有丝分裂驱动蛋白抑制剂的制作方法

专利名称：：有丝分裂驱动蛋白抑制剂的制作方法
背景技术：
：本发明涉及2-苯基嘧啶酮衍生物，其为有丝分裂驱动蛋白抑制剂，尤其有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂，并适于治疗细胞增殖性疾病(cellularproliferativediseases)，例如癌症、过度增生、再狭窄、心脏肥大、免疫病变及炎症。用于治疗癌症的治疗药物包括紫杉烷类和长春花碱类。紫杉烷类和长春花碱类作用于多种细胞结构中存在的微管。微管是有丝分裂纺锤体的主要结构元件。有丝分裂纺锤体将复制的基因组分配到细胞分裂产生的两个子细胞中。推测通过这些药物破坏有丝分裂纺锤体从而抑制癌细胞分裂并诱导癌细胞死亡。然而，微管形成其他类型的细胞结构，包括用于神经过程中胞内运输的管道(tracks)。因为这些药物不特异性靶向有丝分裂纺锤体，所以它们具有的副作用限制了其有效性。因为如果可以降低使用与治疗癌症有关的药物的副作用就将达到治疗学的利益，所以改善用于治疗癌症药物的特异性是非常令人感兴趣的。传统的癌症治疗中引人注目的进步和通过新机制作用的治疗药物的鉴别有关。这种实例不仅包括紫杉烷类，而且包括拓扑异构酶I抑制剂的喜树碱类。从这两种观点看来，有丝分裂驱动蛋白是新型抗癌药的重要药靶。有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂纺锤体装配和发挥功能的重要酶类，但不是其他微管结构例如在神经过程中的普遍成分。有丝分裂驱动蛋白在有丝分裂的所有阶段都有重要作用。这些酶类是将ATP水解释放的能量转化为机械力的“分子发动机”，其促进细胞货物(cellularcargoes)沿着微管定向运动。足以起这种作用的催化域是约340个氨基酸的致密结构。在有丝分裂期间，驱动蛋白将微管组织成双极结构即有丝分裂纺锤体。驱动蛋白介导染色体沿着纺锤体微管运动，也介导有丝分裂纺锤体与有丝分裂特定阶段有关的结构改变。有丝分裂驱动蛋白功能的实验性微扰造成有丝分裂纺锤体的畸形或功能障碍，时常导致细胞周期停滞及细胞死亡。在有丝分裂驱动蛋白中已经鉴别了KSP。KSP属于装配进包括反向平行同二聚体的双极同源四聚体的正端方向的(plusend-directed)微管发动机的进化保守的驱动蛋白亚家族。在有丝分裂期间，KSP参与有丝分裂纺锤体微管。定向显微注射抗KSP的抗体进入人细胞阻碍纺锤体在前中期的极点分离，使单极纺锤体产生并导致有丝分裂停止且诱导程序性细胞死亡。在其他非人的有机体中的KSP和相关驱动蛋白束住反向平行微管并使其互相相对滑动，从而迫使这个纺锤体两极分离。KSP也可介导分裂后期B纺锤体伸长及在纺锤体极点微管的聚集。已经描述了人KSP(也称为HsEg5)[Blangy等，Cell，831159-69(1995)；Whitehead等.，ArthritisRheum.，391635-42(1996)；Galgio等.，J.CellBiol.，135339-414(1996)；Blangy等，JBiol.Chem.，27219418-24(1997)；Blangy等，CellMotilCytoskeleton，40174-82(1998)；Whitehead和Rattner，J.CellSci.，1112551-61(1998)；Kaiser等，JBC27418925-31(1999)；GenBank检索号X85137，NM004523和U37426]，并描述了KSP基因的一个片段(TRIP5)[Lee等，MolEndocrinol.，9243-54(1995)；GenBank检索号L40372]。也已经报道了非洲蟾蜍属KSP同源物(Eg5)，和果蝇属K-LP61F/KRP130。某些喹唑啉酮被称为是KSP抑制剂(PCT公布WO01/30768，May3，2001)。某些嘧啶酮最近也被称为KSP抑制剂(PCT申请.No.US03/15861)。有丝分裂驱动蛋白是新型有丝分裂化疗药发现和开发的重要药靶。相应的，本发明的目的是提供用于抑制KSP这种有丝分裂驱动蛋白的化合物、方法和组合物。发明概述本发明涉及2-苯基嘧啶酮及其衍生物，其有利于治疗细胞增殖性疾病，治疗与KSP驱动蛋白活性有关的疾病，并有利于抑制KSP驱动蛋白。可通过式I说明本发明的这些化合物发明详述本发明化合物有利于抑制有丝分裂驱动蛋白并以式I的化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体为例进行说明其中a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；p为1-3；r为0或1；s为0或1；R1选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8环烷基，和9)杂环基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、芳烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R2独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)(C＝O)aObC2-C10烯基，4)(C＝O)aObC2-C10炔基，5)CO2H，6)卤素，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)(C＝O)aNR6R7，10)CN，11)(C＝O)aObC3-C8环烷基，12)(C＝O)aOb杂环基，13)SO2NR6R7，和14)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R3a和R3b独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)(C＝O)aObC2-C10烯基，5)(C＝O)aObC2-C10炔基，6)CO2H，7)卤素，8)OH，9)ObC1-C6全氟烷基，10)(C＝O)aNR6R7，11)CN，12)(C＝O)aObC3-C8环烷基，13)(C＝O)aOb杂环基，14)SO2NR6R7，和15)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R4独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR6R7，12)氧代，13)CHO，14)(N＝O)R6R7，15)(C＝O)aObC3-C8环烷基，16)SO2NR6R7，和17)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；R5选自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)卤素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)环烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-杂环基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和18)C(O)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多达3个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；R6和R7独立选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自R6的取代基取代，或者R6和R7可与连接它们的氮共同形成一个4-7元的单环杂环或每个环为4-7元的双环杂环，并任选含有除氮外的一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个或多个选自R5的取代基取代；Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；且Rb为H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NRa2、(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基-NHRa、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。且另一个实施方案为以上刚描述过的式I化合物，或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R1选自任选被一个或多个选自R4的取代基取代的芳基和杂环基。本发明的第二个实施方案为式II化合物，或其药学上可接受的盐或立体异构体其中a、b、r、s、R4、R5、R6和R7的定义为上述式I的定义，且p’为0-2；R2选自1)(C＝O)aC1-C10烷基，2)(C＝O)a芳基，3)(C＝O)aNR6R7，4)(C＝O)aC3-C8环烷基，5)(C＝O)a杂环基，6)SO2NR6R7，和7)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R2a选自卤素和(C1-C6)烷基；R3a及R3b独立选自氢、(C1-C6)烷基、三氟甲基和卤素；并R4a及R4b独立选自氢、卤素和(C1-C6)烷基，条件是至少一个不为氢，或R4a及R4b组合形成二基，选自-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH＝CH-O-和-CH＝CH-N-。本发明的第三个实施方案为式II化合物，或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中p’及R5如上述式II定义且R2为(C1-C6)亚烷基-NR6R7；所述亚烷基任选被最多达3个选自OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和NR6R7的取代基取代；R2a选自卤素和(C1-C6)烷基；R3a及R3b独立选自氢、(C1-C6)烷基、三氟甲基和卤素；R4a及R4b独立选自氢、卤素和(C1-C6)烷基，条件是至少一个不为氢；R6及R7独立选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)杂环基，5)C2-C10烯基，6)C2-C10炔基，和7)C3-C8环烷基，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自R5的取代基取代，或者R6和R7可与连接它们的氮共同形成一个4-7元的单环杂环或每个环为4-7元的双环杂环，并任选含有除氮外的一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个或多个选自R5的取代基取代。本发明化合物特定的实例包括2-(2-溴苯基)-3-(3-氟-4-甲基苯基)嘧啶-4(3H)-酮。本发明化合物可具有不对称中心、手性轴及手性面(如在E.L.Eliel和S.H.Wilen，StereochemistryofCarbonCompounds，JohnWiley&Sons，NewYork，1994，第1119-1190页中所述)，且存在的外消旋物、外消旋物混合物及单一非对映体和所有可能的同分异构体及其混合物包括旋光异构体均包括在本发明内。另外，本文公开的化合物可以互变异构体存在，且两种互变异构形式都包括在本发明的范围内，即使仅描述了其中一种互变异构结构。例如，任何要求保护的下列化合物A都理解为包括互变异构结构B，且反之亦然，同样包括其混合物。当任何变量(例如R3、R4、R5等)在任何组分中出现超过一次，则其每次出现的定义独立于其它每次出现的定义。同样，允许取代基及变量的组合，只要这种组合使化合物稳定。自取代基划入环系统的线表示所指的键可连接到任何能取代的环原子上。