本发明属于饲料添加剂制备技术领域，特别是涉及一种利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂。
背景技术：
南美白对虾是世界上三大经济虾类之一，具有营养需求较低，生长快，抗病力强、广盐性、适应能力强的特性。随着南美白对虾集约化防病养殖技术的发明与改进以及全人工苗种培育技术的突破，掀起了我国对虾养殖业的热潮。人工配合饲料是南美白对虾健康养殖的物质基础，掌握对虾的营养需求，选用优质价廉的饲料直接关系到对虾养殖的经济效益。
在对虾饲料中添加诱食剂能提高饲料适口性，增强动物食欲，提高动物采食量，增强饲料的消化和吸收，从而提高饲料效率，增加养殖产量。另外，配合饲料在生产和贮存过程中，或多或少失去了原有的色泽和风味，甚至还会有特殊的臭味，即使是营养全面的配合饲料，其养殖效果也会出现很大的差异。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种促进南美对虾生长，提高对虾免疫力，降低饲料残饵率，提高饲料的抗氧化效果的一种利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：一种利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂，包括种子液培养、豆粕固态发酵、黄粉虫虫体粉的制备，诱食剂的制备，诱食剂由以下成分及重量份组成：甜菜碱7-14份、牛磺酸6-8份、发酵豆粕7-15份、海参活性多肽10-15份、乌梅5-10份、黄粉虫虫体粉3-8份、白芍6-8份、酸枣仁10-20份、薄荷2-6份、山奈3-6份。
利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂具体制备步骤如下：
1）种子液培养：以无菌操作的方式将纳豆芽孢杆菌接种于斜面培养基，30-32℃培养2-3d；接着从斜面培养基挑取1-2环菌接入液体种子液培养基中，在36℃-38℃、150-155r/min条件下振荡培养3-5h，斜面培养基的成分及其重量份为：牛肉膏0.4-0.8份、蛋白胨1-2份、氯化钠0.6-1份、琼脂1.8-2.4份、水94-100份，液体种子液培养基的成分及其重量份为：牛肉膏1-1.8份，蛋白胨3-6份，氯化钠1-3份，水270-278份；
2）豆粕固态发酵：将种子液培养过程所得的纳豆芽孢杆菌菌液以10%~14%的接种量接入固体培养基，再加入0.1-0.15重量份活性多肽，活性多肽的氨基酸序列为：qsgfctsyycskfctaglygcyngicyclhcss，纳豆芽孢杆菌在固态发酵过程中会合成外毒素，影响其新陈代谢，加入的活性多肽与外毒素的活性部位结合，有效地减弱了外毒素的毒性效应，为固态发酵培养提供了有利环境，在35-37℃培养55-64h，得发酵豆粕；固体培养基的制备方法为：将豆粕粉碎，取4-6重量份豆粕、1-1.5重量份麸皮以及4-6份水混合，静置1.5-3h，将所得混合物置于培养瓶中，121℃灭菌14-20min，得固体培养基；纳豆芽孢杆菌购买于上海地天生物科技有限公司；
3）黄粉虫虫体粉的制备：将黄粉虫置于260-270℃条件下烘干，至黄粉虫充分膨胀，再将黄粉虫粉碎至70-80目，得黄粉虫虫体粉；
4）诱食剂的制备：按重量份计取甜菜碱、牛磺酸、发酵豆粕、海参活性多肽、乌梅、黄粉虫虫体粉、白芍、酸枣仁、薄荷、山奈置于混合容器中，充分混匀，搅拌，即得利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂，上述方法以发酵豆粕为蛋白源，以纳豆芽孢杆菌对豆粕发酵处理，使豆粕中的各种抗原成分、抗营养因子被有效降低去除，豆粕中的蛋白质也被分解成大量的小肽，这种无抗原的小肽更易被对虾吸收，能够显著提高对虾的成活率，同时降低了添加剂在水体中的残留，减少了水体中的氨氮含量，符合绿色环保的要求。
