专利名称：挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种药物成分的提取方法及其药物组合物。
背景技术：
目前市场上治疗心脑血管疾病的药物多为西药，容易产生耐药性和较强的毒副作用，而且在治疗心律失常的同时西药本身又导致心律失常的产生。中药在治疗心脑血管疾病方面近几年取得了可喜的进步，但多以中医成方为研究对象，新中药方剂的研究很少。挂金灯甾类化合物来源于挂金灯(锦灯笼)，中医认为挂金灯性味微苦，归肺经，具有清热解毒，利咽化痰，利尿的功效；用于治骨蒸劳热，痰热咳嗽，咽喉肿痛，喑哑，黄疸，水肿，小便不利，天泡湿疮。所以，目前尚没有用挂金灯甾类化合物治疗心脑血管疾病的报道。
发明内容
本发明的发明人在挂金灯的研究中发现挂金灯甾类化合物对心律失常、心肌缺血、心脑血管硬化、心脑血管栓塞和高血压等心脑血管疾病有预防和治疗的作用。挂金灯甾类化合物按以下方法提取(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)过滤收集的提取液，再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化；(三)用浓度为50％～90％的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用浓度为60％～90％的醇溶解，过滤，滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65～75％的挂金灯甾类化合物、15～25％的苦参碱和5～15％的大黄制成。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由45～55％的挂金灯甾类化合物、25～35％的苦参碱和15～25％的小檗碱制成。含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由55～65％的挂金灯甾类化合物、30～40％的苦参碱和1～10％的麝香制成。本发明提取挂金灯甾类化合物的方法简单，挂金灯甾类化合物纯度高达50％以上。本发明中含挂金灯甾类化合物的药物组合物可用于治疗心律失常或心肌缺血，有效率分别为85％、90％和85％。
具体实施例方式
具体实施例方式
一本实施方式挂金灯甾类化合物按以下方法提取(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)过滤收集的提取液，再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化；(三)用浓度为50％～90％的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用浓度为60％～90％的醇溶解，过滤，滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
用本实施方式提取的挂金灯甾类化合物进行动物试验(本试验使用的挂金灯甾类化合物的纯度相同纯度为70％；试验中挂金灯甾类化合物都溶解于浓度为5％的葡萄糖后再注射，注射剂量均为10mL)(1)缺氧存活试验本实验分4组进行，每组10只、体重为18～22g的昆明种小鼠，第1组小鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水；第2组小鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物；第3组小鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物；第4组小鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物；注射30min后将小鼠放入含3g钠石灰的500mL磨口瓶里，瓶口途凡士林后改瓶盖，记录小鼠死亡时间。各组小鼠死亡时间如表1所示。
表1
第2、3和4组与第1组相比具有显著差异P＜0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物可以延长完全密闭小鼠存活时间，并增加抗缺氧能力。
(2)挂金灯甾类化合物对乌头碱诱发的心律失常的影响本实验分4组进行，每组10只、体重为200～230g的健康雌性Wistar大鼠，第1组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射10mL生理盐水；第2组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射5mg挂金灯甾类化合物；第3组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射15mg挂金灯甾类化合物；第4组雌性Wistar大鼠按体重每千克静脉注射75mg挂金灯甾类化合物；30min后按体重每千克腹腔注射5mg、20％的乌拉坦进行麻醉；然后将大鼠仰位固定并与BL-420生物机能实验系统相连扫描心电，待大鼠心电显示稳定后在第1组大鼠舌下静脉注射生理盐水，在第2、3和4组大鼠按体重每千克舌下静脉注射1mL、0.04％的乌头碱，注射5s内完滴制。
滴丸所采用的主药可以为穿山龙、槐米、雪胆提取浸膏；也可以采用穿山龙、槐米、雪胆提取浸膏的β-环糊精包合物。采用穿山龙、槐米、雪胆提取浸膏的β-环糊精包合物的优点在于其对味道苦的穿山龙、槐米、雪胆提取物进行包合后，使其口感好，患者容易接受。
滴丸完成后，可以采用素丸直接使用；或采用了薄膜包衣技术对素丸进行包衣，可有效掩盖药物的苦味并防止主药的引湿性而导致的滴丸吸湿，溶解粘连现象，保证滴丸在保存中不干丸、裂丸，也保证滴丸在储存当中的稳定性。所述包衣材料包括例如常规包衣材料或欧巴代包衣材料。
