一种发酵法生产16a-轻基-氢化可的松的工艺的制作方法
【专利摘要】一种发酵法生产16a-轻基-氢化可的松的方法，用产玫瑰色链霉菌在16a位羟化氢化可的松，得到产品，生产工艺绿色环保，产率高，有很好的应用前景。
【专利说明】-种发酵法生产16 α -羟基-氢化可的松的工艺
【技术领域】
[0001] 本发明为留体化合物生产领域，特别是微生物发酵法生产16 α -羟基-氢化可的 松的技术。
【背景技术】
[0002] 留体在16α位羟基化，可以产生很强的抗炎和糖（肾上腺）皮质激素活性，其中， 16 α -羟基-氢化可的松是生产丙缩羟强龙等留体药物的重要中间体，以前采用化学合成， 这种生产工艺复杂，步骤繁琐，副产物多，同时生产过程中需要使用一些有毒试剂。
[0003] 中国发明专利申请 2006100515112. Χ、201310576849· 9、200710061260· X、 200710060202. 5公开了留体化合物及留体中间体的生产方法，然而，它们均没有涉及 16 α -羟基-氢化可的松。
[0004] 因此，研究和开发一种收率高、工艺简单、经济实用且尽量避免使用各种有害试剂 的生产方法，对用生物转化法生产16 α -羟基-氢化可的松有着非常重要的意义。
【发明内容】
[0005] 本发明为留体化合物生产领域，特别是微生物发酵法生产16 α -羟基-氢化可的 松的技术。
【发明内容】
[0006] 本发明用微生物发酵法生产16 α -羟基-氢化可的松，即Α，结构式如下：
【权利要求】
1. 一种发酵法生产16 α -羟基-氢化可的松的方法，其特征在于用产玫瑰色链霉菌羟 化氢化可的松，生产16 α -羟基-氢化可的松；所用发酵培养基成份：葡萄糖10_14g/L，酵 母浸膏 5-7g/L，麦芽浸膏 30-40g/L，KH2PO4 4.5 g/ L ,K2HPO4 20 g/L，pH 7.0,发酵过 程如下： 种子培养；在带夹套发酵罐加入培养基，装料系数为〇. 7-0. 8,灭菌，冷却至30-35°C， 接种，接入产玫瑰色链霉菌，接种量为5-8%，发酵分为2个阶段： (1) 细胞生长阶段，接种后20-24h，调节pH为6. 0-6. 5,加入底物氢化可的松，使其 在发酵液中浓度为〇. 5-0. 9 g/L，通入洁净空气，使溶氧饱和度为20-30 %，调节温度为 30-35 0C ； (2) 微生物转化阶段，从接种后20-24h开始，直到发酵结束，全部发酵时间为120-140 小时；调节pH为7. 0-7. 5,流加加入底物氢化可的松，使其在发酵液中浓度为1. 5-2. 0 g/L， 通入洁净空气，使溶氧饱和度为50-60%，调节温度为35-40°C ;发酵结束前40-50h停止流 加氢化可的松，以消耗剩余的底物氢化可的松； 发酵结束，用离心或过滤除去细胞，用乙酸乙酯萃取发酵液，使16 α -羟基-氢化可的 松转入有机相，蒸出有机相，得到产品，产品收率90-95 %。
【文档编号】C12P33/14GK104212868SQ201410451152
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年9月6日 优先权日:2014年9月6日
【发明者】张媛媛, 宿烽, 邹慧斌, 刘均洪 申请人:青岛科技大学