如果环系统为多环，其意味着这种键仅连接到邻近环的任何适当的碳原子上。要理解本领域普通技术人员可选择本发明化合物的取代基及取代型式而提供化学上稳定的并可通过本领域技术和下列提出的方法自可容易获得的原料容易的合成的化合物。如果取代基自身被超过一个基团取代，应理解这些基团可在相同碳原子上或不同碳原子上，只要使结构稳定。短语“任选被一个或多个取代基取代”被认为与短语“任选被至少一个取代基取代”相当且在此情况下优选的实施方案将具有0-3个取代基。本文所用术语“烷基”和“亚烷基”意指包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。例如，“C1-C10烷基”中“C1-C10”的定义包括以直链或支链排列的具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的基团。例如，“C1-C10烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语“环烷基”指具有特定碳原子数目的单环饱和脂肪烃基。例如“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。“烷氧基”代表通过氧桥连接的指明数目的碳原子的环状的或非环状的烷基。因此“烷氧基”包括上述烷基和环烷基的定义。如果未明确碳原子的数目，术语“烯基”指直链、支链或环状的，含有2-10个碳原子及至少一个碳碳双键的非芳香烃基。优选存在一个碳碳双键，并可存在最多达4个非芳香性的碳碳双键。因此，“C2-C6烯基”指具有2-6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可含有双键且如果指明了取代的烯基则此部分可被取代。术语“炔基”指直链、支链或环状的，含有2-10个碳原子及至少一个碳碳三键的非芳香烃基。可存在最多达3个碳碳三键。因此，“C2-C6炔基”指具有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可含有三键且如果指明了取代的炔基则此部分可被取代。在某些例子中，取代基可用包括0在内的一定范围碳原子数目定义，例如(C0-C6)亚烷基-芳基。如果芳基被认为是苯基，则此定义包括苯基自身，也包括-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。本文所用“芳基”是指环中多达7个原子的任何稳定的单环或每个环中多达7个原子双环碳环，其中至少一个环为芳香环。这种芳基的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基及联苯基。在芳基取代基是双环的且一个环为非芳香性的例子中，应理解经芳香环而连接。本文所用术语“杂芳基”代表环中多达7个原子的稳定的单环或每个环中多达7个原子双环碳环，其中至少一个环为芳香环且含有1-4个选自O、N和S的杂原子。本定义范围内的杂芳基包括但不限于吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹啉基、吡唑基(pyrrazolyl)、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、唑基、异唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。对于下列杂芳基的定义，“杂芳基”也理解为包括任何含有氮的杂芳基的N-氧化物衍生物。在杂芳基取代基是双环的且一个环为非芳香性或不含有杂原子的例子中，应理解各自经芳香环或经含杂原子环连接。本文中所用术语“杂环”或“杂环基”是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的5元-10元芳香性或非芳香性杂环，且包括双环基团。“杂环基”因此包括上面提及的杂芳基，也包括其二氢化及四氢化类似物。“杂环基”进一步的实例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲唑基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、奈吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、异唑啉、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁烷基、1，4-二烷基、氮杂环庚烷基(hexahydroazepinyl)、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基(thiomorpholinyl)、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。杂环取代基的连接可通过碳原子或通过杂原子实现。在一个实施方案中，杂环选自2-氮杂酮、苯并咪唑基、2-二氮杂酮、咪唑基、2-咪唑啉酮、吲哚基、异喹啉基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基和噻吩基。正如本领域技术人员所理解的，本文中所用“卤素”(″halo″)或″卤素″意指包括氯、氟、溴和碘。除非另有定义，烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基取代基可为未被取代的或取代的。例如，(C1-C6)烷基可被一个、两个或三个选自OH、氧代、卤素、烷氧基、二烷基氨基或杂环基例如吗啉基、哌啶基等的取代基取代。在这种情况下，如果一个取代基为氧代且另一个为OH，则定义中包括下列-C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)等。在某些例子中，在式II化合物中定义R4a及R4b使其可共同形成选自-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH＝CH-O-和-CH＝CH-N-的二基。用和R4a及R4b连接的苯环形成的部分的实例包括但不限于在某些例子中，定义R6和R7使其可与连接它们的氮共同形成4-7元单环或每个环为4-7元的双环杂环，且任选含有除氮外一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述杂环任选被一个或多个选自R5的取代基取代。可如此形成的杂环的实例包括但不限于下列的杂环，须牢记杂环任选被一个或多个(且优选一个、两个或三个)选自R5的取代基取代在一个实施方案中，R1选自任选被1-3个选自R4的取代基取代的芳基和杂环基。在另一个实施方案中，R1选自任选被1-3个选自R4的取代基取代的苯基和吲哚基。在又一个实施方案中，R1为任选被1-3个选自R4的取代基取代的苯基。在一个实施方案中R2选自卤素和(C1-C6)亚烷基-NR6R7。在一个实施方案中R2a选自溴和氯。在另一个实施方案中，对于式II的R2a选自溴和氯，且R2为(C1-C6)亚烷基-NR6R7。在一个实施方案中R3a和R3b独立选自氢、(C1-C6)烷基和卤素。在另一个实施方案中R3a和R3b为氢。在一个实施方案中p为1或2。在另一个实施方案中，p’为1。在一个实施方案中R4定义为卤素、C1-C6烷基、OC1-C6亚烷基NR6R7、(C＝O)aC0-C6亚烷基-T，(其中T为H、OH、CO2H或OC1-C6烷基)，SO2NH2，C1-C6亚烷基NR6R7或OC0-C6亚烷基-杂环基，任选被1-3个选自R5、C0-C6亚烷基NR6R7、(C＝O)NR6R7或OC1-C3亚烷基-(C＝O)NR6R7的取代基取代。在另一个实施方案中，R4为卤素、C1-C6烷基或C1-C3亚烷基NR6R7。在另一个实施方案中，R4为卤素或C1-C6烷基。在式II化合物的一个实施方案中，R4a和R4b独立选自氢、卤素和(C1-C6)烷基，条件是至少一个不为氢。本发明包括式I化合物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐及立体异构体。本文中一些特定的示例性化合物为胺类化合物的质子化了的盐。术语“游离形式”指以非盐形式的胺类化合物。包括在内的药学上可接受盐不仅包括本文所述特定化合物的示例性盐，也包括所有式I化合物游离形式的典型的药学上可接受的盐。可使用本领域已知技术分离所述化合物特定盐的游离形式。例如，可通过用适当的碱稀水溶液例如NaOH稀水溶液、碳酸钾稀水溶液、稀氨水及碳酸氢钠稀水溶液处理该盐使游离形式再生。游离形式在某些物理性质例如在极性溶剂中溶解度上与其各自盐形式多少有些区别，但是为发明的目的这种酸盐及碱盐在其它药学方面与其各自游离形式相当。可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。Berg等，″PharmaceuticalSalts，″J.Pharm.Sci.，1977661-19更详细描述了上文所述药学上可接受的盐及其它典型的药学上可接受的盐的制备。由于在生理条件下化合物中脱质子化的酸性部分例如羧基可为阴离子的，而这种带有的电荷然后可被内部带有阳离子的质子化了的或烷基化的碱性部分例如四价氮原子平衡抵消，所以应注意本发明化合物是潜在的内盐或两性离子。除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下列方案中显示的反应制备本发明化合物。例如如在Ager等，J.ofMed.Chem.，20379-386(1977)中所述。因此，下列说明性方案是为说明的目的而不是局限于所列化合物或任何特定的取代基。方案中显示的取代基数目并不必需符合权利要求中所用的数目，且为清楚起见，显示单取代基连接到在上文中式I的定义下允许有多取代基的化合物上。方案如方案A中所示，可自适当取代的苄腈起始合成本发明化合物A-3。方案B说明了如何用离去基团可激活C-2苯环的烷基部分，并接着通过适当取代的胺置换而提供本发明化合物B-8。在本发明中也理解自这种烷基取代基制备其它官能部分。方案A方案B应用本发明化合物使用在许多种应用中。如本领域技术人员所理解的，可使用多种方法改变有丝分裂；即可通过增加或降低有丝分裂途径中组分的活性影响有丝分裂。换句话说，可通过干扰平衡，或通过抑制或激活某些组分影响有丝分裂(例如破裂)。类似方法可用于改变减数分裂。在一个实施方案中，本发明化合物用于调节有丝分裂纺锤体的形成，从而引起有丝分裂中的细胞周期停滞延长。本文中“调节”指改变有丝分裂纺锤体形成，包括增加或减少纺锤体形成。本文中“有丝分裂纺锤体形成”是指通过有丝分裂驱动蛋白将微管组织为双极结构。本文中“有丝分裂纺锤体异常”是指有丝分裂停止和单极纺锤体形成。本发明化合物适用于结合有丝分裂驱动蛋白和/或调节有丝分裂驱动蛋白的活性。在一个实施方案中，有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂驱动蛋白的bimC亚家族的成员(如在美国专利号6,284,480，column5中所述)。虽然本发明化合物也可调节得自其他有机体的有丝分裂驱动蛋白的活性，但是在进一步的实施方案中有丝分裂驱动蛋白为人KSP。在文中，调节指增加或减少纺锤体极分离而造成畸形即有丝分裂纺锤体极的展开(splaying)，或另外造成有丝分裂纺锤体形态学微扰。为此目的，KSP的变异体和/或片段也包括在KSP的定义内。另外，本发明化合物可抑制其他有丝分裂驱动蛋白。本发明化合物用于治疗细胞增殖性疾病。可通过本文中提供的方法和组合物治疗的疾病状态包括但不限于，癌症(在下文中进一步讨论)、自身免疫性疾病、关节炎、移植排斥、炎性肠病、医学处理后包括但不限于外科手术、血管成形术等之后诱导的增殖。要理解在一些情况下细胞可不处于过度增殖或增殖低下状态(非正常状态)但仍需要治疗。例如，在伤口愈合期间，细胞可“正常”增殖，但可需要增加增殖。类似于上文讨论的，在农业生产中可需要调节增殖从而通过直接提高农作物生长增加收成，或通过抑制对农作物不利的植物或有机体的生长增加收成。