基于斗鲳活性多肽的复配物的制作方法

文档序号:11314943阅读:372来源:国知局

本发明涉及鱼类产品深加工技术领域,尤其是涉及基于斗鲳活性多肽的复配物。



背景技术:

自20世纪50年代起,海洋鱼捕捞产量便呈逐年增加的趋势,直至1996年产量达到8640万吨,但进入21世纪以后,随着人类的过度捕捞及海洋鱼资源种类的灭绝与减少,海洋鱼捕捞产量出现明显的下降,至2010年这一产量已降至7740万吨,且这种下降趋势还将继续持续下去。面对海洋鱼资源的日益衰退,除了加大对资源的保护与扶持力度,还应合理的规划海洋资源的利用,避免宝贵资源的浪费与无形流失。

海洋鱼类长期生活在极端、极具竞争及挑战的环境中,其体内化合物的组成及结构均与陆地生物存在很大的区别,因此可以从海洋鱼中获得的截然不同的功能性物质,如多不饱和脂肪酸、多糖、矿物质、维生素、抗氧化物、酶及生物活性肽等。长期以来,尽管海洋鱼富含人类所需要的多种营养成分及功能因子,但由于基本的处理手段、贮存方法及冷链运输的缺乏,这部分海洋鱼资源通常只是用于食用、作为动物的饲料,甚至被丢弃,造成了自然资源的极大浪费。随着人类对健康的重视及对海产品营养价值的关注,关于海洋鱼高值化利用、深度开发的报道日益增多。海洋鱼含有相当大比例的肌肉蛋白,这部分肌肉蛋白营养价值高,由均衡的氨基酸组成,易于被人体消化。将加工副产品中的肌肉蛋白采用蛋白酶进行水解能够实现蛋白的回收利用,否则它们只能作为加工过程中的废物而被丢弃。

现有技术如授权公告号为cn103937864b的中国发明专利,公开了一种从鳀鱼中分离的活性多肽,得到的抗神经细胞损伤多肽分子量为2,181da;由天门冬氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸等十一种氨基酸组成,是一种新型的具有活性的多肽。该活性多肽可以显著提高pc12神经细胞的存活率,在终浓度为50μg/ml时,细胞存活率与损伤组比较提高了26.4%,有效地减轻了谷氨酸盐诱导的神经细胞损伤,但口感较差,效果不明显。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种营养丰富全面,口感爽滑,易于吸收,无化学防腐剂,无毒副作用,能抑制或者杀伤肿瘤细胞,增强人体免疫力的基于斗鲳活性多肽的复配物。

本发明针对上述技术中提到的问题,采取的技术方案为:基于斗鲳活性多肽的复配物,其成分及其重量份为:斗鲳鱼活性多肽2~4份、植物蛋白粉20~26份、葡萄糖2~7份、蔗糖1~4份、羟甲基纤维素5~11份、微量元素0.05~0.09份、维生素1~2份、浓缩果汁3~5份、水28~37份。

基于斗鲳活性多肽的复配物,其制备方法包括以下步骤:

脱腥处理:将鱼肉糜以1g:4~6ml比例为浸泡在脱腥液中,在13~17℃下浸泡2~3h,脱腥液的成分及其重量份为:红茶粉1~3份、nacl0.5~1份、水95~100份,脱腥液中红茶粉中的黄酮类化合物有消臭作用,萜烯类化合物具有吸附异味的功能,儿茶素类可以消除甲基硫醇化合物,该脱腥步骤属于物理脱腥,脱腥效果好,对斗鲳鱼肉中的蛋白质无任何影响;

脱脂:将鱼肉糜与石油醚以料液比为1:2~4(w/v)在45~50℃下回流脱脂17~20h,过滤,放置至石油醚挥发完全即得脱脂鱼肉糜,该步骤利用油脂能溶于石油醚的特性,能有效除去鱼肉糜中的脂肪,脱脂彻底,无试剂残留,且该处理方法对斗鲳鱼肉中的的成分及功效无任何影响;

酶解:将脱脂鱼肉糜加水调至底物浓度为5~7%,调节ph至7~8,加入2800~3000u/g的碱性蛋白酶和700~800u/g的中性蛋白酶,在温度为50~55℃下酶解100~120min,灭酶,调节ph至中性,离心,上清液即为酶解液,采用复合蛋白酶酶解能够结合两种蛋白酶的水解能力和位点,降低酶解时间,提高蛋白质的转化率,使得活性多肽的得率高;

