新型的级联聚合物络合物、它们的制备方法以及包含它们的药物组合物的制作方法

专利名称：：新型的级联聚合物络合物、它们的制备方法以及包含它们的药物组合物的制作方法新型的级联聚合物络合物、它们的制备方法以及包含它们的药物组合物本发明涉及权利要求中表征的主题，即新型的级联聚合物络合物、包含这些化合物的组合物、所述络合物在诊断中的用途和制备这些化合物和组合物的方法。目前临床上采用的用于磁共振成像(MRI或NMR)的现代成像法的造影剂[例如Magnevist⑧或ProHance^分布在身体的全部细胞外间隙(血管内和间质)中。这种分布空间包括了约20%的身体体积。细胞外MRI造影剂首先成功地用于脑和脊柱疾病病过程的临床诊断，因为其中局部分布空间的情况十分特殊。在脑和脊髓中，健康组织中的细胞外造影剂由于血脑屏障不能离开血管内空间。在具有血脑屏障损伤的疾病过程(例如恶性肿瘤、炎症、脱髓鞘病症等)的情况下，脑中形成对这些细胞外造影剂血管通透性增加的区域(Schmiedl等人，MRIofblood-brainbarrierpermeabilityinastrocyticgliomas:applicationofsmallandlargemolecularweightcontrastmedia,Magn.Reson.Med.22:288，1991)。通过禾廿用这种血管通透性损伤，来认识别相对于健康组织具有高对比度的患病组织是可能的。然而，在血管和脊髓的外部，没有上述造影剂的这种通透性屏障(Canty等人，First-passentryofnonioniccontrastagentintothemyocardialextravascularspace.Effectsonradiographicestimateoftransittimeandbloodvolume.Circulation84:2071，1991)。因此，造影剂的积累不再依赖于血管通透性，而是仅仅依赖于相应组织中细胞外间隙的大小。利用这些造影剂不可能将血管与周围的间质间隙区分开来。特别对于血管造影来说，仅分布在血管空间中的造影剂是期望的。通过磁共振成像的方式，这种血池剂应该能够区分灌注充分的组织与灌注不充分的组织并由此来诊断缺血。通过使用血管造影剂，还应该能够区分由于贫血而梗塞的组织与周围的健康组织或缺血的组织。当目的是例如区分心肌梗塞与缺血时，这尤其重要。17迄今为止，大多数怀疑患有心血管病症(这种病症是西方工业化国家中最普通的死亡原因)的病人不得不接受侵入性诊断检查。在血管造影术中，目前尤其使用含碘造影剂辅助的x射线诊断。这些检査涉及各种缺点它们涉及辐射应激风险，不方便并且造成紧张，这尤其是由含碘造影剂必须以比NMR造影剂高很多的浓度使用而产生的。因此，需要可标记血管空间的NMR造影剂(血池剂)。这些化合物因良好的耐受性和高活性(使MRI中的信号强度大大增加)而值得注意。通过使用与大分子或生物分子连接的络合剂来至少部分地解决这些问题的方法至今仅取得非常有限的成功。因此，例如，欧洲专利申请0088695和0150844中所述的络合物中的顺磁中心的数量不足以产生满意的成像。通过向大分子生物分子中多次引入络合单元来增加所需的金属离子的数量与该生物分子的亲和性和/或特异性的不可容许的损害有关[J.Nucl.Med.M，1158(1983)]。大分子通常可适合作为血管造影术的造影剂。然而，例如白蛋白-GdDTPA(Radiology1987:162:205)在大鼠内静脉注射24小时后在肝组织中显示有几乎为剂量的30%的累积。另外，在24小时内仅有剂量的20%被消除。大分子聚赖氨酸-GdDTPA(欧洲专利申请，公开号0233619)同样地证明适合作为血池剂。然而，由于其制备方法，这种化合物由各种大小的分子的混合物组成。在大鼠排泄试验中可能显示，这种大分子经肾通过肾小球滤过被原样排出。然而，由于其合成方法，聚赖氨酸-GdDTPA也可能含有太大以致不能在肾小球滤过中通过肾毛细血管而由此留在体内的大分子。也已有对基于碳水化合物例如葡聚糖的大分子造影剂的描述(欧洲专利申请，公开号0326226)。这些化合物的缺点是通常它们只能运载约5%的增强信号的顺磁阳离子。欧洲专利公开0430863中所述的聚合物代表血池剂方向上的一个进步，因为它们不再具有上述聚合物特有的尺寸和分子量的不均一性。然而，关于在血液中延长的停留时间、完全排泄、耐受性和/或活性方面，它们仍然18不能令人满意。欧洲专利EP0836485(Schmitt-Willich等人)代表了MR血池剂方向上的另一个进步，因为它描述了耐受性良好并且可被完全排泄的聚合物。然而，在特别用作冠状动脉造影术的造影剂和使用较高的磁场例如1.5或3特斯拉的情况下，还是期望钆络合物在血液中具有较高的浓度以及适当时更长的停留时间。因此，目的是提供没有上述缺点的新型诊断方法，特别是用于鉴别和定位血管病症的诊断方法。本发明实现了该目的。已经发现出人意料地明显适用于制备不显示所述的缺点NMR诊断试剂的络合物，所述络合物包含具有形成络合物的配体的含氮级联聚合物、至少4个原子序数为20-29、39、42、44或57-83的元素的离子、HAS结合单元、连接基(适当时)和无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子(适当时)以及适当时包含酰化的氨基。