因此，在一个实施方案中，本发明包括在正遭受或可最终遭受这些疾病或状态中任何一种的细胞或个体上的应用。认为本文中提供的化合物、组合物及方法特别适用于治疗癌症包括实体瘤例如皮肤、乳房、脑、颈的癌症，睾丸癌等。特别的，可通过本发明的化合物、组合物及方法治疗的癌症包括但不限于心的肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤)，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺支气管癌(鳞状上皮细胞、分化不良型小细胞、分化不良型大细胞、腺癌)，肺泡(细支气管的)癌，支气管腺瘤，肉瘤，软骨错构瘤，间皮瘤；胃肠的食道(鳞状上皮细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺癌、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肽瘤)，小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)，大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道肾(腺癌、威尔姆斯瘤[肾胚细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱及尿道(鳞状上皮细胞癌、移行细胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝肝癌(肝细胞癌)、胆管癌、肝胚细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤；骨成骨肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、尤因肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞瘤脊索瘤(malignantgiantcelltumorchordoma)、osteochronfroma(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、软骨母细胞瘤、chondromyxofibroma、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统颅(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、畸形性骨炎)，脑脊膜(脑脊膜瘤、脑脊膜肉瘤(meningiosarcoma)、神经胶质瘤)，脑(星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤)，脊髓神经纤维瘤，脑脊膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤)；妇科学的子宫(子宫内膜癌)，宫颈(宫颈癌、肿瘤前(pre-tumor)宫颈非典型增生)，卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、不明类别癌(unclassifiedcarcinoma)]、卵泡粒膜细胞瘤、塞-莱细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤)，阴户(鳞状上皮细胞癌、腺癌、纤维肉瘤、黑色素瘤)，阴道(透明细胞癌、鳞状上皮细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)，输卵管(癌)；血液学的血([急性和慢性的]髓细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征)，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤恶性黑色素瘤、基底细胞癌、鳞状上皮细胞癌、卡波西肉瘤、moles发育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕疙瘩、银屑病；及肾上腺成神经细胞瘤。因此，本文中术语“癌细胞”包括遭受上述疾病中任何一种的细胞。如美国专利号6,284,480中所述，通过调节bimC驱动蛋白亚族真菌成员的活性，本发明化合物也适于用作抗真菌剂。根据标准药学技术，本发明化合物可单独或在药用组合物中与药学上可接受的载体、辅料或稀释剂组合给予哺乳动物，优选人。可口服或胃肠外给予化合物，包括静脉、肌肉、腹膜内、皮下、直肠及局部给药。这种含有活性成分的药用组合物可制成适于口服给药形式，例如片剂、含片、锭剂、水或油混悬液、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊剂或软胶囊剂、或糖浆剂或酏剂。可根据药用组合物制造领域中任何已知方法制备预期口服给予的组合物，并且为提供药学上精制的及适口的制剂，这种组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的药剂。片剂含有活性成分与无毒的适于制造片剂的药学上可接受的辅料。这些辅料可为例如，惰性稀释剂例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂(granulating)和崩解剂例如微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠(sodiumcrosscarmellose)、玉米淀粉或海藻酸；粘合剂例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶；及润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可不包衣或者通过已知技术包衣从而掩盖药物的不良味道或延长在胃肠道中崩解和吸收且因而提供持续更长时间的药物效应。例如，可采用水溶性掩盖味道的原料例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙纤维素，或采用延时原料例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。口服使用的制剂也可制成硬明胶胶囊剂，其中活性成分混合于惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或白陶土中；或制成软明胶胶囊剂，其中活性成分混合于水溶性载体例如聚乙烯二醇或油性介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油中。水混悬液含有与适于制造水混悬液的辅料混合的活性材料。这种辅料为助悬剂例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶及阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可为天然存在的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或烯化氧与长链脂肪醇的缩合产物例如十七碳乙烯氧基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或烯化氧与得自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇一油酸，或烯化氧与得自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。此水混悬液也可含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙基酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，和一种或多种甜味剂例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。可通过将活性成分混悬于植物油例如花生油、橄榄油、麻油或椰子油中，或矿物油例如液体石蜡中制备油性混悬液。这种油性混悬液可含有增稠剂例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可加入上文所述的甜味剂和调味剂以提供适合口服的制剂。可通过加入抗氧化剂例如丁羟茴醚(butylatedhydroxyanisol)或α生育酚储存这些组合物。可分散粉剂或颗粒剂适于通过加入水制备水混悬液而提供与分散剂或湿润剂、助悬剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。适当的分散剂或湿润剂及助悬剂已经通过上文涉及的例子说明。也可存在其他辅料例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸而储存。本发明组合物也可制成水包油乳状液的形式。油相可为植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡或其混合物。适当的乳化剂可为天然存在的磷脂例如大豆卵磷脂，及酯类或得自脂肪酸和己糖醇酐混合物的偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯，及所述偏酯和烯化氧的缩合产物例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。此乳剂也可含有甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂。可使用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖制备糖浆剂和酏剂。这种制剂也可含有湿润剂、防腐剂、调味剂和着色剂及抗氧化剂。药用组合物可制成无菌可注射的水溶液。在可接受的载体和溶剂中可采用水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。这种无菌可注射制剂也可制成活性成分溶于油相中的无菌可注射水包油微乳剂。例如，首先将活性成分溶于豆油和卵磷脂的混合物中，然后将油溶液放入水和甘油的混合物中并处理而制成微乳剂。这种可注射的溶液或微乳剂可通过局部单次快速静脉注射(localbolusinjection)导入患者血流中。可选择的，以这种方法给予溶液或微乳有利于维持化合物的恒定循环浓度。为维持这种恒定浓度，可利用连续静脉注射递送装置。这种装置的一个实例为DeltecCADD-PLUSTMmodel5400静脉注射泵。这种药用组合物可制成用于肌内或皮下给药的无菌可注射溶液或油状混悬液形式。可根据已知技术使用上文中提到的分散剂或湿润剂及助悬剂制备这种混悬液。无菌可注射制剂也可制成在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。另外，常规采用非挥发油作为溶剂或混悬介质。为此目的，可采用任何无刺激性的非挥发油包括合成的甘油一酯或甘油二酯。另外，发现在可注射制剂中使用脂肪酸例如油酸。式1化合物也可以直肠给药的栓剂形式给药。可通过混合药物与适当的无刺激性辅料而制备这些组合物，其在常温下为固体但在直肠温度下为液体并因此在直肠中熔化从而释放药物。这种原料包括可可脂、甘油明胶、氢化的植物油、各种分子量聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。为局部使用，采用含有式I化合物的乳膏、软膏剂、凝胶剂、溶液剂或混悬剂等(为这种应用目的，局部应用应包括口腔洗剂和漱口剂)。本发明化合物可经适当的鼻内载体和递送装置的局部使用以鼻内形式给药，或经皮肤使用本领域普通技术人员熟知的皮肤贴剂的形式给药。以经皮肤递送系统形式给药后，整个给药方案的给药剂量理所当然比间歇给药连续。