本发明属于水产养殖技术领域，尤其涉及一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂；本发明还涉及一种上述防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法。
背景技术：
牙鲆(Paralichthys olivaceus)俗称牙片、左口、偏口、比目鱼，是名贵的海产鱼类，又是重要的海水增养殖鱼类之一。牙鲆属冷温性底栖肉食性经济鱼类，它的个体硕大，肉质细嫩鲜美，深受消费者的喜爱，市场十分广阔，经济价值很高。我国的牙鲆人工孵化育苗研究始于50年代末，育苗厂家遍布山东、河北、辽宁等省。从90年代开始，牙鲆养殖发展迅速，山东的威海、烟台、青岛等地除开展网箱和池塘养殖外，正在大力发展工厂化养殖生产，近几年来，在南方部分地区也逐渐开展养殖，并且规模逐步扩大。
链球菌病是牙鲆最常见、最多发的疾病之一，以夏季高温期最为盛行。其病原菌为链球菌，为革兰氏阳性菌，菌体为球形或卵圆形，大小为0.5～1μm，常成对或多个菌体连成链状。鱼类感染源从食物而来，特别是投喂低值小杂鱼，很容易爆发此病。患病的牙鲆主要症状是：鱼体表形成瘀斑、发白褪色，严重时下颌出血溃烂，肝、脾、肾、肠均充血；感染初期病鱼无食欲，离群慢游，腹部朝天打转。目前常用的治疗方法是用200mg/L福尔马林加上200mg/L氟苯尼考抗菌素药浴20～30分钟病鱼。然而现有的治疗方法不仅会污染环境，对生态环境造成严重的影响，而且还会最终影响人类的健康，影响牙鲆养殖业的健康可持续发展。
技术实现要素：
本发明的目的之一是提供一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，其原料组分均为绿色纯天然原料，并能有效预防和治疗牙鲆链球菌病的发生。
为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案，一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花27-33份、圆葱20-27份、东壁土20-27份、野薄荷19-25份、刺梨根19-25份、皂荚19-25份、小蓟16-24份、石蒜16-23份、苦石莲16-23份、苏木15-20份、紫荆皮14-21份、红花醡浆草14-21份、大风子12-19份、合欢花11-18份、川穹10-18份、仙人掌10-17份、蛇床子10-17份、葛花9-17份、紫苏子9-16份、天胡荽9-14份、鸭舌草8-14份、马齿苋8-12份、土贝母7-12份、卤虫粉9-12份、山楂6-9份、扇贝丁6-10份、沙蚕粉12-19份、鱼油7-10份。
优选地，所述防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花30份、圆葱23份、东壁土23份、野薄荷21份、刺梨根22份、皂荚22份、小蓟22份、石蒜18份、苦石莲19份、苏木18份、紫荆皮16份、红花醡浆草17份、大风子16份、合欢花15份、川穹14份、仙人掌14份、蛇床子14份、葛花13份、紫苏子12份、天胡荽12份、鸭舌草11份、马齿苋10份、土贝母10份、卤虫粉10份、山楂8份、扇贝丁8份、沙蚕粉15份、鱼油9份。
优选地，所述防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花28份、圆葱25份、东壁土24份、野薄荷23份、刺梨根23份、皂荚23份、小蓟21份、石蒜20份、苦石莲20份、苏木16份、紫荆皮17份、红花醡浆草18份、大风子15份、合欢花14份、川穹15份、仙人掌13份、蛇床子13份、葛花13份、紫苏子13份、天胡荽11份、鸭舌草11份、马齿苋10份、土贝母9份、卤虫粉11份、山楂7份、扇贝丁8份、沙蚕粉16份、鱼油9份。
本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，是根据链球菌病的发病原理，选择的合适的组分，按照特定的比例和制备方法制备，可以充分发挥各组分之间的协同增效作用，最大限度地发挥各组分的功能。本发明中，金银花、圆葱、东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花、川穹、仙人掌、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母以上述特定的配比组合在一起时，对牙鲆链球菌病的病原菌链球菌具有显著的杀菌抑菌效果，能迅速控制病情，而且利于牙鲆快速恢复健康状态，利于牙鲆脱落的鳞片重新长出。卤虫粉味道鲜美，牙鲆喜欢摄食。山楂味酸性温，气血并走，化瘀而不伤新血，行滞气而不伤正气，应用于肉食积滞证，泻痢腹痛、疝气痛、瘀滞腹痛胸痛、恶露不尽、痛经、吐血、便血等，在本发明中添加山楂可以促进牙鲆摄食更多的添加了本发明的饲料添加剂的饲料，进而使得饲料中的营养成分能够为牙鲆更好的补充营养和体力，并使本发明的饲料添加剂中对牙鲆链球菌病的病原菌具有显著杀菌抑菌效果的成分进入牙鲆体内并发挥其相应作用。扇贝丁营养丰富、味道鲜美。沙蚕营养丰富，不仅是鱼虾嗜食的饵料生物，也可以作为优良的钓饵。鱼油可以为牙鲆补充能量，而且对牙鲆具有诱食作用。本发明中，卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油对牙鲆具有协同诱食的效果，卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油以上述特定比例复配后，可改善饲料添加剂的口感，能诱食牙鲆摄食更多的添加了本发明的饲料添加剂的饲料，进而使饲料中的营养成分进入牙鲆体内并被牙鲆利用，也使饲料添加剂中的对牙鲆链球菌病的病原菌具有显著杀菌抑菌效果的成分进入牙鲆体内并发挥其相应作用。
