从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，包括如下步骤：(1)去脂：以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，加入质量浓度为0.8～1.2％的H2O2的NaOH溶液，浸泡，用清水洗至中性，沥干，得去脂鸡皮；(2)制备胶原蛋白：向去脂鸡皮加入去离子水，升温，加入复合蛋白酶Ⅰ，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；(3)制备低分子量活性胶原蛋白肽：向散状胶原蛋白加复合蛋白酶Ⅱ，进一步酶解，酶解完全后，升温，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。本发明优化了工艺步骤，提高了生产率，提升了胶原蛋白肽的得率，提高了胶原蛋白肽的活性。
【专利说明】从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及鸡皮的深加工【技术领域】，具体涉及一种从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法。
【背景技术】
[0002]鸡皮属于富含动物结缔组织的原料，有很好的美容功效，其含有丰富的胶原蛋白，能使皮肤光滑祛皱，效果是其它东西没法比较的。胶原蛋白具有独特的三股超螺旋结构，三条链相互平行而且由链间氢键相连，具有十分稳定的性质，一般的加工温度及短时间加热都难使其分解，因此难被人体吸收，直接食用利用率较低；如将胶原蛋白水解为多肽后，消化吸收率低几乎达到100%，而其营养剂生理功能也会显著提高，如:保护胃黏膜以及抗溃疡，促进皮肤胶原代谢，抑制血压上升，能促进钙吸收和降低血清中胆固醇含量，对关节炎等胶原病也都有很好的预防和治疗作用。
[0003]近几年来，胶原蛋白的开发和利用已引起人们广泛的关注。不过，并非所有的胶原蛋白肽都能轻易地应用于不同的领域。胶原蛋白肽的用途主要取决于胶原水解产物量，胶原蛋白肽在医药、食品、化妆品、精细化工产品中的应用都与其分子量有关。分子量的大小已经成为衡量产品质量的标准。
[0004]目前，国内生产的胶原蛋白肽，其分子量多在2000道尔顿以上，生物学活性很低。
[0005]经过专利检索，还未发现从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法的相关文献。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是提供一种从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，该方法生产出的胶原蛋白肽的分子量分布在500~1500道尔顿之间。
[0007]本发明提供的技术方案如下:
[0008]从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，包括以下步骤:
[0009](I)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用18~20倍原料重的质量浓度为0.8~
1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18~22°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0010](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量5~10倍量的去离子水，升温至38~45°C，加入原料质量1%。~3%。的复合蛋白酶I ,进行酶解,鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0011]( 3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量1%。~3%。复合蛋白酶II，进一步酶解，酶解完全后，升温至90~100°C，保持15~30min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
[0012]步骤⑵中所述复合蛋白酶I为氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。[0013]步骤(3)中所述复合蛋白酶II为内切蛋白酶。
[0014]优选地，步骤(3)中所述干燥为喷雾干燥。
[0015]本发明的有益效果在于:
[0016]本发明采用两步酶切法从鸡皮中提取胶原蛋白，具有产品活性高、得率高的优点。在酶解前，对鸡皮进行去脂处理，有效避免了酶解液中颗粒状的脂肪与酶解液形成混悬液，也防止脂肪粒残存在胶原蛋白中，影响胶原蛋白得率，降低胶原蛋白肽的生物学活性。氨肽酶和羧肽酶是外切酶，本发明首先采用氨肽酶和羧肽酶对鸡皮中的胶原蛋白进行外切，将胶原蛋白与鸡皮的其他组织成分离开，使鸡皮成为散状后，再用内切蛋白酶对蛋白质进行酶解，使蛋白成为小分子的蛋白肽。
[0017]综上所述，本发明在不同阶段科学选取了不同的蛋白酶，优化了工艺步骤，提高了生产率，提升了胶原蛋白肽的得率，提高了胶原蛋白肽的活性。采用本发明制得的产品，分子量在500~1500道尔顿之间约占90%，活性多肽含量高达90%以上。
【具体实施方式】
[0018]以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0019]实施例1
[0020](I)去脂:以新鲜 鸡皮为原料，剪碎洗净，用18倍原料重的质量浓度为1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0021](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量10倍量的去离子水，升温至45°C，加入原料质量1%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0022](3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量3%。内切蛋白酶，进一步酶解，酶解完全后，升温至90°C，保持30min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经喷雾干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
[0023]实施例2
[0024](I)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用19倍原料重的质量浓度为1.1%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在19°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0025](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量9倍量的去离子水，升温至43°C，加入原料质量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0026](3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量1%。内切蛋白酶，进一步酶解，酶解完全后，升温至95°C，保持25min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经喷雾干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
[0027]实施例3
[0028](I)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用20倍原料重的质量浓度为1.0%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0029](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量7倍量的去离子水，升温至38°C，加入原料质量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0030](3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量2%。内切蛋白酶，进一步酶解，酶解完全后，升温至10(TC，保持15min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经喷雾干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
[0031]实施例4
[0032](I)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用20倍原料重的质量浓度为0.8%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0033](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量5倍量的去离子水，升温至45°C，加入原料质量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0034](3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量3%。内切蛋白酶，进一步酶解，酶解完全后，升温至100°C，保持20min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经喷雾干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。[0035]实施例5
[0036](I)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用20倍原料重的质量浓度为0.9%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在22°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮；
[0037](2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量10倍量的去离子水，升温至40°C，加入原料质量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白；
[0038](3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量2%。内切蛋白酶，进一步酶解，酶解完全后，升温至95°C，保持20min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经喷雾干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
【权利要求】
1.从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)去脂:以新鲜鸡皮为原料，剪碎洗净，用18~20倍原料重的质量浓度为0.8~1.2%的H2O2的0.01mol/L NaOH溶液在18~22°C下搅拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂鸡皮； (2)制备胶原蛋白:向去脂鸡皮加入原料重量5~10倍量的去离子水，升温至38~45°C，加入原料质量1%。~3%。的复合蛋白酶I，进行酶解，鸡皮解体成为散状胶原蛋白； (3)制备低分子量活性胶原蛋白肽:向散状胶原蛋白加入原料重量1%。~3%。复合蛋白酶II，进一步酶解，酶解完全后，升温至90~100°C，保持15~30min，将酶灭活，静置，分离出清澈液体，加入活性炭，脱色后过滤，再用超滤装置过滤浓缩，浓缩液经干燥后制得低分子量活性胶原蛋白肽。
2.根据权利要求1所述从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，其特征在于:步骤(2)中所述复合蛋白酶I为氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。
3.根据权利要求1所述从鸡皮中 提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，其特征在于:步骤⑶中所述复合蛋白酶II为内切蛋白酶。
4.根据权利要求1所述从鸡皮中提取低分子量活性胶原蛋白肽的方法，其特征在于:步骤(3)中所述干 燥为喷雾干燥。
【文档编号】C12P21/06GK103952457SQ201410179061
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年4月30日 优先权日:2014年4月30日
【发明者】周冠旻 申请人:桂林军供生化技术开发有限公司