本发明化合物也可以栓剂递送，采用的基质例如可可脂、甘油明胶、氢化的植物油、各种分子量聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。如果给予受试人本发明化合物，正常由开处方医师通常根据每个患者的年龄、体重、性别和反应，及患者症状严重性相应改变剂量从而确定日剂量。在一个示例性应用中，给予正治疗癌症的哺乳动物适量的化合物。给予的量在每日每千克体重约0.1mg-约60mg之间，优选在每日每千克体重约0.5mg-约40mg之间。本发明化合物也适于与已知治疗药物和抗癌药联用。例如，本发明化合物适于与已知抗癌药联用。本公开化合物与其他抗癌药或化学治疗药物的联用在本发明范围内。在V.T.Devita和S.Hellman(编辑)所著CancerPrinciplesandPracticeofOncology，第6版(2001年2月15日)，LippincottWilliams&WilkinsPublishers中可找到这种药物的实例。本领域普通技术人员将能够识别基于涉及药物和癌症的特别性质的药物联用是有利的。这种抗癌药包括但不限于下列雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒剂/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和其他血管生成抑制剂，细胞增殖和生存信号传导抑制剂、细胞凋亡诱导剂及干扰细胞周期关卡的药物。当与放射治疗联用时本发明化合物特别有效。在一个实施方案中，本发明化合物也适于与已知抗癌药包括下列雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视色素受体调节剂、细胞毒剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、反转录酶抑制剂和其他血管生成抑制剂联用。“雌激素受体调节剂”指以任何机制干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的实例包括但不限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯、4，4’-二羟基二苯甲酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。“雄激素受体调节剂”指以任何机制干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物。雄激素受体调节剂的实例包括非那雄胺及其他5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和阿比特龙乙酸盐。“类视色素受体调节剂”指以任何机制干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物。这种类视色素受体调节剂的实例包括贝沙罗汀、维A酸、13-顺式-维A酸、9-顺式-维A酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4’-羟基苯基)视黄酰胺(retinamide)和N-4-羧基苯基视黄酰胺。“细胞毒剂/细胞抑制剂”指通过直接干扰细胞的功能或抑制或干扰细胞有丝分裂从而导致细胞死亡或主要抑制细胞增殖的化合物，包括烷化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、缺氧可活化化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、参与有丝分裂过程激酶的抑制剂、抗代谢物；生物效应调节剂；激素/抗激素治疗剂、生血生长因子(haematopoieticgrowthfactors)、单克隆抗体靶向治疗药物、拓扑异构酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂和泛素连接酶抑制剂。细胞毒剂的实例包括但不限于，sertenef、恶病质素、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈达铂、奥沙利铂、替莫唑胺、heptaplatin、雌莫司汀、英丙舒凡甲苯磺酸盐、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯铵、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、甲基丝裂霉素、顺铂、伊罗夫文、dexifosfamide、顺式-胺二氯(2-甲基-吡啶)铂、苄基鸟嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)-二-μ-(己-1，6-二胺)-μ-[二胺-铂(II)]二[二胺(氯)铂(II)]四氯化物、diarizidinylspermine、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3’-脱氨基-3’-吗啉代-13-脱氧代-10-羟基洋红霉素、annamycin、加柔比星、依利奈法德、MEN10755、和4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-氮杂环丙基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO00/50032)。缺氧能激活(activatable)的化合物的实例为替拉扎明。蛋白酶体抑制剂的实例包括但不限于乳胞素和bortezomib。微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’，4’-二脱氢-4’-脱氧-8’-去甲长春花硷、多西紫杉醇(docetaxol)、根霉素、多拉司他汀、米伏布林羟乙基磺酸盐、auristatin、西马多丁、RPR109881、BMS184476、长春氟宁、cryptophycin(一种缩酚酸肽类抗肿瘤药)、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-t-丁酰胺、TDX258、epothilones(大环内酯类抗肿瘤药)(参见例如美国专利号6,284,781及6,288,237)和BMS188797。拓扑异构酶抑制剂的一些实施例为托泊替康、hycaptamine、伊立替康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外-苯亚甲基-酵酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-k1]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙基氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、依托泊苷磷酸盐、替尼泊苷、索布佐生、2’-二甲基氨基-2’-脱氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-hydroOxy-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮、2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]isoguinoline-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡啶并[4，5，1-脱]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。在PCT公开号WO01/30768、WO01/98278、WO03/050,064、WO03/050,122、WO03/049,527、WO03/049,679、WO03/049,678和WO03/39460及待审PCT申请号US03/06403(2003年3月4日申请)、US03/15861(2003年5月19日申请)、US03/15810(2003年5月19日申请)、US03/18482(2003年6月12日申请)及US03/18694(2003年6月12日申请)中描述了有丝分裂驱动蛋白，且特别是人有丝分裂驱动蛋白KSP抑制剂的实例。在一个实施方案中有丝分裂驱动蛋白抑制剂包括但不限于KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂、Kif14抑制剂、Mphosphl抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。“涉及有丝分裂过程激酶的抑制剂”包括但不限于aurora激酶抑制剂、Polo样激酶(PLK)抑制剂(特别PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂及bub-R1抑制剂。“抗增殖剂”包括反义RNA和DNA寡核苷酸例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，及抗代谢物例如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他汀、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、阿糖胞苷ocfosfate、fosteabine氢氧化钠、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林(tiazofurin)、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2’-脱氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-四癸二烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-吡喃庚糖]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩甲酰基-L-谷氨酸、氨基蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新、乙酸11-乙酰基-8-(氨基甲酰基氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四-2，4，6-三烯-9-基酯、八氢吲嗪三醇、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨基丁酸酶、2’-氰基-2’-脱氧-N4-软脂酰基-1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛硫代缩氨基脲。单克隆抗体靶向治疗药物的实例包括具有附着到特定癌细胞或靶细胞特定单克隆抗体的细胞毒素剂或放射性同位素的那些治疗药物。实例包括碘[131I]托西莫单抗(Bexxar)。“HMG-CoA还原酶抑制剂”指3-羟基-3-甲基戊二酰-CoA还原酶的抑制剂。可使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR；参见美国专利号4,231,938、4,294,926和4,319,039)，辛伐他汀(ZOCOR；参见美国专利号4,444,784、4,820,850和4,916,239)，普伐他汀(PRAVACHOL；参见美国专利号4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)，氟伐他汀(LESCOL；参见美国专利号5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)及阿托伐他汀(LIPITOR；参见美国专利号5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。