含有荭草素和异荭草素的组合物制剂及其制备方法

专利名称：：含有荭草素和异荭草素的组合物制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种含有荭草素和异荭草素的组合物制剂及其制备方法，属于中药制药的
技术领域：
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背景技术：
：冠心病心绞痛是指由于冠状动脉硬化或痉挛导致心肌缺血、缺氧所引起的心绞痛，约占心绞痛患者的90%。它属于人类重大疾病之一，其死亡率一直是重大疾病之首。冠心病心绞痛以前多发于中老年患者，随着社会的发展，生活水平的提高，其发病年龄趋于年轻化。因此，冠心病的发病率趋向提高之势，防治任务十分沉重，已引起国内外关注。随着现代科学技术的发展，人们对冠心病的诊断和防治也取得了一些进展，药物治疗方面，在扩张冠脉的基础上(硝酸酯、亚硝酸酯类)，出现了钙离子拮抗剂、P-受体阻滞剂、溶栓药物的应用，为治疗冠心病心绞痛提供了多种手段。然而临床实践表明，单纯西药治疗只治标不治本，尤其是药物的副作用，使患者难以接受和长期服用。当代人类回归大自然的愿望日益强烈，普遍希望接受天然无公害的中药治疗，从而为中医药的发展提供了良好的契机。冠心病心绞痛在中医中称之为胸痹心痛，开发一种高效、低毒、质量稳定、剂型先进的治疗冠心病心绞痛的纯中药制剂是本发明的目的。冠心病心绞痛病情来势凶猛，对病人身心造成极大的伤害，因此，临床上常常需要一种能够迅速缓解症状、解除病人痛苦、起效迅速、效果明显的药物。中国专利02128066.5报道了荭草l-50、灯盏细辛50-0制作而成的一种中药制剂，该制剂的制备采用以下工艺荭草、灯盏细辛水煮、醇沉处理，然后用乙酸乙酯提取，正丁醇提取，聚酰胺柱分离的方法获得提取物。该工艺中将荭草和灯盏细辛共同提取，灯盏细辛在其中也采用乙酸乙酯提取和正丁醇提取，故造成了药物有效成分的损失。在专利号200610051009.0中，针对现有技术的不足以及工艺的优化和改进，本发明人将荭草和灯盏细辛分别进行水煎煮提取，荭草提取后用乙酸乙酯、正丁醇以及聚酰胺柱进行分离纯化，而灯盏细辛水煎煮后利用黄酮类化合物在酸性条件下析出沉淀，不溶于水，在中性和弱碱性条件下溶解的性质纯化精制。该工艺较好的保留了药效成分，并简化了操作步骤，但是本发明人对工艺优化和改进的过程中，还发现将荭草采用醇、水结合提取，灯盏细辛采用醇提取，然后采用不同的步骤进行纯化精制，得到的提取物有效成分更高，杂质含量更低，药效作用良好，更有利于注射制剂的制备。
发明内容本发明的目的在于提供一种含有荭草素和异荭草素的组合物制剂及其制备方法，该制剂以注射制剂为主；本发明对本方的临床应用、组方及药材资源进行了调查研究，利用现代技术对制剂中药材的质量、制剂工艺、有效成分含量等进行了研究，具有工艺先进，临床应用安全有效，质量可控，生物利用度高，疗效确切，稳定性好等优点。本发明是这样构成的按照重量份计算，上述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂是由中药原料荭草1IO份和灯盏细辛110份经提取制备而成水针剂、输液剂、粉针剂、冻干剂及其它药剂学上可以接受的剂型。优选的配比为荭草3-8份灯盏细辛1-5份最优选的配比为荭草5份灯盏细辛1份本发明的中药制剂，是荭草和灯盏细辛分别提取的步骤制备的，所述步骤进一步包括将分别提取后得到的提取物合并，以该合并的提取物为药物活性成分，按照制剂学常规技术制备成制剂。所述分别提取，步骤如下步骤1)荭草乙醇回流提取，滤过，回收乙醇得醇提取液备用；药渣加水煎煮，滤过，滤液浓縮，醇沉，滤过，回收乙醇，滤液与醇提取液合并，调ra值，用正丁醇萃取，合并正丁醇液，用水洗，回收正丁醇，残留物加乙醇溶解，上聚酰胺柱，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)灯盏细辛乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，加水，静置，调PH，弃上清液，沉淀用水洗，干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物。以上步骤进一步包括将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，按照制剂学常规技术，制成所述中药制剂的步骤。本发明的组合物制剂，制备方法为步骤1)荭草乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，得醇提取液备用；药渣加水煎煮，滤过，浓縮，醇沉，静置，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，滤液与醇提液合并，用盐酸调PH，然后用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗，回收正丁醇，残留物加乙醇溶解，上聚酰胺柱，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)灯盏细辛乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，加水，静置，用盐酸调PH，保温，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗，干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)上述提取物，加注射用水，搅拌使溶，再加入甘油，混匀，用饱和碳酸钠调PH6.8-7.8，补加注射用水，混匀，用微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，灭菌，即得注射液。