本发明的另一目的是提供一种上述防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法，该防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：
(1)按照配比称取金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹，与重量为金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹总重量的15倍的清水混合，30-40℃浸泡24h，过滤得浸泡液；
(2)按照配比称取东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母，装入球磨机研磨，过80目筛，得研磨粉；
(3)将步骤(1)得到的浸泡液及步骤(2)得到的研磨粉放置于超临界萃取仪中的萃取釜中，利用二氧化碳作为介质进行萃取，萃取釜压力为40Mpa，萃取温度为45℃，分离器压力12Mpa，分离器温度为70℃，萃取2小时，得到萃取液；
(4)按照配比称取圆葱和仙人掌，并捣碎；
(5)按照配比分别称取卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油，并与步骤(3)所得的萃取液、步骤(4)所得的捣碎的圆葱和仙人掌混合均匀，即得目标物。
用法用量：将本发明的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂。
制备方法中，将金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹在清水中浸泡30-40℃浸泡24h取过滤液的目的是有利于上述各组分中的有效成分充分析出，更好的发挥其作用；将东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母研磨的作用是使上述各组分中的有效成分在后续步骤更充分的析出。超临界萃取的目的是充分萃取有效成分，并使各组分相互结合，提高利用率。将圆葱和仙人掌捣碎的目的是提高圆葱和仙人掌与其他各组分之间的接触面积，有利于充分利用圆葱和仙人掌中的有效成分，更好的发挥各组分之间的协同作用。添加卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油可以对牙鲆起到诱食作用。此外，本发明的制备方法简单易行，而且制备过程不会对环境带来污染。
本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的组分均为绿色环保原料，对环境无毒无害，不含有化学药品或抗生素，食用治愈好的牙鲆后不会影响人们的身体健康，而且本发明的制剂对牙鲆链球菌病的治愈效果好，治愈率高，使患病的牙鲆的成活率达到90％以上，用药2-4天后，牙鲆开始逐步恢复正常摄食，摄食频率提高，眼球外突、肛门红肿现象消失，腹鳍、胸鳍、尾鳍的基部出血现象得到控制，鳞片脱落现象得到控制，游姿逐渐恢复正常。此外，本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂还能有效降低牙鲆链球菌病的发病概率，能提高牙鲆的免疫力，对链球菌病的发生具有很好的预防作用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，是根据链球菌病的发病原理，选择的合适的组分，按照特定的比例和制备方法制备，可以充分发挥各组分之间的协同增效作用，最大限度地发挥各组分的功能。本发明中，金银花、圆葱、东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花、川穹、仙人掌、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母以上述特定的配比组合在一起时，对牙鲆链球菌病的病原菌链球菌具有显著的杀菌抑菌效果，能迅速控制病情，而且利于牙鲆快速恢复健康状态，利于牙鲆脱落的鳞片重新长出。卤虫粉味道鲜美，牙鲆喜欢摄食。山楂味酸性温，气血并走，化瘀而不伤新血，行滞气而不伤正气，应用于肉食积滞证，泻痢腹痛、疝气痛、瘀滞腹痛胸痛、恶露不尽、痛经、吐血、便血等，在本发明中添加山楂可以促进牙鲆摄食更多的添加了本发明的饲料添加剂的饲料，进而使得饲料中的营养成分能够为牙鲆更好的补充营养和体力，并使本发明的饲料添加剂中对牙鲆链球菌病的病原菌具有显著杀菌抑菌效果的成分进入牙鲆体内并发挥其相应作用。扇贝丁营养丰富、味道鲜美。沙蚕营养丰富，不仅是鱼虾嗜食的饵料生物，也可以作为优良的钓饵。鱼油可以为牙鲆补充能量，而且对牙鲆具有诱食作用。本发明中，卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油对牙鲆具有协同诱食的效果，卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油以上述特定比例复配后，可改善饲料添加剂的口感，能诱食牙鲆摄食更多的添加了本发明的饲料添加剂的饲料，进而使饲料中的营养成分进入牙鲆体内并被牙鲆利用，也使饲料添加剂中的对牙鲆链球菌病的病原菌具有显著杀菌抑菌效果的成分进入牙鲆体内并发挥其相应作用。