在M.Yalpani，″CholesterolLoweringDrugs″，Chemistry&Industry，第85-89页(1996年2月5日)的第87页及美国专利号4,782,084和4,885,314中描述了可在本方法中使用的这些结构式及其他HMG-CoA还原酶抑制剂。本文中所用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所有药学上可接受的内酯和开放酸(open-acid)形式(即内酯环打开形成游离酸)，也包括具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的盐或酯的形式，且因此这种盐、酯、开放酸及内酯形式的用途包括在本发明范围内。“含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂”指抑制任何一种或任何组合的含异戊二烯基的蛋白转移酶的化合物，包括法呢基-蛋白转移酶(FPTase)、香叶基香叶基-蛋白转移酶I型(GGPTase-I)及香叶基香叶基-蛋白转移酶II型(GGPTase-II，也称为RabGGPTase)。含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂的实例可见于下列公开及专利WO96/30343、WO97/18813、WO97/21701、WO97/23478、WO97/38665、WO98/28980、WO98/29119、WO95/32987、美国专利号5,420,245、美国专利号5,523,430、美国专利号5,532,359、美国专利号5,510,510、美国专利号5,589,485、美国专利号5,602,098、欧洲专利公开号0618221、欧洲专利公开号0675112、欧洲专利公开号0604181、欧洲专利公开号0696593、WO94/19357、WO95/08542、WO95/111917、WO95/12612、WO95/12572、WO95/10514、美国专利号5,661,152、WO95/10515、WO95/10516、WO95/24612、WO95/34535、WO95/25086、WO96/05529、WO96/06138、WO96/06193、WO96/16443、WO96/21701、WO96/21456、WO96/22278、WO96/24611、WO96/24612、WO96/05168、WO96/05169、WO96/00736、美国专利号5,571,792、WO96/17861、WO96/33159、WO96/34850、WO96/34851、WO96/30017、WO96/30018、WO96/30362、WO96/30363、WO96/31111、WO96/31477、WO96/31478、WO96/31501、WO97/00252、WO97/03047、WO97/03050、WO97/04785、WO97/02920、WO97/17070、WO97/23478、WO97/26246、WO97/30053、WO97/44350、WO98/02436和美国专利号5,532,359。对血管生成的含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂的实例参见EuropeanJ.ofCancer，第35卷，No.9，第1394-1401页(1999)。“血管生成抑制剂”指以任何机制抑制新血管生成的化合物。血管生成抑制剂的实例包括但不限于酪氨酸激酶抑制剂例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)的抑制剂；表皮来源、成纤维细胞来源或血小板来源生长因子；MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂；整联蛋白阻滞剂；干扰素-α；白细胞介素-12；戊聚糖多硫酸酯；环加氧酶抑制剂，包括非类固醇抗炎药(NSAIDs)例如阿司匹林和布洛芬，也包括选择性环氧化酶2抑制剂例如塞来考昔和罗非考昔(PNAS，第89卷，第7384页(1992)；JNCI，第69卷，第475页(1982)；Arch.Opthalmol.，第108卷，第573页(1990)；Anat.Rec.，第238卷，第68页(1994)；FEBSLetters，第372卷，第83页(1995)；Clin，Orthop.第313卷，第76页(1995)；J.Mol.Endocrinol.，第16卷，第107页(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，第75卷，第105页(1997)；CancerRes.，第57卷，第1625页(1997)；Cell，第93卷，第705页(1998)；Intl.J.Mol.Med.，第2卷，第715页(1998)；J.Biol.Chem.，第274卷，第9116页(1999))，类固醇抗炎药(例如皮质激素、盐皮质激素、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、倍他米松)；羧基酰胺基三唑；考布他汀A-4；角鲨胺；6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇；沙利度胺；血管生长抑素；肌钙蛋白-1；血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))，及抗VEGF的抗体(参见NatureBiotechnology，第17卷，第963-968页(1999.10月)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO00/44777；和WO00/61186)。包括调节或抑制凝固作用及纤维蛋白溶解系统的其他治疗药物调节或抑制血管生成并也可与本发明化合物联用(参见综述Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000))。这种调节或抑制凝固作用及纤维蛋白溶解途径的药物的实例包括，但不限于肝素(参见Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素及羧肽霉U抑制剂(也称为活性凝血酶activatable纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa])(参见ThrombosisRes.101329-354(2001))。在PCT公开号WO03/013,526及美国系列号60/349,925(2002年1月18存档)中描述了TAFIa抑制剂。“干扰细胞周期关卡的药物”指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶，从而使癌细胞对DNA损害药物敏感的化合物。这种药物包括ATR抑制剂、ATM抑制剂、Chk1及Chk2激酶抑制剂和cdk及cdc激酶抑制剂且特定的例证为7-羟基星孢素、flavopiridol(黄酮类抗肿瘤药)、CYC202(Cyclacel)及BMS-387032。“细胞增殖和生存信号传导途径的抑制剂”指抑制细胞表面受体及那些表面受体的信号转导级联下游区的药物。这种包括EGFR抑制剂的抑制剂(例如gefitinib和erlotinib)、ERB-2抑制剂(例如曲妥单抗)、IGFR的抑制剂、细胞因子受体抑制剂、MET抑制剂、PI3K抑制剂(例如LY294002)、丝氨酸/苏氨酸激酶(包括但不限于例如在WO02/083064、WO02/083139、WO02/083140及WO02/083138中描述的Akt抑制剂)、Raf激酶抑制剂(例如BAY-43-9006)、MEK抑制剂(例如CI-1040及PD-098059)和mTOR抑制剂(例如WyethCCI-779)。这种药物包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。“细胞凋亡诱导剂”包括TNF受体家族成员(包括TRAIL受体)的激活剂。本发明也包括与为选择性COX-2抑制剂的NSAID’s的组合。为说明书的目的，将COX-2的选择性抑制剂NSAID’s定义为具有抑制COX-2作用超过抑制COX-1作用至少100倍的特异性的抑制剂，其通过细胞或微粒体试验测定的COX-2IC50与COX-1IC50的比率评价。这种化合物包括但不限于在美国专利5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利5,698,584、美国专利5,710,140、WO94/15932、美国专利5,344,991、美国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598，所有均通过引用结合到本文中。特别适用于本治疗方法的COX-2抑制剂为3-苯基-4-(4-(甲基磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲基磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；或其药学上可接受的盐。已经描述的特异性COX-2抑制剂且因此适用于本发明的化合物包括但不限于帕瑞考昔、CELEBREX和BEXTRA或其药学上可接受的盐。其他血管生成抑制剂的实例包括但不限于，内皮生长抑素、ukrain、豹蛙酶(ranpirnase)、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基(氯乙酰基)氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化戊糖甘露糖磷酸酯、7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-氢吲哚酮(SU5416)。上文所用“整联蛋白阻滞剂”指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体结合到αvβ3整联蛋白的化合物；选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体结合到αvβ5整联蛋白的化合物；选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体结合到αvβ3整联蛋白且选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体结合到αvβ5整联蛋白的化合物；也指拮抗、抑制或阻碍在毛细管内皮细胞上表达的特定整联蛋白活性的化合物。该术语也指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1及α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语也指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1及α6β4整联蛋白的任何组合的拮抗剂。一些酪氨酸激酶抑制剂的特定的实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基)吲哚满-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-脱甲氧格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟基甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3’，2’，1’-k1]吡咯[3，4-i][1，6]苯并二氮杂辛因-1-酮、SH268、染料木黄酮、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯[2，3-d]嘧啶甲烷磺酸酯、4-(3-溴-4-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-2，3-二氮杂萘胺和EMD121974。