1,8－二氮杂萘衍生物的制作方法

专利名称：1,8－二氮杂萘衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药，特别涉及作为IV型磷酸二酯酶抑制剂的1，8-二氮杂萘衍生物。
背景技术：
气喘是因呼吸道收缩而反复喘鸣和发作的呼吸器官疾病。这类疾病的患者数量越来越多，今后还有进一步增加的可能。
目前对气喘进行治疗主要采用支气管扩张药物氨茶碱和茶碱等黄嘌呤衍生物及异丙喹喘宁等β受体兴奋剂。
这些化合物的作用机理是通过使呼吸道平滑肌细胞中的环腺苷酸(cAMP)产生的酶腺苷酸环化酶活化或抑制cAMP的分解酶磷酸二酯酶(PDE)，使细胞中的cAMP浓度提高，以缓解呼吸道平滑肌的收缩(内科69，207-214(1992))。
众所周知，细胞中的cAMP浓度提高可抑制呼吸道平滑肌的收缩(Clin.Exp.Allergy，22，337-344(1992)，Drugs of the Future，17，799-807(1992))，对改善气喘症状很有效。
但是，黄嘌呤衍生物还显现出使血压下降和强心作用等全身性副作用(J.Cyclic Nucleotide and Protein Phosphorylation Res.，10，551-564(1985)，J.Pharmacol.Exp.Ther.，257，741-747(1991))。此外，β受体兴奋剂还易导致脱敏，如果用量较大，则会出现手指震颤和心悸等副作用。
另一方面，PDE被至少分为I～V型5种不同的类型，它们的分布或机能各不相同(Pharmacol.Ther.，51，13-33(1991))。特别是IV型PDE，它不对核苷酸中的环鸟苷酸(cGMP)作用，只特异性地分解cAMP，这证明PDE存在于呼吸道平滑肌及浸润细胞。
此外，IV型PDE抑制剂在豚鼠中通过抗原及血小板活化因子对嗜酸性细胞浸润具有抑制作用(Eur.J.Pharmacol.，255，253-256(1994))，对从嗜酸性细胞中游离出障碍性蛋白(MBP、ECP)也具有抑制作用(Br.J.Pharmacol.，115，39-47(1995))。另外，IV型PDE抑制剂还对造成收缩的物质(组胺、醋甲胆碱、LTD4)引发的呼吸道平滑肌的收缩显现出抑制作用(Br.J.Pharmacol.，113，1423-1431(1994))，对与气喘有很大关系的细胞分裂素IL-4的产生具有抑制作用(J.Invest.Dermatol.，100，681-684(1993))，对呼吸道内血管透过性的亢进具有抑制作用(Fundam.Clin，Pharmacol.，6，247-249(1992))，对呼吸道过敏症具有抑制作用(Eur.J.Pharmacol.，275，75-82(1995))。因此，希望IV型PDE抑制剂能够成为副作用较少的气喘治疗剂。
具有IV型PDE抑制活性的大多数化合物中都包含1，8-二氮杂萘衍生物。本申请人首先报道下式表示的4位(R6)上具有芳基、杂芳基、环烷基等环状取代基及3位(R5)上无取代或具有低级烷基的1，8-二氮杂萘衍生物，该化合物具有IV型PDE抑制活性(WO96/06843号)。 式中，R5表示氢原子或低级烷基，R6表示具有取代基的芳基、具有取代基的杂芳基、环烷基或金刚烷基。其他详细内容参见该公报。
发明的揭示本发明者们的目的是提供能够有选择地并有效地对IV型PDE进行抑制、且副作用较少的用于支气管哮喘等呼吸器官疾病的预防·治疗的新颖化合物，进一步提供含有这些化合物的医药品。
本发明者们对具有IV型PDE抑制活性的化合物进行认真研究后发现，在先前报道的化合物(WO96/06843号)的3位上导入了特定取代基(X-R6)的1，8-二氮杂萘衍生物是一种新化合物，该化合物显现出很强的IV型PDE抑制作用。此外，该化合物经口吸水性和持续性也很好。因此，可以认为该化合物能够作为IV型PDE抑制剂使用，从而完成了本发明。
即，本发明涉及以下通式(I)表示的新颖的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐及以它们为有效成分的医药品。 式中符号含义如下R1-R0、-低级亚烷基-环烷基或-环烷基，R0-低级烷基，R2、R3、R4可以相同也可以不同，表示-H、-R0、-卤素、-低级亚烷基-OH、-低级亚烷基-SH、-低级亚烷基-O-R0、-低级亚烷基-S-R0、-低级亚烷基-O-CO-R0、-低级亚烷基-S-CO-R0、-OH、-O-R0、-S-R0、-SO-R0、-SO2-R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-环烷基、-CO-R0或-CH＝N-OR9，R9-H、-R0或-低级亚烷基-芳基，R5可被选自R10表示的基团取代的环烷基、可被选自R10表示的基团取代的环烯基、可被选自R10表示的基团取代的杂环基或可被选自R10表示的基团取代的苯基，R6-OH、-OR7、-COOH、-COOR7、-CONH2、-CONHR7、-CON(R7)2、-O-COR7、-O-COOR7、-CHO、-COR7、-NH2、-NHR7、-N(R7)2、-NHCOR7、-N(R7)COR7、-NHSO2R7、-N(R7)SO2R7、-CN、-NHCOOR7、-N(R7)COOR7、-C(NH)NH2、-NHC(NH)NH2或-N(R7)C(NH)NH2或-Y-R8表示的基团，R7可被选自-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN及-COR0的基团取代的低级烷基，R8可被选自R10表示的基团取代的环烷基、可被选自R10表示的基团取代的芳基或可被选自R10表示的基团取代的杂环基，R10-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN或-COR0或R7表示的基团，Y键、-O-、-COO-、-CONH-、-CON(R7)-、-O-CO-、-O-COO-、-CO-、-NH-、-N(R7)-、-NHCO-、-N(R7)CO-、-NHCOO-、-N(R7)COO-、-NHSO2-或-N(R7)SO2-，X键、低级亚烷基或低级亚烯基。
此外，本发明还提供了含有1，8-二氮杂萘衍生物或其盐的医药品，特别是IV型抑制剂。
以下，对本发明进行详细说明。
本说明书中，“低级”是指碳原子数1～6的直链或支链烃链。“低级烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基等，其中较好的是碳原子数1～4的烷基，特别好的是甲基和乙基。“低级亚烷基”是指上述“低级烷基”中除去了任意1个氢原子的二价基团，较好的是碳原子数1～4的亚烷基，特别好的是亚甲基、亚乙基及亚丙基。“低级亚烯基”是指碳原子数在2以上的“低级亚烷基”的任意位置上具有1个以上双键的基团，较好的是碳原子数2～4的亚烯基。
“环烷基”较好为碳原子数3～8的环烷基，特别好的是环丙基及环己基。“环烯基”较好为碳原子数5～8的环烯基，特别好的是环己烯基。“芳基”表示碳原子数6～14的芳香族烃基，较好的是苯基。“杂环基”是指具有1～4个选自氮原子、氧原子及硫原子的杂原子的单环～三环式杂环基，可形成桥式环也可与苯环形成稠环，该杂环基较好为5～7元饱和或不饱和单环杂环基，特别好的是吡啶基、哌啶基、吗啉基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、四唑基、吡嗪基、哌嗪基。
“卤素”是指F、Cl、Br及I。
“可取代”是指“无取代”或“具有1～5个相同或不同的取代基”。
“可取代的环烷基”、“可取代的环烯基”、“可取代的杂环”、“可取代的苯基”及“可取代的芳基”中的取代基只要能够用作医药上、特别是IV型PDE抑制剂中的环的取代基即可，对其无特别限定，较好的是-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN或-COR0或可被这些基团取代的低级烷基。
1，8-二氮杂萘3位上的基团(X-R6)最好是与碳原子数相同的烷基相比亲水性更好的基团，例如，X最好表示键或低级亚烷基，R6最好表示-OH、-COOH、-COOR7、-O-COR7、-NH2、-NHR7、-N(R7)2、-C(NH)NH2、-NHC(NH)NH2或-N(R7)C(NH)NH2或-Y-R8表示的基团。R8最好表示芳基或杂环基，这些基团可被选自-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN或-COR0的基团取代。
1，8-二氮杂萘4位上的基团(R5)较好为环烷基、3位上具有取代基的苯基等，该取代基较好为卤素、低级烷基等。1，8-二氮杂萘5位及6位上的基团(R3，R4)较好为低级烷基或氢原子，更好为氢原子。1，8-二氮杂萘7位上的基团(R2)较好为-低级烷基、-卤素、-低级亚烷基-OH或式-CH＝N-OH表示的基团等。
本发明化合物中特别好的例子是选自3-(2-脒基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(2-胍基乙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1 H)-酮、4-环己基-1-乙基-7-甲基-3-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[3-(1H-四唑-5-基)丙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸、3-(4-环己基-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基)丙酸、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(羟基亚氨基甲基)-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、3-[7-氯-4-(3-氯苯基)-1-乙基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、3-[1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮及1-{2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]乙基}哌啶-4-羧酸的化合物及其盐。
本发明化合物因取代基的种类不同有时存在几何异构体和互变异构体，本发明包括这些异构体的分离体或它们的混合物。
此外，本发明化合物中有时存在手性碳原子，还包括以此为基础的(R)体、(S)体旋光异构体。本发明包括这些旋光异构体的混合物及它们的分离体。
本发明化合物还包括药理学上允许的药物前体。药理学上允许的药物前体是指具有通过溶剂分解或在生理学条件下可转变为本发明的NH2、OH、CO2H等的基团的化合物。可形成药物前体的基团为Prog.Med.，5，2157-2161(1985)和《医药品的开发》(广川书店，1990年)第7卷、分子设计163-198中记载的基团。
本发明的化合物还包括酸加成盐或根据不同取代基与碱形成的盐。这些盐是指制药学上允许的盐，具体包括与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸和甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有机酸形成的酸加成盐，与钠、钾、镁、钙、铝等无机碱和甲胺、乙胺、乙醇胺、赖氨酸、鸟氨酸等有机碱形成的盐和铵盐等。
本发明还包括本发明化合物(I)及其盐的各种水合物和溶剂合物及多晶型物。
