抗肿瘤活性吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的联合应用的制作方法

专利名称：抗肿瘤活性吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的联合应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它疗效好的抗肿瘤药物的联合用药，尤其是那些在抑制肿瘤细胞生长方面具有协同作用的抗肿瘤药物。更具体地说，本发明涉及吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的联用制剂，一种包括给予吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的治疗方法和吲哚并吡咯并咔唑衍生物及其它抗肿瘤药物用于制备抗癌制剂的用途。
背景技术：
各种药物的发展，特别是传染病治疗药物，高血压治疗药物和高血脂治疗药物的发展延长了人类的寿命。然而人类寿命的延长增加了与年龄增长紧密相关的疾病造成的死亡率，在发达国家和发展中国家都已经成为了严重的问题。特别是在日本、欧洲和美国，患恶性肿瘤(癌症)的死亡率显著增加。治疗癌症的方法有许多，例如，手术、放射治疗、化学治疗和免疫治疗，几种方法的联合应用能够增加存活率。癌症细胞在器官间转移是治疗癌症面临的一个问题，然而手术和放射疗法对于它的治疗是有限的。因此，主要采用化学治疗，即药物治疗。
许多化学治疗药物已被报道。这些抗肿瘤药物大致分为以下几类以环磷酰胺为代表的抗肿瘤烷化剂；以5-氟尿嘧啶为代表的抗肿瘤抗代谢药；以盐酸阿霉素为代表的抗肿瘤抗生素；以长春新碱和紫杉醇为代表的源于植物的抗肿瘤药物；以顺铂为代表的抗肿瘤铂络合物；等等。本发明人发现一种新的吲哚并吡咯并咔唑衍生物具有强效的抗肿瘤活性，并将一系列化合物申请了专利(例如，美国专利No.5591842，5668271，5804564，5922860，WO 95/30682，WO96/04293，WO 98/0743，EP-A-0528030，JP-A-10-245390)。
此前，十字孢碱(Staurosporine)，即一种吲哚并咔唑衍生物，或其衍生物，和其它抗肿瘤药物的联合用药已经有文献报道(例如，JP-A-02-108636，WO 94/20106，WO 2001/04125，JP-A-08-50012，JP-A-10-500394)。然而十字孢碱和它的衍生物在结构上与本发明的通式1化合物显著不同。而且，十字孢碱及其衍生物对蛋白激酶C表现出抑制作用，而本发明的通式1化合物表现出对拓扑异构酶的抑制作用(T.Yoshinari et al.，Cancer Research，55，1310-1315(1995))。另外，现有技术并没有象本发明那样公开或主张采用通式1化合物和其它抗肿瘤药物联合用药。

发明内容
本发明的目的是通过将抗肿瘤吲哚并吡咯咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物联合用药扩大化学治疗的应用范围，并提供比单独用药时更好的抗肿瘤作用，特别是协同作用。
更具体地说，本发明的一个目的是提供包含吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物的联用制剂或混合物，协同增强抗肿瘤活性。另一目的是采用吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物联合用药治疗癌症患者。采用吲哚并吡咯并咔唑衍生物和其它抗肿瘤药物制备治疗癌症的制剂是本发明的又一个目的。
本发明的发明人对已经发现的吲哚并吡咯并咔唑抗肿瘤化合物和其它抗肿瘤药物的联合用药进行了深入的研究。结果发现联合用药展现出了优异的抗肿瘤活性，特别是增效作用。
更具体地说本发明涉及的联用制剂包含两个单独制剂，在治疗癌症中可以同时给药，分开给药或者顺序给药*一种制剂，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种通式I化合物或其可药用盐
其中R1和R2各自独立地代表氢原子，低级烷基，低级烯基，低级炔基，芳基，芳烷基或杂环基(其中低级烷基、烯基、炔基，芳基，芳烷基和杂环基可以分别有一至五个相同或不同的取代基，选自羧基、氨基甲酰基、磺基、氨基、氰基、单低级烷基氨基、双低级烷基氨基、羟基和卤原子)；式-Y-R3基团(其中Y代表羰基、硫代羰基或磺酰基，R3代表氢原子、低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、芳基、芳烷基、低级烷氧基、肼基、氨基、芳氨基、氨甲酰基或杂环基(其中低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、芳基、芳烷基和杂环基可以分别含有1-4个相同或不同取代基，选自卤原子、任选保护的羟基、氨基、羧基、氨甲酰基、氰基和低级烷氧羰基，其中氨基和氨甲酰基可以进一步被低级烷基单取代或双取代，该低级烷基则可任选地被选自卤原子、羟基、氨基、羧基、氨甲酰基和低级烷氧羰基的一个或多个取代基取代))]；或式-(CH2)m-R4基团(其中R4代表吡啶基、呋喃基或噻吩基(此处的吡啶基、呋喃基和噻吩基可以被羟基、低级烷氧基、羟基低级烷基和羟基低级链烯基单取代或双取代)，m是1-3的整数)，R1和R2合起来代表低级亚烷基(其中低级亚烷基可以有一至四个相同或不同的取代基，这些取代基选自氨基、单低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、羧基和磺基)，R1和R2和与它们键合的氮原子共同组成杂环基(其中杂环基的环上可以连有可以任选地被选自氨基、羟基、羧基和磺基的一个或多个取代基取代的低级烷基)，G代表戊糖基或己糖基，X1和X2各自独立地代表氢原子、卤原子、氨基、单低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基、芳烷氧基、羧基、低级烷氧羰基或低级烷基。
*另一种制剂，其中含有与药用载体和稀释剂组合的至少一种抗肿瘤药物，该药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物来源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物或者它们的药用盐(其中，抗肿瘤烷化剂包括氮芥N-氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺、左旋苯丙氨酸氮芥、白消安、二溴甘露醇、卡波醌、噻替哌、雷莫司汀、尼莫司汀或替莫唑胺，抗肿瘤抗代谢物包括氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤核苷、巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶(5-FU)、替加氟、优福定、去氧氟尿苷、卡莫氟(己基氨甲酰-5-FU)、阿糖胞苷、阿糖胞苷酯、依诺他滨、S-1、吉西他滨或氟达拉滨，抗肿瘤抗生素包括放线菌素D、多柔比星、柔红霉素、新制癌菌素、博来霉素、培洛霉素、丝裂霉素C、阿柔比星、吡柔比星、表柔比星、净司他丁斯酯或伊达比星，植物源的抗肿瘤药物包括长春新碱、长春碱、长春地辛、依托泊甙、索布佐生、多西他赛、紫杉醇或长春瑞滨，抗肿瘤铂络合物包括顺铂、卡铂、尼达铂或奥沙利铂，抗肿瘤喜树碱衍生物是伊立替康、托泊替康或喜树碱，抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂包括易瑞莎(Iressa)和SU5416，单克隆抗体包括IMC-C225，RhuMabVEGF或美罗华，干扰素包括干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a或干扰素γ-n1，生物反应调节物包括云芝多糖、香菇多糖、西佐喃、溶血性链球菌制剂或乌苯美司，其它抗肿瘤药物主要包括米托蒽醌、L-天冬酰胺酶、丙卡巴肼、达卡巴嗪、羟基脲、喷司他丁和维生素A酸)。多柔比星在下文中被称为阿霉素。