与除抗癌化合物外的化合物联用也包括在本方法中。例如，要求保护的化合物与PPAR-γ(即PPAR-gamma)激动剂及PPAR-δ(即PPAR-delta)激动剂联用适于治疗某些恶性肿瘤(malingnancies)。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体增生物激活受体γ和δ。文献中已经报道了在内皮细胞上PPAR-γ的表达及其在血管生成中作用(参见J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.OphthalmolVis.Sci.2000；412309-2317)。最近，PPAR-γ激动剂在体外显示抑制对VEGF的生血管应答；曲格列酮和马来酸罗格列酮均抑制小鼠中视网膜新生血管形成。(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括但不限于噻唑烷二酮类(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯异唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(公开于USSN09/782,856)，及2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色满-2-甲酸(公开于USSN60/235,708和60/244,697)。本发明的另一个实施方案为本公开化合物与用于治疗癌症的基因治疗的联用。治疗癌症的遗传学策略的综述参见Hall等(AmJHumGenet61785-789，1997)及Kufe等(CancerMedicine，5thEd，第876-889页，BCDecker，Hamilton2000)。可使用基因治疗递送任何抑制肿瘤基因。这种基因的实例包括但不限于p53，其可经重组病毒介导基因转移递送(例如参见美国专利号6,069,134)；uPA/uPAR拮抗剂(″Adenovirus-MediatedDeliveryofauPA/uPARAntagonistSuppressesangiogenesis-DependentTumorGrowthandDisseminationinMice，″GeneTherapy，August1998；5(8)1105-13)及干扰素γ(JImmunol2000；164217-222)。也可联合给予本发明化合物与先天多药耐药(MDR)的抑制剂，特别是与高水平表达转运蛋白相关的MDR的抑制剂。这种MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853及PSC833(伐司朴达)。本发明化合物可镇吐药结合使用，以治疗由于单独使用本发明化合物或与放射治疗联用导致的恶心或呕吐，包括急性的、迟发的、晚期的及预期的呕吐。为预防或治疗呕吐，本发明化合物可联用其他镇吐药，特别是神经激肽-1受体拮抗药；5HT3受体拮抗药，例如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和扎托司琼；GABAB受体激动剂，例如巴氯芬；皮质类固醇例如地卡特隆(地塞米松)、康宁乐、Aristocort(去炎松及其衍生物制剂的商品名)、Nasalide(鼻松)、Preferid、Benecorten或其他例如公开于美国专利号2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712药物；抗多巴胺剂，例如吩噻嗪类(例如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)；甲氧氯普胺或屈大麻酚。在一个实施方案中，选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质类固醇的镇吐药可作为治疗或预防给予本发明化合物可以引起的呕吐的辅助药物使用。例如在美国专利号5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；欧洲专利公开号EP0360390、0394989、0428434、0429366、0430771、0436334、0443132、0482539、0498069、0499313、0512901、0512902、0514273、0514274、0514275、0514276、0515681、0517589、0520555、0522808、0528495、0532456、0533280、0536817、0545478、0558156、0577394、0585913、0590152、0599538、0610793、0634402、0686629、0693489、0694535、0699655、0699674、0707006、0708101、0709375、0709376、0714891、0723959、0733632和0776893；PCT国际专利公开号WO90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170、94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；且在英国专利公开号2266529、2268931、2269170、2269590、2271774、2292144、2293168、2293169和2302689中完全描述了与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂。在上述提及的专利和公开中完全描述了这些化合物的制备，其通过引用结合到本文中。在一个实施方案中，与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂选自在美国专利号5,719,147中描述的2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或其药学上可接受的盐。也可联合给予本发明化合物与利于治疗贫血的药物。这种贫血治疗药物为例如连续促红细胞生成素(continuouseythropoiesis)受体激动剂(例如阿法依伯汀)。也可联合给予本发明化合物与利于治疗中性粒细胞减少症的药物。这种中性粒细胞减少症治疗药为例如调节嗜中性粒细胞生产和功能的造血生长因子例如人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的实例包括非格司亭。也可联合给予本发明化合物与免疫增强药物，例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙。因此，本发明范围包括本发明要求保护的化合物与选自雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、先天多药耐药的抑制剂、止吐药、利于治疗贫血的药物、利于治疗中性白细胞减少的药物、增强免疫药物、细胞增殖及生存信号传导抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂的第二种化合物联合使用。涉及本发明化合物的术语“给药”及其相关表述(例如“给予”一种化合物)指将化合物或化合物的前体药物引入到需要治疗动物的系统中。如果本发明化合物或其前体药物与一种或多种其他活性药物(例如细胞毒素剂等)联合给药，则“给药”及其变化各自理解为包括同时和依次引入化合物或其前体药物及其他药物。本文中所用术语“组合物”是指包括包含特定量的特定成分的产物，也包括任何直接或间接得自特定量的特定成分的组合的产物。本文中所用术语“治疗上有效量”意指通过研究者、兽医、医学博士或其他临床医生的研究在组织、系统、动物或人中引起生物学或医学效应的活性化合物或药用试剂的量。术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”指对患有癌性疾病哺乳动物的治疗且指通过杀死癌细胞有效减轻癌的症状，并且有效抑制癌的生长和/或转移。在一个实施方案中，用作第二种化合物的血管生成抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂、表皮来源的生长因子的抑制剂、成纤维细胞来源的生长因子的抑制剂、血小板来源的生长因子的抑制剂、MMP抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、戊聚糖多硫酸酯、环氧合酶抑制剂、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-(氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙立度胺、血管生长抑素、肌钙蛋白-1和VEGF抗体。一种治疗癌症的方法也包括在权利要求书的范围内，其包括给予治疗上有效量的式I化合物并联用放射治疗和/或一种选自雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、先天多药耐药的抑制剂、止吐药、利于治疗贫血的药物、利于治疗中性白细胞减少症的药物、增强免疫药物、细胞增殖及生存信号传导抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂的化合物。且本发明的又一个实施方案是治疗癌症的方法，包括给予治疗上有效量的式I化合物并联用紫杉醇或曲妥单抗。本发明进一步的包括治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的式I化合物并联用COX-2抑制剂。本发明也包括适用于治疗或预防癌症的药用组合物，包含治疗上有效量的式I化合物和选自雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、细胞增殖及生存信号传导抑制剂(aninhibitorofcellproliferationandsurvivalsignaling)、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂的化合物。本发明的这些及其他方面从本文含有的讲解来说是显而易见的。试验通过下列描述的试验测试了实施例中描述的本发明化合物并发现其具有激酶抑制活性。在文献中已知且本领域技术人员可轻易的完成其他试验分析方法(参见，例如PCT公开号WO01/30768，5月3日，2001，第18-22页)。I.驱动蛋白ATP酶体外试验人聚组氨酸标记的KSP运动域(KSP(367H))的克隆与表达使用pBluescript全长人KSP构建体(Blangy等，Cell，vol.83，第1159-1169页，1995)作为模板通过PCR克隆用于表达人KSP运动域构建体的质粒。使用N-末端引物5’-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.1)及C-末端引物5’-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.2)扩增此运动域和颈连接区。PCR产物用AseI和XhoI消化，连接到pRSETa的NdeI/XhoI消化产物(Invitrogen)并转化进E.coliBL21(DE3)中。在37℃下培养细胞直到OD600为0.5。将培养物冷却到室温后用100μM的IPTG诱导KSP的表达并孵育过夜。通过离心沉淀出细胞并用冰预冷的PBS洗涤一次。迅速冰冻沉淀并在-80℃下储存。