本发明的级联聚合物络合物可以用通式i来描述r一L一A画(X-[Y-(Z-(W-Kw)z)y]丄-,(i)其中R^HAS-结合单元，L-连接基或键，A-基本分枝数(basemultiplicity)为a的含氮级联核，X和Y-相互独立地为直接键或伸长分枝数(reproductionmultiplicity)分别为x和y的级联伸长单元，Z和W=相互独立地为直接键或伸长分枝数分别为z和w的级联伸长单元，K、络合剂的残基，3=2-12的数字，并且x、y、z和w-相互独立地为l-4的数字，条件是所述级联核A的a个基本分枝中刚好一个分枝代表刚好一个与L连接的点，并且条件是所述级联聚合物络合物在所述络合剂残基K中总共包含至少419个原子序数为20-29、39、42-44或57-83的元素的离子，并且适当时包含无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子。优选的式I化合物是特征在于下式适用于分枝数的积的化合物"(a-l)*x*y*z*w^64。特别优选的式I化合物是特征在于下式适用于分枝数的积的化合物8<(a—1)*x*y*z*w<48。以下适合作为级联核A:氮原子，UU2AnN-UCH，一N、2PuN——CH2~~CH2——N(CH,),(CH，).'N——CH~CH2~N、j2Pu220<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中m和n是l-10的数字，p是0-10的数字，IJi是(^或E，1^是QS或E，其中E代表基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中o是l-6的数字，(^是氢原子或Q2，并且《是直接键，M1、M2、M3、M"相互独立地为直接键、任选地插入1-3个氧原子和/或任选地被1-2个氧代基取代的d-do-亚烷基链，R。是分枝的或未分枝的C,-C,。-烷基、硝基、氨基、羧酸基，或者是,u'其中，(^的数量对应所述基本分枝数a，并且条件是刚好一个(52代表与L的连接。级联核的最简单的例子是氮原子，它的三个键(基本分枝数a=3)在第一"内层"(级l)被两个级联伸长单元X和Y(当X是直接键时)或Z(当X和Y各自代表直接键时)占据；换句话说，基础的级联起始物氨A(H)a=NH3的三个氢原子已被两个级联伸长单元X和Y或Z和连接L的直接键代替。上述级联核A的例子中存在的(^的数量(其中02出现在各级核A中)代表所述基本分枝数a。级联伸长单元X、Y、Z和W包含-N(^(^基，其中，Qi是氢原子或02并且02是直接键。各级联伸长单元(例如X)中存在的02的数量对应于该单元的伸长分枝数(例如在X的情况下为x)。分枝数(a-l)xyzw的积表示连接在所述级联聚合物中的络合剂残基K的数量。本发明的聚合物在分子中包含至少4个且最多64个K残基，在任何情况下所述K残基都能结合l-最多3个(在二价离子的情况下)、优选一个上述原子序列的元素的离子。最后一级，即与所述络合剂残基K连接的级联伸长单元W通过NH基(-NQ、2，其中Q4旨氢原子且Q2-直接键)与K连接，然而上一级级联伸长单元可以通过NH(^基(例如通过酰化反应)和通过N(^(^基(例如通过烷基化反应)连接。本发明的级联聚合物络合物最多具有十级(即在任何情况下可能有不止一个的级联伸长单元X、Y和Z存在于分子中)，但是优选具有2-5级,并且分子中的至少两个级联伸长单元是不同的。可以优选地提及的级联核A是上述通式所覆盖的那些，其中m是l-3的数字，特别优选l，n是l-3的数字，特别优选l，p是0-3的数字，特别优选l，o是数字1，M1、M2、M3、M4相互独立地为直接键、-CH2-、-C0-或-CH2C0-基，并且R°;l-CH2NU'U2-、CH3-或N02基。可以提及的更优选的级联起始物A是例如三(氨乙基)胺，三(氨丙基)胺，二亚乙基三胺，三亚乙基四胺，四亚乙基五胺，1,3，5-三(氨甲基)苯，1,3，5-苯三酰胺(Trimesamide)，氨基间苯二甲酰胺，3，5-二(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3，5-二(3-氨基丙氧基)苯甲酰胺，3,5-二(2-氨基乙氧基)苯胺，3，5-二(3-氨基丙氧基)苯胺，3,4，5-三(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3,4，5-三(3-氨基丙氧基)苯甲酰胺，3，4,5-三(2-氨基乙氧基)苯胺，3,4，5-三(3-氨基丙氧基)苯胺，3,5-二氨基-1-苯甲酰胺，1,4，7-三氮杂环壬垸，241,4，7，10-四氮杂环十二烷，1，4,7，10，13-五氮杂环十五垸，1，4，8，11-四氮杂环十四垸，1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷，1，4，7,10,13，16,19，22，25,28-十氮杂环三十烷，四(氨甲基)甲烷，l，l，l-三(氨甲基)乙垸，三(氨丙基)硝基甲烷，2,4，6-三氨基-1,3,5-三嗪，赖氨酰胺，鸟氨酰胺，谷氨酰胺天冬酰胺，二氨基丙酰胺。特别优选的式I的化合物选自氨基间苯二甲酰胺，3,5-二(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3,5二(3-氨基丙氧基)苯甲酰胺，3,5-二(2-氨基乙氧基)苯胺，3，5-二(3-氨基丙氧基)苯胺，3，4，5-三(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3,4，5-三(3-氨基丙氧基)苯甲酰胺，3，4,5-三(2-氨基乙氧基傳胺，3，4，5-三(3-氨基丙氧基)苯胺，3，5-二氨基-1-苯甲酰胺，赖氨酰胺，鸟氨酰胺，谷氨酰胺天冬酰胺，二氨基丙酰胺。可以指出，可以单纯从形式上选择级联核A的定义以及由此区分级联核与第一级联伸长单元或连接基，因此不必考虑期望的级联聚合物络合物的实际合成结构。