另外，本发明滴丸中部分示例性组分及其制剂工艺参数选择如下表所列
本发明金槐冠心滴丸表面光滑、硬度适当且圆整度好，粒径可以为2-5mm，适于容易地、没有任何不适地给药。
下表为金槐冠心滴丸与市售片剂的比较数据。
表4
a表示与第1组相比具有显著差异P＜0.05；b表示与第2组比具有显著差异P＜0.05；c表示与第3组相比具有显著差异P＜0.05；d表示与第4组相比具有显著差异P＜0.05；e表示与第5组相比具有显著差异P＜0.05。试验结果说明挂金灯甾类化合物具有抗心肌缺血作用。
具体实施例方式
二本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是醇为乙醇、丙醇或丁醇。其它与实施方式一相同。
具体实施例方式
三本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(一)中醇或水的重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的4～10倍。其它步骤与
具体实施例方式
四本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(三)中用大孔吸附树脂柱体积4～5倍、温度为50～70℃的醇回流洗脱1.8～2.2h。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施例方式
五本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(三)中减压或常压浓缩温度始终低于70℃；减压浓缩压力小于10-3Pa。其它步骤与
具体实施例方式
六本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(四)中减压干燥压力小于10-3Pa，温度低于70℃。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施例方式
七本实施方式与
具体实施方式
一、三或四的不同点是醇是体积浓度为70％的乙醇。其它与实施方式一、三或四相同。
具体实施例方式
八本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(一)中用重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的5～9倍的水加热煮沸挂金灯果实、根茎和/或宿萼3次，每次35～45min。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施例方式
九本实施方式与
具体实施方式
一的不同点是步骤(二)中大孔吸附树脂柱为DM130大孔吸附树脂柱。其它步骤与实施方式一相同。
具体实施例方式
十本实施方式挂金灯甾类化合物按以下方法提取(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)过滤收集的提取液，再进行甲壳素吸附；(三)收集吸附液，在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用浓度为60％～90％的醇溶解，过滤，滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
具体实施例方式
十一本实施方式含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65～75％的挂金灯甾类化合物、15～25％的苦参碱和5～15％的大黄制成。
本实施方式制成的药物组合物用于治疗心律失常。表5是本实施方式药物组合物治疗心律失常的临床药效学报告。
用法用量每日服三次，每次按病人体重每千克服用本实施方式药物组合物45mg。
对30例年龄55～60岁的男性心律失常患者进行10～20天治疗，患者病情明显好转的占55％(室性早搏消失、室性心动过速消失、窦性节律恢复)，患者病情轻度改善的占30％(室性早搏次数减少、室性心动过速次数减少)，治疗无效患者的占15％。本实施方式药物治疗心律失常的效果如表5所示，其中病情诊断采信正规医院出具心电图。
表5
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图10A-10型精装治疗箱托架示意11A-10型精装治疗箱自蓄热功能复合体尺寸规格5 自蓄热功能复合体图12A-10型精装治疗箱岫玉锥尺寸规格6 岫玉锥图13B-05型精装治疗箱底箱示意14B-05型精装治疗箱托盘示意15B-05型精装治疗箱铝合金箱箱体示意图
具体实施方式
以下根据实例例详细地说明本发明。但本发明并不限于这些实施例等。
实施例1、简装治疗盒
实施例2、B-05精装治疗箱
对30例年龄55～60岁的男性心律失常患者进行10～20天治疗，患者病情明显好转的占60％(室性早搏消失、室性心动过速消失、窦性节律恢复)，患者病情轻度改善的占30％(室性早搏次数减少、室性心动过速次数减少)，治疗无效患者的占10％。本实施方式药物治疗心律失常的效果如表6所示，其中病情诊断采信正规医院出具心电图。
表6
具体实施方式
十五本实施方式与
具体实施方式
十四的不同点是含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由46～54％的挂金灯甾类化合物、<p>上述步骤A中使用乙酸乙酯萃取的次数优选为4次。
按上述方法取苦碟子药材乙醇热回流提取液，浓缩至1ml相当于原生药4g，加1∶1(体积/体积)乙酸乙酯萃取，反复几次，合并各次乙酸乙酯层，加热回收乙酸乙酯后，测定溶液中总黄酮、内酯A含量，以萃取次数、总黄酮保留率、内酯A保留率为指标，检查水相中的有效成分的残留，结果如下
