专利名称：氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法
技术领域：
本发明涉及一种化合物检测方法，特别涉及一种对含有杂质的氢化可的松进行定性及定量检测的液相色谱检测方法。
背景技术：
氢化可的松是一种人工合成也是天然存在的糖皮质激素，其抗炎作用为可的松的1.25倍，不但具有免疫抑制作用、抗毒作用、抗休克及一定的盐皮质激素活性等，还有留水、 留钠及排钾作用。氢化可的松主要用于肾上腺皮质功能减退症的替代治疗及先天性肾上腺皮质功能增生症的治疗，也可用于类风湿性关节炎、风湿性发热、痛风、支气管哮喘、过敏性疾病，并可用于严重感染和抗休克治疗等。
目前，氢化可的松主要通过化学合成和微生物转化的途径得到，不过上述两种途径所得的终产物中，都存在一些副产物及未完全反应的与氢化可的松结构相类似的杂质。 因此，需要建立一种检测方法，其可以对氢化可的松及所含的结构类似的杂质进行定量和定性的研究。2010版《中国药典》中公开了一种氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法， 其检测色谱图如
图1所示。氢化可的松及其其他五种杂质在149. 46分钟时才达到基线分离的效果。该检测方法的数据如下表所示。
权利要求
1.一种氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于，包括将氢化可的松及其杂质溶解得到样品溶液；以及采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，以醇-水混合液或者乙腈-水混合液为流动相，流动相流速为O. 3-2. OmL/min，柱温为10°C -35°C，采用紫外检测器对样品溶液进行液相色谱检测。
2.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述流动相包括甲醇-水混合液或乙腈-水混合液。
3.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述紫外检测器的检测波长为210nm-270nm。
4.根据权利要求3所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述紫外光的波长为242nm。
5.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述流动相为乙腈水=65%-20% :35%-80%，优选为乙腈水=60%_50% :40%_50%。
6.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于流动相流速为O. 8mL/min。
7.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18反相色谱柱，所述填充剂的粒度为5微米，孔径为100A，所述C18反相色谱柱的柱内直径为4. 6mm，柱内长度为250mm。
8.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于所述样品溶液的浓度为O. 03mg/mL-0. 5 mg/mL。
9.根据权利要求8所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于，所述样品对溶液以孔径为O. 45um或O. 22um的微孔滤膜进行过滤。
10.根据权利要求1所述的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其特征在于对样品溶液进行液相色谱检测后分离的氢化可的松及其杂质为6 β -OH. R. S、表氢化可的松、泼尼松龙、氢化可的松、R. S和可的松。
全文摘要
本发明提供一种氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法，其包括将氢化可的松及其杂质溶解得到样品溶液；以及采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，以醇-水混合液或者乙腈-水混合液为流动相，流动相流速为0.3-2.0mL/min，柱温为10℃-35℃，采用紫外检测器对样品溶液进行液相色谱检测。本发明的氢化可的松及其杂质的液相色谱检测方法可以对氢化可的松及其杂质共六种化合物同时进行快速定性定量分离检测，其操作简单，检测结果精密度高，准确性好，还避免了复杂流动相体系变化影响到检测的稳定性和重现性的问题，而且避免了流动相配比变化影响到检测的稳定性和重现性的问题。
文档编号G01N30/02GK103048393SQ20111031155
公开日2013年4月17日 申请日期2011年10月14日 优先权日2011年10月14日
发明者龚立冬, 邵娜, 李彧娜 申请人:苏州赛分科技有限公司