因此，例如三(氨乙基)胺不仅可以被认为其本身是级联核A(比较所示的A的第一通式，其中m-n-p-l，U^E，o是数字1并且U'-I^:Q2)，也被认为是氮原子(-级联核A)，该氮原子具有作为第一级的两个级联伸长单元并在任何情况下通过以下结构式与连接基连接<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>(与E的定义比较)。所述级联伸长单元X、Y、Z和W相互独立地由以下来确定，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>其中，U'是Q'或E，U2是Q2或E，E代表基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>，其中o是l-6的数字，Q1是氢原子或Q2，(52是直接键，U3是d-C2。-亚烷基链，其任选地插入1-10个氧原子和/或1-2个-N(CO)q-R2-、1-2个亚苯基和/或1-2个亚苯氧基，和/或任选地被1-2个氧代基、硫代、羧基、CrC5-垸基羧基、(VCV垸氧基、羟基、d-Cs-垸基取代，其中q是数字0或l，并且R2是氢原子、任选地被1-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，B是氢原子或以下基团1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>V是次甲基—同时，L/是直接键或基团M，并且US具有IJS的一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>I个含义，或者<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>是以下基团之一-NH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>同时，1^和IJS相同并且是直接键或基团M，其中M是直接键、任选地插入1-3个氧原子和/或任选地被1-2个氧代基取代的C,-do-亚垸基链。优选的级联伸长单元X、Y、Z和W是那些化合物，其中在上述通式中基团U3是直接键、-CO-、-COCH2OCH2CO-、-COCH2-、-CH2CH2-、-CONHC6H4-、-COCH2CH2CO-、-COCH2-CH2CH2CO-或-COCH2CH2CH2CH2CO-，基团U4是直接键或者是-CH2CO-，基团U5是直接键、-(CH2)4-、-CH2CO-、-CH(COOH)-、-CH2OCH2CH2-、-CH2C6H4-、CH2-C6H4OCH2CH2-，1基E是基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>可以提及的所述级联伸长单元x、-CH2CH2NH-;-CH2CH2N<;-CO-(CH2)2-NH-;-CO-(CH2)rNH--CO-(CH2)6-NH-;-CO-(CH2)2-N<;-CO-(CH2)rN<;-CO-(CH2)6-N<;Y、Z和W的例子是-CO-(CH2)4-NH-;-CO-(CH2)5-NH-;-CO-(CH2)4-N<;-CO-(CH2)5-N<;AVNN工O"HO)NOO,AVN"工0"5)N8、HN8"工oo"H08,^HN"HON工o)NQO"(-HN"HONHO)NOOHNQO"HOO"58-"VN(HOO。)5(〉N0H38,〖-KN(H003)H3(-MN)H〕8-N(-MNZH:yH3)N8NfGH:PK3-HN8-"3(>SSNH。)N03NH3H3;Hd-MNO:yH::5NH38-s(>NNH3NH3)NO:^H:^H30::>-^(-HJVSMDNHCONCB^G^GCO-s(VNNHC^HCONO^HOONHUOO-^(-n^pGZHC^NOO^GO^GOO-"〉N寸(NH3X>N)H303-TKNVSX-MNDHUOO-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中n和m各自是数字0、1、2、3或4，其中n+m的和不大于4，W相互独立地是氢原子或原子序数为20-29、39、42-44或57-83的金属离子等价物，^是氢原子、任选地被1-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>R3是？IR基或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>基，H2R"是异丙基、环己基、任选地插入1-10个氧原子、1个亚苯基、1个亚苯氧基和/或任选地被1-5个羟基、l-3个羧基、l个苯基取代的直链的、支链的、饱和的或不饱和的(VC3(T烷基链，RS是氢原子或R4，176是直链的、支链的、饱和的或不饱和的CrC2(r亚垸基，其任选地包含1-5个亚氨基、1-3个亚苯基、1-3个亚苯氧基、1-3个亚苯基亚氨基、1-5个酰胺、l-2个酰肼、l-5个羰基、l-5个亚乙氧基、l个脲、l个硫脲、1-2个羧垸基亚氨基、l-2个酯基、1-10个氧、l-5个硫和/或l-5个氮原子，和/或任选地被l-5个羟基、l-2个巯基、l-5个氧代基、l-5个硫代、1-3个羧基、l-5个羧烷基、l-5个酯基和/或l-3个氨基取代，其中，任选地存在的亚苯基可以被1-2个羧基、1-2个砜或1-2个羟基取代，T是-CO-a、-NHCO-a或-NHCS-a基，并且a是与最后一级级联伸长单元W的末端氮原子连接的点。