运输:避免日晒、雨淋、防止摔撞、重压，严禁与有毒、有害、有异味物品混运；
[0027]Qll:贮存:采收后的北虫草可在烘干箱内50°C烘干，含水量低于10%的情况下10°C~25°C下可保存12个月；贮存场所应满足防雨、防鼠、防虫、通风、干燥、清洁、阴凉、无阳光直射的要求，严禁与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易污染的物品混放。
[0028]作为上述技术方案的优选，所述Ql步骤中的母种分离的质量要求应符合:
[0029]
【权利要求】
1.一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，包括以下步骤: Ql:引进分离母种:将经各种方法选育得到的、具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物挑选为母种，利用无菌操作的方法将所需要的母种从混杂的微生物群体中单独分离出来； Q2:出草试验:经过栽培试验证明菌种在常规条件下可以产生农艺性状合格子实体； Q3:母种扩繁:在无菌条件下，将分离的母种斜面培养物切割成6mm~8mm小块,转接到PDA斜面培养基上，18°C~22°C下进行暗培养，待菌丝长满试管后在4°C环境中保存； Q4:制作原种； Q5:制作液体栽培种，同时配置培养基； Q6:灭菌并冷却:高压灭菌温度达到121°C~126°C后，保持lh，然后将常压灭菌温度达到100°C~105°C，保持不低于8h，当灭菌锅内培养基温度降至40°C~50°C时出锅，移入接种室内，冷却至25°C以下进行接种； Q7:接种:先将接种工具用酒精灯火焰灼烧灭菌，然后将液体生产种覆盖到冷却的固体培养基中，每瓶约含有35g固体培养基，可接种5ml液体栽培种； Q8:生产管理:生产周期约为45天； Q81:发菌:接种后的培养基于培养瓶中，用托盘乘放置于发菌室，可2~5层叠放,温度控制在18 °C~22 °C之间，空气相对湿度控制在60 %~70 %之间，黑暗培养，通风换气，保持空气新鲜； Q82:见光培养:将暗培养条件下长满菌丝的培养瓶上架见光，人工控制室内温、湿度及光照强度，温度保持在18°C _22°C，湿度保持在60-75% ； Q83:通风:保持室内空气新鲜，每日定时开窗通风； Q84:杂菌、虫害防治: Q841:物理防治:生产过程中调节好培养室内温湿度，避免过分干燥或潮湿，加强通风换气； 通风口安装纱网及紫灯外灭菌装置，防治螨类、虫类及杂菌进入； 生产车间内发现污染源后立即清除并高压灭菌，防治二次污染； 在无培养物的条件下采用紫外光对整个培养室内进行消毒； Q842:化学防治:在无培养物的条件下采用高效、低毒化学药剂进行彻底消毒； Q9:采收:子实体长5cm以上，顶部形成孢子囊且无孢子飞散时采收；用手按住子实体基部采下，盛器以小盘为宜，以免挤压；采后管理:将采收后的培养瓶清空、洗刷灭菌，可重复利用； QlO:包装、运输:避免日晒、雨淋、防止摔撞、重压，严禁与有毒、有害、有异味物品混运； Qll:贮存:采收后的北虫草可在烘干箱内50°C烘干，含水量低于10%的情况下10°C~25°C下可保存12个月；贮存场所应满足防雨、防鼠、防虫、通风、干燥、清洁、阴凉、无阳光直射的要求，严禁与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易污染的物品混放。
2.根据权利要求1所述的一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，所述Ql步骤中的母种分离的质量要求应符合:
3.作为上述技术方案的优选，所述Ql步骤中的母种分离的质量要求应符合:
4.根据权利要求1所述的一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，所述Q4步骤中的制作母种的质量要求应符合:
5.作为上述技术方案的优选，所述Q5步骤中的液体栽培种的感官要求应符合:
6.根据权利要求1所述的一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，所述Q5步骤中的配置培养基的分别为: 母种及原种培养基配方为:马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基，具体包含:马铃薯，葡萄糖，磷酸二氢钾，硫酸镁，维生素，琼脂粉，水； 液体栽培种培养基配方为:马铃薯、葡萄糖培养液，具体包含:马铃薯，葡萄糖，磷酸二氢钾，硫酸镁，维生素，水；用于生产的培养基:小麦，液体栽培种PDA培养液，pH值6.0~7.0，动物蛋白为蚕蛹或鸡蛋。
7.根据权利要求1所述的一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，母种及原种培养基配方具体包含:马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾7.0g，硫酸镁3.5g，维生素B10.lg，琼脂粉20g，水lOOOmL，pH值为6.0~7.0 ;液体栽培种培养基配方具体为:马铃薯200g，葡萄糖20g,磷酸二氢钾7.0g,硫酸镁3.5g，维生素B10.1g,水1000mL, pH值为6.0~7.0 ;用于生产的每个培养瓶的标准培养基配方具体为:小麦35g,液体栽培种PDA培养液50mL, pH6.0 ~7.0 ;动物蛋白 20g。
8.根据权利要求1所述的一种北虫草工厂化生产方法及工艺，其特征在于，所述北虫草工厂化生产方法及工艺，其生产设备与生产环境为: 生产设备为:天平、高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、恒温箱、显微镜及酒精灯；厂房设原料处理室、拌料室、分装室、灭菌室、冷却室、接菌室、发菌室、培养室、贮藏室、包装室； 厂房内部环境设有无菌操作区，无菌操作区设置紫外灯，用于每天定时进行物理消毒灭菌；生产车间外部采用保暖设施，内部采用空调等控温设施，保证室内温度控制到18。。~22°C之间； 培养架上设有满足于培养子实体的光源，光照强度控制在500LUX~1000LUX之间；每间培养室内有专用的通风口，通风口处需安装过滤风装置，室内CO2浓度不高于1000PPM。
【文档编号】A01G1/04GK103733875SQ201310551688
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年11月8日 优先权日:2013年11月8日
【发明者】任金平, 李启云, 温嘉伟, 刘国文, 高月波, 田志来 申请人:吉林省农业科学院, 吉林省农院生物制剂实验厂