(制备方法)利用本发明化合物的基本骨架或不同种类的取代基特征，采用各种公知的合成方法可制备本发明化合物及其制药学上允许的盐。因官能团的种类不同，在制备目的化合物时在原料至中间体阶段有时会出现保护基，即很易除去而转变为该官能团的基团。在其后的步骤中，可根据需要除去保护基，获得目的化合物。这种官能团包括羟基和羧基等，它们的保护基如Greene及Wuts著《Protective Groups in Organic Synthesis(第2版)》所述，可根据反应条件作适当选择。
(1)制备方法1 式中，L1表示离去基团，以下也是如此。
本制备方法是使氨基吡啶衍生物(II)与通式(III)表示的酰基化试剂反应，生成酰胺衍生物(IV)，然后直接进行闭环反应，制得本发明化合物(Ia)。
L1表示的离去基团较好为卤素、酰氧基、烷氧基碳酰氧基等碳酸酯或甲磺酰氧基、对甲苯磺酰氧基等有机磺酸残基。此外，XR6上的取代基可以与L1连接，使通式(III)表示的化合物的分子内或分子间形成酸酐(例如戊二酸酐等)。
反应在二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿等卤代烃类，苯、甲苯、二甲苯等芳香族烃类，乙醚、四氢呋喃(THF)、二噁烷等醚类，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)等对反应无活性的有机溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，可使用当量或一方过量的氨基吡啶衍生物(II)及酰基化试剂(III)。如果反应时存在有机碱(较好为三乙胺、吡啶、4～(N，N-二甲基氨基)吡啶)、无机碱(较好为氢氧化钠、碳酸钾)或金属碱(氢化钠、甲醇钠、叔丁醇钾等)，则反应能够更顺利地进行。
本制备方法可分阶段进行酰胺衍生物(IV)的分离及闭环反应。这种情况下，各反应中所用的溶剂、温度和碱等条件都与前述相同。
(2)制备方法2 本制备方法是由含有羧基的本发明化合物(Ib)制备含有氨基的本发明化合物(Id)。作为制备中间体的氨基甲酸酯化合物(Ic)也是本发明化合物。
由化合物(Ib)获得的酸酐等羧基反应性衍生物与叠氮化钠等叠氮化物的反应或通过二苯氧基磷酰叠氮(DPPA)法获得的酰叠氮的Curtius重排，或化合物(Ib)的常规酰胺化反应而制得的伯酰胺的Hofmann重排等而获得的异氰酸酯和醇化合物的反应可制得本发明化合物(Ic)。
反应在按照前述《Protective Groups in Organic Synthesis(第2版)》记载的氨基的氨基甲酸酯型保护基的除去反应等可由本发明化合物(Ic)制得本发明化合物(Id)。
(3)制备方法3使R8上的三氟甲基水解可制得化合物(I)的R8上具有羧基的化合物。
反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、DMF等对反应无活性的有机溶剂中或无溶剂条件下，在酸(盐酸、硫酸等)或碱(氢氧化钠、甲醇钠等)存在下，并在冷却～加热下进行。(4)制备方法4 本制备方法由本发明化合物(Ie)开始，经上述途径制成本发明化合物(If)和(Ig)及(Ih)。
使本发明化合物(Ie)脱水就可制得本发明化合物(If)，反应可采用常规的脱水反应方法。例如，按照日本化学会编《实验化学讲座(第四版)》20卷(1992年)(丸善)等记载的方法进行。
使本发明化合物(If)与叠氮化钠等叠氮化物反应就可制得本发明化合物(Ig)。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、甲醇和乙醇等醇类、DMF、水等对反应无活性的溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，对应于化合物(If)叠氮化物的用量可以是当量或过量。如果使反应在酸(乙酸、三氟乙酸、三乙胺盐酸盐、盐酸、氯化铝等)或碱(吡啶、三乙胺、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、叔丁醇钾等)存在下进行，则反应能够更顺利。
使本发明化合物(If)与氨、氯化铵等铵盐、氨基化钠等氨基化金属反应可制得本发明化合物(Ih)。此外，使化合物(If)和氯化氢反应而制得的亚氨代酰氯再与氯化铵等铵盐反应也可制得化合物(Ih)。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、醇类、DMF、水等对反应无活性的溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下，常压～加压下进行。进行反应时，对应于化合物(If)氨基化试剂的用量可以是当量或过量。(5)制备方法5 本制备方法是使本发明化合物(Id)进行胍基化反应而制得本发明化合物(Ii)。
反应时可使用氨基氰、脒基硫酸、1-脒基吡唑、S-甲基异硫脲等作为胍基化试剂。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、醇类、DMF、水等对反应无活性的有机溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，对应于化合物(Id)胍基化试剂的用量可以是当量或过量。如果使反应在酸(乙酸、三氟乙酸、盐酸、硫酸等)或碱(吡啶、二甲基氨基吡啶、三乙胺、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、叔丁醇钾等)存在下进行，则反应能够更顺利。
(6)制备方法6 式中，Ra及Rb可以相同也可不同，为H、R7或R8表示的基团，以下也是如此。
本制备方法是由本发明化合物(Ij)制备噻唑衍生物(Ik)。
使化合物(Ij)和溴、N-溴琥珀酰亚胺、三溴化苄基三甲基铵等溴化剂反应而获得的溴化物在分离或不分离的情况下与硫代酰胺(V)反应，可制得噻唑衍生物(Ik)。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、醇类、乙酸、DMF、水等对反应无活性的溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，化合物(Ij)和溴化剂或溴化物和硫代酰胺(V)的用量为当量或一方过量。如果反应时存在酸或碱，则反应能够更顺利地进行。(7)制备方法7 本制备方法是在本发明化合物(Il)的吡啶环中导入基团氯。
使化合物(Il)与间氯过苯甲酸、过乙酸、过氧化氢水等氧化剂反应而制得的吡啶氧化物在分离或不分离的情况下与氧氯化磷、五氯化磷、亚硫酰二氯等氯化试剂反应可制得本发明化合物(Im)。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、醇类、乙酸、DMF、水等对反应无活性的溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，化合物(Il)和氧化剂或吡啶氧化物和氯化试剂的用量可以是当量也可过量。如果反应时存在酸或碱，则反应能够更顺利地进行。
利用WO97/19078号公报等记载的常用取代反应本身即能使本制备方法制得的本发明化合物(Im)中的氯被各种取代基取代。
(8)原料的合成 式中，L2是与L1相同的离去基团，M表示H或金属盐。
原料化合物(II)中，取代基R2和吡啶环以碳-碳结合的化合物以及在吡啶环的2位及6位上具有离去基团的原料化合物(VI)可按照WO97/19078号公报19～21页记载的方法制备。
使原料化合物(VI)依次与具有R1基的胺化合物(VII)和亲核试剂R2M(VIII)进行取代反应本身即能合成取代基R2和吡啶环不以碳-碳结合的原料化合物(II)。取代反应的顺序可考虑到导入的取代基(R1NH及R2)和离去基团(L1及L2)而作适当决定。反应在水、芳香族烃类、醚类、DMF等对反应无活性的溶剂中或无溶剂条件下，并在冷却～加热下进行。进行反应时，如果存在有机碱、无机碱(较好为氢氧化钠、碳酸钾)或金属碱，则反应能够更顺利地进行。
对上述各制备方法制得的本发明化合物进一步进行酰胺化、磺酰胺化、酯化、水解、烷基化、酯的还原、亲核取代等反应可制备其他各种本发明的化合物。酰胺化、磺酰胺化及酯化反应可按照日本化学会编《实验化学讲座(第四版)》22卷(1992年)(丸善)等记载的方法进行。水解反应可按照前述《Protective Groups in Organic Synthesis(第2版)》的羧基的脱保护反应等记载的方法进行。烷基化反应可按照日本化学会编《实验化学讲座(第四版)》20卷(1992年)(丸善)等记载的方法进行。酯的还原反应也可按照日本化学会编《实验化学讲座(第四版)》20卷(1992年)(丸善)等记载的方法进行。亲核取代反应是使具有被羟基取代的烷基的化合物与亚硫酰二氯反应生成烷基卤衍生物，或与甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯等反应生成有机磺酸酯，再与亲核试剂反应。或者利用Mitsunobu反应也可制备。反应在卤代烃类、芳香族烃类、醚类、DMF等对反应无活性的有机溶剂中或无溶剂条件下进行，并在冷却～加热条件下进行。进行反应时如果有碱存在，则反应能够更顺利地进行。
以上各制备方法制得的反应生成物可作为游离化合物、其盐或水合物等各种溶剂合物被分离精制。盐可通过常规的成盐反应形成。
分离精制可采用萃取、浓缩、蒸馏、结晶化、过滤、重结晶、各种色谱法等常规化学操作进行。
各种异构体可利用异构体间的物理化学差异分离。例如，旋光异构体可通过一般的光学离析法，例如分级结晶法或色谱法等进行分离。此外，旋光异构体还可由具备适当光学活性的原料化合物制备。
产业上利用的可能性PDE抑制作用目前至少有I～V型5个类型，本发明化合物对IV型PDE具有特定的抑制活性，可作为与IV型PDE有关的呼吸器官疾病(例如，支气管哮喘(包括特异反应性哮喘)、慢性支气管、肺炎性疾病、成人呼吸窘迫症候群(ARDS)等)的预防·治疗剂使用。特别是希望能够作为支气管哮喘的预防·治疗剂使用。
本发明化合物还可作为与IV型PDE有关的其他疾病的预防·治疗剂使用，例如与细胞分裂素(IL-1、IL-4、IL-6及TNF(肿瘤坏死因子))等有关的疾病(例如，慢性关节炎、溃疡性大肠炎、克罗恩病、败血症、败血症性休克、内毒素性休克、革兰氏阴性菌性败血症、中毒性休克症候群、肾炎、肝炎、感染(细菌及病毒)、循环衰竭(心力衰竭、动脉硬化、心肌梗塞、大脑卒中等))。
此外，本发明化合物还不易因肝微粒体中存在的P450药物代谢酶而代谢，显现出良好的经口吸收性及持续性，是一种具有良好体内动态的持续性药剂。
本发明化合物的有用性可通过以下试验确认。
试验例1 IV型PDE抑制活性1)按照以下方法从大鼠的心室肌精制含有IV型PDE的溶液。在乙醚麻醉下摘出雄性Wistar大鼠的心脏，用生理盐水洗涤后，分离出心室。然后，用剪子将分离出的心室剪成小片，将这些小片悬浮在含有1％的哺乳动物细胞抽提物蛋白酶抑制剂混合物(Protease Inhibitor Cocktail For Mammalian CellExtracts，SIGMA)缓冲液A(20mM的Bis-Tris、50mM的乙酸钠、2mM的EDTA、5mM的2-巯基乙醇、2mM的苯甲脒、0.05mM的苯基-甲基-磺酰氟，pH6.5)后，利用Polyton破坏细胞，再进行超离心(100,000G，60分钟，4℃)分离，获得可溶性组分。
2)将所得可溶性组分填入经过缓冲液A平衡化的2.6×10cm的Q琼脂糖柱后，用1200ml缓冲液A对该柱进行洗涤除去未结合的蛋白。然后，用750ml含有0.05～1.00M乙酸钠的线形梯度液的缓冲液A对与该柱结合的蛋白进行洗脱，回收7ml试样110份，检测cGMP及钙/calmodulin存在或不存在时所得各试样的cAMP代谢PDE的活性。将各试样中的具有cAMP代谢活性且在cGMP或钙/calmodulin存在下cAMP代谢活性不受影响的试样作为检测IV型PDE抑制活性的存储溶液使用。