可以优选地提及的络合剂残基K是那些，其中在以上所示的式IA中代表U6的CrC2()、优选CrC12亚烷基链包含基团-012-、-CH2NHCO-、-NHCOCH20-、-NHCOCH2OC6H4-、-N(CH2C02H)-、-NHCOCH2C6H4-、-NHCSNHC6H4-、-CH2OC6H4-、-CH2CH20-，和/或被基团-COOH、-CH2COOH取代。可以提及的l^的例子是以下基团-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-C6H4-、-C6H1(r、-CH2C6H5-、-CH2NHCOCH2CH(CH2C02H)-C6H4-、-CH2NHCOCH2OCH2-、-CH2NHCOCH2C6H4-、-CH2NHCSNH-C6H4-CH(CH2COOH)CH2--CH2OC6H4-N(CH2COOH)CH2-、-CH2NHCOCH20(CH2CH20)4-C6H-CH20-C6H4-、-CH2CH2-0-CH2CH2-、-CH2CH2-0-CH2CH2-0-CH2CH:可以提及的R"的例子是以下基团异丙基、环己基、-CH3、-C6H5、-CH2-COOH、-CH2-C6H5、-CH2-0-(CH2CH2-0-)6CH3、-CH2-OH。如果本发明的试剂意欲用于NMR诊断，那么络合物盐的中心离子必需是顺磁的。具体地，它们是原子序数为21-29、42、44和58-70的元素的二价和三价离子。合适的离子的例子是铬(m)、铁(II)、钴(II)、镍(II)、铜(II)、镨(ni)、钕(in)、钐(m)和镱(m)离子。因为它们的磁矩非常强，所以钆(m)、铽(in)、镝(in)、钬(m)、铒(m)、锰(n)和铁(m)离子是特别优选的。结构l的功能是连接两个功能单元r和a在一起。在该连接中，l可以是直接键或连接基。出于本发明目的的术语连接基包括任何这样的化学结构，其一侧与HAS结合单元R共价连接，另一侧与含氮级联核A连接，并因此使R与A连接。因此，术语连接基的含义是从功能上定义的，并且包括大量迥然不同的化合物。相关的技术人员根据他的专业知识而无需过重的负担就能够合成大量迥然不同的符合本发明连接R与A的功能的连接基结构。为此目的，技术人员只需要实施常规实验。优选的连接基结构L包括直接键、具有l-30个碳原子的直链的或支链的、饱和的或不饱和的碳链，该碳链可以被插入和/或取代。如果连接基的碳链被插入，那么它们优选被插入一个或多个具有3-8个碳原子的环碳基或杂环碳基或者一个或多个氧、氮、硫和/或磷原子，而这些基团和原子本身可以任选地与其它原子诸如氢或氧或者基团连接。本发明意义上的连接基还可以包括一种或多种氨基酸。在特别优选的式I的化合物中，L选自直接键，-O-CHrCO-NIHCH^CH^OVKrCHrCHrCO-,-0-CH2-CO-，-O-CH2-CO-NH-cl.12-CO-，-CO-，-OP(02)0-Cw2-CO-，-OCHrCO-Pro4-，-O-CH:rCO-NH-芳基-OC-芳基-CO-，画O-CH;rCO-NH-芳基-C三C-C三C-芳基-CO-，-CO-NH-CHrCH2-，其中，Pra是氨基酸脯氨酸。在这种情况下，所述连接基L的定向如下所示R-0-CHrCO画NH-(CH2.CH2.0)wo國CH2-CH2-CO國A，R-0-CH2-CO-A，R-0扁CH2匪CO國NH-Ci—12-CO-A，R-CO-A，R國OP(02)0-Cw2-CO-A，R-0-CH2-CO-Pro4-A，R-CO-NH-CH2-CH2-A，R-0-CH2-CO-NH-芳基-C三C隱芳基-CO-A。式I的本发明的化合物包括HSA结合单元R，R是与蛋白质人血清白蛋白(HAS)连接的化学结构并且具有连接L的直接键。在优选的式I的化合物中，R的分子量不超过2000Da。在特别优选的式I的化合物中，R对HSA具有至少一种特别的亲合力，抑制常数Ki小于或等于50pM，由实施例3中所述并且来自公开号为US2004/0254119的美国专利申请(West等人，美国申请号US10/487,025)的方法来测定。特别优选R具有小于或等于15(aM的Ki。可以提及的合适的HSA结合基的例子是R:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>本发明的级联聚合物络合物包含至少4个上述原子计数(atomicnumcalculated)的元素的离子。优选的式I的化合物包含至少8个上述原子计数的元素的离子。其余的酸性氢原子，即没有被所述中心离子取代的那些，可以任选地全部或部分被无机碱和/或有机碱、氮基酸或氨基酰胺的阳离子代替。合适的无机阳离子是例如锂离子、钾离子、钙离子、镁离子、尤其是钠离子。合适的有机碱阳离子尤其是伯胺、仲胺或叔胺(诸如乙醇胺、二乙醇胺、吗啉、葡糖胺、N，N-二甲基葡糖胺、尤其是N-甲基葡糖胺)的阳离子。合适的氨基酸阳离子是例如赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸的阳离子和其它酸性或中性氨基酸的酰胺。本发明的化合物的特点是高血液浓度，尤其是在某些时刻。与像欧洲专利EP0836485中所述的化合物相比，这有利于选择合适的成像时间，并且使信号-背景比更合适，特别是在早先和中间的成像时刻。本发明的化合物特别适合用作冠状动脉造影术的造影剂，以及用于使用较高磁场强度例如1.5-3特斯拉的NMR应用。分子量为5000-60000Da、优选5000-40000Da的本发明化合物具有所述期望的性质。它们包含(稳定地结合在络合物中)为它们的用途所需的大量金属离子。