本发明涉及植物培养技术领域，具体涉及一种草莓不定芽诱导培养基及其制备方法与应用。
背景技术：
草莓又叫洋莓、地莓等，属蔷薇科、草莓属、多年生草本植物。草莓果鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香，富含维生素c、维生素a、胡萝卜素等。草莓有较高的营养价值和药用价值，已成为世界小浆果类水果中最著名的品种之一，以其色泽鲜艳、柔软多汁、酸甜可口、应用丰富，深受广大消费者的喜爱。近年来，随着现代生物技术研究的不断深入，新的生物技术试验设备设施的不断推出，草莓培养技术发展迅猛；但是，在培养过程中，还存在很多的问题，如草莓不定芽诱导率低等。因此，还需要开发新型的草莓不定芽诱导培养基，以弥补现有技术中存在的不足。
技术实现要素：
针对现有技术中的缺陷，本发明目的在于提供一种草莓不定芽诱导培养基及其制备方法与应用，以通过在ms培养基的基础上添加适量的6-苄氨基嘌呤和萘乙酸等成分，提高草莓不定芽的诱导率，且适用于多个草莓品种，具有广阔的应用前景；培养基的制备方法简单，生产成本低。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种草莓不定芽诱导培养基，每1l培养基的原料组分包括：6-苄氨基嘌呤(6-ba)1.0～2.0mg、萘乙酸(naa)0.1～0.3mg、吲哚丁酸(iba)0～0.2mg、白糖25～35g、琼脂3.6～4.0g，余量为ms培养基。
在本发明的进一步实施方式中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
在本发明的进一步实施方式中，每1l培养基的原料组分包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基。
在本发明的进一步实施方式中，每1l培养基的原料组分还包括：缬氨酸0.5～0.8mg、丙氨酸1.0～1.2mg、尿素0.1～0.3mg和吲哚乙酸0.05～0.1mg。
在本发明的进一步实施方式中，每1l培养基的原料组分包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g、缬氨酸0.7mg、丙氨酸1.1mg、尿素0.2mg和吲哚乙酸0.08mg，余量为ms培养基。
第二方面，本发明提供了草莓不定芽诱导培养基的制备方法，包括如下步骤：将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
第三方面，本发明提供了草莓不定芽诱导培养基在培养草莓中的应用。
在本发明的进一步实施方式中，应用包括如下步骤：将草莓匍匐茎灭菌，然后剥离茎尖；将茎尖接种于草莓不定芽诱导培养基中进行不定芽诱导。
在本发明的进一步实施方式中，茎尖的长度为0.2～0.5mm。
在本发明的进一步实施方式中，不定芽诱导的时间为25～35天。
本发明提供的技术方案，具有如下的有益效果：(1)本发明通过在ms培养基的基础上添加适当含量的6-苄氨基嘌呤和萘乙酸等成分，制备得到的草莓不定芽诱导培养基可以提高草莓不定芽的诱导率；(2)本发明提供的草莓不定芽诱导培养基适用于多个草莓品种，具有广阔的应用前景；(3)本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法简单，生产成本低。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，因此只是作为示例，而不能以此来限制本发明的保护范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，数据为三次重复实验的平均值或平均值±标准差。本发明实施例中采用的草莓品种为新世纪1号。
本发明提供一种草莓不定芽诱导培养基，每1l培养基的原料组分包括：6-苄氨基嘌呤1.0～2.0mg、萘乙酸0.1～0.3mg、吲哚丁酸0～0.2mg、白糖25～35g、琼脂3.6～4.0g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
优选地，每1l培养基的原料组分还包括：缬氨酸0.5～0.8mg、丙氨酸1.0～1.2mg、尿素0.1～0.3mg和吲哚乙酸0.05～0.1mg。
另外，本发明还提供了上述草莓不定芽诱导培养基的制备方法，包括如下步骤：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
另外，本发明还提供了上述草莓不定芽诱导培养基的在培养草莓中的应用方法，包括如下步骤：
将草莓匍匐茎灭菌，然后剥离长度为0.2～0.5mm的茎尖；将茎尖接种于草莓不定芽诱导培养基中，不定芽诱导25～35天。
下面结合具体实施例对本发明提供的草莓不定芽诱导培养基及其制备方法与应用作进一步说明。
实施例一
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例二
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.2mg、吲哚丁酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例三
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.3mg、吲哚丁酸0.2mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例四
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.5mg、萘乙酸0.1mg、吲哚丁酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例五
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.5mg、萘乙酸0.2mg、吲哚丁酸0.2mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例六
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.5mg、萘乙酸0.3mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例七
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤2.0mg、萘乙酸0.1mg、吲哚丁酸0.2mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例八
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤2.0mg、萘乙酸0.2mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例九
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤2.0mg、萘乙酸0.3mg、吲哚丁酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例十
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g、缬氨酸0.7mg、丙氨酸1.1mg、尿素0.2mg和吲哚乙酸0.08mg，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例十一
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g、缬氨酸0.5mg、丙氨酸1.2mg、尿素0.1mg和吲哚乙酸0.1mg，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
实施例十二
本实施例提供一种草莓不定芽诱导培养基，原料组分按重量份计，包括：6-苄氨基嘌呤1.0mg、萘乙酸0.1mg、白糖30g、琼脂3.8g、缬氨酸0.8mg、丙氨酸1.0mg、尿素0.3mg和吲哚乙酸0.05mg，余量为ms培养基；其中，每1lms培养基的原料组分包括：nh4no31650mg、kno31900mg、cacl2·2h2o440mg、mgso4·7h2o370mg、kh2po4170mg、ki0.83mg、h3bo36.2mg、mnso4·4h2o22.3mg、znso4·7h2o8.6mg、na2moo4·2h2o0.25mg、cuso4·5h2o0.025mg、cocl2·6h2o0.025mg、feso4·7h2o27.8mg、na2-edta·2h2o37.3mg、肌醇100mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg和甘氨酸2.0mg。
按上述的原料，采用本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法，制备草莓不定芽诱导培养基：
将所有原料组分混合均匀，然后灭菌，得到草莓不定芽诱导培养基。
将本发明实施例一至实施例十二制备得到的草莓不定芽诱导培养基分别用于诱导草莓。其中，实施例一至实施例九是采用3因素、3水平的l9(33)正交试验方案配制的培养基。
将草莓匍匐茎灭菌，然后剥离长度为0.3mm的茎尖；将茎尖分别接种于实施例一至实施例十二制备得到的草莓不定芽诱导培养基中，每个处理(实施例组)接种10瓶，每瓶接种1个茎尖，定期观察记录，30d后分析统计结果。
结果分析如下表1所示和表2所示。
表1不同培养基对不定芽诱导的正交试验
表2实施例十至实施例十二制备的培养基对不定芽诱导的影响
本发明提供的技术方案，具有如下的有益效果：(1)本发明通过在ms培养基的基础上添加适当含量的6-苄氨基嘌呤和萘乙酸等成分，制备得到的草莓不定芽诱导培养基可以提高草莓不定芽的诱导率；(2)本发明提供的草莓不定芽诱导培养基适用于多个草莓品种，具有广阔的应用前景；(3)本发明提供的草莓不定芽诱导培养基的制备方法简单，生产成本低。
需要注意的是，除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。除非另外具体说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对步骤、数字表达式和数值并不限制本发明的范围。在这里示出和描述的所有示例中，除非另有规定，任何具体值应被解释为仅仅是示例性的，而不是作为限制，因此，示例性实施例的其他示例可以具有不同的值。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的保护范围当中。