更具体地说，本发明涉及在治疗癌症过程中可以同时、分别或顺次给药的联用制剂，该制剂包含两个单独制剂*一种制剂，其中含有与药用载体和稀释剂组合的至少一种上述定义的通式I化合物(其中R1、R2、R3、R4、m、Y、G、X1和X2定义同权利要求1)或它的药用盐。
*另一种制剂，其中含有与药用载体和稀释剂组合的至少一种抗肿瘤药物，该药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者它的药用盐(其中，若制剂包含5-尿嘧啶，该制剂还可以包含甲酰四氢叶酸或与单独的甲酰四氢叶酸制剂联合用药)。
特别优选的是，本发明涉及的联用制剂包含两个单独制剂，可以在癌症治疗过程中同时、分别或顺次给药*一种制剂，其中含有与药用载体或稀释剂组合的式IA化合物 (以下该化合物称为化合物A)或者它的药用盐；*一种制剂，其中含有与药用载体或稀释剂组合的抗癌药，该抗癌药选自5-尿嘧啶、阿霉素、顺铂、卡铂、依立替康、托泊替康和喜树碱(其中，若制剂包含5-尿嘧啶，则它可以与单独的甲酰四氢叶酸制剂联合用药)或它们的药用盐。化合物A是6-N-(1-羟甲基-2-羟基)乙氨基-12，13-二氢-2，10-二羟基-12-(β-D-吡喃葡糖基)-5H-吲哚并[2，3-a]吡咯并[3，4-c]-咔唑-5，7(6H)-二酮。
本发明还涉及癌症的治疗方法，包括服用有效剂量的至少一种通式1化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2按照权利要求1定义)或者它的药用盐和至少一种与其合用的有效剂量的抗肿瘤药物，包括抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同上)或者它们的药用盐。
更具体地说，本发明涉及癌症的治疗方法，包括服用有效剂量的至少一种通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2同上)或者它的药用盐和与其合用的至少一种有效剂量的抗肿瘤药物，该抗肿瘤药选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者它的药用盐(其中，若通式I化合物与5-尿嘧啶联合给药，该制剂还可包含甲酰四氢叶酸)。
特别优选的是，本发明涉及癌症的治疗方法，包括治疗有效量的化合物A或它的药用盐和治疗有效量抗肿瘤药的联合用药，其中抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、卡铂、依立替康、托泊替康和喜树碱或它们的药用盐(此处，如果化合物A和5-氟尿嘧啶联合给药，还可使用甲酰四氢叶酸)。
再者，本发明还涉及应用至少一种通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2按照权利要求1定义)或者它的药用盐和至少一种抗肿瘤药物来制备抗肿瘤制剂，抗肿瘤药物是选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同上)或者它们的药用盐。
特别是，本发明涉及应用至少一种通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2按照权利要求1定义)或者它的药用盐和至少一种抗肿瘤药物来制备抗肿瘤制剂，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者它们的药用盐(其中，若化合物通式I和5-氟尿嘧啶联用，还可以使用甲酰四氢叶酸)。
特别优选的是，本发明涉及使用化合物A或它的药用盐和抗肿瘤药物来制备抗肿瘤制剂，其中抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、卡铂、依立替康、托泊替康和喜树碱或它们的药用盐(此处，如果化合物A和5-氟尿嘧啶联合给药，还可以使用甲酰四氢叶酸)。
此外，本发明还涉及一种药物组合物，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少组合一种通式I化合物或其药用盐(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2的定义同上)和至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同上)或者它们的药用盐。
更具体地说，本发明涉及一种药物组合物，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2定义同上)或其药用盐和至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；盐酸吉西他滨；盐酸阿霉素和依托泊甙；多西他赛水合物和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者它的药用盐(其中，如果组合物中包含通式I化合物和5-氟尿嘧啶，则该制剂还可包含甲酰四氢叶酸)。
特别优选的是，本发明涉及一种药物组合物，其中含有与药用载体或稀释剂组合的化合物A或它的药用盐和一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂、卡铂、依立替康、托泊替康和喜树碱或它们的药用盐(此处，如果包含通式I化合物和5-氟尿嘧啶，则还可含有甲酰四氢叶酸)。
术语“低级”被用来限定基团或化合物，此处指基团或化合物含有6个或更少，最好是4个或更少的碳原子。
“低级烷基”指含有1至6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基和己基。
“低级烯基”指含有3至6个碳原子的直链或支链烯基，例如丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、3-戊烯基和4-己烯基。
“低级炔基”指含有3至6个碳原子的直链或支链炔基，例如丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、3-戊炔基和4-己炔基。
“环烷基”指含有3至6个碳原子的环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
“环烷基-低级烷基”指环烷基取代的低级烷基，此处的环烷基和低级烷基定义同上，例如环丙甲基、环丁甲基、环戊甲基、环己甲基、1-环丙乙基、2-环丙乙基、1-环丁乙基、2-环丁乙基、1-环戊乙基、2-环戊乙基、1-环己乙基、3-环己丙基、3-环戊丙基、4-环己丁基和4-环戊丁基、环烷基-低级烷基优选共有4至10个碳原子。
“芳基”可以是单环或多环，包括含有6个至12个碳原子的芳基例如苯基、萘基和四氢萘基。
“芳烷基”指芳基取代的低级烷基，其中芳基和低级烷基定义同上，其实例包括含有7至15个碳原子的芳烷基，例如苄基、苯乙基、苯丙基、苯丁基、苯戊基、萘甲基和萘乙基。
“杂环基”包括含有1至4个选自氮、氧、硫的杂原子的五员环或六员杂环基团。包括芳香杂环和非芳香杂环，前者包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、呋咱基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基；后者包括二氢噻吩基、四氢噻吩基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、哌啶基、哌嗪基、噁唑啉基、噁唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑烷基、噻唑啉基、噻唑烷基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、1，2-二硫戊环基、1，3-二硫戊环基、1，2-二硫杂环戊二烯基、1，3-二硫杂环戊二烯基、二氢噻喃基、四氢噻喃基、1，4-二噻烷基、1，4-二硫杂环己二烯基、1，4-氧硫杂环己二烯基和硫代吗啉基。
单低级烷基氨基包括甲胺基、乙胺基、丙胺基、异丙胺基、丁胺基、戊胺基和己胺基。二低级烷基氨基包括二甲胺基、乙基甲胺基、二乙基胺基、乙基丙胺基、二丙基胺基、丁基甲基胺基、二丁基胺基、丁基乙基胺基、甲基戊基胺基、己基甲基胺基和乙基己基胺基。
芳基胺基指被上述定义的芳基取代的胺基，例如苯基胺基和萘基胺基。
卤原子包括氟、氯、溴和碘。