3)使试验化合物在含有40mM的Tris-HCl(pH8.0)、5mM的氯化镁、4mM的2-巯基乙醇、1μM的cAMP、1μCi/ml[3H]cAMP及IV型PDE存储溶液的反应混合液中30℃反应10分钟。在反应液中加入含有半量8mM硫酸锌和5μM的3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)的20mg/ml的Amersham(涂过多聚赖氨酸的硅酸钇SOPA珠)悬浮液，使反应停止，测定放射活性。
IV型PDE的代谢活性用试验化合物的抑制率为50％时的浓度IC50表示，算出各化合物的IC50。
采用上述试验方法及WO97/19078号公报记载的方法，同样对I、II、III及V型PDE抑制活性进行测定。
上述抑制活性测定试验的结果是，实施例2、16、21、28、38、39、40、41、43、47、61、70、77、78、79、80的化合物对IV型PDE具有11nM以下的IC50值。其中，有的化合物显现出0.002nM的强力活性。
试验例2 使用了肝微粒体的体外药物代谢试验1)用100mM的Na-K磷酸缓冲液(pH7.4)稀释人及大鼠的肝微粒体悬浮液(人的肝微粒体Xenotech公司生产，大鼠的肝微粒体Charles River公司生产)使其中的蛋白质量达到0.5mg/ml。在100μl该缓冲液中加入试验化合物(10μg/ml的乙腈溶液)2μl、200mM的Na-K磷酸缓冲液(pH7.4)500μl、1mM的EDTA-NaOH(pH7.4)50μl及精制水200μl，形成基质溶液(反应溶液中的浓度肝微粒体(蛋白质量)0.05mg/ml、试验化合物20ng/ml、100mM的Na-K磷酸缓冲液、0.1mM的EDTA-NaOH)。
2)混合42mg的NADP、5ml的100mM葡萄糖-6-磷酸酯酶(G6P)及5ml的100mMMgCl2。然后添加G6P脱氢酶(约1750 U/5mg/ml)57μl，调制出NADPH生成系。在37℃加温5分钟后，冷冻直至使用。
3)在37℃对900μl基质溶液进行预保温5分钟后，加入100μlNADPH生成系，于37℃反应10、20、30分钟。然后加入2ml乙酸乙酯使反应停止，再用冰冷却。此外，在加入2ml乙酸乙酯后再加入100μl的NADPH生成系，调制出对照组溶液(反应时间为0分钟)。
4)在反应液中加入一定浓度的内标物(乙腈溶液)100μl、0.5M的磷酸1ml及乙酸乙酯2ml，振荡10分钟。然后以2500rpm进行10分钟离心分离后，取出乙酸乙酯层，使其蒸发干燥。残渣溶于HPLC的移动相溶剂100μl中。接着，在以下条件下对试验化合物进行12分钟左右的洗脱，对内标物进行约16分钟的洗脱(HPLC条件移动相乙腈/20mM的乙酸铵＝2∶3(v/v))，柱DiscoveryRP Amide C16，4.6x35mm(SUPELCO公司)，流速0.8ml/min，检测UV286nm)。
5)算出对照组中的试验化合物的峰高比(与内标物的峰高比)和反应10、20、30分钟后的峰高比的比例(残存率)。
上述测定试验的结果可确认，存在于肝微粒体中的P450药物代谢酶很难使实施例2、21、28、41、43、47、77、79的化合物代谢。
试验例3以IV型PDE抑制活性为指标的经口吸收性及体内动态评估试验为了评估抑制IV型PDE的本发明化合物的经口吸收性及体内动态，进行以下测定。
1)给7周龄的雄性Fisher大鼠口服悬浮于含0.5％甲基纤维素的精制水中的试验化合物，用量是3mg/kg。此外，作为对照组同样给大鼠口服溶剂(含0.5％的甲基纤维素精制水，3ml/kg)。经口给药后，在肝素存在下从用乙醚麻醉了的大鼠的尾静脉经时采血，按照常规方法分离出血浆。
2)将口服了试验化合物或溶剂的大鼠的血浆加入上述试验例1所示的IV型PDE测定系统中，使血浆的最终浓度达到0.1％，测定IV型PDE抑制活性。
本试验结果是，实施例2、21、28、41、43、47、77、79的化合物与比较化合物相比，显现出良好的经口吸收性及持续性(比较化合物4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘)。
从上述1～3的试验结果可确认本发明化合物具有IV型PDE抑制活性，可作为与IV型PDE有关的疾病的预防·治疗药使用。
由用于常规的制剂化的载体、赋型剂和其他添加剂可制得以本发明化合物或其盐的1种或2种以上为有效成分的制剂。
给药方式可采用片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、溶液剂等经口给药方式，或静注、肌注等注射剂形式，或栓剂，经皮剂、经鼻剂或吸入剂等非经口给药方式中的任一种。给药量可考虑症状、给药对象的年龄、性别等进行适当选择。一般经口给药时，成人1天0.001mg/kg～100mg/kg左右，可1次服用也可分2～4次给药。根据症状静脉给药时，一般成人1天0.001mg/kg～10mg/kg左右，可1天1次给药也可分数次给药。以吸入的方式给药时，通常成人1天0.0001mg/kg～1mg/kg左右，可1天1次给药也可分数次给药。以涂剂的方式给药时，用量在0.0001mg/kg～1mg/kg的范围内，1日1次或分数次给药。
本发明的经口给药的固体组合物包括片剂、散剂和颗粒剂等。这种固体组合物中混合了1种或1种以上的活性物质及至少1种惰性稀释剂，例如，乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羟丙基纤维素、微晶纤维素、玉米淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮、硅酸铝镁等。按照常规方法，组合物中还可包含惰性添加剂，例如，硬脂酸镁等润滑剂，羧甲基淀粉钠等崩解剂和助溶剂。根据需要，片剂或丸剂可包裹糖衣、胃溶性或肠溶性涂膜。
经口给药的液体组合物包括药剂学上允许的乳剂、溶液剂、悬浮剂、糖浆剂和酏剂等。常用惰性稀释剂包括精制水和乙醇。这种组合物除了惰性稀释剂之外，其中还可包含润湿剂和悬浮剂等助剂，甜味剂、矫味剂、芳香剂和防腐剂。
非经口给药的注射剂包括无菌的水性或非水性溶液剂，悬浮剂和乳剂。水性溶液剂包括注射用蒸馏水及生理盐水。非水性溶液剂包括丙二醇、聚乙二醇、橄榄油等植物油、乙醇等醇类和吐温80(商品名)等。这类组合物中还可包含等张剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂和助溶剂。使这些组合物通过除菌过滤器，再配合使用杀菌剂或光照就可使它们无菌化。也可将它们制成无菌的固体组合物，在使用前用无菌水或无菌注射溶剂溶解就可使用。
实施发明的最佳方式以下，根据实施例对本发明进行具体说明，但本发明并不仅限于此。此外，原料化合物的制备方法如参考例所示。3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶按照WO97/19078号公报的参考例44记载的方法制备，3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶及3-环己烷羰基-2-乙基氨基-6-甲基吡啶等3-取代-2-乙基氨基-6-甲基吡啶衍生物由WO97/19078号的参考例45、48及51记载的方法制备。
参考例及下述表格中使用以下省略符号。Ex实施例编号，No化合物编号，Dat物理化学数据(MSFAB-MS(M+H)+、MP熔点(℃)、dec分解、NMR1CDCl3的1HNMR中的特征峰δ(ppm)、NMR2DMSO-d6的1HNMR中的特征峰δ(ppm))，Sal盐及所含溶剂(oxa草酸盐，fum富马酸盐，空栏游离体，成分前的数字如1HCl表示一盐酸盐)，Syn制备方法(数字同样表示制备的实施例编号)，Me甲基，Et乙基，cPr环丙基，cHex环己基，Ph苯基，Ac乙酰基，Py2吡啶-2-基，Py4吡啶-4-基。此外，取代基前的数字表示取代位置，例如，2-Cl-Py4表示2-氯吡啶-4-基、3-Cl-Ph表示3-氯苯基。
参考例1用60％的氢化钠对3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶的DMF溶液进行处理后，加热下使其与氯化戊二酸一乙酯反应。然后，通过常规方法进行后处理和精制，获得4-{N-[3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲基吡啶-2-基]-N-乙基氨基甲酰基}丁酸乙酯。加热下使所得化合物在乙醇中与甲醇钠反应后，在反应液中加入浓硫酸，在加热条件下反应2天。接着，通过常规方法经过后处理和精制，获得3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸乙酯。MS399。
参考例2与参考例1同样，获得[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]乙酸乙酯。NMR16.91(1H，d，J＝8.1Hz)，4.13(2H，q，J＝7.1Hz)，3.43(2H，s)。
参考例3与参考例1同样，获得4-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丁酸甲酯。NMR16.88(1H，d，J＝7.8Hz)，4.67(2H，q，J＝7.0Hz)，2.27(2H，t，J＝7.6Hz)。
参考例4在加热条件下使3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶与异色满-1，3-二酮(75％)反应后，使按照常规方法进行后处理而获得的化合物在2-丁酮中和碳酸钾存在下与甲基碘反应。然后，按照常规方法进行后处理并精制，获得呈黄色固状的2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸甲酯。MS433。
参考例5在甲醇中用甲醇钠对4-氰基丁酸进行处理后，在THF中使其与新戊酰氯反应。然后使所得化合物在加热条件下与3-(3-氯苯甲酰)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶反应，再按照常规方法进行后处理，使所得化合物在乙醇中并在甲醇钠存在下加热反应后，再次按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈微黄色固体的4-(3-氯苯基)-3-(2-氰基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS352。
参考例6在THF中在三乙胺存在下使3’-三氟甲基苯基乙酸与新戊酰氯反应。在所得化合物中加入3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶，于150℃搅拌15小时后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色固状的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(3-三氟甲基苯基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS443。
参考例7与参考例6同样，获得4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(4-三氟甲基苯基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS443。