蛋白质纯化在冰上解冻细胞沉淀并重悬于溶解缓冲液(50mMK-HEPES，pH8.0，250mMKCI，0.1％Tween，10mM咪唑，0.5mMMg-ATP，1mMPMSF，2mMbenzimidine，1x完全蛋白酶抑制剂合剂(Roche))中。细胞悬液与1mg/ml溶菌酶和5mMβ-巯基乙醇在冰上孵育10分钟，然后超声处理(3×30秒)。随后所有步骤均在4℃下进行。溶解产物在40,000xg离心40分钟。在缓冲液A(50mMK-HEPES，pH6.8，1mMMgCl2，1mMEGTA，10μMMg-ATP，1mMDTT)中稀释上清液并加样到SP琼脂糖柱上(Pharmacia，5ml药筒)且用0-750mMKCl在缓冲液A中的梯度液洗脱。集合含有KSP的流分并用Ni-NTA树脂(Qiagen)孵育1小时。用缓冲液B(没有PMSF和蛋白酶抑制剂cocktail的溶解缓冲液)洗涤该树脂3次，然后将孵育15分钟并用缓冲液B洗涤的步骤重复3次。最后，用缓冲液C(除pH6.0外与缓冲液B相同)孵育并洗涤15分钟3次且倒入柱中。用洗脱缓冲液(除150mMKCl和250mM咪唑外与缓冲液B相同)洗脱KSP。集合含有KSP的流分，制成10％的蔗糖溶液并在-80℃储存。从自牛脑分离的微管蛋白制备微管。1mg/ml的纯化的微管蛋白(＞97％无MAP)在37℃下在10μM紫杉醇、1mMDTT、1mMGTP在BRB80缓冲液(80mMK-PIPES、1mMEGTA、1mMMgCl2、pH6.8)中存在下聚合。所得微管通过超速离心自未聚合微管蛋白分离并除去上清液。含有微管的沉淀轻轻的重悬于10μM紫杉醇、1mMDTT、50μg/ml氨苄西林及5μg/ml氯霉素在BRB80的溶液中。驱动蛋白运动域和微管、1mMATP(1∶1MgCl2∶Na-ATP)一起孵育，并在23℃下在含有80mMK-HEPES(pH7.0)、1mMEGTA、1mMDTT、1mMMgCl2和50mMKCl的缓冲液中化合。通过使用80mMHEPES和50mMEDTA的终止缓冲液组合物稀释2-10倍终止反应。通过加入150μl的含有2∶1比率的淬灭A淬灭B的淬灭C缓冲液经奎钠丁红/钼酸铵测定法测定自ATP酶水解反应所得游离磷酸盐。淬灭A含有0.1mg/ml奎钠丁红和0.14％聚乙烯醇；淬灭B含有12.3mM钼酸铵四水合物的1.15M硫酸溶液。反应物在23℃下孵育10分钟，并测定在540nm的磷酸盐-钼酸盐络合物的吸光度。在上述试验中检定了实施例中描述的化合物1-4并发现其具有的IC50≤50μM。II.细胞增殖试验以使对数增长超过24、48及72小时的密度将细胞铺在96-孔组织培养皿上并附着过夜。第二天，以10-点，半对数滴定加入到所有平板(compoundsareaddedina10-point，one-halflogtitrationtoallplates)。每个滴定系列操作3份，整个试验保持DMSO浓度恒定为0.1％。也包括只有0.1％DMSO的对照。制备在培养基中没有血清的每一化合物稀释系列。试验中血清的终浓度在200μL体积的培养基中为5％。在24、48或72小时向滴定板上的每个样品和对照孔加入20微升的Alamar蓝染色试剂，然后加入药物并37℃下再孵育。6-12小时后使用530-560纳米激发波长，590纳米发射波长在CytoFluorII板上分析Alamar蓝色荧光。通过绘图X轴为化合物浓度及Y轴为细胞生长的平均百分抑制率得到细胞溶解的EC50。仅用载体处理的对照孔的细胞生长定义为测定的100％生长，而化合物处理的细胞生长与其比较。使用所有者内部软件计算百分细胞溶解值并使用对数4-参数曲线拟合计算拐点。百分细胞溶解值定义为％细胞溶解值(荧光对照)-(荧光样品)X100X(荧光对照)-1拐点作为细胞溶解的EC50。III.通过FACS评价有丝分裂停止及细胞凋亡FACS分析通过测定处理过细胞总体内DNA含量而用于评价化合物阻止细胞有丝分裂和诱导细胞凋亡的能力。以每6cm2组织培养皿1.4×106个细胞的浓度接种细胞并使其附着过夜。然后用载体(0.1％DMSO)处理细胞或滴定化合物系列8-16小时。处理后，在指定时间通过胰蛋白酶消化并离心沉淀获得细胞。用PBS冲洗细胞沉淀并用70％乙醇固定及在4℃下储存过夜或更长时间。为FACS分析，至少要沉淀500,000固定的细胞并吸出除去70％乙醇。然后在4℃下细胞与RNaseA(50Kunitzunits/ml)和碘化丙锭(50μg/ml)孵育30分钟，并使用BectonDickinsonFACSCaliber分析。使用Modfit细胞周期分析模拟软件(VerityInc.)分析数据(自10,000细胞)。通过绘图X轴为化合物浓度及Y轴为每个滴定点细胞周期的G2/M阶段中细胞的百分数(通过碘化丙锭荧光测定)得到有丝分裂停止的EC50。使用SigmaPlot程序分析数据从而使用对数4-参数曲线拟合计算拐点。拐点作为有丝分裂有丝分裂的EC50。使用类似方法测定化合物致细胞凋亡的EC50。此时，在每个滴定点的凋亡细胞百分数(通过碘化丙锭荧光测定)绘制在Y轴上，并如上所述进行类似分析。IV.免疫荧光显微技术检测单极的纺锤体用于DNA、微管蛋白和粒周蛋白免疫荧光染色的方法基本如Kapoor等(2000)J.CellBiol.150975-988中所述。为了细胞培养研究，将细胞铺在组织培养处理过的玻璃房室载玻片上并使其附着过夜。然后细胞和目标化合物孵育4-16小时。孵育完成后，吸出培养基和药物并自载玻片除去房室和垫圈。然后根据参考文献透化、固定、洗涤细胞及阻断非特异抗体结合。阻断前用二甲苯将植入石蜡的肿瘤切片脱蜡并通过乙醇系列再水合。在4℃下载玻片孵育在一抗(小鼠单克隆抗α微管蛋白抗体，克隆DM1A得自Sigma稀释倍数1∶500；兔多克隆抗粒周蛋白抗体得自Covance，稀释倍数1∶2000)过夜。洗涤后，在室温下载玻片和结合的稀释到15μg/ml的二抗孵育(结合FITC的驴抗小鼠微管蛋白IgG；结合Texasred的驴抗兔粒周蛋白IgG)一小时。然后洗涤载玻片并用Hoechst33342复染色显影DNA。免疫染色样品用100x油浸物镜在Nikon落射荧光显微镜上使用Metamorph反褶积(deconvolution)和成像软件成像。实施例提供的实施例目的是帮助进一步理解本发明。采用特定的原料、物种和条件是为描述本发明而不是限制其合理的范围。方案1步骤12-溴-N-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(benzenecarboximidamide)(1-2)在80℃下向纯净的2-溴苄腈(1-1，5.0g，27.5mmol，1.0当量)和3-氟-4-甲基苯胺(3.44g，27.5mmol，1.00当量)的混合物加入固体氯化铝(3.66g，27.5mmol，1当量)，并在140℃下加热所得混合物30分钟。反应混合物冷却至23℃，放置14小时，然后溶解在氯仿(35mL)中。用NaHCO3水溶液(40mL)洗涤并浓缩产生2-溴-N-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(1-2)的深色油状物。LRMSm/z计算值C14H12BrFN2(M+H)308.2，测得308.2。步骤22-溴-N-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N’-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(1-3)在回流下加热2-溴-N-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N’-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(1-2，5.56g，18.1mmol，1当量)在二甲基甲酰胺二甲基缩醛(18.3mL，138mmol，7.60当量)中的溶液4.5小时。反应混合物浓缩得到2-溴-N-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N’-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(1-3)的深色油状物。LRMSm/z计算值C17H17BrFN3(M+H)363.4，测得363.2。步骤32-(2-溴苯基)-3-(3-氟-4-甲基苯基)嘧啶-4(3H)-酮(1-4)用(三甲基甲硅烷基)乙烯酮(0.39mL，2.76mmol，2当量)的甲苯(5mL)溶液处理2-溴-N-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N’-(3-氟-4-甲基苯基)亚氨代苯甲酰胺(1-3,500mg，1.38mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(5mL)溶液。在23℃下搅拌反应混合物5天。浓缩所得反应混合物，并经反相HPLC(乙腈H2O并存在0.1％TFA梯度洗脱)纯化残余物得到2-(2-溴苯基)-3-(3-氟-4-甲基苯基)嘧啶-4(3H)-酮(1-4)的深橙色固体。1HNMR(500MHz，CD3OD)δ8.12(d，1H，J＝6.8Hz)，7.53(d，1H，J＝7.8Hz)，7.46(d，1H，J＝7.6Hz)，7.32(t，1H，J＝7.6Hz)，7.24(t，1H，J＝7.8Hz)，7.20-7.08(m，3H)，6.67(d，1H，J＝6.6Hz)，2.19(s，3H)。序列表<110>Merck&Co.，Inc.Arrington，KennethL.Fraley，MarkE.Hartman，GeorgeD.<120>有丝分裂驱动蛋白抑制剂<130>21596<150>60/531,554<151>2003-12-19<160>2<170>FastSEQforWindowsVersion4.0<210>1<211>42<212>DNA<213>人工序列<220><223>全合成核苷酸序列<400>1gcaacgattaatatggcgtcgcagccaaattcgtctgcgaag42<210>2<211>60<212>DNA<213>人工序列<220><223>全合成核苷酸序列<400>2gcaacgctcgagtcagtgatgatggtggtgatgctgattcacttcaggcttattcaatat60权利要求1.