低级亚烷基的实例包括含有1至6个碳原子的直链或支链亚烷基，例如亚甲基、1，2-亚乙基、1，2-亚丙基、异亚丙基、1，2-亚丁基、异亚丁基、仲亚丁基、1，2-亚戊基、异亚戊基、新亚戊基和1，2-亚己基。
低级烷氧基是指由上述定义的低级烷基与氧键合成的取代基，为含有1至6个碳原子的直链或支链烷氧基，优选含有1至4个碳原子的烷氧基，更优选含有两个或一个碳原子，最优选含一个碳原子的烷氧基。例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、新戊氧基和己氧基。
低级烷氧羰基指上述定义的烷氧基与羰基键合的取代基，例如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、丁氧羰基、异丁氧羰基、戊氧羰基和己氧羰基。
芳烷氧基是芳基取代的低级烷氧基，其中芳基和低级烷氧基部分的定义如上。其实例包括苄氧基、苯基乙氧基、苯基丙氧基、α-萘甲氧基、β-萘基甲氧基、萘基乙氧基和四氢萘基甲氧基。
选择性保护的羟基的保护基包括C2-C6烷酰基，例如乙酰基、丙酰基和丁酰基；芳酰基，例如苯甲酰基；取代或未被取代的芳烷基，例如苄基和4-甲氧基苄基；形成缩醛的基团，例如丙酮化合物。
羟基-低级烷基指含有1至6个，优选1-4个，更优选2-3个碳原子的直链或支链羟烷基，例如羟甲基、羟乙基、羟丙基、羟丁基和羟己基。
羟基-低级烯基指含有2至6个碳原子，优选3-4个碳原子，更优选3个碳原子的直链或支链羟基烯基，例如3-羟基-1-丙烯基。
m是1至3的整数，优选是1。
戊糖基和己糖基是指其中的羟基任选地被选自氢原子、低级烷基、低级烷基羰氧基，低级烷氧基和氨基的1-3个相同或不同的基团取代，或任选被氧化的戊糖基和己糖基。其实例包括由戊糖和己糖衍生的基团，戊糖包括核糖、阿拉伯糖、木糖和2-脱氧核糖，己糖包括阿洛糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖胺、半乳糖胺、2-脱氧葡萄糖、4-O-甲基葡萄糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸。其优选实例包括β-D-吡喃葡糖基。
在通式I化合物中，G优选代表下式的基团 或
其中R5代表氢原子或低级烷基，R6代表羟基或氨基。
在通式I化合物中，X1和X2优选分别键合在吲哚并吡咯并咔唑环的1或2位和10或11位，它们各自独立地代表卤原子、羟基、低级烷氧基或芳基烷氧基。
在通式I化合物中，优选G代表β-D-吡喃葡萄糖基，X1和X2分别代表键合在吲哚并吡咯并咔唑环的2位和10位的羟基。
在通式I化合物中，优选R1代表氢原子，R2代表下式的基团 在通式I化合物中，优选R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表6-羟甲基吡啶-2-基。
在通式I化合物中，优选R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表吡啶-4-基。
在通式I化合物中，优选R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表5-羟甲基吡啶-4-基。
优选的是，G，X1和X2，R1和R2的优选实施方案可以任选地组合。
依据权利要求1，通式I化合物优选是通式IA化合物(即化合物A)
依据本发明，通式I化合物可以是它的药用盐的形式。这种盐的实例包括其与盐酸、硫酸等无机酸形成的酸加成盐，或者与乙酸、柠檬酸、酒石酸和马来酸等有机酸形成的酸加成盐。当本发明中的化合物含有酸性基团时，该酸性基团可以下列形式存在碱金属盐例如钾盐和钠盐；碱土金属盐，例如镁盐和钙盐；与有机碱成盐，例如乙胺盐和精氨酸盐。
本领域专业人员依据已知文献中描述的方法可以很容易地制备通式I化合物，例如可以依据美国专利Nos.5591842、5668271、5804564和5922860或其它的类似方法。
此处使用的术语药用载体或稀释剂包括溶剂例如水、生理盐水、醇(例如乙醇)、甘油和植物油；添加剂例如赋形剂、基质、崩解剂、粘合剂、润滑剂、湿润剂、稳定剂、乳化剂、分散剂、防腐剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、芳香剂、缓冲剂、加溶剂、抗菌剂、调节渗透压的盐、包衣剂和抗氧化剂。
癌症治疗指通过给癌症患者服用抗肿瘤药物抑制癌细胞的生长。最好这种治疗能够使癌的生长消退。特别是能够减少可测量的癌的尺寸。更优选的是，这种治疗能够完全消除癌症。
癌症指实体癌和血癌。实体癌包括脑瘤、头颈癌、食道癌、甲状腺癌、肺小细胞癌、肺非小细胞癌、乳腺癌、胃癌、胆囊和胆管癌、肝癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌、绒毛膜癌、子宫癌、宫颈癌、肾盂和尿道癌、膀胱癌、前列腺癌、阴茎癌、睾丸癌、胚胎癌、Wilms肿瘤、皮肤癌、恶性黑色素瘤、神经母细胞瘤、骨肉瘤、Ewing肿瘤和软组织肉瘤；优选的是结肠癌、肺小细胞癌、肺非小细胞癌、膀胱癌、头颈癌、胃癌、胰腺癌、肝癌和卵巢癌；更优选的是结肠癌、肺非小细胞癌和头颈癌。血癌包括急性白血病、慢性淋巴性白血病、慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、恶性淋巴癌、多发性骨髓瘤和Hodgkin淋巴癌。
术语制剂包括口服制剂和非肠道吸收制剂。口服制剂包括片剂、胶囊、散剂和颗粒剂。非肠道制剂包括灭菌液体制剂例如溶液剂或混悬剂；特别是注射液和输注液；优选静脉注射液或输注液；特别是静脉注射液。
联用制剂由两个或两个以上的单独制剂组成，它们在治疗过程中可以同时、单独或顺次给药。联用制剂可以是所谓的盒式制剂或药物组合物。联用制剂包括由至少一种制剂和含有两种单独制剂的用于抗癌的这种联用制剂进一步组合制成的制剂。
上面提到的两个单独制剂除了和药用载体或稀释剂组合，还可以进一步和至少一种包含至少一种抗肿瘤药的制剂联用，该抗肿瘤药包括抗肿瘤烷化剂、抗肿瘤抗代谢药、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药(其中每种抗肿瘤药定义同权利要求1)或它们的药用盐。在这种情形，上面提到的后加的至少一种制剂和以上的两个单独制剂可以同时、分别或顺次给药。例如，含三种制剂的联用制剂包括一种含有通式1化合物的制剂，一种含有5-氟尿嘧啶的制剂，和一种含有甲酰四氢叶酸的制剂。
联用制剂中的两个单独制剂中的一个或两个可以是非肠道吸收制剂，它们最好是注射或输液，特别是静脉注射。
通常，依据本发明的制剂可以包括治疗有效量的本发明化合物和药用载体或稀释剂。它的配制技术被认为是一般的工艺知识，为业内人士所熟知。优选的是，静脉输注剂或注射制剂可以采用本领域专业人员熟知的各种方法和药用载体或稀释剂组合制备。
此外，使用本发明提到的联用制剂时，给药采用非肠道给药和/或口服给药，优选非肠道给药。具体地说，联用制剂给药时两种都可以采用非肠道给药；或一种采用非肠道给药，另一种口服给药；或两者都口服给药。最好联用制剂的两种单独制剂都采用非肠道给药。非肠道给药包括例如静脉给药、皮下给药或肌内给药，其中优选静脉给药。当三种以上的制剂联用给药时，至少一种制剂可以采用非肠道给药。优选静脉给药；特别是静脉输液或注射。
在实施本发明时，通式I化合物可以与其它抗肿瘤药物同时给药。可以先服用通式I化合物，再服用其它抗肿瘤药物。或者先服用抗肿瘤药物，再服用通式I化合物。此外，也可以服用通式I化合物，片刻之后再服用其它抗肿瘤药物。或者，先服用其它抗肿瘤药物，片刻之后再服用通式I化合物。给药的顺序和间隔可以由本领域专业人员依据要使用的含通式I化合物的制剂、联用的含抗肿瘤药物的制剂、要治疗的癌细胞种类和患者状况来选定。
术语“同时地”指基本上同时服用制剂治疗疾病。术语“分别地”指不同时间分别服用制剂治疗疾病；例如，第一天服用一种药，第二天服用另一种药。术语“顺次的”指依次服用制剂；例如，先服用一种药物，在规定时间后再服用另一种药。
抗肿瘤烷化剂指具有抗肿瘤活性的烷化剂。烷化剂通常指在烷基化反应中能够提供烷基取代有机化合物的氢原子的试剂。例如，抗肿瘤烷化剂包括氮芥N-氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺、左旋苯丙氨酸氮芥、白消安、二溴甘露醇、卡波醌、噻替哌、雷莫司汀、尼莫司汀和替莫唑胺(3-甲基-4-氧代-3，4-二氢咪唑并[5，1-d][1，2，3，5]四嗪-8-甲酰胺)，其中优选环磷酰胺。