优选的步骤l)为荭草加8-12倍50-80%乙醇浸泡10-14小时，回流提取1-3次，每次0.5-2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至50°C时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加8-12倍水煎煮2-4次，每次1_2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至5(TC时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达50-75%，搅拌均匀，静置10-24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调ra卜4.5，用1/4-1倍量水饱和的正丁醇提取2-6次，合并正丁醇液，用1/16-1/2倍量水洗1-3次，减压回收正丁醇，残留物加60-90%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为10-1000g，①4-10cm，径高比1:2-10，吸附流速0.5_4.OBV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；优选的步骤2)为灯盏细辛加6-10倍50-70%乙醇浸泡10_14小时，回流提取2-4次，每次0.5-2小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置1024小时，抽滤，滤液用盐酸调PH14.5，55t:保温210小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH25，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；进一步包括步骤3)，步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提5取物合并，加注射用水，搅拌使溶，再加入甘油，混匀，用饱和碳酸钠调PH6.8-7.8，补加注射用水，混匀，用微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，灭菌，即得注射液。更优选的步骤1)为荭草加10倍量70%乙醇浸泡12小时，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加10倍水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至50°C时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达65%，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调K13，用1/2倍量水饱和的正丁醇提取4次，合并正丁醇液，用1/8倍量水洗2次，减压回收正丁醇，残留物加80%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为500g，①8cm，径高比1:6，吸附流速1.5BV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加8倍65%乙醇浸泡12小时，回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水1000毫升，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液用盐酸调ra2，55t:保温6小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH34，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为，将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，加1800毫升注射用水，搅拌使溶，再加入甘油适量，混匀，用饱和碳酸钠调rae.8-7.8，补加注射用水至10000毫升，混匀，用0.45um和0.22um微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，每支10ml，105。C下灭菌60分钟，即得1000支注射液。本发明的功能主治具有活血化瘀、通脉止痛功能。用于冠心病心绞痛心血瘀阻证，症见胸闷、胸部剌痛，固定不移，心悸不宁，唇舌暗紫，脉细涩等冠心病心绞痛见上述证候者。应用范围本药剂用于冠心病心绞痛心血瘀阻证，症见胸部剌痛、胸闷，固定不移，心悸不宁，唇舌暗紫，脉细涩等冠心病心绞痛见上述证候者。与现有技术相比，本发明针对药材的理化性质，对荭草和灯盏细辛采用了分别提取的方法。将荭草采用醇、水相结合的粗提取，醇沉、正丁醇、聚酰胺多级分离精制的方法来制备得到荭草素和异荭草素提取物；将灯盏细辛采用醇提取，不同Kl分离纯化的方法制备得到灯盏细辛总黄酮提取物，具有工艺先进，临床应用安全有效，质量可控，生物利用度高，疗效确切，稳定性好等优点。为了使本领域普通技术人员更好的理解本发明，以下通过实验及实施例来进一步阐述本发明组合物制剂的组成、其制备方法及用途—、本发明工艺的选择1、荭草提取工艺研究1.1提取溶剂的选择分别称取荭草药材50g，采用加水煎煮、乙醇回流、乙醇回流后药渣加水煎煮三种方法进行提取，以提取液色泽、过滤难易程度、荭草素、异荭草素提取率以及总固体物收率为考察指标，对提取溶剂进行研究。表1荭草提取工艺表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实验结果表明，采用醇、水分提相结合的方法提取荭草药材，提取液在色泽、含量、过滤难易等方面均取得良好效果。虽然单独采用醇提的含量也较高，但考虑下阶段的精制纯化工艺，优选醇、水结合。1.2醇提工艺研究a.提取次数考察样品制备取荭草药材50g，加70%乙醇加热回流4次，每次1小时，分别收集每次的回流液，滤过。以荭草素和异荭草素总量提取率为指标进行考察表2提取次数_总固形物得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表中数据显示，提取四次时，荭草中总固形物收率几乎已经无大变化，因此确定提取次数为1-3次，其中提取2次为最佳工艺，较经济合理。b.提取乙醇量的考察样品制备取荭草50g，依下表条件加入不同的70X乙醇，加热回流2次，每次l小时，滤过，收集滤液。结果如下表3提取量_总固形物得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>总固形物收率随乙醇量的加大而增加，但到一定程度后没有较大的增加，所以选择乙醇的量为药材的8-12倍，优选加入量为10倍量。c.乙醇浓度的考察样品制备取荭草50g，依下表条件加入不同浓度的乙醇，加热回流2次，每次l小时，滤过，收集滤液。结果如下表4乙醇浓度_总固形物得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>总固形物收率随乙醇浓度的加大而增加，但当浓度增加到90%反而总收率下降，因此选择乙醇浓度为50-80%，优选为70%。