优选的，海参活性多肽制备步骤为：取新鲜海参，匀浆，按固液比4-7:1加入去离子水，于42-50℃条件下恒温搅拌，调ph值至6.2-6.5，加入酶制剂，酶制剂由以下成分及重量份组成：中性蛋白酶3-7份、木瓜蛋白酶6-10份和胰蛋白酶1-2份，酶解4-6h，酶解过程中在酶解液中通入氮气；每隔30-40min在酶解液中通入氮气，通入量为20-30m³/h，将酶解液加温至96-98℃，保持7-10min，将酶解液调ph至中性，于2-6℃条件下5000-6000r/min离心10-15min，取上清液，得海参活性多肽，在酶解过程中通入的氮气可使海参活性多肽结构中的芳香族氨基酸的酚腔基基团能够作为有效电子供体，提高制备的海参活性多肽中的芳香性氨基酸含量，增强海参活性多肽的抗氧化效果。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：通过在诱食剂中加入海参活性多肽提高诱食剂对饲料的抗氧化效果，对虾摄食了添加有本诱食剂的饲料体内自由基清除率高，实现增强对虾成活率、免疫力和品质的效果；制备的饲料诱食剂可有效遮盖饲料中的不良气味，同时刺激对虾的感觉器官，促进对虾摄食及饲料在对虾体内的消化和吸收，减少饲料的残饵率。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述：
实施例1：
利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂具体制备步骤如下：
1）种子液培养：以无菌操作的方式将纳豆芽孢杆菌接种于斜面培养基，30℃培养2d；接着从斜面培养基挑取1环菌接入液体种子液培养基中，在37℃、154r/min条件下振荡培养4h，斜面培养基的成分及其重量份为：牛肉膏0.6份、蛋白胨1份、氯化钠0.8份、琼脂2.0份、水98份，液体种子液培养基的成分及其重量份为：牛肉膏1.6份，蛋白胨4份，氯化钠2份，水274份；
2）豆粕固态发酵：将种子液培养过程所得的纳豆芽孢杆菌菌液以13%的接种量接入固体培养基，再加入0.13重量份活性多肽，活性多肽的氨基酸序列为：qsgfctsyycskfctaglygcyngicyclhcss，在36℃培养58h，得发酵豆粕；固体培养基的制备方法为：将豆粕粉碎，取5重量份豆粕、1.2重量份麸皮以及4份水混合，静置2h，将所得混合物置于培养瓶中，121℃灭菌16min，得固体培养基；纳豆芽孢杆菌购买于上海地天生物科技有限公司；
3）黄粉虫虫体粉的制备：将黄粉虫置于264℃条件下烘干，至黄粉虫充分膨胀，再将黄粉虫粉碎至78目，得黄粉虫虫体粉；
4）海参活性多肽制备步骤为：取新鲜海参，匀浆，按固液比5:1加入去离子水，于47℃条件下恒温搅拌，调ph值至6.4，加入酶制剂，酶制剂由以下成分及重量份组成：中性蛋白酶4份、木瓜蛋白酶8份和胰蛋白酶2份，酶解5h，酶解过程中在酶解液中通入氮气；每隔34min在酶解液中通入氮气，通入量为24m³/h，将酶解液加温至97℃，保持8min，将酶解液调ph至中性，于4℃条件下6000r/min离心12min，取上清液，得海参活性多肽；
5）诱食剂的制备：按重量份计取甜菜碱10份、牛磺酸7份、发酵豆粕10份、海参活性多肽12份、乌梅7份、黄粉虫虫体粉4份、白芍8份、酸枣仁14份、薄荷4份、山奈5份，置于混合容器中，充分混匀，搅拌，即得利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂。
实施例2：
利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂具体优选制备步骤如下：
1）种子液培养：以无菌操作的方式将纳豆芽孢杆菌接种于斜面培养基，32℃培养3d；接着从斜面培养基挑取2环菌接入液体种子液培养基中，在37℃、154r/min条件下振荡培养4h，斜面培养基的成分及其重量份为：牛肉膏0.7份、蛋白胨2份、氯化钠0.8份、琼脂2份、水98份，液体种子液培养基的成分及其重量份为：牛肉膏1.6份，蛋白胨4份，氯化钠2份，水276份；
2）豆粕固态发酵：将种子液培养过程所得的纳豆芽孢杆菌菌液以14%的接种量接入固体培养基，再加入0.12重量份活性多肽，活性多肽的氨基酸序列为：qsgfctsyycskfctaglygcyngicyclhcss，在36℃培养58h，得发酵豆粕；固体培养基的制备方法为：将豆粕粉碎，取4重量份豆粕、1.2重量份麸皮以及5份水混合，静置2h，将所得混合物置于培养瓶中，121℃灭菌18min，得固体培养基；纳豆芽孢杆菌购买于上海地天生物科技有限公司；