抗肿瘤抗代谢药指具有抗肿瘤活性的抗代谢药，抗代谢药通常包括扰乱正常新陈代谢的物质和能通过抑制电子转移系统从而阻止富能量中间体的生成的物质，这是由于它们具有与对于生物有机体非常重要的正常代谢物类似的结构或功能(例如，维生素、辅酶、氨基酸和糖)。抗肿瘤抗代谢物的实例包括氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤核苷、巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶(5-FU)、替加氟、优福定、去氧氟尿苷、卡莫氟(己基氨甲酰-5-FU)、阿糖胞苷(胞嘧啶阿拉伯糖甙)、阿糖胞苷酯、依诺他滨(山萮酰阿糖胞苷)、S-1、吉西他滨和氟达拉滨，其中优选5-FU、S-1和吉西他滨。5-FU优选与甲酰四氢叶酸联用。
抗肿瘤抗生素指具有抗肿瘤活性的抗生素，其中抗生素包括由微生物产生，能够抑制微生物和其它生物有机体的细胞生长和其它功能的物质。其实例包括放线菌素D(放线菌素)、多柔比星(阿霉素)、柔红霉素(道诺霉素)、新制癌菌素、博来霉素、培洛霉素、丝裂霉素C、阿柔比星(阿克拉霉素A)、吡柔比星、表柔比星、净司他丁斯酯和伊达比星，其中优选阿霉素。
植物源的抗肿瘤药物包括来源于植物并具有抗肿瘤活性的化合物以及对该化合物进行化学改性得到的新化合物。植物源的抗肿瘤药物包括长春新碱、长春碱、长春地辛、依托泊甙、索布佐生、多西他赛、紫杉醇和长春瑞滨，其中优选依托泊甙、多西他赛和紫杉醇。
抗肿瘤喜树碱衍生物包括喜树碱本身，专指结构上与喜树碱相关，用于抑制癌细胞生长的化合物。该类化合物包括但不仅仅局限于喜树碱、10-羟基喜树碱、托泊替康、依立替康和9-氨基喜树碱，其中优选喜树碱、托泊替康和依立替康。依立替康在体内代谢，显示出与SN-38相当的抗肿瘤活性。喜树碱衍生物的作用机理和活性与喜树碱基本相同。(例如，Nitta等，Gan to Kagaku Ryouhou(癌及化学疗法)，14，850-857(1987))。
抗肿瘤铂络合物指具有抗肿瘤活性的铂络合物，此处铂络合物中的铂以离子形式存在。优选的铂络合物有顺铂、顺-二胺二水合铂(II)离子、氯化氯·(二亚乙基三胺)合铂(II)、二氯(乙二胺)合铂(II)、1，1-环丁二羧酸根)二胺合铂(II)(卡铂)、螺铂、异丙铂、(2-乙基丙二酸根)二胺合铂(II)、乙二胺丙二酸根铂(II)、(1，2-二氨基二环己烷)水合硫酸合铂(II)、(1，2-二氨基二环己烷)水合丙二酸根合铂(II)、(1，2-二氨基环己烷)丙二酸根合铂(II)、(4-羧基邻苯二甲酸根)(1，2-二氨基环己烷)合铂(II)、(1，2-二氨基环己烷)-(异柠檬酸根)合铂(II)、(1，2-二氨基环己烷)-(草酸根)合铂(II)、奥马铂、四铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂。优选的铂化合物包括顺铂(即，顺-二氯二氨合铂(II))、卡铂和奥沙利铂。顺铂已经有商品上市。此处其它列举的抗肿瘤铂络合物是已知的，有市售商品和/或可以由本领域专业人员按照常规方法制备。
抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂指具有抗肿瘤活性的酪氨酸激酶抑制剂，该酪氨酸激酶抑制剂指能够抑制酪氨酸激酶活性的化学物质，酪氨酸激酶可以将ATP中的磷酸根转移到蛋白质中特定酪氨酸的羟基上。该抑制剂包括易瑞莎(ZD-1839；N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉胺)和SU5416(Semaxanib；(3Z)-3-[(3，5-二甲基-1H吡咯-2-基)亚甲基]-1，3-二氢-2H吲哚-2-酮)。
单克隆抗体是由单克隆的抗体生成细胞产生的抗体，其实例包括IMC-C225(西妥昔单抗)，RhuMabVEGF(贝伐单抗)和美罗华。
干扰素指具有抗肿瘤活性的干扰素，通常它们是具有20000分子量的糖蛋白，绝大多数动物细胞遭到病毒感染时产生并分泌这种糖蛋白，它们不仅能够抑制病毒生长，还有许多免疫效应机制，例如抑制细胞(尤其是肿瘤细胞)生长，增强天然杀伤细胞活性，它们隶属于一类细胞因子。干扰素的实例包括干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a和干扰素γ-n1。
总的来说，生物反应调节物是对能够调节生物有机体防御机制和生物反应的物质或药物的总称。生物反应包括组织细胞的存活、生长、分化，使其能够用于个体抵御肿瘤、感染和其它疾病。
生物反应调节物的实例包括云芝多糖、香菇多糖、西佐喃、溶血性链球菌制剂和乌苯美司。
其它抗肿瘤药物是指不属于上面任何抗肿瘤药物的具有抗肿瘤活性的药物，主要包括米托蒽醌、L-天冬酰胺酶、丙卡巴肼、达卡巴嗪、羟基脲、喷司他丁和维生素A酸。
抗肿瘤烷化剂、抗肿瘤抗代谢药、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物已被熟知，商品化，或可以被本领域专业人员用熟知的或常规的方法制备。例如，美国专利No.5792783描述了SU-5416的制备方法；美国专利No.5770599描述了易瑞莎的制备过程；WO 96/40210描述了IMC-C225的制备方法；WO 94/10202描述了RhuMab-VEGF的制备方法；美国专利Nos.5420319和5959133描述了奥沙利铂的制备方法；美国专利Nos.5434254和5223608描述了吉西他滨的的制备方法；美国专利Nos.5162532、5247089、5191082、5200524、5243050和5321140描述了喜树碱的制备方法；美国专利Nos.4604463描述了依立替康的制备方法；美国专利Nos.5734056描述了托泊替康的制备方法；JP-B-4-5029描述了替莫唑胺的制备方法；JP-A-2-503143描述了美罗华的制备方法。
上面提到的抗肿瘤烷化剂已经商品化例如，氮芥N-氧化物有氧氮芥(商品名，Mitsubishi Pharma Corporation)；环磷酰胺有癌得星(商品名，Shionogi Co.，Ltd.)；异环磷酰胺有Ifomide(商品名称，Shionogi & Co.，Ltd.)；左旋苯丙氨酸氮芥有Alkeran(商品名，GlaxoSmithKline)；白消安有Mablin(商品名，Takeda ChemicalInd.)；二溴甘露醇有Myebrol(商品名，Kyorin Pharmaceutical)；卡波醌有Esquinon(商品名，Sankyo Co)；噻替哌有Tespamin(商品名，Sumitomo Pharmaceuticals Co.，Ltd.)；雷莫司汀有Cymerin(商品名，Mitsubishi Pharma Corporation)；尼莫司汀有Nidran(商品名，Sankyo Co)。
上面提到的抗肿瘤抗代谢药有商品面世例如，氨甲蝶呤有Metbotrexate(商品名，Takeda Chemical Ind.)；6-巯基嘌呤核苷有Thioinosie(商品名，Aventis)；巯基嘌呤有Leukerin(商品名，Takeda Chemical Ind.)；5-尿嘧啶有5-FU(商品名，DYOWA HAKKOKOGYO Co.，Ltd.)；替加氟有Futraful(商品名，THIHOPharmaceutical Co.，Ltd.)；去氧氟尿苷有Furtulon(商品名，NipinRoche K.K.)；卡莫氟有Yamafur(商品名，YamanouchiPharmaceutical)；阿糖胞苷有Cylocide(商品名，NipponShinyaku)；阿糖胞苷酯有Starasid(商品名，Nippon Kayaku)；依诺他滨有Sunrabin(商品名，ASAHI KASEI CORP.)；S-1有TS-1(商品名，TAIHO Pharmaceutical Co.，Ltd.)；吉西他滨(Qventas，美国)；氟达拉滨有Fludara(商品名，Nihon Schering)。
