专利名称：有抗疟活性的4－氨基－喹啉喹嗪啶基－和喹嗪啶烷基－衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及抗疟化合物，特别是涉及4-氨基-喹啉衍生物。
背景技术：
疟疾是一种由原生动物疟原虫所引起的传染性疾病。在人类，由四种不同的寄生虫种类引起间日疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫和恶性疟原虫，后者是最致命的以及唯一致死的一种疟原虫。疟疾与结核以及AIDS一起，被认为是世界上最严重的和分布最广的病变之一。
目前抗疟药种类很少，这是因为恶性疟原虫的抗药株扩散到全世界，以及在最近的25年里化合物发展较少(在全世界1400种注册的药物中只有4种抗疟药)(Olliaro P & Taylor WRJ，J.Exp.Biol.，206，3753，2003)。
恶性疟原虫对喹啉类药物如氯喹以及抗叶酸物如磺胺多辛/乙嘧啶的抗药性是普遍存在的，且产生了大量的多重耐药株。因此，迫切需要有效、便宜和容易在疫区使用的抗疟药物，例如撒哈拉以南的非洲。
达到这个目标的策略包括1)将与现有篙素衍生物的抗疟药物(目前唯一有效的没有观察到抗药性的药物)的联合治疗进行最优化；2)研制已知化合物的类似物；3)鉴别新合成的物质或天然物质(Rosenthal PJ，J.Exp.Biol.2003，206，3735)。
鉴别和研究属于4-氨基喹啉族的化合物如氯喹、[7-氯-4-(4-二乙基氨基-1-甲基丁基氨基)喹啉]仍然是有效的方法，因其功效、低毒和低成本。然而，仍然需要一些氯喹类似物，因其对抗氯喹的恶性疟原虫株也有效。
在至今合成的4-氨基喹啉氯喹类似物中有一些衍生物，其位于喹啉核的4位上的二烷氨基烷氨基链得以变更。特别是Studi Sassaresi，57(1979)pp.811-816和Bollettino Chimico Farmaceutico(June1989，vol.128，pp 212-215)发表的如下化合物 其中，n是1、2或3。
在纯对映体形式中，其中位于喹嗪啶基核的1-和9a位上的氢原子呈顺式构象。
不管作者的假设如何，所要求保护的这些化合物的抗疟活性还没有被证实。
发明详述业已发现，4-氨基喹啉喹嗪啶基-和ω-(喹嗪啶基-1-基)烷基-衍生物有抗疟活性，且对抗氯喹的恶性疟原虫株有效。
本发明涉及通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐在制备疟疾治疗药物中的的应用。
其中R选自氯、溴和三氟甲基；和n是0至3的整数；本发明的另一个目的是通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐 其中R选自氯、溴和三氟甲基；和n是0至3的整数；但必须满足以下条件，当R是氯喹以及n是1、2或3时，位于喹嗪啶基核的1-和9a位上的氢原子是反式构象。
除非另外指出，术语“通式(I)的化合物”也包括所有可能的立体异构体。
术语“药学上可接受的盐”包括通式(I)的化合物与生理上相容的酸形成的盐，所述的酸如盐酸、磷酸、硫酸、酒石酸和柠檬酸，以及制药技术中常用的其他酸。
具体地说，优选如下化合物作为单独的对映体或与相应的旋光对映体相混合。
(Ia′)R＝Cl (Ia″)R＝Cl(Ib′)R＝CF3(Ib″)R＝CF3本发明也包括通式(II)的复合物
其中R选自氯、溴和三氟甲基；和n是0至3的整数；M是一种选自金、铑和钌的金属；Lig是一种选自如下的配体PR’3，其中当M是金时，R’是苯基或C2-C4烷基；环辛二烯，其中当M是铑时；通式(I)的另一种分子，其中当M是钌时；当M是金时，X是PF6-，而当M是铑或钌时，X是Cl-；当M是金或铑时，Y不存在，而当M是钌时，Y是氯。
特别优选的是复合物(IIa)，其中R是氯；n是1；M是金；Lig是三苯基膦；X是PF6-；Y不存在。
通式(I)的化合物是公知，其中R是氯，n是从1到3的整数，在1-和9a-位上的氢原子是顺式构象，该化合物可以经适合的ω-(喹嗪啶基-1α-基)烷胺和4，7-二氯喹啉反应制备，如Bollettino ChimicoFarmaceutico，128(1989)，pp.212-215中所述。
类似地，有相同的空间排列构象的通式(I)的化合物可用相应的7-取代4-氯喹林制备，所述化合物中R是溴或三氟甲基，n是从1到3的整数。