另外，申请人在研究中发现，将荭草药材提取之前浸泡10-14小时，其荭草素、异荭草素等的提取更为完全。故综合上述结果，决定荭草药材的醇提工艺为用50%_80%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取1-3次，每次8-12倍量、0.5-2小时。优选为用70%乙醇浸泡12小时，回流提取2次，每次10倍量、1小时。1.3水提工艺研究将乙醇回流提取后的药渣进行水煎煮提取，参考本发明人在专利号200610051009.0中荭草的水煎煮工艺，以荭草素、异荭草素、总固休物收率为指标，考察工艺的稳定性及合理性。a.提取次数考察将药渣加入IO倍量水，按下表次数进行提取，每次1小时，以总固形物、荭草素、异荭草素提取率为指标，考察提取次数对药材有效成分提取率的影响。表5提取次数_提取率评价表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果表明，提取率随提取次数的增加而增加，但到一定程度后没有较大的增加，所以选择提取2-4次，优选提取3次，较经济合理。b.加水量考察乙醇提取后的药渣，按下表加水量分别提取3次，每次1小时，以总固形物提取率为指标，考察加水量对药材有效成分提取率的影响。表6加水量_总固形物提取率评价表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果表明，提取率随加水量的加大而增加，但到一定程度后没有较大的增加，所以选择加水量为8-12倍，优选加入量为10倍量，经济合理。2、荭草精制工艺研究在工艺改进过程中，本发明人将荭草的粗提取物采用乙酸乙酯萃取，正丁醇萃取，最后过聚酰胺柱的方式除杂，其操作繁琐，同时对半成品的相对密度、pH值等皆有要求，本发明人经过反复的试验以及对文献的参考，去除乙酸乙酯萃取的步骤，试验结果表明，有效成分的转移率、药液的色泽、澄明度并无影响，同时由于工艺简化，节约了生产时间以及生产成本，适合大生产的要求。以精制前粗提取物中荭草素为100%计，结果如下表7不同纯化条件结果表工艺<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实验结果表明，采用醋酸乙酯提取的样品，色素较重，后续工艺处理中测定有效成分的损失率较大，而乙醇回流提取灯盏细辛药材，提取液在色泽、含量、澄明度等方面均取得良好效果。故选择乙醇为提取溶剂。3.2醇提工艺研究a.提取次数考察样品制备取灯盏细辛药材10g，加60%乙醇加热回流5次，每次1小时，分别收集每次的回流液，滤过。表9提取次数_野黄吝甙得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表中数据显示，提取四次时，灯盏细辛中野黄芩甙收率几乎已经无大变化，因此确定提取次数为2-4次，其中提取3次为最佳工艺，较经济合理。b.提取乙醇量的考察样品制备取灯盏细辛10g，依下表条件加入不同量的65%乙醇，加热回流3次，每次l小时，滤过，收集滤液。结果如下表10提取量_总固形物得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>野黄芩甙收率随乙醇量的加大而增加，但到一定程度后没有较大的增加，所以选择乙醇的量为药材的6-10倍，优选加入量为8倍量。c.乙醇浓度的考察样品制备取灯盏细辛10g，依下表条件加入不同浓度8倍量的乙醇，加热回流3次，每次1小时，滤过，收集滤液。结果如下表11乙醇浓度_总固形物得率表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>野黄芩甙收率随乙醇浓度的加大而增加，但当浓度增加到70%后没有较大的增加，因此选择乙醇浓度为50-70%，优选为65%。另外，申请人在研究中发现，将灯盏细辛药材提取之前浸泡10-14小时，其野黄芩甙等有效成分的提取更为完全。故综合上述结果，决定灯盏细辛药材的醇提工艺为用50%_70%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取2-4次，每次8-10倍量、0.5-2小时。优选为用65%乙醇浸泡12小时，回流提取3次，每次8倍量、1小时。4、灯盏细辛提取物精制工艺研究本发明人根据工艺研究的积累以及对大量文献的考察，将灯盏细辛的醇提取物采用1%蛋白干溶液除杂，乙酸乙酯萃取，水溶液调节酸碱沉降除杂等方式，来考察提取物的纯化精制工艺。以醇提取物精制前为100%计，结果如下表12不同溶剂纯化工艺表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>以上试验表明，利用黄酮类化合物在酸性条件下析出沉淀，不溶于水，在中性和弱碱性条件下溶解的性质，采用加水溶解，自然沉降，调节酸碱除杂的方式纯化精制灯盏细辛提取物，是非常合理的，而有机溶剂的残留会为后续注射制剂的制备带来隐患，故酸碱调节的方式不仅简化生产工艺，降低成本，而且操作简便，是适合大生产的精制方式。二、荭草和灯盏细辛组合物制剂对大鼠实验性心肌缺血的作用2.1药物香丹注射液，批号040706华西医科大学制药厂生产，为阳性对照药1;注射用复方荭草，按照专利号200610051009.0所述的方法制备，为阳性对照药2;按本发明制备方法制成的复方荭草注射液，为本发明药物。动物SD雄性大鼠。2.2实验方法与结果取SD雄性大鼠，随机分为4组，按照下表剂量分组给药。试验前动物麻醉、固定，记录正常心电图。打开胸腔前接上人工呼吸机，结扎左冠状动脉降支后，迅速关闭胸腔，恢复呼吸，记录心电图，有明显ST段抬高者为手术成功征象(剔除未出现明显心肌梗死心电图波形者)。各组分别股静脉给药6.0g/kg，生理盐水对照组给同体积生理盐水。记录结扎喉10、30、120min各时间点心电图，计算各时间ST段上下偏移总mv数，并进行统计处理，结果见表13。试验结束后，立即取出心脏，用生理盐水洗余血，剪心房及各大血管、筋膜、心耳，称取心室重量，然后将心肌切成等厚度的5片，置于37°C0.5%N-BT染色体液中染色10min，取出剪去被染色的非梗塞心肌，称重未染色的梗塞心肌，按式子心肌缺血百分比=缺血区重量+心室重量X100X，计算心肌缺血区百分率，进行统计处理，结果见表14。表13对大鼠结扎左冠状动脉前降支后ECG的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>与N.S对照组比较*P<0.05**P<0.01表14对大鼠急性心肌梗塞范围的影响(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>与N.S对照组比较*P<0.05**P<0.01试验结果表明，本发明复方荭草注射液与已有注射制剂及申请专利的工艺比较，可以明显提高对大鼠实验性心肌缺血的作用效果，且相对已有来说疗效相当，相对于申请人之前的研究工艺，本发明注射制剂的疗效更好，生物利用度更高。