上面提到的抗肿瘤抗生素已经商品化例如，放线菌素D有Cosmegen(商品名，BANYU PHARMACEUTICL Co.，Ltd)；阿霉素有Adriacin(商品名，KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.)；柔红霉素有Daunomycin(商品名，MEIJI SEIKA KAISHA，LTD.)；新制癌菌素有Neocarzinostatin(商品名，Yamanouchi Pharmaceutical)；博来霉素有Bleo(商品名，Nippon Kayaku)；培洛霉素有Pepleo(商品名，Nippon Kayaku)；丝裂霉素C有Mitomycin(商品名，KYOWA HAKKOKOGYO Co.，Ltd)；阿柔比星有Aclacinon(商品名，YamamouchiPharmaceutical)；吡柔比星有Pinorubin(商品名，Nippon Kayaku)；表柔比星有Pharmorubicin(商品名，Pharmacia K.K.)；净司他丁有SMANCS(商品名，Yamanouchi Pharmaceutical)；伊达比星有Idamicin(商品名，Pharmacia K.K.)。
上面提到的植物源的抗肿瘤药已经商品化例如，长春新碱有Oncovin(商品名，Shionogi Co.，Ltd.)；长春碱有Vinblastine(商品名，Kyorin Pharmaceutical)；长春地辛有Fildesin(商品名，Shionogi Co.，Ltd.)；依托泊甙有Lastet(商品名，Nippon Kayaku)；索布佐生有Perazolin(商品名，AENYAKU KOGYOCO，.LTD.)；紫杉醇有Taxol(商品名，Bristol)；长春瑞滨有Navelbine(商品名，KYOWAHAKKO KOGYO Co.，Ltd)。
上面提到的抗肿瘤铂络合物已经商品化例如，顺铂有Randa(商品名，Yakult)；卡铂有Paraplatin(商品名，Bristol)；奈达铂有Aqupla(商品名，Shionogi Co.，Ltd.)；以及奥沙利铂(Desynth S.A.，美国)。
上面提到的抗肿瘤喜树碱衍生物已经商品化例如，依立替康有Campto(商品名，Yakult)；托泊替康(Qventas，美国)；喜树碱(AldrichChemical Company，Inc，美国)。
上面提到的干扰素已经商品化例如，干扰素α有Sumiferon(商品名，Sumitomo Pharmaceutical Co.，Ltd.)；干扰素α-2a有Canferon-A(商品名，takeda Chemical Ind.)；干扰素α-2b有IntronA(商品名，Schering-Pliugh)；干扰素β有IFNβ(商品名，MOCHIDAPHARMACEUTICAL CO.，LTD.)；干扰素γ-1a有Imunomax-γ(商品名，Shionogi & Co.，Ltd.)；干扰素γ-n1有Ogamma(商品名，OtsukaPharmaceutical Co.，Ltd.)。
上面提到的生物反应调节物已经商品化例如，云芝多糖有Krestin(商品名，Sankyo Co)；香菇多糖有Lentinan(商品名，Aventis)；西佐喃有Sonifiran(商品名，Kaken PharmaceuticalCo.，Ltd.)；溶血性链球菌制剂有Picibanil(商品名，ChugaiPharmaceutical Co.，Ltd.)；乌苯美司有Bestatin(商品名，NipponKayaku)。
上面提到的其它抗肿瘤药物已经商品化例如，米托蒽醌有Novantrone(商品名，Wyeth Lederle(日本)Ltd.)；L-天冬酰胺酶有Leunase(商品名，KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.)；丙卡巴肼有Natulan(商品名，Nippon Roche K.K.)；达卡巴嗪有Dacarbazine(商品名，KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.)；羟基脲有Hydrea(商品名，Bristol)；喷司他丁有Coforin(商品名，Kagakuoyobi KesseiRyouhou Kenkyuusho)；维生素A酸有维A酸胶囊剂(Nippon RocheK.K.)。
在本发明的方法中，优选的治疗单位依据不同的条件而不同，例如，通式I化合物的给药方式、通式I化合物的种类、通式I化合物的剂型、其它联用的抗肿瘤药物的种类、它们的给药方式和剂型；癌细胞的种类和患者的状况。专业人员在常规的治疗单位的基础上和/或考虑本说明书的内容，可以选择一种最佳的治疗方案。
更具体地说，本发明的方法中通式1化合物的治疗单位会随着所用的化合物的种类、联用组分的种类、用药频率和要治疗的具体部位、病情、患者年龄、医生的诊断和癌症的种类的不同而变化。例如，作为暂行措施成人口服给药每天的剂量在1至500mg范围内。在非肠道吸收给药的情形，优选静脉给药，最好是静脉滴注，每日的剂量为1至100mg/m2(体表面积)，10至15mg/m2(体表面积)更好，最好是13mg/m2(体表面积)。静脉滴注可以连续给药1至4小时，2至3小时较好，2小时最佳。给药频率依据给药方式和症状而变化；比如，每日1至5次，优选每日1或2次，每日一次更好。或者是，可以采用定期间隔给药，例如，隔日给药。非肠道吸收给药的停药周期可以是1至6周，优选2至4周，最好3至4周。
和通式I化合物联用的其它抗肿瘤药物的治疗单位没有特别限定，但可以任选地由专业人员依据已知文献确定。示例如下5-氟尿嘧啶(5-FU)D的治疗单位如下口服给药，每天200至300mg，每日1至3次；静脉注射或静脉滴注给药每日给药5至15mg/kg，连续给药5天，每天一次，然后再隔日给药一次，每次5至7.5mg/kg(其中剂量可以适当减少或增加)。
S-1(替加氟、Gimestat、Otastat钾)的治疗单位是，起始剂量(单剂量)依据体表面积采用下列标准；口服每日两次，亦即早餐和晚餐后服用，连续服药28天，然后停药14天。这是一个疗程，再重复该疗程的治疗。单位体表面积的起始标准量为少于1.25m240mg/剂量，1.25m2或更高至少于1.5m250mg/剂量，1.5m2或以上60mg/剂量。依据患者的病情可以适当降低或升高该标准。
吉西他滨的治疗单位为，静脉滴注30分钟，剂量是1mg/m2，每周给药一次，连续给药3周，第四周停药。这是一个疗程，重复上述疗程。依据患者的年龄、病症和药物的副作用，剂量可以适当减少。
阿霉素(例如盐酸阿霉素)的治疗单位如下静脉注射，每次10mg(0.2mg/kg)(效价)，每日一次，连续给药4至6天，停药7至10天。这是一个疗程，再重复2至3次。总剂量最好不要超过500mg(效价)/m2(体表面积)，在此范围内可以适当地上下浮动。
依托泊甙的治疗单位如下静脉注射，每天给药60至100mg/m2(体表面积)，连续给药5天，然后停药3周(其中剂量可以适当增减)。以上为一个疗程，再重复此步骤与之相比相反，口服给药每日给药175至200mg，连续给药5天，然后停药3周(其中剂量可以适当增减)。以上为一个疗程，重复该步骤。
多西他赛(多西他赛水合物)的治疗单位为，静脉滴注给药，每日一次，每次给药持续1小时或1小时以上，剂量为60mg/m2(体表面积)，3至4周完成给药(其中剂量可以适当增减)。
紫杉醇的治疗单位为，静脉滴注给药，剂量为210mg/m2(体表面积)，每次给药历时3小时，每日一次，给药后至少停药3周。这是一个疗程，重复该步骤。此剂量可以适当增减。
顺铂的治疗单位如下静脉注射剂量是50至70mg/m2(体表面积)，每日一次，给药后停药3周或3周以上(其中剂量可以适当增减)。这是一个疗程，重复该步骤。
卡铂的治疗单位为静脉滴注剂量是300至400mg/m2，每日一次，每次历时30分钟或30分钟以上。服药后停药至少4周(其中剂量可以适当增减)。这是一个疗程，重复该步骤。
奥沙利铂的治疗单位为85mg/m2，静脉注射每日一次，服药后停药两周。这是一个疗程，重复该步骤。
依立替康(盐酸依立替康)的治疗单位为100mg/m2，静脉滴注每日一次，一周给药3至4次，停药至少两周。
托泊替康的治疗单位为1.5mg/m2，静脉滴注每日一次，历时5天，给药后停药3周。
