专利名称：胡芦巴黄酮提取物制备方法及其降血糖应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种黄酮提取物的制备方法，尤其涉及胡芦巴黄酮提取物制备方法及其降血糖应用。
背景技术：
胡芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)是豆科蝶形花亚科胡芦巴属的一种一年生草本植物，其干燥成熟种子作为常用中药被收入《中华人民共和国药典》。研究表明胡芦巴含有多种生物活性物质，如黄酮、皂苷、生物碱、香豆素和多糖等多种活性成分。其中， 黄酮作为一大类活性物质，具有降血糖和抗氧化等作用。黄酮类化合物的提取方法现在一般采用水煮提取、有机溶剂提取和超声提取等方法。水煮和超临界CO2流体提取的方法存在诸多局限，没有被广泛应用。超声提取是在相对较低的温度下进行的，节省能源，也有利于对热不稳定黄酮化合物的提取，并且超声提取由于空化效应、机械效应和热效应等的作用，加强了溶剂的扩散和有效成分的溶解，从而缩短提取时间。同时超声法节省溶剂，操作步骤简化，提高工作效率。此外，超声提取过程无化学反应，被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变，生物活性不减。因此，超声提取是一种快速、高效、易于放大、绿色安全的方法。高血糖是糖尿病的临床表现之一，持续的高血糖会引起起糖代谢、脂肪和蛋白质代谢紊乱，并导致一系列心脑血管疾病、肾功能衰竭等，近年来研究发现，中药降糖作用温和持久、副作用小，且作用机理具有多效应、多位点、多功能的综合作用。因此，开发具有降血糖的中药提取物及其制剂具有重要意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种快速、高效、易于放大、绿色安全的胡芦巴黄酮提取物制备方法。本发明所要解决的另一个技术问题是提供该提取物在降血糖药物或保健食品中的应用。为解决上述问题，本发明所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，包括以下步骤(1)将干燥、粉碎成粒度为20 60目的胡芦巴种子用质量浓度为10 90%的乙醇溶液在提取温度为20 60°C、超声功率为100 600W、料液质量体积比为1 5 1 20、提取时间为0.5 池的条件下进行超声提取，得到提取液；(2)所述提取液经浓缩后用质量浓度为70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，并过滤， 得到浓缩液；该浓缩液依次通过质量浓度为95%的乙醇、纯水、质量浓度为5%的盐酸、纯水、质量浓度为2%的氢氧化钠和纯水处理的中极性大孔吸附树脂；(3)先用水洗脱中极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用质量浓度为10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脱至无黄酮流出并收集洗脱液；(4)蒸发回收所述洗脱液中的乙醇，得到黄酮溶液；
(5)经所述黄酮溶液经浓缩、真空干燥即得粉状胡芦巴黄酮提取物。用下述制备方法代替权利要求1中所述步骤(1)将干燥、粉碎成粒度为20 60 目的胡芦巴种子先用超临界(X)2萃取提取油脂后，再用质量浓度为10 90%的乙醇溶液在提取温度为20 60°C、超声功率为100 600W、料液质量体积比为1 5 1 20、提取时间为0. 5 池的条件下进行超声提取，得到提取液。所述步骤(3)中极性大孔吸附树脂为DM130型。所述步骤O)中的浓缩温度为50 60°C。所述步骤(4)中的蒸发回收温度为45 60°C。所述步骤(5)中的真空干燥温度为50 60°C。如上所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖药物中的应用。所述降血糖药物中含有质量30 60%的胡芦巴黄酮提取物和药学可接受的辅料。如上所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖保健食品中的应用。所述降血糖保健食品中含有质量20 50%的胡芦巴黄酮提取物和保健食品可接受的添加剂。本发明与现有技术相比具有以下优点1、本发明首次对胡芦巴种子的黄酮类化合物的超声提取制备过程进行了研究，对影响提取得率及黄酮含量的各个参数进行了优化，从而确定了最优条件；同时提高了黄酮类物质得率，并减小了工业消耗、降低了生产成本。2、本发明采用乙醇为溶剂，安全可靠、易于工业化生产。3、本发明是在相对较低的温度下进行的，节省能源，也有利于对热不稳定黄酮化合物的提取。4、本发明节省溶剂，操作步骤简化，提高了工作效率，是一种快速、高效、易于放大、绿色安全的方法。5、本发明胡芦巴黄酮提取物经实验证明具有显著的降血糖的生物学活性，可明显降低糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量、改善小鼠和大鼠的葡萄糖耐量、提高糖尿病小鼠胰腺重量指数、促进肝糖原的合成，可广泛应用于各种胡芦巴黄酮类降血糖的药物及保健食品开发需求。