参考例8在二氯乙烷中并在三乙胺存在下，使2-(2-氨基噻唑-4-基)乙酸乙酯与乙酰氯反应，然后通过常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色固状的2-(2-乙酰氨基噻唑-4-基)乙酸乙酯。MS229。
参考例9在乙醇-1M的氢氧化钠水溶液(1∶1)中，在室温下使2-(2-乙酰氨基噻唑-4-基)乙酸乙酯反应后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色固状的2-(2-乙酰氨基噻唑-4-基)乙酸。MS201。
参考例10使用2-(2-乙酰氨基噻唑-4-基)乙酸，与参考例6同样，获得N-{4-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]噻唑-2-基}乙酰胺。MS439。
参考例11在乙腈中并在碳酸铯存在下，使异哌啶甲酸乙酯与溴代乙酸苄酯反应，然后按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色油状的1-(苄氧基羰基甲基)异哌啶甲酸乙酯。MS306。
参考例12在乙醇中并在10％钯炭的存在下，在1个气压的氢氛围气中使1-(苄氧基羰基甲基)异哌啶甲酸乙酯进行接触还原反应。在乙醇中用甲醇钠对所得化合物进行处理后，在THF中使其与新戊酰氯反应。然后，在加热条件下使所得化合物与3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶反应，再在乙醇中用甲醇钠进行处理。接着按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈黄色油状的1-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]哌啶-4-羧酸乙酯。MS454。
参考例13用1.6M的丁基锂/己烷溶液对二异丙胺的THF溶液进行处理后，在滴加THF的同时滴加2，6-二氯吡啶，并反应后，再滴加3-氯苯甲醛。按照常规方法进行后处理后，使所得化合物在加热条件下在甲苯中与二氧化锰反应，再按照常规方法进行后处理，并精制，获得3-(3-氯苯甲酰基)-2，6-二氯吡啶。MS286。
参考例14在2，6-二氯-3-(3-氯苯甲酰基)吡啶的THF溶液中添加70％的乙胺水溶液，并在室温下反应后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得6-氯-3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基吡啶。NMR18.95(1H，brs)，6.48(1H，d，J＝7.8Hz)，1.3(3H，t，J＝7.1Hz)。
参考例15在150℃温度下加热，使6-氯-3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基吡啶与戊二酸酐反应后，按照常规方法进行后处理。在60℃的温度下，在2-丁酮中并在碳酸钾存在下使所得化合物与甲基碘反应后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色固体的3-[7-氯-4-(3-氯苯基)-1-乙基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸甲酯。MS405。
参考例16在DMF中用60％的氢化钠对3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶进行处理后，使其与氯化戊二酸一乙酯反应，并按照常规方法进行后处理。然后，使所得化合物在乙醇中并在甲醇钠存在下加热反应。按照常规方法进行后处理，接着在6M盐酸水溶液-二噁烷(1∶1)中使所得化合物加热反应，再按照常规方法进行后处理。在DMF中并在碳酸钾存在下使所得化合物与甲基碘反应，按照常规方法进行后处理，并精制，获得3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸甲酯。NMR110.11(1H，d，J＝0.6Hz)，2.45-2.95(4H，m)，1.43(3H，t，J＝7.1Hz)。
参考例17在冰冷却下，在2，6-二氯-3-(3-氯苯甲酰基)吡啶的DMF溶液中滴加15％的硫代甲醇钠水溶液，反应后，按照常规方法进行后处理，并精制。将所得化合物和70％的乙胺水溶液一起装入封管中，于110℃下加热反应后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲硫基吡啶。NMR16.36(1H，dd，J＝8.2，0.7Hz)，2.58(3H，s)，1.32(3H，t，J＝7.1Hz)。
参考例18室温下，在4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(吡啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的二氯甲烷溶液中添加间氯过苯甲酸，搅拌5分钟后，按照常规方法进行后处理，并精制。获得呈无色固状的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(1-氧代吡啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS392。
参考例19室温下，在3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶的DMF溶液中加入氯化乙酰氯和吡啶，使它们反应后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得N-[3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲基吡啶-2-基]-N-乙基氯乙酰胺。在该化合物的乙腈溶液中加入N-叔丁氧基羰基哌嗪和碳酸钾，加热下反应。然后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得2-[4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基]-N-[3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲基吡啶-2-基]-N-乙基乙酰胺。加热下在甲醇中使所得化合物与甲醇钠反应，再按照常规方法进行后处理，并精制，获得3-(1-叔丁氧基羰基哌嗪-4-基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。NMR14.73(2H，q，J＝7.3Hz)，3.15-3.35(2H，m)，1.38(9H，s)。
参考例20在4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-羟基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的THF溶液中加入三乙胺和甲磺酰氯，加热条件下反应后，通过常规方法进行后处理，并精制，获得4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-甲磺酰氧丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。NMR14.67(2H，q，J＝7.1Hz)，4.18(2H，t，J＝6.3Hz)，2.93(3H，s)。
参考例21在4-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丁酸的THF溶液中加入草酰氯和1滴DMF，室温下搅拌。在冰冷却下在浓氨水的THF溶液中滴入反应液，搅拌30分钟后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得4-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丁酰胺。在所得化合物的二氯乙烷溶液中加入吡啶、氧氯化磷和1滴DMF，室温下搅拌后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得4-(3-氯苯基)-3-(3-氰基丙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。NMR16.90(1H，d，J＝8.2Hz)，4.67(2H，q，J＝7.1Hz)，1.70-2.10(2H，m)。
参考例22室温下，在镁的乙醚悬浮液中滴加2-溴噻吩，使它们反应。冷却至0℃后，在其中加入2-氯-6-甲基烟酸，升温至室温后，搅拌12小时。然后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得2-氯-6-甲基-3-(噻吩-2-羰基)吡啶。NMR17.79(1H，dd，J＝5.0，1.1Hz)，7.78(1H，d，J＝7.7Hz)，2.63(3H，s)。
参考例23在封管中加热搅拌2-氯-6-甲基-3-(噻吩-2-羰基)吡啶和70％的乙胺水溶液后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得2-乙基氨基-6-甲基-3-(噻吩-2-羰基)吡啶。NMR17.97(1H，d，J＝8.1Hz)，7.62(1H，dd，J＝5.0，1.1Hz)，1.28(3H，t，J＝7.3Hz)。
参考例240℃用氢化钠对3-(3-氯苯甲酰基)-6-二甲氧基甲基-2-乙基氨基吡啶的DMF溶液进行处理后，加入氯化戊二酸一乙酯，于80℃加热搅拌。然后，按照常规方法进行后处理，将所得化合物溶于乙醇中，于0℃添加甲醇钠，加热回流1小时。冷却至0℃后，加入浓硫酸，再加热回流1小时。按照常规方法进行处理。使所得化合物溶于二噁烷中，于0℃加入6M的盐酸，升温至室温后，搅拌3小时。按照常规方法进行处理后，获得3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸。NMR110.12(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.1Hz)，1.44(3H，t，J＝6.9Hz)。
参考例25在3-(3-氯苯甲酰基)-6-二甲氧基甲基-2-乙基氨基吡啶的丙酮溶液中加入6M的盐酸，室温反应5小时后蒸去溶剂。然后，在甲基叔丁基醚中在通过常规的分液处理而获得的生成物中加入环氧丙烷和氯化乙酰氯，于60℃搅拌14小时。接着，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈黄色油状的2-氯-N-[3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲酰基吡啶-2-基]-N-乙基乙酰胺。NMR110.1(1H，d，J＝0.6Hz)，7.95(2H，brs)，1.0-1.5(3H，m)。
参考例26在2-氯-N-[3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲酰基吡啶-2-基]-N-乙基乙酰胺的乙腈溶液中加入碳酸铯及异哌啶甲酸乙酯，于60℃搅拌3小时。从反应液过滤无机物并蒸去溶剂后，将所得残渣溶于乙醇中，加入甲醇钠，加热回流15分钟。然后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈黄色油状的1-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]哌啶-4-羧酸乙酯。MS468。