环磷酰胺的治疗单位为静脉注射每日一次，给药100mg。如果患者可以接受，剂量可以增加到每日200mg。总共给药3000至8000mg；剂量可以适当增减。必要的话，可以肌内注射、胸内注射或肿瘤内注射。与其相比，口服给药每日剂量是100至200mg。
易瑞莎的治疗单位为口服给药，每日一次250mg。
SU5416的治疗单位为静脉滴注剂量是145mg/m2，每周两次，每次历时60分钟，给药四周。这是一个疗程，重复该步骤。
IMC-C225的治疗单位为第一天静脉滴注400mg/m2，后来改为每周250mg/m2。
RhuMabVEGF的治疗单位为静脉滴注每周3mg/kg。
当5-FU与甲酰四氢叶酸联合用药时，治疗单位为第1天至第5天静脉滴注，5-FU425mg/m2，甲酰四氢叶酸200mg/m2。停药4周后再次给药。
本发明的联用制剂中包含的单独制剂可以有多种形式，包括口服制剂，例如片剂、胶囊、散剂、颗粒剂或溶剂；非肠道吸收无菌液体制剂，栓剂或软膏，例如溶液剂或混悬剂。
固体制剂可以被制成片剂、胶囊、散剂或颗粒剂，也可以用适当的载体(添加剂)制备。载体(添加剂)包括糖例如乳糖和葡萄糖；淀粉例如谷物、小麦和大米淀粉；脂肪酸例如硬脂酸；无机盐例如硅铝酸镁和无水磷酸钙；合成聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮和聚亚烷基二醇；脂肪酸盐，例如硬脂酸钙和硬脂酸镁；醇，例如硬脂醇和苯甲醇；合成纤维素衍生物，例如甲基纤维素，羧甲基纤维素，乙基纤维素或羟丙甲基纤维素；以及常用添加剂例如明胶、滑石、植物油或阿拉伯树胶。
通常，象片剂、胶囊、颗粒剂和散剂这样的固体制剂，在整个制剂重量中，通式1化合物含量可以达到0.1至100％，优选5至100％，更优选为5至60％，最好是活性成分占5至40％。
液体制剂可以用水、醇或合适的添加剂制备成混悬液、糖浆、注射液、输注液(静脉输液)等形式。制备液体制剂常用的添加剂包括植物油，例如大豆油、花生油或芝麻油。
特别是，当制剂采用肌内注射、静脉注射或皮下注射非肠道给药时，合适的溶剂或稀释剂包括注射用的蒸馏水、盐酸利多卡因水溶液(用于肌内注射)、生理盐水、葡萄糖水溶液、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、静脉注射液(例如，柠檬酸和柠檬酸钠的水溶液)或电解质溶液(用于静脉滴注或静脉注射)或它们的混合溶液。
注射剂可以是事先已溶解的溶液状态，或者是粉末状或适当载体(添加剂)状态，给药前再将其溶解。这些注射剂可以含有占整个制剂重量例如0.1至10％，最好为0.1至5％的活性成分。
口服给药的液体制剂例如混悬剂或糖浆，可以含有占制剂总重量0.5至10％的活性成分。
依据本发明，联用制剂中的每种制剂均可以由本领域专业人员依据常规和通用方法制备。例如，当与通式1化合物联用的含其它抗肿瘤药物的制剂为口服制剂时，可以通过将适量抗肿瘤药物与适量乳糖混合填入适于口服制剂的明胶胶囊来制备该制剂。另一方面，当含抗肿瘤药物的制剂是注射剂时，可以通过将适量抗肿瘤药物与适量的0.9％生理盐水混合填入注射用小瓶来制备该制剂。
而且，本发明的含有通式1化合物和其它抗肿瘤药物的联用制剂容易由本领域专业人员按照常规或通用方法制备。
附图简介

图1显示化合物A和顺铂联合用药的协同作用。图2显示化合物A和卡铂联合用药的协同作用。图3显示化合物A和5-FU/甲酰四氢叶酸联用对肿瘤生长的显著抑制作用。
最佳实施方式本发明将参照以下实施例作更详细的说明，但本发明不仅限于这些实施例。
首先描述联用制剂中含通式1化合物的制剂的制备实施例。本发明的联用制剂中，含通式I化合物的制剂之外的其它制剂已经商品化，或者容易由本领域专业人员依据常规文献或通用方法制备。
制备例1包含化合物式IA(化合物A)的注射制剂的制备注射用蒸馏水(55L)加热至60至65℃，加入6kg葡萄糖(日本药典)，搅拌使其溶解。加入适量热的注射用蒸馏水补足体积至60L；加入18g化合物A；将混合物搅拌两小时至固体全部溶解。加入冷却的注射用蒸馏水(58L)，混合物继续搅拌。将混合物冷却至室温，再加入注射用蒸馏水，使混合物溶液体积达到120L。得到的溶液消毒，滤过0.22μ滤膜，滤液灌封于消毒过的塑料袋中，每袋255至265ml。
制备例2包含化合物式IA(化合物A)的口服制剂的制备4500g乳糖、3950g微晶纤维素、200g羟丙基纤维素、300g交联的羧甲基纤维素钠和1000g化合物A一起在高速搅拌的制粒机中混合搅拌。加入2000g纯净水，搅拌制粒。颗粒经流化床烘干机干燥，由Comill粉碎。将得到的颗粒与50g硬脂酸镁在V形混合器中混合润滑。再将产品在制片机中压模制成200mg的片剂。
实施例1联合用药的细胞活性a)试剂胎牛血清来自Moregate，DMEM介质来自Asahi Techno GlassCorporation。化合物A(式IA化合物)按照Ohkubo等的方法合成(M.Ohkubo等，Bioorg.& Med.Chem.Lett.，9，3307-3312(1999))。顺铂(CDDP，注射)来自Nippon Kayaku；喜树碱(CPT)来自Sigma；阿霉素(ADM，Adriacin)来自KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.；长春新碱(VCR，Oncovin)来自Shionogi & Co.Ltd.；卡铂(CBDCA)来自Sigma。
b)细胞HCT116人大肠癌细胞，SCC-25人舌癌细胞，A427人肺非小细胞癌细胞和J82人膀胱癌细胞来自美国模式培养物保藏所(ATCC)。
c)活性评价方法细胞混悬于加有10％FCS的DMEM介质中，细胞混悬液接种在96孔板上，每孔为1000个细胞/50μl。在37℃5％CO2-95％空气环境下培养过夜。每种药物用二甲基亚砜或适当溶剂稀释，将50μl的一种药物或两种药物滴加到接种有细胞的孔内，在37℃5％CO2-95％空气环境下继续培养3天。用WST-8方法检测细胞的生长(H.Tominaga等，Anal.commun.，36，47-50(1999))。此处使用的WST-8方法包括几个步骤向每个板孔加入10μLWST-8试剂，继续在37℃培养1至6小时，搅动该板，比色法测定产生的甲的量，确定药物的抑制率。
采用等效剂量分析方法评价两种药物间的相互作用(G.G.Steel和M.Peckham，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，5，85-91(1979))。依照此方法，确定每种药物的50％生长抑制浓度(IC50)，将细胞存活率和相对浓度(相对于IC50为1.0时的药物浓度)作图。随后使用由每种药物得到的图；假设联合用药的各个药物有不同的作用机制(模式1)或相似的作用机制(模式2)；绘制出两条曲线(见图1)。当代表实际联合使用时肿瘤生长抑制率的点落在两条线之间时，药物间的作用具有叠加作用。当点落在两条线下面时，药物之间具有协同作用。当点落在两条线上面时，药物之间具有拮抗作用。图1表示化合物A与顺铂联合给药具有协同作用。图2表示化合物A与卡铂联合给药具有协同作用。活性评价如下所述。
表1化合物A和其它抗肿瘤药物联合用药的活性

S协同效应，CDDP顺铂，CPT喜树碱，ADM沙霉素(doxorubicin)CBDCA卡铂正如表1所示，化合物A与顺铂、阿霉素和卡铂联合用药表现出协同抗肿瘤活性。
实施例2联合用药活性的动物试验(1)a)小鼠和癌细胞雌性CDF1小鼠(4或5周龄)来自Charles River Japan，Inc。P388小鼠血癌细胞来自国家癌症中心。
b)试剂化合物A、顺铂、依托泊甙和阿霉素与例1相同。
c)活性评价方法每只小鼠腹膜移植P388小鼠血癌细胞(1×106细胞)(第0天)。次日(第1天)腹膜给药。一种或两种药物观察给药组和未给药的空白组小鼠存活天数。试验结束(30天)仍然存活，而且没有存留腹膜通的语音业务还是传真或MODEM业务，以便调整DSP(数字信号处理器)的参数(如调整增益、抖音缓冲Jitter buffer等参数)，以适应不同的业务，从而提高传输质量。
还有一种是T.38方式，T.38协议是ITU-T(国际电联)引入的实时IP传真传输标准，T.38协议中定义了IP网络部分终端间传真系统传输的过程，传真信号首先经过语音/传真网关的调制后，通过TCP(传输控制协议)或者UDP(用户数据报协议)在IP网络中以IP传真包的形式传送。如图2所示，媒体网关(MG)把传真机间协商的信号和数据信号解析出来，转换成T.38报文，在因特网上通过实时传输协议(RTP)进行传输，另一端的媒体网关从T.38报文中复原出原来的传真协商信号和数据信号。
