一种迎春花提取物及其在制备食品防腐剂中的应用
【专利摘要】本发明公开了一种迎春花提取物及其在制备食品防腐剂中的应用，含有迎春花提取物。迎春花提取物由以下步骤制备：(a)将干燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用80～90％乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB?8型大孔树脂富集活性成分，先用5～15％乙醇冲洗6～10个柱体积除去大极性成分，再用70～80％乙醇洗脱8～12个柱体积，收集70～80％乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的5％～15％。
【专利说明】
一种迎春花提取物及其在制备食品防腐剂中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于食品领域，涉及防腐剂的制备及应用，具体涉及一种迎春花提取物及 其在制备食品防腐剂中的应用。
【背景技术】
[0002] 迎春花为木犀科植物迎春花的花。2~4月收采，烘干。原植物迎春花为落叶灌木， 高达5米。枝细长，直立或成拱形，小枝平滑无毛，有四棱。复叶对生;小叶3片，卵形或长椭圆 状卵形，长1~3厘米，先端尖，边缘有细毛，下面无毛;叶柄长5~10毫米。花淡黄色，先叶开 花，着生于去年的枝条上，单生或腋生;花梗长约6毫米，被有狭长绿色的小苞;萼钟状，裂片 6,线状，绿色，与萼简同长或较长;花冠管高脚碟形，径约2厘米，裂片6,长6毫米，筒部长12 毫米;雄蕊2,着生于花筒内；子房2室。花期2~4月。多栽于庭园。分布山东、陕西、辽宁、江 苏、浙江、贵州等地。
[0003] 长期以来，食品工业都习惯于将化学合成品作为食品的防腐剂如苯甲酸及其盐 类、山梨酸及其盐类和对羟基苯甲酸酯类等，其在使用过程中不可避免地会对食品的风味 产生不良影响，一旦超标又会对人体产生毒副作用。天然防腐剂具有抗菌性强、安全无毒、 水溶性好、热稳定性好、具有一定的营养保健功能等优点，天然植物源防腐剂的开发及运用 于卤制品的生产符合天然、安全、营养的发展方向。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种基于迎春花的天然植物源防腐剂的制备方法及其应 用，该防腐剂中的迎春花提取物具有显著的抑菌防腐作用。
[0005] 上述目的是通过如下技术方案实现的：
[0006] -种具有抑菌防腐作用的迎春花提取物通过如下方法制备：（a)将干燥的迎春花 和茵陈蒿混合，粉碎，用80~90%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙 醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5~15%乙醇冲洗 6~10个柱体积除去大极性成分，再用70~80%乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80%乙 醇洗脱液，减压浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的5%~15%。
[0007] 进一步地，所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物通过如下方法制备：（a)将干 燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用85%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味 得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲 洗8个柱体积除去大极性成分，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压 浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的10%。
[0008] 进一步地，所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物通过如下方法制备：（a)将干 燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味 得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5%乙醇冲 洗10个柱体积除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12个柱体积，收集70%乙醇洗脱液，减压 浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的5%。
[0009] 进一步地，所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物通过如下方法制备：（a)将干 燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用90%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味 得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用15%乙醇冲 洗6个柱体积除去大极性成分，再用80 %乙醇洗脱8个柱体积，收集80 %乙醇洗脱液，减压浓 缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的15%。
[0010] 上述的迎春花提取物在制备食品防腐剂方面的应用。
[0011] 本发明的有益效果：
[0012] 本发明提供的食品防腐剂主要含有迎春花提取物，该提取物具有显著的抑菌防腐 作用，可以用于食品领域抑菌防腐，且纯天然，不含合成化学品。
【具体实施方式】
[0013] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0014] 药材来源:药材迎春花和茵陈蒿购自安徽亳州中药材市场。
[0015] 主要试剂:食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司;AB-8型大孔树脂购自天 津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA;甲酸为HPLC级，购于TEDIA;色谱用纯净水 为哇哈哈纯净水。所用试剂和材料均为可以购买到的常规商品。
[0016] 实施例1:迎春花提取物的制备
[0017] (a)将5kg干燥的迎春花和茵陈蒿（占总重10 % )混合粉碎，用85 %乙醇热回流提取 3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a)浓 缩液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂 富集，先用10 %乙醇冲洗8个柱体积除去大极性物质，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集 75 %乙醇洗脱液，减压浓缩。
[0018] 实施例2:迎春花提取物的制备
[0019 ](a)将5kg干燥的迎春花和茵陈蒿（占总重5 % )混合粉碎，用80 %乙醇热回流提取3 次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a)浓缩 液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别得 到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂富 集，先用5 %乙醇冲洗10个柱体积除去大极性物质，再用70 %乙醇洗脱12个柱体积，收集 70%乙醇洗脱液，减压浓缩。
