本发明涉及植物组织培养技术领域,尤其是一种百香果组培快繁方法。
背景技术:
百香果学名西番莲,又名鸡蛋果,属百香果科热带、亚热带多年生常绿藤本植物,其果实为典型的热带、亚热带浆果。果汁香味独特、味道鲜美,富含各种营养成分,且根、茎、叶、花还可入药。百香果属蔓性果树,适宜在温暖、全年无冻害天气的北纬24度以南的地区种植。百香果的繁殖方法主要有两种,一是用种子直接播种繁殖,二是用蔓条扦插繁殖;用种子直接播种繁殖易引起杂种分离,存在着品质偏酸、甜度不够、产量不高的问题;而不加选择地随意扦插繁殖,加快了品种的退化,病害增加,特别容易感染茎腐病,产量大大降低。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种百香果组培快繁方法,这种方法培养的百香果能够保持自身杂种优势,而且诱发时间短、出苗快。
为了解决上述问题,本发明采用的技术方案是:
这种百香果组培快繁方法包括以下步骤:
A、外植体消毒灭菌:选取百香果腋芽作为外植体,用水洗干净,采用75%酒精消毒,然后在0.2%升汞溶液液浸泡20分钟~30分钟,取出后用无菌水冲洗5次~8次;
B、芽诱导培养:接种至芽诱导培养基,培养至长出新芽;培养时光照为2300LUX~2450LUX,温度为23℃~25℃;
C、生根培养:转入生根培养基至长出1厘米~3厘米的根;培养时光照为2300LUX~2500LUX,温度为23℃~25℃;
D、壮苗培养:转入壮苗培养基,培养至苗高2厘米~5厘米;其中,壮苗培养时光照为2200 Lux~2300 Lux,温度为24℃~28℃;
其中,芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升~0.3毫克/升萘乙酸和0.35毫克/升~0.5毫克/升6-苄氨基腺嘌呤;
生根养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升~0.3毫克/升萘乙酸以及0.1毫克/升~0.2毫克/升赤霉素;
壮苗培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升~0.3毫克/升萘乙酸。
上述技术方案中,更具体的技术方案还可以是:腋芽长1.5厘米~3厘米。
MS培养基成分为:硝酸钾1.9克/升、硝酸铵1.65克/升、磷酸二氢钾170毫克/升、硫酸镁370毫克/升、氯化钙440毫克/升、碘化钾0.83毫克/升、硼酸6.2毫克/升、硫酸锰22.3毫克/升、硫酸锌8.6毫克/升、钼酸钠0.25毫克/升、硫酸铜0.25毫克/升、氯化钴0.025毫克/升、乙二胺四乙酸二钠37.25毫克/升、硫酸亚铁27.85毫克/升、肌醇100毫克/升、甘氨酸2毫克/升、盐酸硫胺素0.1毫克/升、盐酸吡哆醇0.5毫克/升、烟酸0.5毫克/升、蔗糖30毫克/升、琼脂7 毫克/升。
由于采用了上述技术方案,本发明与现有技术相比具有如下有益效果:
本发明方法可在短期内获得大量优质种苗,保持百香果杂种优势,具有诱发时间短、出苗快、增殖频率高、出苗齐的特点,腋芽的萌发率均达90%以上,生根率可达 92.7%以上。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详述:
实施例1
本实施例百香果组培快繁方法为:
A、选取长1.5厘米的百香果腋芽作为外植体,用水洗干净,采用75%酒精消毒,然后在0.2%升汞溶液液浸泡20分钟,取出后用无菌水冲洗5次;
B、接种至芽诱导培养基,培养至长出新芽;培养时光照为2450LUX,温度为23℃~25℃;芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升萘乙酸和0.5毫克/升6-苄氨基腺嘌呤;
C、转入生根培养基至长出1厘米~3厘米的根;培养时光照为2400LUX,温度为23℃~25℃;生根养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升萘乙酸以及0.2毫克/升赤霉素;
D、转入壮苗培养基,培养至苗高2厘米~5厘米;其中,壮苗培养时光照为2200 Lux,温度为24℃~28℃;壮苗培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.27毫克/升萘乙酸。
本实施例腋芽的萌发率为90.7%,生根率为93.2%。
实施例2
本实施例百香果组培快繁方法为:
A、选取长3厘米的百香果腋芽作为外植体,用水洗干净,采用75%酒精消毒,然后在0.2%升汞溶液液浸泡25分钟,取出后用无菌水冲洗6次;
B、接种至芽诱导培养基,培养至长出新芽;培养时光照为2400LUX,温度为23℃~25℃;芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升萘乙酸和0.4毫克/升6-苄氨基腺嘌呤;
C、转入生根培养基至长出1厘米~3厘米的根;培养时光照为2500LUX,温度为23℃~25℃;生根养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升~.3毫克/升萘乙酸以及0.15毫克/升赤霉素;
D、转入壮苗培养基,培养至苗高2厘米~5厘米;其中,壮苗培养时光照为2250 Lux,温度为24℃~28℃;壮苗培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升萘乙酸。
本实施例腋芽的萌发率为91%,生根率为92.7%。
实施例3
本实施例百香果组培快繁方法为:
A、选取长2厘米的百香果腋芽作为外植体,用水洗干净,采用75%酒精消毒,然后在0.2%升汞溶液液浸泡30分钟,取出后用无菌水冲洗8次;
B、接种至芽诱导培养基,培养至长出新芽;培养时光照为2300LUX,温度为23℃~25℃;芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.27毫克/升萘乙酸和0.35毫克/升/升6-苄氨基腺嘌呤;
C、转入生根培养基至长出1厘米~3厘米的根;培养时光照为2300LUX~2500LUX,温度为23℃~25℃;生根养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升萘乙酸以及0.1毫克/升赤霉素;
D、转入壮苗培养基,培养至苗高2厘米~5厘米;其中,壮苗培养时光照为2300 Lux,温度为24℃~28℃;壮苗培养基以MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升。
本实施例腋芽的萌发率为91.5%,生根率为93%。