专利名称：含芒果苷的药用组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含芒果苷的药用组合物及其制备方法。
背景技术：
芒果苷(mangiferin)，又名芒果素、知母宁，是从漆树科植物芒果叶或百合科植物知母等植物中提取的天然多酚类化合物，分子式C19H18O11，分子量422。其化学结构如下 芒果苷的药理研究表明其具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、降糖、抗炎、利胆、免疫调节等等。但因本品几乎不溶于水，溶解性差，生物利用度低，而一定程度上限制了其作为新药的研发。
为此，我们通过大量的研究，发明了一种含芒果苷的药用组合物，该组合物可以有效地增加芒果苷的溶解性，提高生物利用度，并可将其制成注射剂等各种剂型，从而更好地使该化合物发挥药效。
发明内容
本发明的目的是提供一种含芒果苷的药用组合物及其制备方法，在不改变芒果苷结构的前提下，增加芒果苷水溶性，克服芒果苷溶解性差之缺陷，并增加其生物利用度。其特征是选择环糊精衍生物作为包合材料，将芒果苷制成包合物，以此增加芒果苷在水中的溶解度。环糊精与芒果苷的比例可以是3g-30g∶1g范围的任何一种比例。所说的环糊精衍生物包括各种取代基的α-环糊精衍生物、β-环糊精衍生物、羟丙基-γ-环糊精衍生物及磺丁基醚-β-环糊精衍生物等。
本发明的技术解决方案是将芒果苷加入适量的有机溶剂溶解，在搅拌情况下，滴加到水溶解的环糊精衍生物溶液中，继续搅拌混合溶液，使环糊精衍生物将芒果苷包合完全。由此制备具有较好水溶性的制剂。
具体工艺如下取1重量份的芒果苷，用约150重量份60％乙醇加热溶解；取3-30重量份的环糊精衍生物，加两倍环糊精衍生物量的水搅拌溶解，至环糊精衍生物溶液呈粘稠状。
将两份溶液放入水浴中，高速搅拌情况下，将芒果苷溶液滴加到环糊精衍生物溶液中。继续搅拌溶液，直至呈粘稠状。得到芒果苷环糊精混合物。
本发明提供的芒果苷包合物用作化疗增效药的大鼠有效剂量范围为15-30mg/日，按照不同种类动物间剂量换算公式折到人体为150-300mg/日/人。给药途径为口服，每日3次。因动物与人体之间的差异，故允许实际临床应用剂量有所调整。亦可采用其它给药途径。
本发明提供的药用组合物加入一种或多种药用辅料制成任何一种药剂学上的剂型。
具体实施例方式下列实施例旨在进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明，在不背离本发明的精神和原则的前提下，对本发明所做的本领域普通技术人员容易实现的任何改动都将落入本发明的待批权利要求范围之内。
制备例1芒果叶用95％乙醇渗漉提取，减压回收乙醇，稠膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，回收溶剂得到石油醚提取部、乙酸乙酯提取部、水层沉淀物。其中水层沉淀物用55％乙醇热提冷却得到黄色针状结晶，经反复纯化处理得到芒果苷。HPLC测定芒果苷含量为90％。
制备例2知母饮片水煎煮两次，每次1小时，水煎液浓缩，80％乙醇沉淀，取上清液，减压回收乙醇，上大孔吸附树脂吸附，水洗至清，30％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，减压干燥，即得。HPLC测定芒果苷含量为88％。
实施例1取芒果苷100mg，用60％乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-β-环糊精3.0g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例2取芒果苷100mg，用70％乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-β-环糊精0.3g，加水15mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例3取芒果苷100mg，用65％乙醇约15mL加热使之溶解；称取α-环糊精1.0g，加水10mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例4取芒果苷100mg，用丙酮约5mL加热使之溶解；称取β-环糊精1.0g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例5取芒果苷100mg，用无水乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-γ-环糊精1.0g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例6取芒果苷100mg，用甲醇约15mL加热使之溶解；称取磺丁基醚-β-环糊精1.0g，加水20mL室温下搅拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
制剂制备例1芒果苷环糊精包合物注射液的制备取芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物10g，加入1000ml重蒸馏水中，溶解，过0.22um滤膜，120℃灭菌15min，即得。
制剂制备例2芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物胶囊的制备芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物200g，过80目筛，加入微晶纤维素100克作为稀释剂组成配方，混匀，装胶囊，即得，含药量为100mg/粒。
试验例1芒果苷环糊精包合物溶解度测定分别精密称取研成细粉芒果苷5mg和芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物500mg，置于25±2℃50ml蒸馏水中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况。芒果苷仍有可见溶质颗粒，其水溶解度小于0.1mg/ml，属水几乎不溶物质；芒果苷羟丙基-β-环糊精则完全溶解。另精密称取研成细粉芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物1000mg，置于25℃±2℃30ml蒸馏水中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，芒果苷羟丙基-β-环糊精有少量可见溶质颗粒。因此芒果苷羟丙基-β-环糊精水溶解度大于10mg/ml，属水略溶物质。