[0020]实施例3:迎春花提取物的制备
[0021] (a)将5kg干燥的迎春花和茵陈蒿（占总重15% )混合粉碎，用90%乙醇热回流提取 3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a)浓 缩液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂 富集，先用15 %乙醇冲洗6个柱体积除去大极性物质，再用80 %乙醇洗脱8个柱体积，收集 80%乙醇洗脱液，减压浓缩。
[0022]实施例4:实施例1的对比，不添加茵陈蒿
[0023] (a)将5kg干燥的迎春花粉碎，用85%乙醇热回流提取3次(25L X 3次），每次2小时， 合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（3L);(b)对步骤(a)浓缩液依次用石油醚（3LX 3 次）、乙酸乙酯（3LX 3次)和水饱和的正丁醇（3LX 3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂富集，先用10%乙醇冲洗 8个柱体积除去大极性物质，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓 缩。
[0024]实施例5:实施例1的对比，茵陈蒿占总重20%
[0025] (a)将5kg干燥的迎春花和茵陈蒿（占总重20 % )混合粉碎，用85 %乙醇热回流提取 3次(25LX3次），每次2小时，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液(3L);(b)对步骤(a)浓 缩液依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂 富集，先用10 %乙醇冲洗8个柱体积除去大极性物质，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集 75 %乙醇洗脱液，减压浓缩。
[0026] 实施例6:抑菌试验
[0027] 按照实施例1~5制备迎春花提取物1~5，考察迎春花提取物1~5对食品中常见污 染菌的抑菌试验，抑菌试验采用滤纸片的方法。迎春花提取物1~5分别用去离子水溶解配 制成浓度为280mg/L的提取物溶液。
[0028] 采用菌种如下:沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特单核细胞菌、大肠杆菌、肉毒杆 菌。
[0029] 滤纸片的制法:用打孔器将102型新华滤纸制成直径为6_的放入干燥洁净的烧杯 内，在121°C高温高压灭菌锅内灭菌30分钟，烘干备用。
[0030] 迎春花提取物1~5抑菌作用的测定：用无菌试管吸取适宜浓度的菌悬液O.lmL加 入已倒好的平面培养基表面，涂布均匀；分别用微量移液器注射20mL提取物溶液于滤纸片 上，将滤纸片贴于已接种细菌的平面培养基表面，每皿三片，重复三次。倒置平皿37°C培养 18小时后，用游标卡尺量取抑菌圈直径。结果见表1。
[0031 ] 抑菌圈（mm)=抑菌直径-6(mm) 〇 [0032]表1迎春花提取物1~5抑菌作用
[0033]
[0034] 结果表明：迎春花提取物1~3具有明显的抑菌作用。迎春花提取物4和5抑菌效果 较差，明显不如天然迎春花提取物1~3;说明本发明迎春花提取物的抑菌防腐效果与是否 添加茵陈蒿以及茵陈蒿添加的比例有关。该迎春花提取物可以制得抑菌防腐效果优异的食 品防腐剂。
[0035] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有抑菌防腐作用的迎春花提取物，其特征在于，通过如下方法制备：（a)将干 燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用80~90%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无 醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙 酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成分，先用5~ 15%乙醇冲洗6~10个柱体积除去大极性成分，再用70~80%乙醇洗脱8~12个柱体积，收 集70~80 %乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的5 %~15 %。2. 根据权利要求1所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物，其特征在于，通过如下方 法制备：（a)将干燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用85%乙醇溶液热回流提取，合并提取 液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次 用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成 分，先用10 %乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集 75%乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的10%。3. 根据权利要求1所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物，其特征在于，通过如下方 法制备：（a)将干燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用80%乙醇溶液热回流提取，合并提取 液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次 用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成 分，先用5 %乙醇冲洗10个柱体积除去大极性成分，再用70 %乙醇洗脱12个柱体积，收集 70%乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的5%。4. 根据权利要求1所述的具有抑菌防腐作用的迎春花提取物，其特征在于，通过如下方 法制备：（a)将干燥的迎春花和茵陈蒿混合，粉碎，用90%乙醇溶液热回流提取，合并提取 液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次 用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用AB-8型大孔树脂富集活性成 分，先用15 %乙醇冲洗6个柱体积除去大极性成分，再用80 %乙醇洗脱8个柱体积，收集80 % 乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，茵陈蒿占迎春花与茵陈蒿总重的15%。5. 权利要求1~4所述的迎春花提取物在制备食品防腐剂方面的应用。
【文档编号】A23L3/3472GK105831546SQ201610164311
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年3月22日
【发明人】张利文
【申请人】张利文