专利名称：通过反义寡核苷酸来调制Toll样受体4表达的制作方法
通过反义寡核苷酸来调制Tol I样受体4表达本申请要求2008年11月4日递交的美国临时专利申请序列号61/111，148的优先权，兹明确将该申请的公开内容以提述方式并入本文。
背景技术：
发明领域本发明涉及Toll样受体4 (TLR4)。具体而言，本发明涉及与编码TLR4的核酸特异性杂交，从而调制TLR4表达和活性的反义寡核苷酸及其在治疗或预防与TLR4有关的或者可受益于调制TLR4表达的疾病中的用途。相关技术的概述Toll样受体(TLR)存在于免疫系统的许多细胞上，而且已经被证明涉及先天性免疫应答(Hornung, V.等，(2002) J. Immunol. 168 :4531-4537)。TLR 是哺乳动物识别外来分子并发动对外来分子的免疫应答的关键手段，而且还提供了联系先天性和适应性免疫应答的(Akira,S^ (2001) Nature Immunol. 2 :675-680 ；Medzhitov, R. (2001) Nature Rev. Immunol. 1 :135-145)。在脊椎动物中，此家族由称作TLRl至TLRll的至少11种蛋白质组成，已知所述蛋白质识别来自细菌、真菌、寄生物和病毒的病原体相关分子样式(PAMP)，并诱导由许多转录因子介导的免疫应答。一些TLR位于细胞表面上以检测胞外病原体并启动对胞外病原体的应答，而其它 TLR位于细胞内部以检测胞内病原体并启动对胞内病原体的应答。表1列出了 TLR、其已知的激动剂和已知含有TLR的细胞类型(Diebold，S. S.等(2004) Science 303 :1529-1531 ； Liew, F.等(2005)Nature 5 :446-458 ；Hemmi H 等(2002)Nat Immunol 3:196-200; Jurk M 等，O002)Nat Immunol3 499 ；Lee J 等(2003) Proc. Natl. Acad. ki. USA 100 6646-6651) ； (Alexopoulou, L. (2001) Nature 413:732-738)。表 权利要求
1.与TLR4mRNA(SEQID NO 282)互补的长度为20至50个核苷酸的合成的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸具有包含SEQ ID NO :7、8、17、M、30、49、86、100、102、115、121、 126、136、146、184或256的序列，且其中所述寡核苷酸与人TLR4特异性杂交，并且抑制人 TLR4的表达。
2.一种组合物，包含依照权利要求1的合成反义寡核苷酸和生理学上可接受的载体。
3.一种用于抑制TLR4表达的方法，该方法包括施用依照权利要求1的合成反义寡核苷酸。
4.一种用于抑制TLR4表达的方法，该方法包括施用依照权利要求2的组合物。
5.一种用于抑制哺乳动物中TLR4表达的方法，该方法包括对所述哺乳动物施用依照权利要求1的合成反义寡核苷酸。
6.一种用于抑制哺乳动物中TLR4表达的方法，该方法包括对所述哺乳动物施用依照权利要求2的组合物。
7.一种用于抑制哺乳动物中TLR4介导的免疫应答的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1的合成反义寡核苷酸。
8.一种用于抑制哺乳动物中TLR4介导的免疫应答的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求2的组合物。
9.一种用于治疗性处理患有一种或多种由TLR4介导的疾病或病症的哺乳动物的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1的合成反义寡核苷酸。
10.一种用于治疗性处理患有一种或多种由TLR4介导的疾病或病症的哺乳动物的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求2的组合物。
11.一种用于在哺乳动物中预防一种或多种由TLR4介导的疾病或病症的方法，该方法包括以预防有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1的合成反义寡核苷酸。
12.一种用于在哺乳动物中预防一种或多种由TLR4介导的疾病或病症的方法，该方法包括以预防有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求2的组合物。
13.依照权利要求5-12中任一项的方法，其中所述哺乳动物是人。
14.依照权利要求9-12中任一项的方法，其中所述一种或多种疾病或病症选自下组 癌症、自身免疫疾病或病症、气道炎症、炎性疾病或病症、感染性疾病、疟疾、莱姆病、眼部感染、结膜炎、皮肤病症、银屑病、硬皮病、心血管疾病、动脉粥样硬化、慢性疲乏综合征、结节病、移植排斥、变态反应、哮喘和由病原体引起的疾病。
15.依照权利要求14的方法，其中所述自身免疫性病症选自下组红斑狼疮、多发性硬化、I型糖尿病、肠易激综合征、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、感染性休克、普秃、急性播散性脑脊髓炎、阿狄森氏综合征、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、大疱性类天疱疮、查加斯病、慢性阻塞性肺病、腹部疾病、皮肌炎、子宫内膜异位症、肺出血肾炎综合征、格雷夫斯氏病、格-巴二氏综合征、桥本氏病、化脓性汗腺炎、特发性血小板减少性紫癜、间质性膀胱炎、硬斑病、重症肌无力、发作性睡病、神经性肌强直、天疱疮、恶性贫血、多肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂症、斯耶格伦氏综合征、颞动脉炎(“巨细胞动脉炎”)、血管炎、白癜风、外阴痛和韦格纳氏肉芽肿病。
16.依照权利要求14的方法，其中所述炎性疾病或病症选自下组气道炎症、哮喘、自身免疫性疾病或疾患、慢性炎症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、贝切特氏病、超敏感性、炎性肠病、再灌注损伤、类风湿性关节炎、移植排斥、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、结膜炎和血管炎。
17.依照权利要求3-12中任一项的方法，其中施用路径选自下组胃肠外、肌肉内、皮下、腹膜内、静脉内、粘膜投递、口服、舌下、经皮、局部、吸入、鼻内、气雾剂、眼内、气管内、直肠内、阴道、基因枪、皮肤贴片、滴眼剂和漱口剂。
18.依照权利要求3-12中任一项的方法，包括进一步施用一种或多种疫苗、抗原、抗体、细胞毒剂、变应原、抗生素、反义寡核苷酸、TLR激动剂、TLR拮抗剂、siRNA、miRNA、适体、 蛋白质、基因治疗载体、DNA疫苗、佐剂、共刺激分子、激酶抑制剂或其组合。
19.一种抑制哺乳动物中TLR4表达和活性的方法，包括对所述哺乳动物施用与 TLR4mRNA互补的反义寡核苷酸和TLR4蛋白的拮抗剂。
20.依照权利要求19的方法，其中所述TLR4拮抗剂选自下组抗TLR4抗体或其结合片段或肽模拟物、基于RNA的化合物、基于寡核苷酸的化合物、和TLR4活性的小分子抑制剂。
全文摘要
提供了用于下调TLR4表达的反义寡核苷酸化合物、组合物和方法。所述组合物包含靶向编码TLR4的核酸的反义寡核苷酸。所述组合物还可以包含与其它治疗性和/或预防性化合物和/或组合物组合的靶向编码TLR4的核酸的反义寡核苷酸。提供了使用这些化合物和组合物来下调TLR4表达以及预防或治疗可受益于调制TLR4表达的疾病的方法。
文档编号C12N5/00GK102271686SQ200980153640
公开日2011年12月7日 申请日期2009年11月4日 优先权日2008年11月4日
发明者埃坎巴.坎迪马拉, 拉克什米.巴加特, 王大庆, 萨德西尔.阿格拉沃尔, 郁东, 马里卡朱纳.普塔 申请人:艾德拉药物股份有限公司