通式(I)的化合物可同样用相应的ω-(喹嗪啶基-1β-基)烷胺制备，所述化合物中R是氯、溴或三氟甲基，n是从1到3的整数，1-和9a-位上的氢原子是反式构象。
至于喹嗪啶偶酰烷基胺(quinolizidinylilalkylamines)，(-)羽扇豆基胺(n＝1)根据Sparatore，F.等人(Farmaco，Ed.Sci，24(1969)587-621)制备，而2-(喹嗪啶基-1’α-基)乙胺(n＝2)和3-(喹嗪啶基-1’α-基)丙胺(n＝3)的制备如Boido，V等人所述(Farmaco，Ed.Sci，34(1979)673-687)。在所有上述情况下，左旋羽扇豆宁(从黄羽扇豆和西班牙羽扇豆种子中提炼)用作起始材料。
从由合成得到的外消旋羽扇豆宁和表-羽扇豆宁(如根据A.Sparatore等人，Farmaco，44(1989)1193-1203)，可得到外消旋形式的所有上述化合物。
可以以一种相似的方法制备差向(立体)异构体喹嗪啶基烷基胺，由右旋表-羽扇豆宁，其依次可由左旋羽扇豆宁在热二甲苯中用NaH进行处理得到(参见，如Iusco，G.等人，Farmaco，51(1996)159-174)。
方案1中所示为一些喹嗪啶胺的制备。
方案1至于n为0的化合物，如方案2中所示，1-喹嗪啶胺经完全合成。
方案22-甲基哌啶酯与γ-氯丁酯烷化(Clemo，G.R.，J.Chem.Soc.(1931)437-442和W.A.Reckow等人，J.Am.Chem.Soc.74(1952)4960-4962)，然后进行迪克曼浓缩，接着脱羧水解，得到1-喹嗪啶酮(降-羽扇豆酮)。然后把酮转变成肟，最后还原成1-喹嗪啶胺(Hadley，M.S.等人J.Med.Chem.28(1985)1873-1847)。得到的非对映异构体混合物通过与一适合的7-取代4-氯喹林反应，得出总是呈非对映异构体混合物形式的相应化合物(I)并经层析法分离(方案3)。
方案3通式(II)的化合物可由Navarro，M.等人，J.Med.Chem.40(1997)1937-1939所述的方法，通过合成金-氯喹复合物制备，以及由Sanchez-Delgado，R.A.等人，J.Med.Chem.39(1996)1095-1099所述的方法，为合成铑-氯喹复合物和钌-氯喹复合物制备。
本发明的化合物经过了对氯喹敏感和对氯喹有抗药性的恶性疟原虫株的体外测试。在对氯喹敏感的恶性疟原虫株中观察到IC50值范围为15-30nM；这些值与那些对氯喹进行观察的值相差不大(对氯喹敏感IC50＝27.8±9nM)。令人吃惊的是，也在对氯喹有抗药性的恶性疟原虫株中观察到，IC50值范围为18-39nM，这明显不同于氯喹的值(对氯喹有抗药性的IC50＝150-300nM)。根据所测量的化合物和株系的不同，与氯喹相比其活性增加10-20倍。如图所示，化合物(Ia’)和(Ia”)证明在W2株(对氯喹有抗药性)中的活性比氯喹大6-8倍，平均IC50值的范围为10到25nM。图中特别显示，与相同剂量的氯喹相比(CQ)，化合物(Ia’)和(Ia”)的不同剂量对W2恶性疟原虫株的抗疟效果。寄生虫的生长用对pLDH在72小时的比色测定来评估。
本发明的化合物也证明在体内有效，伯氏疟原虫诱导的实验鼠科疟疾模型给予腹腔内和口服用药后功效与氯喹的功效相似。而且，该化合物对哺乳动物细胞的毒性非常低(IC50＝15.000-18.000nM)。因此，本发明的一个目的是提供一些药物组合物，其含有通式(I)的化合物及其盐或复合物并与适合的赋形剂和/或载体混合。该组合物必须适于口服或腹腔给药，且可根据如在Remington’s PharmaceuticalSciences Handbook，XVIIEd.Mark Pub.，N.Y.，U.S.A.所述的技术和方法制备。通式(I)和(II)的化合物剂量范围为1到1000mg。
以下，将结合实施例对本发明作更详细叙述。
实施例实施例1---4-(喹嗪啶烷基)氨基-喹啉的合成使4，7-二氯喹啉和7-溴-4-氯喹啉或4-氯-7-三氟甲基-喹啉(8mmoles)、喹嗪啶烷胺(8mmoles)和苯酚(5g)的混合物装入一带有KOH阱的回流冷凝器在180℃下磁棒搅拌加热4小时。
冷却后，混合物用NaOH调节到强碱性pH，以醚萃取3次。将醚溶液用2N NaOH洗涤2次，然后用水洗涤，最后用5％的乙酸萃取两次。乙酸溶液用2N NH3烷化，以醚萃取。
蒸发溶剂后，所得到的结晶残留物用一些无水醚洗涤，从二氯甲烷-二乙基醚混合物或乙醇-醚混合物重新结晶。