试验例2芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物与芒果苷口服生物利用度比较。
1.药液配制称取芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物适量，加去离子水溶解，配成浓度为5mg/mL溶液，为样A；称取芒果苷适量，加1％羧甲基纤维素钠溶液混悬，制成5mg/mL混悬液，为样B。
2.灌胃给药方案大鼠禁食16h，自由饮水，分别灌胃给药样A和样B，剂量分别为50mg/kg。分别于给药前5min和给药后15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min、300min、、360min、480min取血，分离血清。
3.样品处理血浆样品的处理精密吸取血浆便样品0.2mL，精密加入冷藏的10％三氯乙酸40μL，涡旋3min，12000r/min离心10min，吸取上清液约120μL置于尖底进样瓶中，HPLC自动进样。
4样品的测定4.1仪器1100系列高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；包括G1312A二元泵，G1313A自动进样器，4.2血浆样品测定的色谱条件色谱柱岛津Shim packCLC ODS柱(150mm×6mm，5μm)；流动相甲醇 乙腈1.2％KH2PO4水溶液(24∶2∶74)；流速0.8mL/min检测波长254nm柱温40℃。
4.3结果表1芒果苷包合物与芒果苷的生物利用度比较
上述结果显示口服芒果苷羟丙基-β-环糊精包合物血药浓度(Cmax)远高于口服芒果苷血药浓度(Cmax)，表明芒果苷包合物生物利用度有较大提高。试验例3芒果苷包合物肿瘤增效作用研究1.药物按照制剂制备例2制备的芒果苷包合物。顺铂由山东省德州制药厂生产。
2.动物Wistar大鼠，SPF级，雌雄各半，150～180g，室温18～25℃，湿度40～60％。由昆明医学院实验动物中心提供。饲料由广东省医学动物实验中心提供，自由摄食和饮水，每日更换饮水瓶一次。
3.实验方法3.1造模Walker256细胞系引自上海医药工业研究院药理室，将细胞系在1640培养基中培养，把细胞浓度调成约1×106，无菌下将0.5ml细胞注射到刚断奶的Wistar大鼠腹腔中，6-8天长成腹水瘤。再将腹水瘤鼠处死，收集腹水于无菌小瓶中，取0.5ml细胞于消毒皮肤后行皮下注射到断奶大鼠腋下制成实体瘤，8-10天将动物处死，无菌下取瘤组织置于盛有1640培养基的平皿中，将肿瘤切成1mm3大小的瘤块备用。另取大鼠，雌雄不拘，分模型组、顺铂组、芒果苷包合物高中低剂量组、芒果苷包合物高中低剂量组与顺铂合用组，共8组。将动物于2％戊巴比妥钠静脉注射麻醉下切开腹腔，暴露肝脏，用眼科手术镊轻轻在肝上打一遂道，将瘤块植入，压迫止血，关腹后静脉注射1ml生理盐水放回笼中饲养。
3.2分组将肝癌大鼠按体重随机分为8组，每组10只。分别为模型组、顺铂组、芒果苷包合物高中低剂量组、芒果苷包合物高中低剂量组与顺铂合用组。按表2所示剂量和给药方式每日给药一次，连续给药14天。
4.检测指标末次给药24小时后处死，取血，剥取瘤组织。
5.1瘤重与抑瘤率抑瘤率％＝(1-给药组平均瘤重/模型组平均瘤重)×100％根据各组抑瘤率，按Burgi修正公式对联合用药组进行疗效判断。即Q＝联合用药组抑瘤率/(顺铂组抑瘤率+芒果苷组抑瘤率-顺铂组抑瘤率×芒果苷组抑瘤率)若q值为0.85～1.15为单纯相加，q＞1.15为增强，q＜0.85为拮抗。
5.结果芒果苷溶液对顺铂抑瘤的增效作用表2芒果苷对肝癌大鼠抑瘤率的影响
与模型组比较*，P＜0.05；**，P＜0.01。与相应化疗药组比较#，P＜0.05；##，P＜0.01。与相同剂量芒果苷溶液组比较△，P＜0.05；△△，P＜0.01。
结果表明，较低剂量的顺铂(0.5mg/kg)肝癌的抑瘤活性较低，抑瘤率只达24.3％。芒果苷包合物只在30mg/kg剂量下表现出较明显的抑瘤活性，抑瘤率为23.4％。当芒果苷包合物与顺铂联合应用时，抑瘤活性明显提高，各组与模型组比较具有显著性差异。芒果苷包合物15mg/kg和30mg/kg与顺铂合用时q值为1.41和1.79，大于1.15，表明芒果苷包合物对顺铂的抑瘤有一定的增效作用。
7结论芒果苷包合物与顺铂联用可明显增强顺铂的抑瘤活性。
权利要求
1.一种含芒果苷和环糊精衍生物的药物组合物，其特征在于芒果苷被包含在环糊精衍生物中，二者配比为芒果苷1g、环糊精衍生物3g-30g。
2.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于芒果苷被包含在环糊精衍生物中，二者配比为芒果苷1g、环糊精衍生物3g-10g。
3.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于环糊精衍生物可以选自各种取代基的α-环糊精衍生物、β-环糊精衍生物、羟丙基-γ-环糊精衍生物及磺丁基醚-β-环糊精衍生物等。
4.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于环糊精衍生物优选为羟丙基-β-环糊精。
5.权利要求1的药物组合物的制备方法，其特征在于取芒果苷，用适当溶剂溶解；取环糊精衍生物，加适量的水搅拌溶解，高速搅拌情况下，将芒果苷溶液滴加到环糊精衍生物溶液中。继续搅拌溶液，直至呈粘稠状。得到芒果苷环糊精混合物。
6.权利要求1的药用组合物加入一种或多种药用辅料制成任何一种药剂学上的剂型。
全文摘要
一种含芒果苷的药用组合物及其制备方法，具体为芒果苷被包含在环糊精衍生物中，且二者配比为芒果苷1g、环糊精衍生物3g－30g范围内，可有效增加芒果苷的溶解度与生物利用度。
文档编号A61P37/00GK1977855SQ20061016684
公开日2007年6月13日 申请日期2006年12月7日 优先权日2005年12月9日
发明者滕厚雷, 于翠翠, 邵萌, 翟大伟, 李子香, 刘军锋 申请人:海南盛科天然药物研究院有限公司