(2)制备方法中，将金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹在清水中浸泡30-40℃浸泡24h取过滤液的目的是有利于上述各组分中的有效成分充分析出，更好的发挥其作用；将东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母研磨的作用是使上述各组分中的有效成分在后续步骤更充分的析出。超临界萃取的目的是充分萃取有效成分，并使各组分相互结合，提高利用率。将圆葱和仙人掌捣碎的目的是提高圆葱和仙人掌与其他各组分之间的接触面积，有利于充分利用圆葱和仙人掌中的有效成分，更好的发挥各组分之间的协同作用。添加卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油可以对牙鲆起到诱食作用。此外，本发明的制备方法简单易行，而且制备过程不会对环境带来污染。
(3)本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的组分均为绿色环保原料，对环境无毒无害，不含有化学药品或抗生素，食用治愈好的牙鲆后不会影响人们的身体健康，而且本发明的制剂对牙鲆链球菌病的治愈效果好，治愈率高，使患病的牙鲆的成活率达到90％以上，牙鲆开始逐步恢复正常摄食，摄食频率提高，眼球外突、肛门红肿现象消失，腹鳍、胸鳍、尾鳍的基部出血现象得到控制，鳞片脱落现象得到控制，游姿逐渐恢复正常。此外，本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂还能有效降低牙鲆链球菌病的发病概率，能提高牙鲆的免疫力，对链球菌病的发生具有很好的预防作用。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花27份、圆葱25份、东壁土22份、野薄荷19份、刺梨根19份、皂荚19份、小蓟18份、石蒜16份、苦石莲16份、苏木15份、紫荆皮15份、红花醡浆草14份、大风子12份、合欢花11份、川穹10份、仙人掌17份、蛇床子10份、葛花9份、紫苏子11份、天胡荽10份、鸭舌草8份、马齿苋8份、土贝母7份、卤虫粉12份、山楂6份、扇贝丁6份、沙蚕粉14份、鱼油8份。
上述防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：
(1)按照配比称取金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹，与重量为金银花、紫荆皮、红花醡浆草、大风子、合欢花和川穹总重量的15倍的清水混合，30-40℃浸泡24h，过滤得浸泡液；
(2)按照配比称取东壁土、野薄荷、刺梨根、皂荚、小蓟、石蒜、苦石莲、苏木、蛇床子、葛花、紫苏子、天胡荽、鸭舌草、马齿苋和土贝母，装入球磨机研磨，过80目筛，得研磨粉；
(3)将步骤(1)得到的浸泡液及步骤(2)得到的研磨粉放置于超临界萃取仪中的萃取釜中，利用二氧化碳作为介质进行萃取，萃取釜压力为40Mpa，萃取温度为45℃，分离器压力12Mpa，分离器温度为70℃，萃取2小时，得到萃取液；
(4)按照配比称取圆葱和仙人掌，并捣碎；
(5)按照配比分别称取卤虫粉、山楂、扇贝丁、沙蚕粉和鱼油，并与步骤(3)所得的萃取液、步骤(4)所得的捣碎的圆葱和仙人掌混合均匀，即得目标物。
实施例2
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花29份、圆葱20份、东壁土20份、野薄荷20份、刺梨根20份、皂荚21份、小蓟16份、石蒜18份、苦石莲18份、苏木15份、紫荆皮14份、红花醡浆草15份、大风子14份、合欢花12份、川穹10份、仙人掌10份、蛇床子11份、葛花9份、紫苏子9份、天胡荽9份、鸭舌草8份、马齿苋10份、土贝母9份、卤虫粉9份、山楂8份、扇贝丁7份、沙蚕粉12份、鱼油7份。
本实施例的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法同实施例1。
实施例3
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花33份、圆葱26份、东壁土25份、野薄荷25份、刺梨根24份、皂荚25份、小蓟24份、石蒜23份、苦石莲23份、苏木20份、紫荆皮21份、红花醡浆草21份、大风子18份、合欢花18份、川穹16份、仙人掌16份、蛇床子17份、葛花16份、紫苏子16份、天胡荽14份、鸭舌草13份、马齿苋12份、土贝母12份、卤虫粉11份、山楂9份、扇贝丁10份、沙蚕粉19份、鱼油9份。
本实施例的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法同实施例1。
实施例4
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花31份、圆葱27份、东壁土27份、野薄荷23份、刺梨根25份、皂荚25份、小蓟23份、石蒜23份、苦石莲22份、苏木18份、紫荆皮20份、红花醡浆草21份、大风子19份、合欢花17份、川穹18份、仙人掌16份、蛇床子16份、葛花17份、紫苏子16份、天胡荽14份、鸭舌草14份、马齿苋12份、土贝母11份、卤虫粉11份、山楂8份、扇贝丁9份、沙蚕粉19份、鱼油10份。
