一种复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法
【专利摘要】本发明涉及一种复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法，属于食品中菌落总数的检测方法领域。一种复合培养基，其特殊之处在于由以下按重量百分配比的原料混合而成：胰蛋白胨10～20％、琼脂粉10～30％、牛肉膏1～10％、酵母浸膏1～10％、葡萄糖1～10％、卵磷脂0.1～0.9％、复合维生素B0.1～0.9％、吐温6010～40％。本发明的复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法，与已有技术相比具有以下优点：采用快速检测菌落总数的复合培养基可快速检测各类食品中的菌落总数，检出率比市售培养基(平板计数琼脂)高20％，菌落形态较大，并且比市售菌落总数检测试纸价格低，适合大范围推广使用。
【专利说明】一种复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法
【技术领域】 [0001]本发明涉及一种复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法，属于食品中菌落总数的检测方法领域。
【背景技术】
[0002]菌落总数是食品样品在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后，所得每g(ml)样品中形成的微生物菌落总数。目前，对菌落总数的检测试剂，通常为平板计数琼脂，多数细菌在该琼脂上培养48h才能形成肉眼可分辨的菌落，耗费时间较长；采用菌落总数快速检测试纸可解决该问题，但快速检测试纸价格昂贵，不适合普遍应用，且国家标准中并未用快速检测试纸检测菌落总数的标准。
【发明内容】
[0003]针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种既经济又能快速检测菌落总数的复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法。
[0004]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0005]一种复合培养基，其特殊之处在于由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨10~20%、琼脂粉10~30%、牛肉膏I~10%、酵母浸膏I~10%、葡萄糖I~10%、卵磷脂0.1~0.9%、复合维生素B0.1~0.9%、吐温6010~40% ；
[0006]所述复合培养基，由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨15~20%、琼脂粉20~30%、牛肉膏6~8%、酵母浸膏8~10%、葡萄糖8~10%、卵磷脂0.3~
0.9%、复合维生素B0.3~0.9%、吐温6020~40% ;
[0007]所述复合培养基，由以下按最佳重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨17.8 %、琼脂粉26 %、牛肉膏7 %、酵母浸膏9 %、葡萄糖9 %、卵磷脂0.6 %、复合维生素B0.6%、吐温 6030% ；
[0008]上述复合培养基用于快速检测菌落总数的方法，其特殊之处在于包括以下工艺步骤:
[0009]a.将上述复合培养基中各组分(无先后顺序)加入适量水中，煮沸溶解至澄清溶液，调节pH值为7.0~7.5，高压灭菌后备用；
[0010]b.称取样品25±0.1g,加入无菌均质瓶中，加入无菌稀释液至250g,均质lmin_2min,稀释度为 I:10 ；
[0011]C.取上述b步骤的稀释液1ml，放入灭菌平皿中，倾倒a步骤的复合培养基溶液，于36°C ±1°C的培养箱内培养12-15h ；
[0012]d.计数，得菌落总数的检测结果。
[0013]所述a步骤中的高压灭菌条件为:温度115°C，时间15min。
[0014]本发明的复合培养基各成分作用原理如下:
[0015]胰蛋白胨:低分子肽，游离氨基酸，提供营养基础；[0016]酵母浸膏:提供维生素和氨基酸；
[0017]葡萄糖:提供碳源；