它们在血管通透性增加的区域诸如肿瘤内累积，允许作出关于组织灌注的报告书，提供测定组织中的血量、选择性縮短弛缓时间或减小血液密度以及在图像中使血管通透性可视的可能性。这种生理信息不能通过使用细胞外造影剂例如Gd-DTPA[Magnevist"来获得。由这些方面还形成在磁共振成像和计算机体层成像现代成像方法中的应用领域特异性更高的恶性肿瘤诊断、细胞生长抑制疗法、抗炎疗法或血管舒张疗法情况下的早期治疗检查、灌注减少区域的早期鉴别(例如在心肌中)、血管病的血管造影术和(无菌或感染性)炎症的鉴别和诊断。通过与已知的级联聚合物络合物，像欧洲专利EP0836485中所述的级联聚合物络合物相比，本发明的级联聚合物络合物具有惊人的性质。这些惊人的性质允许更灵活地选择成像时间并获得更有利的信号-背景比，特别是在某些成像时间。通过与来自特别是EP0836485的已知的级联聚合物络合物相比，特别令人惊奇的是，虽然本文所示的本发明的级联聚合物络合物比已知的级联的络合物少一个聚合物臂，并因此比较起来往往更小，所以应该更容易外渗，但是，本发明的新型级联聚合物络合物实际上显示明显改善的在血液中的停留时间。本发明的级联聚合物络合物还明显适合(间质和静脉内的)淋巴造影术。必需通过与已知的造影剂例如Gd-DTPA[Magnevist^进行比较才能突出的其它优点是其作为磁共振成像造影剂时效力更高(更高的弛豫度)，使诊断所需的剂量显著减少。同时，本发明的造影剂可配制成与血液等渗的溶液，因此可减少对身体的渗透应力，这一点通过物质的毒性减小(更高的毒性阈值)反映出来。更少的剂量和更高的毒性阈值使造影剂在现代成像方法中应用的安全性明显增加。通过与基于碳水化合物例如葡聚糖(欧洲专利申请，公开号0326226)的大分子造影剂(如所述地，它通常仅携带约5%的增强信号的顺磁阳离子)比较，本发明的聚合物络合物通常具有约20%的顺磁阳离子含量。因此，本发明的大分子每分子产生大得多的信号增强，同时使磁共振成像所需的剂量大大小于基于碳水化合物的大分子造影剂的剂量。与所述的其它现有技术的聚合化合物相比，本发明的级联聚合物络合物的特点是排泄行为改善、活性更高、稳定性更好和/或耐受性更佳。本发明的另一个优点是，现在已经可得到具有亲水的或亲脂的、大环的或开链的、低分子量的或高分子量的配体的络合物。因此，有可能通过化学取代来控制这些聚合物络合物的耐受性和药代动力学。本发明的级联聚合物络合物是这样制备的使通式I'化合物与通式I'A或I'B的络合物或络合剂K'反应R-L-A-(X-[Y-(Z-(W-P"z)y]丄-!(I')其中R-HAS-结合单元，L-连接基或键，A-基本分枝数为a的含氮级联核，X和Y=相互独立地为直接键或伸长分枝数分别为x和y的级联伸长单元，Z和W=相互独立地为直接键或伸长分枝数分别为z和w的级联伸长单元，P=最后一级级联伸长单元W的末端NH基的连接点，&=2-12的数字，并且x、y、z和w^相互独立地为l-4的数字，条件是所述级联核A的a个基本分枝中刚好一个分枝代表刚好一个与L连接的点，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>其中W相互独立地是氢原子或原子序数为20-29、39、42-44或57-83的金属离子等价物，或者酸保护基，f是氢原子、任选地被1-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>W是异丙基、环己基、任选地插入l-10个氧原子、1个亚苯基、1个亚苯氧基和/或任选地被1-5个羟基、l-3个羧基、l个苯基取代的直链的、支链的、饱和的或不饱和的d-C3。-烷基链，RS是氢原子或R4，116是直链的、支链的、饱和的或不饱和的d-C20-亚垸基，其任选地包含1-5个亚氨基、1-3个亚苯基、1-3个亚苯氧基、1-3个亚苯基亚氨基、1-5个酰胺、l-2个酰肼、l-5个羰基、l-5个亚乙氧基、l个脲、l个硫脲、1-2个羧垸基亚氨基、l-2个酯基、1-10个氧、1-5个硫和/或1-5个氮原子，和/或任选地被1-5个羟基、l-2个巯基、l-5个氧代基、l-5个硫代、1-3个羧基、l-5个羧烷基、l-5个酯基和/或l-3个氨基取代，其中，任选地存在的亚苯基可以被1-2个羧基、1-2个砜或1-2个羟基取代，T'是-C5150、-COOH-、-N-CK)-或-NOS-基，并且c*o是活化的羧基，禾口<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>其中n和m各自是数字0、1、2、3或4，其中n和m的和不大于4，R1和R2相互独立地可以各自具有上述含义，条件是，如果K'是络合物，那么至少两个(在二价金属的情况下)或三个(在三价金属的情况下)取代基Ri是上述元素的金属离子等价物，并且条件是，如果需要，其它羰基以它们与无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的盐的形式存在，适当时除去存在的保护基，使由这种方式获得的级联聚合物——如果K'是络合剂——通过本领域已知的方法与至少一种原子序数为20-29、39、42、44或57-83的元素的金属氧化物或金属盐反应，随后适当时用无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子全部或部分代替仍存在于以这种方式获得的级联聚合物络合物中的酸性氢原子，并且如果需要，在金属络合之前或之后，适当时酰化仍存在的游离末端氨基。