参考例27在冰冷却下，在1-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]哌啶-4-羧酸乙酯的乙醇溶液中加入硼氢化钠，搅拌15分钟后，按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈黄色油状的1-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羟基甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]哌啶-4-羧酸乙酯。MS470。
参考例28室温下，在(1-乙酰基哌啶-4-基)乙酸的THF溶液中加入三乙胺和新戊酰氯，室温下搅拌1小时。然后，过滤反应液并浓缩，在所得残渣中加入3-环己烷羰基-2-乙基氨基-6-甲基吡啶，于150℃搅拌14小时。对反应液进行后处理，在所得生成物中加入乙醇和甲醇钠，加热回流1小时。按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈无色固状的3-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-环己基-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS396。
参考例29在3-(3-溴苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶的二氯乙烷溶液中加入对甲苯磺酰氯、(1-乙氧基羰基哌啶-4-基)乙酸及二甲基氨基吡啶，于80℃搅拌12小时。对反应液进行后处理，在所得生成物中加入乙醇和甲醇钠，加热回流1小时。按照常规方法进行后处理，并精制，获得呈微褐色固状的4-(3-溴苯基)-3-(1-乙氧基羰基哌啶-4-基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS498。
参考例30采用与参考例5同样的方法，合成4-(3-溴苯基)-3-(2-氰基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS396。
参考例31采用与参考例5同样的方法，合成4-环己基-3-(2-氰基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。MS324。
参考例32采用与后述实施例16同样的方法，获得4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(2-羟基乙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮。NMR16.92(1H，d，J＝8.2Hz)，4.67(2H，q，J＝7.0Hz)，3.74(2H，t，J＝5.8Hz)。
参考例33采用与后述实施例6同样的方法，合成5-(3-氯苯基)-8-乙基-6-[3-(吗啉-4-基)-3-氧代丙基]-7-氧代-7，8-二氢-1，8-二氮杂萘-2-甲醛。NMR17.69(1H，d，J＝8.1Hz)，3.51-3.67(8H，m)，1.44(3H，t，J＝7.0Hz)。
实施例1
在7.5g的3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶的50ml二氯乙烷溶液中加入5ml氯化丙二酸一乙酯和6.5g的4-二甲基氨基吡啶。室温搅拌30分钟后，在80℃的油浴温度下再加热搅拌30分钟。使反应液冷却至室温后，加入1M盐酸水溶液，用氯仿萃取，再用饱和食盐水对有机层进行洗涤后，蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯～氯仿-乙酸乙酯)精制，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-羧酸乙酯7.10g。
实施例2在2.70g的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸乙酯的15ml的THF-甲醇(1∶1)溶液中加入15ml的1M氢氧化钠水溶液。在80℃的油浴温度下加热搅拌2小时。使反应液冷却至室温后，加入1M盐酸水溶液将pH值调整为3，然后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制，再用二异丙醚-乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸1.27g。
实施例3于200℃对3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶1.00g和2，2-二甲基戊二酸酐5.17g的混合物搅拌1.5天。使反应液冷却至室温后，加入0.5M盐酸水溶液，加热回流2小时。然后再次使反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水对有机层进行洗涤后，蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制后，再用乙醇-水重结晶，获得呈橙色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]-2，2-二甲基丙酸198mg。
实施例4在320mg的4-(3-氯苯基)-3-氰基-1-乙基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮中加入10ml的多磷酸。在130℃的油浴温度下加热搅拌2小时。然后，在反应液中加入冰水，再用1M的氢氧化钠水溶液将其pH值调整为6，用氯仿萃取，再用饱和食盐水洗涤有机层后，蒸去溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-乙酸乙酯)精制后，再用乙醇重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-酰胺180mg。
实施例5在1.00g的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸的20ml的THF溶液中加入0.3ml的草酰氯和1滴DMF，室温下搅拌30分钟。然后，在冰冷却过的1.0ml吗啉的10ml的THF溶液中滴入上述反应液，再搅拌30分钟。在反应液中加入1M盐酸水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、饱和食盐水洗涤后，蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制后，再用二异丙醚-乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[3-(吗啉-4-基)-3-氧代丙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮780mg。
实施例6在冰冷却下，依次在700mg的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸的10ml的DMF溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐630mg、二甲胺盐酸盐154mg及三乙胺0.53ml。使反应液升温至室温后搅拌2小时。然后，在反应液中加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-乙酸乙酯)精制后，再用二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]-N，N-二甲基丙酰胺262mg。
实施例9在1.00g的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-羧酸的10ml甲苯溶液中加入900mg的DPPA和0.5ml三乙胺。在100℃的油浴温度下加热搅拌1小时后，加入10ml乙醇，再加热搅拌30分钟。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(甲苯-乙酸乙酯)精制后，再用乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶的N-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸乙酯590mg。
实施例10在40ml的乙醇-3M氢氧化钠水溶液(1∶1)中加入N-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸乙酯720mg。在100℃的油浴温度下加热搅拌4小时后，冷却至室温，加水后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(甲苯-乙酸乙酯)精制后，再用二异丙醚-乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶的3-氨基-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮298mg。
实施例12使1.38g的3-(2-氨基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的15ml二氯乙烷溶液冷却至0℃后，在其中加入720mg的37％福尔马林水溶液和0.55ml的乙酸，搅拌30分钟。然后，加入2.05g的三乙酰氧基硼氢化钠，升温至室温后搅拌2小时。使反应液冷却至0℃后，用1M的氢氧化钠水溶液将pH调整为8左右，用氯仿萃取。蒸去有机层的溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制。然后，在5ml甲醇中的所得油状物中加入194mg的草酸，蒸去溶剂。所得粗结晶用乙腈重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-3-(2-二甲基氨基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮-草酸盐的0.5水合物300mg。
实施例13在1.00g的3-氨基-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的5ml的DMF溶液中加入191mg的60％氢化钠，升温至60℃后，在反应液中加入5ml的DMF的同时加入N-(2-氯乙基)二甲胺盐酸盐551mg和1.08ml的三乙胺，搅拌1小时。使反应液冷却至0℃后，加入5ml水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制后，在5ml甲醇中的所得油状物中加入83mg的草酸，蒸去溶剂。所得粗结晶用甲醇重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-3-(2-二甲基氨基乙基氨基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮-草酸盐的0.5水合物93mg。
实施例14
冰冷却下，在630mg的3-(3-氨基丙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml二氯乙烷溶液中加入甲磺酰氯243mg及三乙胺0.30ml，在升温至室温的同时搅拌1小时。然后，在反应液中加入乙酸乙酯，再用饱和碳酸氢钠水溶液及饱和食盐水洗涤，蒸去有机层的溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，再用乙醇-水重结晶，获得呈无色结晶的N-{3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙基}甲磺酰胺204mg。