式I的化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体其中a为0或1；b为0或1；m为0、1或2；p为1-3；r为0或1；s为0或1；R1选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8环烷基，和9)杂环基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、芳烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R2独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)(C＝O)aObC2-C10烯基，4)(C＝O)aObC2-C10炔基，5)CO2H，6)卤素，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)(C＝O)aNR6R7，10)CN，11)(C＝O)aObC3-C8环烷基，12)(C＝O)aOb杂环基，13)SO2NR6R7，和14)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R3a和R3b独立选自1)H，2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)(C＝O)aObC2-C10烯基，5)(C＝O)aObC2-C10炔基，6)CO2H，7)卤素，8)OH，9)ObC1-C6全氟烷基，10)(C＝O)aNR6R7，11)CN，12)(C＝O)aObC3-C8环烷基，13)(C＝O)aOb杂环基，14)SO2NR6R7，和15)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R4独立选自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR6R7，12)氧代，13)CHO，14)(N＝O)R6R7，15)(C＝O)aObC3-C8环烷基，16)SO2NR6R7，和17)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；R5选自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)卤素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)环烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-杂环基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和18)C(O)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多达3个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；R6和R7独立选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自R6的取代基取代，或者R6和R7可与连接它们的氮共同形成一个4-7元的单环杂环或每个环为4-7元的双环杂环，并任选含有除氮外的一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个或多个选自R5的取代基取代；Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；且Rb为H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NRa2、(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基-NHRa、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其具式II结构其中a、b、r、s、R4、R5、R6和R7的定义为权利要求1中式I化合物的定义，且p’为0-2；R2选自1)(C＝O)aC1-C10烷基，2)(C＝O)a芳基，3)(C＝O)aNR6R7，4)(C＝O)aC3-C8环烷基，5)(C＝O)a杂环基，6)SO2NR6R7，和7)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R4的取代基取代；R2a选自卤素和(C1-C6)烷基；R3a及R3b独立选自氢、(C1-C6)烷基、三氟甲基和卤素；且R4a及R4b独立选自氢、卤素和(C1-C6)烷基，条件是至少一个不为氢，或R4a及R4b组合形成二基，选自-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH＝CH-O-和-CH＝CH-N-。3.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中其中p’为0-2；r为0或1；s为O或1；R2为(C1-C6)亚烷基-NR6R7；所述亚烷基任选被最多达3个选自OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和NR6R7的取代基取代；R2a选自卤素和(C1-C6)烷基；R3a及R3b独立选自氢、(C1-C6)烷基、三氟甲基和卤素；R4a及R4b独立选自氢、卤素和(C1-C6)烷基，条件是至少一个不为氢；R5选自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)卤素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)环烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-杂环基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和18)C(O)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多达3个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2的取代基取代；R6及R7独立选自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)杂环基，5)C2-C10烯基，6)C2-C10炔基，和7)C3-C8环烷基，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个或多个选自R5的取代基取代，或者R6和R7可与连接它们的氮共同形成一个4-7元的单环杂环或每个环为4-7元的双环杂环，并任选含有除氮外的一个或两个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个或多个选自R5的取代基取代；Ra为(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；且Rb为H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NRa2、(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基-NHRa、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。4.一种化合物，其为2-(2-溴苯基)-3-(3-氟-4-甲基苯基)嘧啶-4(3H)-酮。5.一种药用组合物，其由权利要求1的化合物与药学上可接受的载体组成。6.一种药用组合物，其由权利要求3的化合物与药学上可接受的载体组成。7.一种治疗或预防需要这种治疗的哺乳动物癌症的方法，包括给予所述哺乳动物治疗上有效量的权利要求1的化合物。8.一种治疗或预防需要这种治疗的哺乳动物癌症的方法，包括给予所述哺乳动物治疗上有效量的权利要求3的化合物。9.权利要求7的治疗癌症或预防癌症的方法，其中癌症选自脑、生殖泌尿道、淋巴系统、胃、喉及肺的癌症。10.权利要求7的治疗癌症或预防癌症的方法，其中癌症选自组织细胞性淋巴瘤、肺腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤及乳腺癌。11.一种制造药用组合物的方法，包括使权利要求1的化合物与药学上可接受的载体结合。12.权利要求5的组合物，进一步包含选自以下的第二种化合物雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、细胞增殖及生存信号传导抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂。13权利要求12的组合物，其中第二种化合物为选自以下的血管生成抑制剂酪氨酸激酶抑制剂、表皮来源的生长因子的抑制剂、成纤维细胞来源的生长因子的抑制剂、血小板来源的生长因子的抑制剂、MMP抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、戊聚糖多硫酸酯、环氧合酶抑制剂、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-(氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌钙蛋白-1和VEGF抗体。14.权利要求12的组合物，进一步包含蛋白体抑制剂。15权利要求12的组合物，进一步包含aurora激酶抑制剂。16.权利要求12的组合物，进一步包含Raf激酶抑制剂。17.权利要求12的组合物，进一步包含丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。18.权利要求12的组合物，进一步包含不是KSP的另一种有丝分裂驱动蛋白的抑制剂。19.权利要求12的组合物，其中第二种化合物为选自它莫昔芬和雷洛昔芬的雌激素受体调节剂。20一种治疗癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用放射治疗。21.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用选自以下的化合物雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、先天多药耐药的抑制剂、止吐药、利于治疗贫血的药物、利于治疗中性白细胞减少的药物、增强免疫药物、细胞增殖及生存信号传导抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂。22.一种治疗癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用放射治疗和选自以下的化合物雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、含异戊二烯基的蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、先天多药耐药的抑制剂、止吐药、利于治疗贫血的药物、利于治疗中性白细胞减少的药物、增强免疫药物、细胞增殖及生存信号传导抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂。23一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物和紫杉醇或曲妥单抗。24.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物和GPIIb/IIIa拮抗剂。25.权利要求24的方法，其中GPIIb/IIIa拮抗剂为替罗非班。26一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用COX-2抑制剂。27.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用蛋白体抑制剂。28.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用aurora激酶抑制剂。29一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用Raf激酶抑制剂。30.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。31.一种治疗或预防癌症的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物并联用不是KSP的有丝分裂驱动蛋白的抑制剂。32.一种调节有丝分裂纺锤体形成的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物。33.一种抑制有丝分裂驱动蛋白KSP的方法，包括给予治疗上有效量的权利要求1的化合物。全文摘要本发明涉及2－苯基嘧啶酮化合物，适于治疗细胞增殖性疾病、与KSP驱动蛋白活性相关的疾病以及用于抑制驱动蛋白。本发明还涉及包含该化合物的组合物以及用它们治疗哺乳动物癌症的方法。文档编号A61K31/513GK1898215SQ200480038124公开日2007年1月17日申请日期2004年12月15日优先权日2003年12月19日发明者K·L·阿林顿,M·E·弗拉利,G·D·哈特曼申请人:默克公司