采用T.38方式时，已经隐含表明是传真业务(FAX)，而采用G.711方式时，媒体网关需要根据呼叫类型(如传真、数据、文本或语音)来调整网关DSP的一些参数，以便提高传输质量，但是目前MGCP协议中没有适当的参数用于传递这个信息。
现有技术可以通过MGCP协议中的回声抑止(EC)和静音检测(SS参数的组合来区别语音、传真和MODEM这3种业务。在MGCP协议中EC参数指示网关是否打开回声抑制功能(Echo Control)，SS参数指示网关是否打开静音检测功能(Silence Suppression)。如下表所示

上述方案借用了EC和SS参数，当EC和SS都为ON时，为传真业务；当EC、SS一个为ON，一个为OFF时，为语音业务；当EC和SS都为OFF时，为MODEM业务。
c)活性评价方法将持续保持在裸鼠皮下的HCT116细胞制成3mm见方的切片，取一片移植到试验裸鼠皮下部位。当皮下组织肿瘤体积达到0.07cm3至0.36cm3时，将小鼠随机分成4组，如表3所示(0天)。
表3 例3中的组别

在0天和7天，将化合物A(0.3mg/kg)尾静脉给药。在2，4，9和11天，甲酰四氢叶酸(83.3mg/kg)尾静脉给药。给药1小时后，将5-FU按照10mg/kg尾静脉给药。
肿瘤的体积根据其长轴和短轴由下面的公式计算得出肿瘤体积(cm3)＝((长轴(cm)×短轴(cm))2/2)随时监测肿瘤体积与给药初期相比较。试验评价化合物A给药组，5-FU和甲酰四氢叶酸联合给药组，化合物A、5-FU和甲酰四氢叶酸联合给药组之间此数值的显著差异性(Mann-Whiteney’s U-检测)。试验确定化合物A+5-FU+甲酰四氢叶酸联合给药组相对于化合物A给药组和5-FU和甲酰四氢叶酸联合给药组有显著差异(P＜0.05)；这些药物被断定具有联合用药显示的效果(见表4)。图3显示化合物A与5-FU/甲酰四氢叶酸联用具有明显的抑制肿瘤生长的活性。
表4 给药14天后肿瘤体积与联合用药的肿瘤生长抑制活性

实施例4联合用药降低毒性a)小鼠和癌细胞雌性CDF1小鼠(4-5周龄)和P388小鼠血癌细胞同实施例2。
b)试剂化合物A和阿霉素同实施例1。
c)活性评价方法每只小鼠腹膜内移植P388小鼠血癌细胞(1×106个细胞)(0天)。次日(1天)将一种药或两种药腹膜内给药。观察不给药的空白对照组和给药组的小鼠存活天数。试验结束时仍然存活并且无腹水存留的小鼠被认定完全康复，并将谈们的存活天数计算为60天。寿命延长比率(ILS％)计算方法同实施例2。
确定了单独使用化合物A，单独使用ADM，或联合使用化合物A和ADM表现出等价的ILS％值所需的剂量。按照该剂量皮下给药每日一次，连续给药5天。此后，无论小鼠存活还是死亡，都判断降低毒性的效果。记录给药前和给药后次日之间的体重变化作为毒性指标。
表5和表6明确显示，化合物A和阿霉素联合给药可以显著减少每种药物的剂量，从而降低副作用。
表5化合物A与ADM(阿霉素)联合用药的活性

ADM阿霉素(dxorubisin)
表6化合物A和阿霉素联合用药的降低毒性活性

ADM阿霉素(doorubisin)工业应用通式1化合物(特别是化合物A)和其它抗肿瘤药物(例如，顺铂、阿霉素、卡铂和5-FU/甲酰四氢叶酸)体内外都显示出协同抗肿瘤活性。这些药物的联合用药可以显著降低每种药物的剂量(例如，化合物A和阿霉素联合用药)。因此，可以预见通式1化合物(特别是化合物A)和其它药物的联用可以有更广泛的应用。特别是，当通式1化合物(特别是化合物A)表现出与其它药物协同作用时，通式1化合物(特别是化合物A)的使用剂量可以少于单独用药的剂量。这还导致降低副作用的附带好处。
权利要求
1.一种用来在治疗癌症中同时给药，分别给药或顺序给药的联用制剂，其中包含两个单独制剂，*一种制剂，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种通式I化合物或其可药用的盐 [其中R1和R2分别代表氢原子，低级烷基，低级烯基，低级炔基，芳基，芳烷基或杂环基(其中低级烷基、低级烯基、低级炔基，芳基，芳烷基和杂环基可以分别有一至五个-5相同或不同的取代基，这些取代基选自羧基、氨甲酰基、磺基、氨基、氰基、单低级烷基氨基、双低级烷基氨基、羟基和卤原子)；或者式-Y-R3基团{其中Y代表羰基、硫代羰基或磺酰基，R3代表氢原子、低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、芳基、芳烷基、低级烷氧基、肼基、氨基、芳氨基、氨甲酰基或杂环基(其中低级烷基、环烷基、环烷基低级烷基、芳基、芳烷基和杂环基可以分别含有一至四个相同或不同取代基，这些取代基选自卤原子、任选保护的羟基、氨基、羧基、氨甲酰基、氰基和低级烷氧羰基，其中氨基和氨甲酰基可以进一步被低级烷基单取代或双取代，该低级烷基可任选地被一个或多个选自卤原子、羟基、氨基、羧基、氨甲酰基和低级烷氧羰基取代)}；或者式-(CH2)m-R4基团{其中R4代表吡啶基、呋喃基或噻吩基(此处的吡啶基、呋喃基和噻吩基均可以有选自羟基、低级烷氧基、羟基低级烷基和羟基低级链烯基的1或2个取代基取代)，m是1-3的整数}，R1和R2合起来代表低级亚烷基(其中低级亚烷基可以有选自是氨基、单低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、羧基和磺基的1-4个相同或不同的取代基)，或者R1和R2和与它们键合的氮原子共同组成杂环基团(其中杂环基的环上可以连有任选被选自氨基、羟基、羧基和磺基的一个或多个基团取代的低级烷基)，G代表戊糖基或己糖基；X1和X2各自独立地代表氢原子、卤原子、氨基、单低级烷基氨基、二低级烷基氨基、羟基、低级烷氧基、芳烷氧基、羧基、低级烷氧羰基或低级烷基]；*一种制剂，其中含有与药用载体和稀释剂组合的至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物或它们的药用盐(其中，抗肿瘤烷化剂是N-芥氮氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺、左旋苯丙氨酸氮芥、白消安、二溴甘露醇、卡波醌、噻替哌、雷莫司汀、尼莫司汀或替莫唑胺，抗肿瘤抗代谢物是氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤核苷、巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶、替加氟、优福定、去氧氟尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、阿糖胞苷酯、依诺他滨、S-1、吉西他滨或氟达拉滨，抗肿瘤抗生素是放线菌素D、阿霉素、柔红霉素、新制癌菌素、博来霉素、培洛霉素、丝裂霉素C、阿柔比星、吡柔比星、表柔比星、净司他丁斯酯或伊达比星，植物源抗肿瘤药物是长春新碱、长春碱、长春地辛、依托泊甙、索布佐生、多西他赛、紫杉醇或长春瑞滨，抗肿瘤铂络合物包括顺铂、卡铂、尼达铂或奥沙利铂，抗肿瘤喜树碱衍生物是伊立替康、托泊替康或喜树碱，抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂是易瑞莎或SU5416，单克隆抗体是IMC-C225，RhuMabVEGF或美罗华，干扰素包括干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a和干扰素γ-n1，生物反应调节物是云芝多糖、香菇多糖、西佐喃、溶血性链球菌制剂或乌苯美司，其它抗肿瘤药物是米托蒽醌、L-天冬酰胺酶、丙卡巴肼、达卡巴嗪、羟基脲、喷司他丁或维生素A酸)。
2.一种用来在治疗癌症中同时、分别或顺次给药的联用制剂，该制剂包含两个单独制剂*一种制剂，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种上述权利要求1定义的通式I化合物(其中R1、R2、R3、R4、m、Y、G、X1和X2定义同权利要求1)或它的药用盐；*一种制剂，其中含有与药用载体和稀释剂组合的至少一种抗肿瘤药物，抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者它的药用盐(其中，如果制剂包含5-尿嘧啶，则它还可以包含甲酰四氢叶酸或与单独的甲酰四氢叶酸制剂联合)。