实施例16使1.00g的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸、20ml甲醇和0.5ml浓硫酸的混合物加热回流一昼夜。冷却至室温后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，使所得化合物溶于20ml的THF中，然后在其中加入500mg的硼氢化钠。加热回流下在其中滴加3ml甲醇，再加热回流3小时。冷却至室温后，加入1M盐酸水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制后，用二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-羟基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮497mg。
实施例17冰冷却下，在5.08g的5-己酮酸的80ml的THF溶液中加入5.60ml的三乙胺和4.90ml的新戊酰氯，室温搅拌1小时。过滤反应液后蒸去溶剂，在所得残渣中加入3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶2.00g，于150℃加热搅拌2天。使反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯，用1M氢氧化钠水溶液及饱和食盐水洗涤。蒸去有机层的溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，再用乙醇重结晶，获得呈黄色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(3-氧代丁基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮774mg。
实施例18在130℃的温度下，对4-(3-氯苯基)-3-(2-氰基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮700mg、叠氮化钠388mg、三乙胺的盐酸盐411mg及1-甲基吡咯烷-2-酮10ml的混合物搅拌20小时。使反应液冷却至室温后，加入1M盐酸水溶液使反应液呈酸性，用乙酸乙酯萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，再用乙酸乙酯-二异丙醚重结晶，获得呈微黄色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮130mg。
实施例19在500mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-羟基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml的THF溶液中加入300mg对甲苯磺酰氯和0.15ml三乙胺及催化剂量的4-二甲基氨基吡啶，加热回流2小时。然后，再次加入300mg对甲苯磺酰氯、0.15ml三乙胺及催化剂量的4-二甲基氨基吡啶，加热回流2小时。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和饱和食盐水洗涤后减压蒸去溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制。接着，在80℃的油浴温度下，加热搅拌所得化合物及300mg的咪唑、250mg的碳酸钾和10ml的DMF2小时。然后加入300mg的碘化钾，再次在80℃的油浴温度下加热搅拌2小时。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取，有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得残渣用硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制后，溶于乙酸乙酯中，再加入4M氯化氢-乙酸乙酯溶液，减压蒸去溶剂。所得残渣用乙腈-乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶固状的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-[3-(咪唑-1-基)丙基]-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐的0.2水合物447mg。
实施例2060℃的温度下，对20ml甲醇及10ml的1M氢氧化钠水溶液中的1.40g的2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸甲酯搅拌15小时。反应液冷却至室温后，加入1M盐酸水溶液10ml，滤取析出的沉淀物，通过乙酸乙酯-二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶固状的2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸的0.6水合物540mg。
实施例21在120℃的温度下对700mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(3-三氟甲基苯基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮及5ml浓硫酸的混合物搅拌2小时。然后，将反应液倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取，有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得粗结晶用乙腈重结晶，获得呈微黄色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸459mg。
实施例22冰冷却下，在3.45g的3-(4-甲氧基羰基苯基)丙酸的40ml甲醇溶液中加入897mg甲醇钠，搅拌30分钟。浓缩反应液后，在所得残渣中加入50ml的THF。然后，在冰冷却下，加入3.07ml的新戊酰氯，室温搅拌1小时。过滤反应液后浓缩，在所得残渣中加入800mg的3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶，于150℃搅拌14小时。使反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯，用1M的氢氧化钠水溶液及饱和食盐水洗涤。蒸去有机层的溶剂后，在所得残渣中加入50ml甲醇及900mg甲醇钠，加热回流3小时。然后，加入1M氢氧化钠水溶液40ml，于60℃搅拌16小时。在反应液中加入1M盐酸水溶液50ml，减压浓缩，在所得残渣中加入乙酸乙酯，再依次用饱和碳酸氢钠及饱和食盐水溶液洗涤。蒸去溶剂后，用乙醇使所得粗结晶重结晶，获得呈微黄色结晶的4-{[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]甲基}苯甲酸764mg。
实施例23在783mg的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]苯甲酸的20ml二噁烷溶液中加入0.48ml的DPPA、0.31ml的三乙胺、0.89ml的叔丁醇，加热回流18小时。使反应液冷却至室温后减压浓缩，在所得残渣中加入乙酸乙酯，再用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤。减压浓缩有机层后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制。然后，在冰冷却下，在5ml乙酸乙酯中的680mg所得化合物中加入5ml的4M氯化氢-乙酸乙酯溶液，室温搅拌2小时。浓缩反应液，所得粗结晶用乙醇-乙酸乙酯重结晶，获得呈微褐色结晶的3-(3-氨基苯基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐486mg。
实施例26冰冷却下，在3.16g的4-吡啶基乙酸一盐酸盐的50ml甲醇溶液中加入1.97g的甲醇钠，搅拌1小时后，浓缩反应液，在残渣中加入50ml的THF。然后，在冰冷却下，加入2.24ml的新戊酰氯，进行与实施例17同样的操作后，进行成盐处理，获得呈微黄色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(吡啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐98mg。
实施例28使400mg的3-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、5ml的乙醇及5ml的6M盐酸水溶液的混合液加热回流15小时后，浓缩反应液，加入饱和碳酸氢钠水溶液，再用氯仿萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制。将所得黄色油状物溶于5ml甲醇中，在其中加入45mg富马酸的1ml甲醇溶液，蒸去溶剂，所得残渣通过乙醇-乙酸乙酯重结晶，获得呈微黄色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一富马酸盐187mg。
实施例29冰冷却下，在510mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-氧代丁基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的20ml氯仿溶液中滴加1.03ml的溴。滴加结束后，在反应液中加入饱和硫代硫酸钠水溶液，用氯仿萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥后蒸去溶剂，使所得化合物溶于10ml乙醇中。然后在其中加入104mg的硫代乙酰胺，于70℃搅拌2小时。蒸去反应液中的溶剂，在所得残渣中加入氯仿，用水及饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。接着，蒸去有机层中的溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)精制，再用乙腈重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-3-[(2，4-二甲基噻唑-5-基)甲基]-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮301mg。
实施例30在670mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(1-氧代吡啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮中加入1.6ml的氧氯化磷和2.4ml的三乙胺，于60℃搅拌1小时后蒸去溶剂。然后，在所得残渣中加水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，再用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯-己烷)精制，再用乙醇-水重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-3-(2-氯吡啶-4-基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮175mg。