优选的络合剂K'具有以下通式I'A:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>其中R"相互独立地是氢原子或原子序数为20-29、39、42-44或57-83的金属离子等价物，RZ是氢原子、任选地被1-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，R3'是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>R"是异丙基、环己基、任选地插入1-10个氧原子、1个亚苯基、1个亚苯氧基和/或任选地被1-5个羟基、l-3个羧基、l个苯基取代的直链的、支链的、饱和的或不饱和的d-C3(T垸基链，在特别优选的实施方案中，R4选自异丙基和环己基，176是直链的、支链的、饱和的或不饱和的d-C加-亚垸基，其任选地包含1-5个亚氨基、1-3个亚苯基、1-3个亚苯氧基、1-3个亚苯基亚氨基、1-5个酰胺、l-2个酰肼、l-5个羰基、l-5个亚乙氧基、l个脲、l个硫脲、1-2个羧烷基亚氨基、l-2个酯基、1-10个氧、1-5个硫和/或1-5个氮原子，和/或任选地被1-5个羟基、l-2个巯基、l-5个氧代基、l-5个硫代、1-3个羧基、l-5个羧垸基、l-5个酯基和/或l-3个氨基取代，其中，所述任选地存在的亚苯基可以被1-2个羧基、1-2个砜或1-2个羟基取代，T'是-C^O-、-COOH-、-N-CK)-或-NOS-基，并且<^*0是活化的羧基。它们用作制备通式I的级联聚合物络合物的重要中间体。可以提及的所述络合物或络合剂K'中的活化羰基C*0的例子是酐、对硝基苯基酯、N-羟基丁二酰亚胺基酯、五氟苯基酯和酰基氯。为引入络合剂单元而进行的加成或酰化是用基质来进行的，所述基质包含期望的取代基K(可能与离去基团连接)，或者可以通过反应由所述基质产生期望的取代基。可以提及的加成反应的例子是异氰酸酯和异硫氰酸酯的反应，异氰酸酯的反应优选在非质子溶剂诸如THF、二噁垸、DMF、DMSO、二氯甲垸中，在0-10(TC、优选0-50。C下进行，适当时加入有机碱，诸如三乙胺、吡啶、二甲基吡啶、N-乙基二异丙基胺、N-甲基吗啉。与异硫氰酸酯的反应通常在溶剂诸如水或低级醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇或它们的混合物)、DMF或DMF与水的混合物中，在0-10(TC、优选0-50°C的温度下进行，适当时加入有机碱或无机碱，例如三乙胺、吡啶、二甲基吡啶、N-乙基二异丙基胺、N-甲基吗啉或碱土金属、碱金属的氢氧化物(例如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙)或它们的碳酸盐(例如碳酸镁)。可以提及的酰化反应的例子是用技术人员已知的方法进行的游离羧酸的反应[例如J.P.Greenstein，M.Winitz,ChemistryoftheAminoAcids,JohnWiley&Sons,N.Y.(1961)，pp.943-945]。然而，已经证明，在酰化反应之前将羧酸基转化为活化形式例如酐、活化酯或酰基氯是有利的[例如E.Gross,J.Meienhofer，ThePeptides,AcademicPress,N.Y.(1979)，Vol.1，pp.65-314;N.F.Albertson，Org.React.12,157(1962)]。在与活化酯反应的情况下，可以参考技术人员己知的文献[例如Houben-Weyl，MethodenderorganischenChemie，GeorgThiemeVerlag,Stuttgart,VolumeE5(1985)，633]。可以在以上针对酐反应指出的条件下进行该反应。然而，使用非质子溶剂例如二氯甲垸、氯仿也是可能的。在与酰基氯反应的情况下，在-20-5(TC、优选0-3(TC下，只使用非质子溶剂，例如二氯甲垸、氯仿、甲苯或THF。而且，可以参考技术人员已知的文献[例如Houben-Weyl，MethodenderorganischenChemie，GeorgThiemeVerlag,Stuttgart,(1974)，Volume15/2，pp.355-364]。如果R"是酸保护基，那么合适的基团是低级烷基、芳基和芳垸基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、苯基、苄基、二苯甲基、三苯甲基、二(对硝基苯基)甲基和三垸基甲硅烷基。所需的去除保护基的反应适当时通过技术人员已知的方法进行，例如通过在水醇溶液中于0'C-50'C的温度下用碱水解、氢解、碱解酯，或者在为叔丁基酯的情况下借助三氟乙酸。如果需要，可以将用配体或络合物适当时不完全酰化的末端氨基转化为酰胺或单酰胺。可以通过举例提及与乙酸酐、丁二酸酐或二甘醇酐的反应。期望的金属离子通过像例如德国专利公开文本DE3401052中公开的方法，通过将原子序数为20-29、42、44、57-83的元素的金属氧化物或金属盐(例如硝酸盐、乙酸盐、碳酸盐、盐酸盐或硫酸盐)溶解或悬浮在水和/或低级醇(诸如甲醇、乙醇或异丙醇)中并与当量的形成络合物的配体的溶液或悬浮液反应，随后，如果需要，用无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子代替酸基中存在的酸性氢原子。引入期望的金属离子可以在发生在所述络合剂I'A或I'B的两个阶段，即，与级联聚合物偶联之前以及非金属化的配体I'A或I'B偶联之后。在这种情况下，可以借助以下物质进行中和例如钠、钾、锂、镁或钙的无机碱(例如氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)；和/或有机碱，例如尤其是伯胺、仲胺和叔胺，例如乙醇胺、吗啉、葡糖胺、N-甲基葡糖胺和N，N-二甲基葡糖胺；和碱性氨基酸，例如赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸；或原本为中性或酸性氨基酸的酰胺，诸如马尿酸、甘氨酸乙酰胺。