2.3对小鼠常压耐缺氧实验取小鼠按表15分组及剂量给药，各给药组给药0.lml/只，对照组给等量N.S，10min后，放入预先放15g钠石灰的广口瓶内，记录小鼠死亡时间，进行统计学处理，结果见表15。表15对小鼠常压耐缺氧时间的影响(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>与N.S对照组比较*P<0.05**P<0.01试验结果表明，本发明荭草和灯盏细辛组合物制剂有明显耐缺氧作用，与生理盐水组比较均有显著性差异C"P〈0.01)，与阳性对照1比较疗效相当，优于阳性对照2。以上试验表明，本发明荭草和灯盏细辛组合物制剂能明显改善缺血性心肌心电图，对大鼠急性心肌梗塞有明显保护作用，同时对小鼠常压下的耐缺氧作用较为明显。说明本发明工艺所得到的产品疗效确切，临床应用安全有效，稳定性好，质量可控，生物利用度高，工艺先进合理。具体实施例方式需要说明的是，本制备实施例仅仅是介绍一种制备提取物的方法，是为了阐释本发明，而不是限制本发明。实施例l:注射液的制备原料荭草7500g、灯盏细辛1500g制备方法步骤1)为荭草加10倍量70%乙醇浸泡12小时，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加10倍水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至50°C时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达65%，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调K13，用1/2倍量水饱和的正丁醇提取4次，合并正丁醇液，用1/8倍量水洗2次，减压回收正丁醇，残留物加80%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为500g，①8cm，径高比1:6，吸附流速1.5BV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加8倍65%乙醇浸泡12小时，回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水1000毫升，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液用盐酸调ra2，55t:保温6小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH34，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为，将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，加1800毫升注射用水，搅拌使溶，再加入甘油适量，混匀，用饱和碳酸钠调rae.8-7.8，补加注射用水至10000毫升，混匀，用0.45um和0.22um微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，每支10ml，105。C下灭菌60分钟，即得复方荭草注射液1000支。实施例2:输液的制备原料荭草1000g、灯盏细辛5000g制备方法步骤1)为荭草加8倍50%乙醇浸泡10小时，回流提取0.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加8倍水煎煮2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至5(TC时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达50%，搅拌均匀，静置10小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调rai，用1/4倍量水饱和的正丁醇提取2次，合并正丁醇液，用1/16倍量水洗，减压回收正丁醇，残留物加60%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为100g，①4cm，径高比1:2，吸附流速0.5BV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加10倍70%乙醇浸泡14小时，回流提取4次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置24小时，抽滤，滤液用盐酸调ra4.5，55t:保温10小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至ra5，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，加注射用水，搅拌使溶，再加入甘油，混匀，用饱和碳酸钠调PH6.8-7.8，补加注射用水，用常规方法制成输液制剂。实施例3:冻干粉针剂的制备原料荭草3000g、灯盏细辛1000g制备方法步骤1)为荭草加12倍80%乙醇浸泡14小时，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加12倍水煎煮4次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至50°C时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达75%，搅拌均匀，静置24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调5，用l倍量水饱和的正丁醇提取6次，合并正丁醇液，用1/2倍量水洗3次，减压回收正丁醇，残留物加90X乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为1000g，①10cm，径高比1:IO，吸附流速4.OBV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加6倍50%乙醇浸泡10小时，回流提取2次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置io小时，抽滤，滤液用盐酸调rai，55t:保温2小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至ra2，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物混合，加注射用水，搅拌使溶，用常规方法制备成冻干粉针剂。