实施例32在570mg的3-(1-叔丁氧基羰基哌嗪-4-基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml乙酸乙酯溶液中加入10ml的4M氯化氢-乙酸乙酯溶液，室温搅拌1小时后加水，再用1M的氢氧化钠水溶液中和，然后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制后，再用二异丙醚重结晶，获得呈淡黄色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(哌嗪-1-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮115mg。
实施例34在500mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-羟基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml的DMF溶液中加入500mg碳酸钾和0.5ml甲基碘，在80℃的油浴温度下加热搅拌2小时后，再加入1.0g碳酸钾和1.0ml甲基碘，然后在80℃的油浴温度下加热搅拌一昼夜。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制后，再用己烷-二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-[3-(甲氧基羰基氧基)丙基]-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮160mg。
实施例35在500mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-羟基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml叔丁醇溶液中加入300mg叔丁醇钠和0.2ml的甲基碘，在60℃的油浴温度下加热搅拌2小时后，冷却至室温。然后，加入水及1M的盐酸，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制后，再用二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-甲氧基丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮180mg。
实施例36在3.54g的(8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)乙酸乙酯的60ml乙醇溶液中加入30ml的1M氢氧化钠水溶液，室温搅拌14小时后，在反应液中加入1M的盐酸30ml，蒸去溶剂。在所得残渣中加入乙醇，滤去不溶物后再次蒸去溶剂，获得3.55g的粗品。将3.50g该化合物溶于40ml甲醇中，然后加入837mg甲醇钠，形成钠盐。蒸去甲醇后使所得残渣悬浮于40ml的THF中，再加入2.87ml的新戊酰氯，室温搅拌2小时。接着，在反应液中加入乙醚，过滤沉淀的不溶物后蒸去溶剂，在所得残渣中加入800mg的3-(3-溴苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶，于150℃搅拌14小时。然后，在反应液中加入乙酸乙酯，再依次用1M的氢氧化钠水溶液、水及饱和食盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥后蒸去溶剂。在所得残渣中加入50ml乙醇及837mg甲醇钠，加热回流1小时。蒸去溶剂后，加入乙酸乙酯，再用水及饱和食盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-29％的氨水)精制，获得150mg的生成物。用4M的氯化氢形成该化合物的盐酸盐后，用乙醇-乙酸乙酯进行重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐69mg。
实施例37在700mg的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(3-甲磺酰基氧丙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的10ml的THF溶液中加入0.5ml的吡咯烷和300mg的碘化钾后，在60℃的油浴温度下加热搅拌1.5小时。冷却至室温后，加入水及1M的盐酸，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥，蒸去溶剂，所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制。然后，使所得化合物溶于乙酸乙酯中，在其中加入4M的氯化氢-乙酸乙酯溶液后蒸去溶剂，所得残渣用乙酸乙酯-乙腈重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-氯苯基)-1-乙基-6-甲基-3-[3-(吡咯烷-1-基)丙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐133mg。
实施例38冰冷却下，在2.00g的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(2-羟基乙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、1.0ml的三乙胺及20ml的THF的混合物中滴加0.5ml的甲磺酰氯，室温下搅拌30分钟。然后，在反应液中加水，用乙酸乙酯萃取。有机层依次用1M的盐酸、饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，在所得残渣的20ml的THF溶液中加入1.0ml的三乙胺、1.0ml的异哌啶甲酸乙酯和500mg的碘化钾，在60℃的油浴温度下加热搅拌1昼夜。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制，获得1.70g的酯体。以下与实施例2同样操作，获得呈无色结晶的1-{2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]乙基}哌啶-4-羧酸593mg。
实施例39在314mg的3-(2-氨基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的15ml的1，4-二噁烷溶液中加入404mg的1-脒基吡唑一盐酸盐和0.48ml的二异丙基乙胺，搅拌122小时后蒸去反应液，再过滤所得固状物，并用氯仿洗涤。浓缩合并的滤液和洗液，残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制。在5ml乙醇中的所得油状物中加入0.5ml的4M氯化氢-乙酸乙酯，再加入乙腈，再蒸馏，获得呈无色固状的4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(2-胍基乙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐的一水合物347mg。
实施例40于-78℃的温度下，在461mg的4-(3-氯苯基)-3-(2-氰基乙基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的20ml乙醇-氯仿(1∶1)溶液中吹入氯化氢气体，历时30分钟。然后在5℃的温度下搅拌18小时，蒸去反应液。在所得固状物中加入15ml乙醇和505mg乙酸铵，搅拌90小时。蒸去反应液，残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇-氨水)精制。在5ml乙醇中的所得油状物中加入0.4ml的4M氯化氢-乙酸乙酯，蒸去溶剂后，所得残渣用乙醇-乙酸乙酯重结晶，获得呈无色结晶的3-(2-脒基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮一盐酸盐268mg。
实施例42冰冷却下，在300mg的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸甲酯的7ml的THF-乙醇(5∶2)溶液中加入9mg硼氢化钠。搅拌1小时后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，使用所得210mg化合物中的200mg，以下与实施例2同样操作，获得呈微黄色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羟基甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸130mg。
实施例43冰冷却下，在1.50g的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸甲酯的33ml甲醇-吡啶(10∶1)溶液中加入300mg羟胺盐酸盐。搅拌1小时后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后，减压蒸去溶剂。以下与实施例2同样操作对所得残渣进行处理，获得呈无色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羟基亚氨基甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸72mg。
实施例44将4.4g的6-氯-3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基吡啶、5ml的THF及10ml的40％甲胺水溶液装入封管中，在100℃的油浴温度下加热搅拌2小时。冷却至室温后加入氯仿。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。在残渣中加入2ml的苯甲酰氯、2g的4-二甲基氨基吡啶及100ml的二氯乙烷，在80℃的油浴温度下加热搅拌2小时。然后，加入1ml苯甲酰氯及1g的4-二甲基氨基吡啶，在100℃的油浴温度下再加热搅拌1小时。冷却至室温后加水，用氯仿萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制。接着，在冰冷却下，在所得化合物的50ml的DMF溶液中加入700mg的60％氢化钠，搅拌30分钟。然后加入2.7ml的氯代戊二酸一乙酯，在80℃的油浴温度下加热搅拌1小时。再次加入2.7ml的氯代戊二酸一乙酯，在80℃的油浴温度下加热搅拌1小时。反应液冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用水及饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制。使所得化合物和1.5g的甲醇钠及50ml乙醇一起加热回流1小时。反应液冷却至室温后，加入2ml浓硫酸，加热回流1昼夜。使反应液冷却至室温后，加入饱和碳酸氢钠，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制。将所得化合物在10ml的THF-甲醇(1∶1)及20ml的1M氢氧化钠水溶液中，在80℃的油浴温度下加热搅拌1小时。冷却至室温后，用1M的盐酸水溶液将pH值调整到2左右，再用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。所得残渣用乙腈重结晶，获得呈微黄色结晶的3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基氨基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸1.43g。