例如可以通过向酸性络合物盐的水溶液或悬浮液中加入足够所需的碱以达到中性点来制备中性配位化合物。然后，所得溶液可以在真空中蒸发至干。通过加入水可混溶的溶剂，例如低级醇(甲醇、乙醇、异丙醇等等)、低级酮(乙酮等等)、极性醚(四氢呋喃、二噁垸、1,2-二甲氧基乙烷等等)使形成的中性盐沉淀并由此获得容易分离和可直接纯化的晶体通常是有利的。已经证明，即使在络合物形成过程中向反应混合物加入所需的碱是特别有利的，并且由此省去一个步骤。如果酸性络合物包含多个游离的酸性基，制备包含无机和有机阳离子作为反荷离子的中性混合盐通常是有利的。这可以如此进行例如通过使形成络合物的配体的水性悬浮液或水溶液与提供中心离子的元素的氧化物或盐与一半量的中和所需的有机碱反应，分离形成的络合物盐，如果需要，将其纯化，然后，加入所需量的无机碱进行完全中和。还可以倒转加碱的顺序。适当时在通过加入酸或碱将pH调节至6-8、优选约7之后，纯化由这种方式获得的级联聚合物络合物，优选用合适孔径的膜(例如AmiconXM30、AmiconYM10、AmiconYM3、AmiconYMl)超滤，或在例如合适的8叩^(1^@凝胶上进行凝胶过滤。在中心络合物的情况下，使该聚合的络合物通过阴离子交换剂例如IRA67(OPT形式)以及适当时再通过阳离子交换剂例如IRC50(f形式)以除去离子成分通常是有利的。具有与络合剂K'(要不就是相应的含金属络合物)偶联所需的末端氨基的级联聚合物的制备通常从含氮级联起始物A(H)a开始，所述起始物可以够买或可以通过文献中已知的方法或与其相似地来制备。通过文献[例如J.March,AdvancedOrganicChemistry,第3版；JohnWiley&Sons,(1985),364-381]中已知的方法，通过用被保护的胺进行酰化或垸基化反应引入X、Y、Z和W级，所述胺具有所需的结构并包含能够连接级联核的官能团，例如羧酸、异氰酸酯、异硫氰酸酯或活化的羧酸(例如酐、活化酯、酰基氯)或卤化物(例如氯化物、溴化物、碘化物)、氮丙啶、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或技术人员知道的其它离去基团。然而，在此要再次强调，级联核A与级联伸长单元之间的区别或与连接基L的连接完全是形式上的。不使用形式上的级联起始物A(H、而是将定义上属于级联核的氮原子仅与第一级一起引入，这在合成上可能是有利的。可以提及的胺保护基是技术人员熟悉的苄氧羰基、叔丁氧羰基、三氟乙酰基、芴基甲氧羰基、苄基和甲酰基[Th.W.Greene,P.G.MWuts，ProtectiveGroupsinOrganicSyntheses,第2版，JohnWileyandSons(1991)，pp.309-385]。在去除这些保护基(同样地通过来自文献的方法来进行)后，可以向分子中引入下一所需的级。除了这种在任何情况下由一级的两个反应步骤(烷基化或酰化和去除保护基)组成的组装方式外，还可以用同样的仅仅两个反应步骤同时引入两级例如X-[Y]x或多级例如X-[Y-(Z)y]x。这些多级单元通过第二级联伸长胺(其氨基是保护形式的)对具有所需的级联伸长单元的结构的未保护的胺("级联伸长胺")进行烷基化或酰化来组装。所需的作为级联起始物的通式A(H)a的化合物可以够买或通过文献中已知的方法或与其类似地来制备[例如Houben-Weyl，MethodenderOrg.Chemie，Georg-Thieme-Verlag,Stuttgart(1957)，Vol.11/1;M.Micheloni等人，Inorg.Chem.(1985),21，3702;T丄Atkins等人，Org.Synth"Vol.58;(1978)，86-98;TheChemistryofHeterocyclicCompounds:J.S.Bradshaw等人，Aza國Crown-Macrocycles,JohnWiley&Sons,N.Y.(1993)]。包含组装各级所需要的上述官能团的级联伸长胺通过实验部分所述的方法或与其类似地来制备或者通过文献中已知的方法来制备。可以提及的例子是Na，!f-二节氧羰基赖氨酸对硝基苯基酯；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>200880002489.9<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>N-节氧羰基氮丙啶，其可以根据M.Zinic等人，J.Chem.Soc，PerkinTrans1，21-26(1993)来制备；N-苄氧羰基甘氨酸，其可以从例如BachemCalifornia够买；其可以根据C丄Cavallito等人，J.Amer.Chem.Soc.1943，払2140，从N-CO國0-CH2C6H5-(2-溴乙基)胺[A.R.Jacobson等人，J.Med.Chem.(1991),34,2816]而不是节基氯开始制备。通过实验部分所述的方法或与其类似地或者通过文献(见例如欧洲专利申请0512661、0430863、0255471和0565930)中已知的方法来制备通式I'A和I'B的络合物和络合剂。