纯化:用截留分子量为3~5kda的超滤膜在0.6~0.8mpa压力下超滤分离,冷冻干燥,即得斗鲳活性多肽,其氨基酸序列为hshacasysrcylrcrvlhpgcvncyrcsr,该活性多肽具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,通过作用于肿瘤细胞的细胞膜,破坏其完整性并产生穿孔现象,造成细胞内容物溢出胞外而死亡,能特异性地抑制某些肿瘤细胞,并且不会对人体正常细胞产生不良影响;

复配物配制:按配方称取斗鲳鱼活性多肽、植物蛋白粉、葡萄糖、蔗糖、羟甲基纤维素、微量元素、维生素、浓缩果汁、水,混合均匀,灌装,灭菌即得基于斗鲳活性多肽的复配物,该复配物营养丰富全面,口感爽滑,无异味,未添加任何化学防腐剂,对机体无任何毒副作用,满足消费者对健康食品的要求,适合于广泛人群饮用,营养成分易于被机体吸收利用,具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,增强人体免疫力。

与现有技术相比,本发明的优点在于:1)本发明基于斗鲳活性多肽的复配物的营养丰富全面,口感爽滑,无异味,未添加任何化学防腐剂,对机体无任何毒副作用,满足消费者对健康食品的要求,适合于广泛人群饮用;2)该复配物的营养成分易于被机体吸收利用,具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,增强人体免疫力;3)制备方法中采用复合蛋白酶酶解,可降低酶解时间,提高蛋白质的转化率,使得活性多肽的得率高;4)加工方法简单可行,能提高斗鲳的资源利用率和附加值,具有较大的是市场发展潜力和效益。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明方案作进一步说明:

实施例1:

基于斗鲳活性多肽的复配物,其成分及其重量份为:斗鲳鱼活性多肽3份、植物蛋白粉23份、葡萄糖5份、蔗糖3份、羟甲基纤维素7份、微量元素0.07份、维生素1.3份、浓缩果汁3.5份、水29份。

基于斗鲳活性多肽的复配物,其制备方法包括以下步骤:

1)脱腥处理:将鱼肉糜以1g:5ml比例为浸泡在脱腥液中,在15℃下浸泡2.5h,用清水清洗3次,即得脱腥鱼肉糜,脱腥液的成分及其重量份为:红茶粉3份、nacl0.7份、水97份,脱腥液中红茶粉中的黄酮类化合物有消臭作用,萜烯类化合物具有吸附异味的功能,儿茶素类可以消除甲基硫醇化合物,该脱腥步骤属于物理脱腥,脱腥效果好,对斗鲳鱼肉中的蛋白质无任何影响;

2)脱脂:将鱼肉糜与石油醚以料液比为1:3(w/v)在45~50℃下回流脱脂17h,过滤,放置至石油醚挥发完全即得脱脂鱼肉糜,该步骤利用油脂能溶于石油醚的特性,能有效除去鱼肉糜中的脂肪,脱脂彻底,无试剂残留,且该处理方法对斗鲳鱼肉中的的成分及功效无任何影响;

3)酶解:将脱脂鱼肉糜加水调至底物浓度为5%,调节ph至7.5,加入2900u/g的碱性蛋白酶和700u/g的中性蛋白酶,在温度为55℃下酶解110min,在115℃下高压灭酶13min,调节ph至中性,在8000r/min、4℃下离心10min,上清液即为酶解液,采用复合蛋白酶酶解能够结合两种蛋白酶的水解能力和位点,降低酶解时间,提高蛋白质的转化率,使得活性多肽的得率高;

4)纯化:用截留分子量为3kda的超滤膜在0.7mpa压力下超滤分离,冷冻干燥,即得斗鲳活性多肽,其氨基酸序列为hshacasysrcylrcrvlhpgcvncyrcsr,该活性多肽具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,通过作用于肿瘤细胞的细胞膜,破坏其完整性并产生穿孔现象,造成细胞内容物溢出胞外而死亡,能特异性地抑制某些肿瘤细胞,并且不会对人体正常细胞产生不良影响;