母液进行蒸发，残留物用层析法在硅胶柱上纯化，用98∶2-93∶7的CH2Cl2/MeOH进行梯度洗脱。
实施例2---4-(喹嗪啶烷基)氨基-7-氯喹啉的合成4，7-二氯喹啉(9.44mmoles)，1-喹嗪啶胺(9.44mmoles，非对映异构体混合物)和6g苯酚的混合物装入一带有KOH阱的回流冷凝器在180℃下磁棒搅拌加热4小时。
冷却后，混合物用NaOH调节到强碱性pH，以醚萃取4次。将醚溶液用2N NaOH洗涤2次，然后用水洗涤，最后用5％的乙酸萃取两次。乙酸溶液用2N NH3烷化，以醚萃取。
蒸发溶剂后，得到一固体残留物，用层析法将其在硅胶柱上纯化，用99∶1-92∶8的CH2Cl2/MeOH进行梯度洗脱。
蒸发CH2Cl2/1-2％/CH3OH洗脱的分馏物，残留物与醚一起洗涤，得到一溶点为168-169.2℃的化合物(Ia”)，而蒸发CH2Cl2/3-8％/MeOH洗脱的分馏物且残留物与醚一起洗涤，则得到一熔点为235-238℃的化合物(Ia’)。
实施例3-化合物(IIa)的合成使200mg(0.4mmoles)氯化三苯基膦金在回流下溶解于20ml的氰化甲烷，加入148.8mg(0.8mmoles)的六氟磷酸钾(KPF6)，加热30分钟。
加入266.7mg(0.81mmoles)的4-[(喹嗪啶甲基)氨基]-7-氯喹啉，混合物在氮压下回流48小时，然后冷却，将所得到的沉淀物滤出(172mg)。
将过滤物浓缩，加入乙醚(数滴)，贮存于冰箱。过滤分离出的固体，用无水醚/氰化甲烷(1∶3)洗涤。溶液再次浓缩，用醚处理并贮存于冰箱。
这个过程进行数次，每次都滤出沉淀物。最后，溶液进行蒸发到干，得到残留物，即，通式为(IIa)的化合物，进行洗涤和干燥。产量200mg。
权利要求
1.通式(I)所示的化合物及其药学上可接受的盐， 式中R选自氯、溴和三氟甲基；和n是0至3的整数；但必须当R是氯，n是1、2和3时，在喹嗪啶基核的1-和9a-的位上的氢原子是反式构象。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R选自氯、溴和三氟甲基，以及n是0。
3.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，所述的化合物选自以下 (Ia′)R＝Cl(Ia″)R＝Cl(Ib′)R＝CF3(Ib″)R＝CF3
4.通式(II)所示的复合物 式中R选自氯、溴和三氟甲基；和n是0至3的整数；M是一种选自金、铑和钌的金属；Lig是一种选自如下的配体-PR’3，其中当M是金时，R’是苯基或C2-C4烷基；环辛二烯，其中当M是铑时；通式(I)的另一种分子，其中当M是钌时；当M是金时X是PF6-；当M是铑或钌时X是Cl-；当M是金或铑时Y不存在；当M是钌时，Y是氯。
5.如权利要求4所述的复合物，其特征在于，所述的化合物中R是氯；n是1；M是金；Lig是三苯基膦；X是PF6-；Y不存在。
6.通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐以及权利要求4和5所述的复合物在制备抗疟药物中的应用， 式中R是氯、溴或三氟甲基；n是1至3的整数。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，通式(I)的化合物选自 (Ia′)R＝Cl (Ia″)R＝Cl(Ib′)R＝CF3(Ib″)R＝CF3其作为单个对映体或与相应的旋光对映体混合。
8.药物组合物，其特征在于，所述的组合物含有如权利要求6所限定的通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，或如权利要求4和5所述的复合物，并与适合的赋形剂和/或载体混合。
全文摘要
本发明涉及有抗疟活性的4－氨基－喹啉喹嗪啶基和喹嗪啶烷基－衍生物，特别是通式(I)的化合物，其中R和n在说明书中限定，及其药学上可接受的盐，及其与金、铑或钌的复合物，以及含有所述的化合物、盐和复合物的药物组合物。本发明的化合物也对抗氯喹的恶性疟原虫株有效。
文档编号A61P33/06GK1902199SQ200480038152
公开日2007年1月24日 申请日期2004年10月18日 优先权日2003年10月21日
发明者A·斯派拉托尔, D·塔拉梅利, N·巴西利科, S·帕拉皮尼, F·斯派拉托尔, V·博伊多, C·卡努博伊多 申请人:尼德医药有限公司