降血糖的生物学活性实验(1)糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量实验①昆明种小鼠，雌雄各半，体重为18 22g，随机分为对照组和造模组。待造模组小鼠禁食(不禁水)1 后，尾静脉快速注射四氧嘧啶生理盐水溶液。3d后尾尖取血测定小鼠血糖，选定血糖值> 20. Ommol/L，同时伴有多饮、多尿症状的小鼠为糖尿病小鼠。灌胃途径给予糖尿病小鼠胡芦巴黄酮提取物，剂量为250mg Ag4，连续14d。阳性对照组给予格列齐特40mg/kg。给药第7天和第14天时分别测定血糖1次，结果发现糖尿病小鼠血糖显著降低(P < 0.01)，结果见表1。表1胡芦巴黄酮提取物对糖尿病小鼠血糖的影响(n = 10,x±s)
权利要求
1.胡芦巴黄酮提取物制备方法，包括以下步骤(1)将干燥、粉碎成粒度为20 60目的胡芦巴种子用质量浓度为10 90%的乙醇溶液在提取温度为20 60°C、超声功率为100 600W、料液质量体积比为1 5 1 20、 提取时间为0. 5 池的条件下进行超声提取，得到提取液；(2)所述提取液经浓缩后用质量浓度为70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，并过滤，得到浓缩液；该浓缩液依次通过质量浓度为95%的乙醇、纯水、质量浓度为5%的盐酸、纯水、质量浓度为2%的氢氧化钠和纯水处理的中极性大孔吸附树脂；(3)先用水洗脱中极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用质量浓度为 10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脱至无黄酮流出并收集洗脱液；(4)蒸发回收所述洗脱液中的乙醇，得到黄酮溶液；(5)经所述黄酮溶液经浓缩、真空干燥即得粉状胡芦巴黄酮提取物。
2.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，其特征在于用下述制备方法代替权利要求1中所述步骤(1)将干燥、粉碎成粒度为20 60目的胡芦巴种子先用超临界 CO2萃取提取油脂后，再用质量浓度为10 90%的乙醇溶液在提取温度为20 60°C、超声功率为100 600W、料液质量体积比为1 5 1 20、提取时间为0.5 池的条件下进行超声提取，得到提取液。
3.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，其特征在于所述步骤(2)和(3) 中极性大孔吸附树脂为DM130型。
4.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，其特征在于所述步骤O)中的浓缩温度为50 60°C。
5.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，其特征在于所述步骤中的蒸发回收温度为45 60°C。
6.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法，其特征在于所述步骤(5)中的真空干燥温度为50 60°C。
7.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖药物中的应用。
8.如权利要求7所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖药物中的应用，其特征在于所述降血糖药物中含有质量30 60 %的胡芦巴黄酮提取物和药学可接受的辅料。
9.如权利要求1所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖保健食品中的应用。
10.如权利要求9所述的胡芦巴黄酮提取物制备方法所得的胡芦巴黄酮提取物在制备降血糖保健食品中的应用其特征在于所述降血糖保健食品中含有质量20 50%的胡芦巴黄酮提取物和保健食品可接受的添加剂。
全文摘要
本发明涉及一种胡芦巴黄酮提取物制备方法，该方法包括以下步骤(1)将干燥、粉碎的胡芦巴种子用乙醇溶液进行超声提取，得到提取液；(2)所述提取液经浓缩后用乙醇醇沉、过滤，得到浓缩液；该浓缩液依次通过乙醇、纯水、盐酸、纯水、氢氧化钠和纯水处理的中极性大孔吸附树脂；(3)先用水洗脱中极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用乙醇洗脱至无黄酮流出并收集洗脱液；(4)蒸发回收所述洗脱液中的乙醇，得到黄酮溶液；(5)经所述黄酮溶液经浓缩、真空干燥即得粉状胡芦巴黄酮提取物。本发明具有快速、高效、易于放大、绿色安全的特点，所得提取物具有显著的降血糖生物学活性，可广泛应用于各种胡芦巴黄酮类降血糖的药物及保健食品开发需求。
文档编号A23L1/29GK102441026SQ201110375609
公开日2012年5月9日 申请日期2011年11月22日 优先权日2011年11月22日
发明者杨仁明, 王洪伦, 索有瑞 申请人:中国科学院西北高原生物研究所