3.权利要求2中定义的联用制剂，其中G代表下式的基团 或 其中R5代表氢原子或低级烷基，R6代表羟基或氨基。
4.权利要求3所述的联用制剂，其中X1和X2分别键合在吲哚并吡咯并咔唑环的1或2位和10或11位，它们各自独立地代表卤原子、羟基、低级烷氧基或芳基烷氧基。
5.权利要求4所述的联用制剂，其中G代表β-D-吡喃葡糖基，X1和X2分别代表键合在吲哚并吡咯并咔唑环2位和10位的羟基。
6.权利要求5所述的联用制剂，其中R1代表氢原子，R2代表下式的基团
7.权利要求5所述的联用制剂，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表6-羟甲基吡啶-2-基。
8.权利要求5所述的联用制剂，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表吡啶-4-基。
9.权利要求5所述的联用制剂，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表5-羟甲基吡啶-4-基。
10.权利要求1或2所述的联用制剂，其中权利要求1中定义的通式I化合物是通式IA化合物
11.权利要求10所述的联用制剂，其中依据权利要求1的两个单独制剂中的一个或二者是非肠道吸收给药制剂。
12.权利要求11所述的联用制剂，其中依据权利要求1的两个单独制剂是的一个或二者是注射剂或输注液。
13.权利要求12所述的联用制剂，它还与至少一种制剂联用，该制剂包含和药用载体或稀释剂组合的至少一种抗肿瘤药物，抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂、抗肿瘤抗代谢药、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药(其中每种抗肿瘤药定义同权利要求1)或其药用盐。
14.一种治疗癌症的方法，包括给予癌症患者(a)治疗有效量的至少一种权利要求1中定义的通式1化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2同权利要求1定义)或其药用盐；以及(b)治疗有效量的至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同权利要求1)或者其药用盐。
15.一种治疗癌症的方法，包括给予癌症患者(a)治疗有效量的至少一种权利要求1中定义的通式1化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2的定义同权利要求1)或其药用盐；和与其联用的(b)治疗有效的至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者其药用盐(其中，如果权利要求1中定义的通式I化合物与5-尿嘧啶联合给药，该制剂可还包含甲酰四氢叶酸)。
16.权利要求15的方法，其中G是下式的基团 或 其中R5代表氢原子或低级烷基，R6代表羟基或氨基。
17.权利要求16的方法，其中X1和X2分别键合在吲哚并吡咯并咔唑环的1或2位和10或11位，它们各自独立地代表卤原子、羟基、低级烷氧基或芳基烷氧基。
18.权利要求17的方法，其中G代表β-D-吡喃葡糖基，X1和X2分别代表键合在吲哚并吡咯并咔唑环2位和10位的羟基。
19.权利要求18的方法，其中R1代表氢原子，R2代表下式的基团
20.权利要求18的方法，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4其中R4代表6-羟甲基吡啶-2-基。
21.权利要求18的方法，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表吡啶-4-基。
22.权利要求18的方法，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表5-羟甲基吡啶-4-基。
23.权利要求14或15的方法，其中权利要求1中定义的通式I化合物是通式IA化合物
24.至少一种权利要求1所述的通式1化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2的定义同权利要求1)或者其药用盐；和至少一种抗肿瘤药物用来制备抗癌制剂的用途，该抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同权利要求1)或者其药用盐。
25.至少一种权利要求1所述的通式1化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2的定义同权利要求1)或者其药用盐；和至少一种抗肿瘤药物用来制备抗癌药剂的用途，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；吉西他滨；阿霉素和依托泊甙；多西他赛和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者其药用盐。
26.权利要求25中的用途，其中G是下式的基团 或 其中R5代表氢原子或低级烷基，R6代表羟基或氨基。
27.权利要求26中的用途，其中X1和X2分别键合在吲哚并吡咯并咔唑环的1或2位和10或11位，它们各自独立地代表卤原子、羟基、低级烷氧基或芳基烷氧基。
28.权利要求27中的用途，其中G代表β-D-吡喃葡糖基，X1和X2分别代表键合在吲哚并吡咯并咔唑环2位和10位的羟基。
29.权利要求28中的用途，其中R1代表氢原于，R2代表下式的基团
30.权利要求28中的用途，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表6-羟甲基吡啶-2-基。
31.权利要求28中的用途，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表吡啶-4-基。
32.权利要求28中的用途，其中R1代表氢原子，R2代表-CH2-R4，其中R4代表5-羟甲基吡啶-4-基。
33.权利要求24或25中的用途，其中权利要求1中定义的通式I化合物是通式IA化合物
34.一种药物组合物，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种如上定义的通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2的定义同上)或其药用盐和至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自抗肿瘤烷化剂药物、抗肿瘤抗代谢药物、抗肿瘤抗生素、植物源的抗肿瘤药物、抗肿瘤铂络合物、抗肿瘤喜树碱衍生物、抗肿瘤酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体、干扰素、生物反应调节物和其它抗肿瘤药物(此处每一种抗肿瘤药物的定义同上)或者其药用盐。
35.一种药物组合物，其中含有与药用载体或稀释剂组合的至少一种如上定义的通式I化合物(其中R1，R2，R3，R4，m，Y，G，X1和X2定义同上)或其药用盐和至少一种抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物选自5-氟尿嘧啶；S-1；盐酸吉西他滨；盐酸阿霉素和依托泊甙；多西他赛水合物和紫杉醇；顺铂、卡铂和奥沙利铂；依立替康、托泊替康和喜树碱；易瑞莎和SU5416；IMC-C225和RhuMabVEGF或者其药用盐(其中，如果制剂包含通式I化合物和5-尿嘧啶，则还可以包含甲酰四氢叶酸)。
全文摘要
一种在癌症治疗中同时、分别和依次给药的联用药物制剂。联用的药物制剂包括以下两个单独的制剂一种包含药用载体或稀释剂和至少一种通式[I]表示的化合物[I](其中R
文档编号A61K31/282GK1622814SQ0282862
公开日2005年6月1日 申请日期2002年9月30日 优先权日2002年3月26日
发明者荒川浩治, 门田芳明, 中鹤阳子, 小寺努 申请人:万有制药株式会社