[0018]吐温60:表面活性剂和细菌活化剂，可作用于细菌细胞膜某些受体，使休眠状态的细菌迅速感知外界适宜的生长环境，快速生长，同时降低细菌表面和培养基的表面张力，使营养物质更易吸收；
[0019]琼脂粉:凝固剂；
[0020]卵磷脂:营养强化剂，使休眠状态的细菌快速生长。
[0021]牛肉膏:提供营养物质和微量的金属兀素；
[0022]复合维生素B:提供B族元素，促进芽孢生长。
[0023]本发明的复合培养基及其用于快速检测菌落总数的方法，与已有技术相比具有以下优点:采用快速检测菌落总数的复合培养基可快速检测各类食品中的菌落总数，检出率比市售培养基(平板计数琼脂)高20%，菌落形态较大，易于计数，并且比市售菌落总数检测试纸价格低，适合大范围推广使用。
【具体实施方式】
[0024]为了更好地理解与实施，下面结合实施例详细说明本发明。
[0025]实施例1 [0026]准确地称取胰蛋白胨4.0g、琼脂粉6.0g、牛肉膏2.0g、酵母膏2.0g、葡萄糖2.0g、卵磷脂0.2g，复合维生素B0.2g、吐温608.0g,均匀混合后即为复合培养基。
[0027]实施例2
[0028]准确地称取胰蛋白胨10.0g、琼脂粉15.0g、牛肉膏5.0g、酵母膏5.0g、葡萄糖
5.0g、卵磷脂0.5g,复合维生素B0.5g、吐温6020.0g,均匀混合后即为复合培养基。
[0029]上述复合培养基用于快速检测菌落总数的方法，包括以下步骤:将上述实施例1的复合培养基24.4g，加入到400ml蒸馏水中加热煮沸至完全溶解，然后调节pH值为7.0~
7.5，高压灭菌(115°C，15min)备用；再称取25±0.1g样品，加入无菌均质瓶中，加入无菌稀释液至250g，均质lmin-2min，使样品分散良好，此时稀释度为1:10 ;取1.0mL上述稀释液，分别放入2个灭菌平皿中,倾倒菌落总数复合培养基，于36°C ± 1°C的培养箱内培养12h,计数，得菌落总数的检测结果。
[0030]本发明未详细说明的内容均为现有技术，本领域技术人员可以从本实施例及现有技术获得启发，进行变形得到其它实施例。因此，本发明的保护范围应该根据权利要求的保护范围来确定。
【权利要求】
1.一种复合培养基，其特征在于由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨10~20%、琼脂粉10~30%、牛肉膏I~10%、酵母浸膏I~10%、葡萄糖I~10%、卵磷脂0.1~0.9%、复合维生素B0.1~0.9%、吐温6010~40%。
2.根据权利要求1所述一种复合培养基，其特征在于由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨15~20%、琼脂粉20~30%、牛肉膏6~8%、酵母浸膏8~10%、葡萄糖8~10 %、卵磷脂0.3~0.9 %、复合维生素B0.3~0.9 %、吐温6020~40 %。
3.根据权利要求1所述一种复合培养基，其特征在于由以下按最佳重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白胨17.8 %、琼脂粉26 %、牛肉膏7 %、酵母浸膏9 %、葡萄糖9 %、卵磷脂0.6%、复合维生素B0.6 %、吐温6030 %。
4.权利要求1或2或3所述的复合培养基用于快速检测菌落总数的方法，其特征在于包括以下工艺步骤: a.将上述复合培养基中各组分(无先后顺序)加入适量水中，煮沸溶解至澄清溶液，调节PH值为7.0~7.5，高压灭菌后备用； b.称取样品25±0.1g,加入无菌均质瓶中，加入无菌稀释液至250g,均质lmin-2min,稀释度为1:10 ; c.取上述b步骤的稀释液lml，放入灭菌平皿中， 倾倒a步骤的复合培养基溶液，于360C ±1°C的培养箱内培养12-15h ； d.计数，得菌落总数的检测结果。
5.根据权利要求4所述的复合培养基用于快速检测菌落总数的方法，其特征在于所述a步骤中的高压灭菌条件为:温度115°C，时间15min。
【文档编号】C12Q1/06GK103614452SQ201310572487
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月13日 优先权日:2013年11月13日
【发明者】赵瑞连, 徐世明, 郭光平, 张建梅, 厉建军, 王光杰, 宋玉洁, 孙晓红 申请人:烟台市喜旺食品有限公司