保留率＝乙酸乙酯萃取后药液含量/乙酸乙酯萃取前药液含量×100％试验数据表明萃取次数提高，水层内酯A保留率降低，萃取四次以后，水层内酯A的含量降低已不明显，继续萃取效果不佳，而且会出现水层与酯层难以分离的现象，故决定优选4次萃取。
乙酸乙酯萃取后的萃取液中含有大量的乙酸乙酯，因此对乙酸乙酯进行回收，既可重复利用以降低生产成本，减少环境污染，又可减少乙酸乙酯对产品的影响。采用普通回收工艺，待浓缩液已无明显的乙酸乙酯味，且浓缩操作难于进行时，停止浓缩操作，此时检查浓缩液的相对密度为1.20～1.30(80℃)，所得浓缩液即为所需的酯相。
苦碟子内的总黄酮由多种黄酮组成，其中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷等主要有效成分在酸性条件下容易沉淀从而与其它杂质分离。
传统小针的酸沉条件中采用50％的硫酸做沉淀剂，部分原因在于在先操作中使用了氧化钙乳做沉淀剂，使用硫酸可将溶液中残留的氧化钙进一步沉淀完全，减少由于纯化操作引入新杂质的量；本发明对此工艺条件进行了优化，不采用氧化钙乳沉淀剂，一方面可避免引入新的杂质，对产品质量造成影响，另一方面可避免由于使用氧化钙乳沉淀剂所造成的环境污染。
传统小针的酸沉法纯化，收取的是上清液，弃去沉淀。由于有效成分主要在沉淀中，因此收得率很低。又由于本发明只是考虑不同pH值条件下，纯化工艺的效果，因此，采用注射剂生产中常用的盐酸溶液或氢氧化钠溶液做为pH调节剂，可满足工
具体实施方式
十八本实施方式与
具体实施方式
十七的不同点是含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由56～64％的挂金灯甾类化合物、31～39％的苦参碱和2～9％的麝香制成。
具体实施例方式
十九本实施方式与
具体实施方式
十七的不同点是含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由60％的挂金灯甾类化合物、35％的苦参碱和5％的麝香制成。
权利要求
1.挂金灯甾类化合物的提取方法，其特征在于挂金灯甾类化合物按以下方法提取(一)将挂金灯果实、根茎和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)过滤收集的提取液，再依次通过甲壳素和大孔吸附树脂柱进行吸附纯化；(三)用浓度为50％～90％的醇对大孔吸附树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，在减压或常压条件下浓缩成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用浓度为60％～90％的醇溶解，过滤，滤液经减压干燥即得到挂金灯甾类化合物。
2.根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法，其特征在于醇为乙醇、丙醇或丁醇。
3.根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法，其特征在于步骤(一)中醇或水的重量是挂金灯果实、根茎和/或宿萼总重量的4～10倍。
4.根据权利要求1所述的挂金灯甾类化合物的提取方法，其特征在于步骤(三)中用大孔吸附树脂柱体积4～5倍、温度为50～70℃的醇回流洗脱1.8～2.2h。
5.含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由65～75％的挂金灯甾类化合物、15～25％的苦参碱和5～15％的大黄制成。
6.根据权利要求5所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由66～74％的挂金灯甾类化合物、16～24％的苦参碱和6～14％的大黄制成。
7.含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由45～55％的挂金灯甾类化合物、25～35％的苦参碱和15～25％的小檗碱制成。
8.根据权利要求7所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由46～54％的挂金灯甾类化合物、26～34％的苦参碱和16～24％的小檗碱制成。
9.含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由55～65％的挂金灯甾类化合物、30～40％的苦参碱和1～10％的麝香制成。
10.根据权利要求9所述的含挂金灯甾类化合物的药物组合物，其特征在于含挂金灯甾类化合物的药物组合物按重量百分比由56～64％的挂金灯甾类化合物、31～39％的苦参碱和2～9％的麝香制成。
全文摘要
挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物，它涉及一种药物成分的提取方法及其药物组合物。挂金灯甾类化合物的提取方法(一)用醇或水提取挂金灯果实、根茎和/或宿萼；(二)提取液纯化；(三)进行洗脱，将洗脱液浓缩成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用醇溶解，过滤，滤液经干燥即得到挂金灯甾类化合物。挂金灯甾类化合物用于制备治疗心脑血管疾病的药物组合物。本发明提取挂金灯甾类化合物的方法简单，挂金灯甾类化合物纯度高达50％以上。本发明中含挂金灯甾类化合物的药物组合物可用于治疗心律失常或心肌缺血，有效率分别为85％、90％和85％。
文档编号A61P9/00GK1864717SQ20061001015
公开日2006年11月22日 申请日期2006年6月14日 优先权日2006年6月14日
发明者杨宝峰, 初文峰, 方志伟, 董陆陆 申请人:哈尔滨医科大学