3）黄粉虫虫体粉的制备：将黄粉虫置于268℃条件下烘干，至黄粉虫充分膨胀，再将黄粉虫粉碎至76目，得黄粉虫虫体粉；
4）海参活性多肽制备步骤为：取新鲜海参，匀浆，按固液比6:1加入去离子水，于48℃条件下恒温搅拌，调ph值至6.3，加入酶制剂，酶制剂由以下成分及重量份组成：中性蛋白酶4份、木瓜蛋白酶8份和胰蛋白酶2份，酶解4h，酶解过程中在酶解液中通入氮气；每隔37min在酶解液中通入氮气，通入量为28m³/h，将酶解液加温至97℃，保持8min，将酶解液调ph至中性，于4℃条件下5800r/min离心12min，取上清液，得海参活性多肽；
5）诱食剂的制备：按重量份计取甜菜碱10份、牛磺酸7份、发酵豆粕14份、海参活性多肽15份、乌梅8份、黄粉虫虫体粉7份、白芍6份、酸枣仁14份、薄荷5份、山奈5份，置于混合容器中，充分混匀，搅拌，即得利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂。
实施例3：
利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂具体制备步骤如下：
1）种子液培养：以无菌操作的方式将纳豆芽孢杆菌接种于斜面培养基，30℃培养2d；接着从斜面培养基挑取1环菌接入液体种子液培养基中，在38℃、154r/min条件下振荡培养4h，斜面培养基的成分及其重量份为：牛肉膏0.7份、蛋白胨2份、氯化钠0.8份、琼脂2.2份、水98份，液体种子液培养基的成分及其重量份为：牛肉膏1.4份，蛋白胨4份，氯化钠3份，水278份；
2）豆粕固态发酵：将种子液培养过程所得的纳豆芽孢杆菌菌液以13%的接种量接入固体培养基，再加入0.13重量份活性多肽，活性多肽的氨基酸序列为：qsgfctsyycskfctaglygcyngicyclhcss，在36℃培养60h，得发酵豆粕；固体培养基的制备方法为：将豆粕粉碎，取5重量份豆粕、1.2重量份麸皮以及6份水混合，静置3h，将所得混合物置于培养瓶中，121℃灭菌18min，得固体培养基；纳豆芽孢杆菌购买于上海地天生物科技有限公司；
3）黄粉虫虫体粉的制备：将黄粉虫置于267℃条件下烘干，至黄粉虫充分膨胀，再将黄粉虫粉碎至74目，得黄粉虫虫体粉；
4）海参活性多肽制备步骤为：取新鲜海参，匀浆，按固液比7:1加入去离子水，于48℃条件下恒温搅拌，调ph值至6.5，加入酶制剂，酶制剂由以下成分及重量份组成：中性蛋白酶4份、木瓜蛋白酶7份和胰蛋白酶2份，酶解6h，酶解过程中在酶解液中通入氮气；每隔34min在酶解液中通入氮气，通入量为25m³/h，将酶解液加温至97℃，保持8min，将酶解液调ph至中性，于4℃条件下6000r/min离心14min，取上清液，得海参活性多肽；
5）诱食剂的制备：按重量份计取甜菜碱10份、牛磺酸7份、发酵豆粕14份、海参活性多肽12份、乌梅8份、黄粉虫虫体粉4份、白芍7份、酸枣仁14份、薄荷4份、山奈5份，置于混合容器中，充分混匀，搅拌，即得利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂。
上述实施例中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110>兰溪市哥特生物技术有限公司
<120>一种利用海参活性多肽制备的饲料诱食剂
<160>1
<170>siposequencelisting1.0
<210>1
<211>33
<212>prt
<213>人工合成(mytiluscoruscus)
<400>1
glnserglyphecysthrsertyrtyrcysserlysphecysthrala
151015
glyleutyrglycystyrasnglyilecystyrcysleuhiscysser
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