实施例4:粉针剂的制备原料荭草1000g、灯盏细辛100g制备方法步骤l)为荭草加9倍60%乙醇浸泡12小时，回流提取2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加9倍水煎煮4次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至5(TC时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达70%，搅拌均匀，静置18小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调K12-4.5，用1/2倍量水饱和的正丁醇提取3次，合并正丁醇液，用1/4倍量水洗2次，减压回收正丁醇，残留物加70%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为400g，①6cm，径高比1:40，吸附流速2.0BV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加9倍55%乙醇浸泡12小时，回流提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置15小时，抽滤，滤液用盐酸调PH13，55t:保温5小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH24，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物混合，加注射用水，搅拌使溶，用常规方法制备成粉针剂。实施例5:片剂的制备原料荭草100g、灯盏细辛1000g制备方法步骤1)为荭草加11倍75%乙醇浸泡10小时，回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加11倍水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至50°C时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达55%，搅拌均匀，静置15小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调rai-3，用3/4倍量水饱和的正丁醇提取5次，合并正丁醇液，用1/8倍量水洗3次，减压回收正丁醇，残留物加85X乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为600g，①9cm，径高比l:8，吸附流速3.OBV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加7倍60%乙醇浸泡14小时，回流提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置18小时，抽滤，滤液用盐酸调PH24.5，55t:保温8小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH35，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)为取荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物，混合均匀，加入辅料，制粒，压片，即得。实施例6:取荭草4000g和灯盏细辛1000g，粉碎，采取上述实施例中任一方法得到荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物，再加入常规辅料制备成滴丸。实施例7:将上述实施例中任一方法得到的荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物，用制剂学常规技术制备成丸剂。实施例8:将实施例1得到的荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物混合，用制剂学常规技术制备成胶囊剂。实施例9:将实施例4得到的荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物混合，加入乙醇制软材，制粒，干燥，包装，得颗粒剂。权利要求一种含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于按照重量组分计算它是由中药原料荭草1～10份和灯盏细辛1～10份经以下制备方法制备而成步骤1)荭草乙醇回流提取，滤过，回收乙醇得醇提取液备用；药渣加水煎煮，滤过，滤液浓缩，醇沉，滤过，回收乙醇，滤液与醇提取液合并，调PH值，用正丁醇萃取，合并正丁醇液，用水洗，回收正丁醇，残留物加乙醇溶解，上聚酰胺柱，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)灯盏细辛乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓缩，加水，静置，调PH，弃上清液，沉淀用水洗，干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物；步骤3)将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，按照制剂学常规技术，制成所述中药制剂。2.如权利要求1所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于生药的重量配比为荭草3-8份灯盏细辛l-5份。3.如权利要求1所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于生药的重量配比为荭草5份灯盏细辛1份。4.