5)复配物配制:按配方称取斗鲳鱼活性多肽、植物蛋白粉、葡萄糖、蔗糖、羟甲基纤维素、微量元素、维生素、浓缩果汁、水,机械搅拌20min,然后再在500rpm的均质机内均质搅拌30min,灌装到300ml的玻璃瓶内,拧紧瓶盖,在95℃下灭菌15min,即得基于斗鲳活性多肽的复配物,该复配物营养丰富全面,口感爽滑,无异味,未添加任何化学防腐剂,对机体无任何毒副作用,满足消费者对健康食品的要求,适合于广泛人群饮用,营养成分易于被机体吸收利用,具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,增强人体免疫力。

实施例2:

基于斗鲳活性多肽的复配物,其成分及其重量份为:斗鲳鱼活性多肽4份、植物蛋白粉24份、葡萄糖6份、蔗糖2份、羟甲基纤维素10份、微量元素0.08份、维生素2份、浓缩果汁4份、水32份。

基于斗鲳活性多肽的复配物,其制备方法包括以下步骤:

1)脱腥处理:将鱼肉糜以1g:4ml比例为浸泡在脱腥液中,在16℃下浸泡2h,脱腥液的成分及其重量份为:红茶粉2份、nacl0.8份、水98份,脱腥液中红茶粉中的黄酮类化合物有消臭作用,萜烯类化合物具有吸附异味的功能,儿茶素类可以消除甲基硫醇化合物,该脱腥步骤属于物理脱腥,脱腥效果好,对斗鲳鱼肉中的蛋白质无任何影响;

2)脱脂:将鱼肉糜与石油醚以料液比为1:4(w/v)在50℃下回流脱脂18h,过滤,放置至石油醚挥发完全即得脱脂鱼肉糜,该步骤利用油脂能溶于石油醚的特性,能有效除去鱼肉糜中的脂肪,脱脂彻底,无试剂残留,且该处理方法对斗鲳鱼肉中的的成分及功效无任何影响;

3)酶解:将脱脂鱼肉糜加水调至底物浓度为6%,调节ph至8,加入2800u/g的碱性蛋白酶和800u/g的中性蛋白酶,在温度为52℃下酶解120min,灭酶,调节ph至中性,离心,上清液即为酶解液,采用复合蛋白酶酶解能够结合两种蛋白酶的水解能力和位点,降低酶解时间,提高蛋白质的转化率,使得活性多肽的得率高;

4)纯化:用截留分子量为4kda的超滤膜在0.6mpa压力下超滤分离,冷冻干燥,即得斗鲳活性多肽,其氨基酸序列为hshacasysrcylrcrvlhpgcvncyrcsr,该活性多肽具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,通过作用于肿瘤细胞的细胞膜,破坏其完整性并产生穿孔现象,造成细胞内容物溢出胞外而死亡,能特异性地抑制某些肿瘤细胞,并且不会对人体正常细胞产生不良影响;

5)复配物配制:按配方称取斗鲳鱼活性多肽、植物蛋白粉、葡萄糖、蔗糖、羟甲基纤维素、微量元素、维生素、浓缩果汁、水,混合均匀,灌装,灭菌即得基于斗鲳活性多肽的复配物,该复配物营养丰富全面,口感爽滑,无异味,未添加任何化学防腐剂,对机体无任何毒副作用,满足消费者对健康食品的要求,适合于广泛人群饮用,营养成分易于被机体吸收利用,具有抗病毒、抑制或者杀伤肿瘤细胞的作用,增强人体免疫力。

实施例3:

基于斗鲳活性多肽的复配物,其制备方法包括以下步骤:

将鱼肉糜以1g:5ml比例为浸泡在脱腥液中,在13~17℃下浸泡2.5h,脱腥液的成分及其重量份为:红茶粉2份、nacl0.7份、水95份;将脱腥后的鱼肉糜与石油醚以料液比为1:3.5(w/v)在47℃下回流脱脂19h,过滤,放置至石油醚挥发完全即得脱脂鱼肉糜;将脱脂鱼肉糜加水调至底物浓度为5.8%,调节ph至8,加入2900u/g的碱性蛋白酶和700u/g的中性蛋白酶,在温度为52℃下酶解100min,灭酶,调节ph至中性,离心,上清液即为酶解液;将酶解液用截留分子量为5kda的超滤膜在0.8mpa压力下超滤分离,冷冻干燥,即得斗鲳活性多肽;称取斗鲳鱼活性多肽3.5份、植物蛋白粉25份、葡萄糖5份、蔗糖4份、羟甲基纤维素9份、微量元素0.06份、维生素1.3份、浓缩果汁3.5份、水31份,混合均匀,灌装,灭菌即得基于斗鲳活性多肽的复配物。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知,在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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