本实施例的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法同实施例1。
实施例5
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花30份、圆葱23份、东壁土23份、野薄荷21份、刺梨根22份、皂荚22份、小蓟22份、石蒜18份、苦石莲19份、苏木18份、紫荆皮16份、红花醡浆草17份、大风子16份、合欢花15份、川穹14份、仙人掌14份、蛇床子14份、葛花13份、紫苏子12份、天胡荽12份、鸭舌草11份、马齿苋10份、土贝母10份、卤虫粉10份、山楂8份、扇贝丁8份、沙蚕粉15份、鱼油9份。
本实施例的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法同实施例1。
实施例6
一种防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：金银花28份、圆葱25份、东壁土24份、野薄荷23份、刺梨根23份、皂荚23份、小蓟21份、石蒜20份、苦石莲20份、苏木16份、紫荆皮17份、红花醡浆草18份、大风子15份、合欢花14份、川穹15份、仙人掌13份、蛇床子13份、葛花13份、紫苏子13份、天胡荽11份、鸭舌草11份、马齿苋10份、土贝母9份、卤虫粉11份、山楂7份、扇贝丁8份、沙蚕粉16份、鱼油9份。
本实施例的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂的制备方法同实施例1。
实验结果
对比实验1
试验场地选在青岛某渔场，为了验证本发明的治疗效果，在对患有链球菌病的牙鲆进行试验：
对照组的处理如下：用200mg/L福尔马林加上200mg/L氟苯尼考抗菌素药浴20～30分钟病鱼，每日一次，直至病鱼痊愈。
实验A组的处理如下：将本发明实施例1的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
实验B组的处理如下：将本发明实施例2的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
实验C组的处理如下：将本发明实施例3的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
实验D组的处理如下：将本发明实施例4的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
实验E组的处理如下：将本发明实施例5的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
实验F组的处理如下：将本发明实施例6的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，直至病鱼痊愈。
其中，病鱼痊愈的标准为：牙鲆恢复摄食，眼球外突、肛门红肿现象消失，腹鳍、胸鳍、尾鳍的基部出血现象得到控制，鳞片脱落现象得到控制，游姿逐渐恢复正常。
实验结果见表1：
表1本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂治疗效果
实验结果表明：本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂对牙鲆链球菌病的治愈率高，使患病的牙鲆的成活率达到90％以上，用药2-4天后，牙鲆开始逐步恢复摄食，摄食频率提高，腹部朝天打转现象消失。
对比实验2
以正常饲养组为空白对照组。实验组处理如下：
实验a组：将本发明实施例1的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验b组：将本发明实施例2的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验c组：将本发明实施例3的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验d组：将本发明实施例4的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验e组：将本发明实施例5的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验f组：将本发明实施例6的饲料添加剂与市售基础饲料以1:20的重量比混合均匀后投喂，连续使用20天。
实验开始时，每个处理组放入健康牙鲆10只，按上述处理饲养20天后，连续投喂三天低值小杂鱼，并观察记录感染状况。结果见表2：
表2本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂预防链球菌病的效果
由表2可见，本发明的防治牙鲆链球菌病的饲料添加剂能有效降低牙鲆链球菌病的发病概率，能提高牙鲆的免疫力，对链球菌病的发生具有很好的预防作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进应视为本发明的保护范围。