实施例46在150℃的温度下，对1.2g的3-(3-溴苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶及2.1g的戊二酸酐的混合物加热搅拌15小时。冷却至室温后，加入1M的盐酸水溶液加热回流1小时。再次冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂。在残渣中加入50ml乙醇和0.5ml浓硫酸，加热回流1小时。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后蒸去溶剂，残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿)精制。以下操作与实施例2相同，获得呈微黄色结晶的3-[4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸1.00g。
实施例47在2.34g的3-环己烷羰基-2-乙基氨基-6-甲基吡啶的20ml的THF溶液中加入3ml氯化戊二酸一乙酯和2.8ml的2，6-二甲基吡啶后，在60℃的油浴温度下加热搅拌1小时。冷却至室温后加水，用乙酸乙酯萃取。有机层依次用3M的盐酸、饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，在所得残渣的20ml乙醇溶液中加入1.00g的甲醇钠，加热回流1小时。然后，在反应溶液中加入20ml的1M氢氧化钠水溶液，加热回流1小时。冷却至室温后加水，用1M的盐酸中和，再用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂，所得残渣用乙醇-水重结晶，获得呈无色结晶的3-(4-环己基-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基)丙酸764mg。
实施例52在370mg的{4-[4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]哌啶-1-基}乙酸乙酯中加入5ml的6M盐酸，在100℃搅拌15小时后蒸去溶剂，所得粗结晶用乙醇-乙腈重结晶，获得呈无色结晶的{4-[4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]哌啶-1-基}乙酸一盐酸盐185mg。
实施例55在1.28g的4-(3-溴苯基)-3-(1-乙氧基羰基哌啶-4-基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮中加入20ml浓盐酸，于100℃搅拌3小时后蒸去溶剂，加入浓氨水使反应液成碱性后，用乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。蒸去有机层的溶剂后，所得粗结晶用乙腈重结晶，然后用乙醇-水重结晶，获得呈无色结晶的4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮357mg。
实施例56在2.56g的咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基乙酸的30ml甲醇溶液中加入783mg的甲醇钠，室温搅拌30分钟后蒸去溶剂，在所得残渣中加入15ml的N-甲基吡咯烷酮及2.15ml的新戊酰氯，室温搅拌2小时后，加入900mg的3-(3-溴苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶，于150℃搅拌16小时。然后，在反应液中加水，用乙酸乙酯萃取，有机层用水及饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿-甲醇)精制，再用乙腈重结晶，获得呈黄色结晶的4-(3-溴苯基)-1-乙基-3-(咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮240mg。
实施例57在400mg的4-(3-溴苯基)-1-乙基-3-(哌啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮的5ml乙腈溶液中加入0.11ml溴代乙酸乙酯及0.13ml的三乙胺，室温搅拌13小时。然后，在反应液中加入乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠及饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸镁干燥。蒸去有机层的溶剂后，所得残渣通过硅胶柱色谱法(己烷-乙酸乙酯)精制，再用乙酸乙酯-二异丙醚重结晶，获得呈无色结晶的{4-[4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]哌啶-1-基}乙酸乙酯120mg。
采用与上述实施例相同的方法，分别获得以下表1～3表示的实施例1～81的化合物。实施例1～81的化合物的结构及物理化学数据也示于表1～3。
表4及5所示为本发明另一些化合物的结构，采用上述制备方法及实施例记载的方法或本领域技术人员熟知的方法，或对这些方法进行改进都能够很容易地合成上述表4及5中的化合物。表权利要求
1.通式(I)表示的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐， 式中符号含义如下R1-R0、-低级亚烷基-环烷基或-环烷基，R0-低级烷基，R2、R3、R4可以相同也可以不同，表示-H、-R0、-卤素、-低级亚烷基-OH、-低级亚烷基-SH、-低级亚烷基-O-R0、-低级亚烷基-S-R0、-低级亚烷基-O-CO-R0、-低级亚烷基-S-CO-R0、-OH、-O-R0、-S-R0、-SO-R0、-SO2-R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-环烷基、-CO-R0或-CH＝N-OR9，R9-H、-R0或-低级亚烷基-芳基，R5可被选自R10表示的基团取代的环烷基、可被选自R10表示的基团取代的环烯基、可被选自R10表示的基团取代的杂环基或可被选自R10表示的基团取代的苯基，R6-OH、-OR7、-COOH、-COOR7、-CONH2、-CONHR7、-CON(R7)2、-O-COR7、-O-COOR7、-CHO、-COR7、-NH2、-NHR7、-N(R7)2、-NHCOR7、-N(R7)COR7、-NHSO2R7、-N(R7)SO2R7、-CN、-NHCOOR7、-N(R7)COOR7、-C(NH)NH2、-NHC(NH)NH2或-N(R7)C(NH)NH2或-Y-R8表示的基团，R7可被选自-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN及-COR0的基团取代的低级烷基，R8可被选自R10表示的基团取代的环烷基、可被选自R10表示的基团取代的芳基或可被选自R10表示的基团取代的杂环基，R10-OH、-苯基、-卤素、-OR0、-CO2H、-CO2R0、-NH2、-NHR0、-NR02、-NO2、-CN或-COR0或R7表示的基团，Y键、-O-、-COO-、-CONH-、-CON(R7)-、-O-CO-、-O-COO-、-CO-、-NH-、-N(R7)-、-NHCO-、-N(R7)CO-、-NHCOO-、-N(R7)COO-、-NHSO2-或-N(R7)SO2-，X键、低级亚烷基或低级亚烯基。
2.如权利要求1所述的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐，其中，X为键或低级亚烷基，R6为-OH、-COOH、-COOR7、-O-COR7、-NH2、-NHR7、-N(R7)2、-C(NH)NH2、-NHC(NH)NH2或-N(R7)C(NH)NH2或-Y-R8表示的基团。
3.如权利要求1所述的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐，其中，R5为被环己基或卤素取代的苯基。
4.如权利要求1所述的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐，其中，所述化合物选自3-(2-脒基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-3-(2-胍基乙基)-7-甲基-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-环己基-1-乙基-7-甲基-3-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[3-(1H-四唑-5-基)丙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基-3-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]丙酸、3-(4-环己基-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基)丙酸、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]苯甲酸、3-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(羟基亚氨基甲基)-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、3-[7-氯-4-(3-氯苯基)-1-乙基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、3-[1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3基]丙酸、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，8-二氮杂萘-2(1H)-酮及1-{2-[4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，8-二氮杂萘-3-基]乙基}哌啶-4-羧酸。
5.医药组合物，所述组合物由权利要求1所述的1，8-二氮杂萘衍生物或其制药学上允许的盐及制药学上允许的载体组成。
6.如权利要求5所述的医药组合物，所述组合物为IV型磷酸二酯酶抑制剂。
7.如权利要求6所述的医药组合物，所述组合物为呼吸器官疾病的预防或治疗剂。
8.如权利要求7所述的医药组合物，所述组合物为支气管哮喘的预防或治疗剂。
全文摘要
本发明涉及2－氧代－1,2－二氢－1,8－二氮杂萘衍生物或其盐,其特征是3位上具有特定取代基－X－R
文档编号A61K31/444GK1382141SQ00814766
公开日2002年11月27日 申请日期2000年10月24日 优先权日1999年10月25日
发明者岩田正洋, 河野则正, 宅和知文, 白木良太, 小林幹, 竹内诚 申请人:山之内制药株式会社