如权利要求l-3任一所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于其中所述步骤1)为荭草乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，得醇提取液备用；药渣加水煎煮，滤过，浓縮，醇沉，静置，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，滤液与醇提液合并，用盐酸调PH，然后用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，用水洗，回收正丁醇，残留物加乙醇溶解，上聚酰胺柱，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；所述步骤2)为灯盏细辛乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇并浓縮，加水，静置，用盐酸调PH，保温，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗，干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物。5.如权利要求4所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于其中所述步骤1)为荭草加8-12倍50-80%乙醇浸泡10-14小时，回流提取1-3次，每次0.5-2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至50°C时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加8-12倍水煎煮2-4次，每次1_2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至5(TC时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达50-75%，搅拌均匀，静置10-24小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调ra卜4.5，用1/4-1倍量水饱和的正丁醇提取2-6次，合并正丁醇液，用1/16-1/2倍量水洗1-3次，减压回收正丁醇，残留物加60-90%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为10-1000g，①4-10cm，径高比1:2-10，吸附流速0.5_4.OBV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；所述步骤2)为灯盏细辛加6-10倍50-70%乙醇浸泡10-14小时，回流提取2_4次，每次O.5-2小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水，不断搅拌，静置1024小时，抽滤，滤液用盐酸调PH14.5，55t:保温210小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH25，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物。6.如权利要求5所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于进一步包括步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，加注射用水，搅拌使溶，再加入甘油，混匀，用饱和碳酸钠调rae.8-7.s，补加注射用水，混匀，用微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，灭菌，即得注射液。7.如根据权利要求5所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于步骤1)为荭草加10倍量70%乙醇浸泡12小时，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓縮至得至5(TC时相对密度为1.04-1.06，得醇提取液备用；药渣加10倍水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮至5(TC时相对密度为1.05-1.07，加乙醇使含醇量达65%，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓縮至5(TC时相对密度为1.04-1.06，与前述醇提取液合并，用盐酸调ra3，用1/2倍量水饱和的正丁醇提取4次，合并正丁醇液，用1/8倍量水洗2次，减压回收正丁醇，残留物加80%乙醇2500ml溶解，上聚酰胺柱，柱参数为500g，①8cm，径高比1:6，吸附流速1.5BV/h，收集流穿液和洗脱液，回收乙醇，残留物真空干燥，得荭草素和异荭草素提取物；步骤2)为灯盏细辛加8倍65%乙醇浸泡12小时，回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液回收乙醇并减压浓縮至5(TC时相对密度为1.10-1.12，加水1000毫升，不断搅拌，静置12小时，抽滤，滤液用盐酸调ra2，55t:保温6小时，倾弃上清液，抽滤，沉淀用水洗至PH34，真空干燥，得灯盏细辛总黄酮提取物。8.如权利要求6所述含有荭草素和异荭草素的组合物制剂，其特征在于其中所述步骤3)为将荭草素、异荭草素提取物和灯盏细辛总黄酮提取物合并，加1800毫升注射用水，搅拌使溶，再加入甘油适量，混匀，用饱和碳酸钠调rae.8-7.8，补加注射用水至10000毫升，混匀，用0.45um和0.22um微孔滤膜滤过，滤液无菌灌装，每支10ml，105t:下灭菌60分钟，即得1000支注射液。全文摘要本发明涉及一种含有荭草素、异荭草素的组合物制剂及其制备方法，它是用荭草1-10份、灯盏细辛1-10份分别进行提取，然后精制纯化制备而成。其中荭草采取醇、水提取相结合的方法得到粗提取物，再经过正丁醇萃取、聚酰胺除杂的方法精制而成荭草素、异荭草素提取物；灯盏细辛采取乙醇提取得到粗提取物，再经过酸碱调节沉降精制而成灯盏细辛总黄酮提取物。与现有技术相比，本发明制备方法在有效降低药物的不良反应，提高疗效的同时简化了生产工艺，降低成本，而且操作简便，使得到的产品临床应用安全有效，稳定性好，生物利用度高，从而提高和保证了产品的质量。文档编号A61K36/185GK101757129SQ200810069078公开日2010年6月30日申请日期2008年12月26日优先权日2008年12月26日发明者窦啟玲申请人:贵州益佰制药股份有限公司