因此，可以例如通过将基团T"用作官能团T，的前体来制备通式I'A的化合物，在指被保护的酸官能团时，所述基团T"可以通过上述方法在不影响酸保护基W'的情况下被转化为游离基官能团，或者在指被保护的胺官能团时，所述基团T"可以通过来自文献[Th.W.Greene,P.G.M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第2版，JohnWiley&Sons(1991),pp.200880002489.9309-385]的已知方法解封闭，随后被转化为异氰酸酯或异硫氰酸酯[MethodenderOrg.Chemie(Houben画Weyl)，E4,pp.742-749，837-843，GeorgThiemeVerlag，Stuttgart,NewYork(1983)]。可以通过实验部分所述的方法或与其类似地用合适的a-卤代羧酰胺使环状化合物单烷基化[在非质子溶剂例如氯仿中]来制备这种化合物。可以例如通过使用被保护的酸官能团作为活化的羧基-(:*0-的前体来制备通式I'B的化合物，所述保护的酸官能团可以在不影响酸保护基R"的情况下通过上述的方法被转化为游离基官能团，并且通过同样是以上所述的文献中已知的方法被活化。这些化合物可以通过实验部分所述的方法或与其类似地来制备或者例如通过使通式II的氨基酸衍生物与通式III的烷化剂反应来制备其中RS'具有针对仗5所指的含义，其中适当时存在于R5中的羟基或羧基适当时以被保护的形式，并且丫1是直链的或支链的d-(V烷基、苄基、三甲代甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、2，2,2，-三氟乙氧基或2,2，2-三氯乙氧基，其中V不同于R"，-C02RrHalN(III)其中R"是保护基，并且Hal是卤素原子，例如Cl、Br或I，但优选CI[见M.A.Williams:H.Rapoport,J.Org.Chem.^，1151(1993)]。优选的氨基酸衍生物是天然存在的a-氨基酸的酯。化合物(II)与化合物(III)的反应优选在缓冲的烷基化反应中进行，使用磷酸盐缓冲水溶液作为缓冲剂。反应在pH值为7-9、优选在pH8下进行。缓冲剂浓度可以是0.1-2.5M，但是优选使用2M的磷酸盐缓冲溶液。垸基化的温度可以是0-5(TC;优选的温度是室温。反应在极性溶剂中进行，例如乙腈、四氢呋喃、1，4-二噁烷或1，2-二甲氧基乙垸。优选使用乙腈。同样地，用本领域已知的方法，通过将本发明的络合物-适当时地掺入制药工艺学中常规的添加剂-悬浮或溶解在水性介质中，随后适当时对悬浮液或溶液进行灭菌来制备本发明的药物组合物。合适的添加剂是例如生理学上可接受的缓冲剂(例如氨基丁三醇)、络合剂或弱络合物添加剂(例如二乙烯三胺五乙酸或相应的Ca级联聚合物络合物)、或者(如果需要)电解质例如氯化钠、或者(如果需要)抗氧化剂例如抗坏血酸。如果本发明的药剂在水或生理盐水中的悬浮液或溶液需要用于肠内给药或其它用途，那么将它们与制药工艺学中常规的一种或多种赋形剂[例如甲基纤维素、乳糖、甘露醇]和/或表面活性剂[例如卵磷脂、TweeiAMyif]和域调味剂[例如精油]混合以调节味道。原则上，还可以甚至在无需分离所述络合物的盐的情况下来制备本发明的药物组合物。在每任何情况下都需要特别小心地进行螯合物的形成，其方式应使本发明的盐或盐溶液实际上不含具有毒性作用的未络合的金属离子。例如可以在制备过程中借助显色指示剂诸如二甲酚橙通过控制滴定来确保这一点。因此，本发明还涉及制备所述络化合物和它们的盐的方法。对分离的络合物盐的进行纯化仍然是最后的安全保证。本发明的药物组合物优选包含1nmol-1.3mo1/1络合物盐，且通常的剂量是0.0001-5mmol/kg。它们拟用于肠内和肠胃外给药。本发明的络合物以它们与选自原子序数为21-29、39、42、44和57-83的元素的离子的络合物的形式用于NMR诊断。本发明的药剂满足适合作为磁共振成像造影剂的各种要求。因此，它们明显适合在口服或肠胃外给药后通过增加信号强度改善由借助磁共振成像获得的图像所提供的信息。它们还显示出为使身体接触最少量的外来物质所需的高活性和维持检査的非侵入特性所需的良好耐受性。本发明的药剂在相关的成像时间显示出比现有技术例如欧洲专利EP0836485中所述的化合物明显更高的血液浓度。本发明的药剂的良好水溶性和低重量克分子渗透浓度允许制备高浓缩的溶液以便使循环系统的体积负荷保持在合理限度内并补偿体液的稀释，这意味着NMR诊断剂的水溶性必需比NMR核磁共振波谱所需的水溶性高100-1000倍。而且，本发明的药剂不仅在体外显示高稳定性，而且在体内也显示出惊人的高稳定性，使得络合物中没有共价结合的——本身有毒的——离子的释放或交换在该新型造影剂被再次完全排泄出的过程中发生得极其缓慢。通常，本发明的药剂用作NMR诊断剂的剂量是0.0001-5mmol/kg、优选0.005-0.5mmol/kg。使用的细节例如在H.-J.Weinmann等人，Am.J.ofRoentgenology142，619(1984)中有讨论。特别低的剂量(低于1mg/kg体重)的器官特异性NMR诊断剂可以用于例如检测肿瘤和心肌梗死。本发明的化合物的特点是高血液浓度，尤其是在特定时刻。与像欧洲专利EP0836485中所述的化合物相比，这有利于选择合适的成像时间并且使信号-背景比更合适，特别是在早先和中间的成像时刻。本发明的化合物特别适合用作冠状动脉造影的术造影剂，以及用于使用较高磁场强度例如1.5-3特斯拉(由现代NMR仪器提供)的NMR诊断。而且，本发明的络合物可有利地用作用于体内NMR波谱的磁化率(susceptibility)试剂和位移试剂。令人惊奇地，本发明的化合物还适合用于区分无血脑屏障区域内的恶性和良性肿瘤。它们还具有能完全从体内消除的特点，因此耐受性良好。总之，合成开辟诊断医学领域新的可能性的新型络合剂、金属络合物和金属络合物盐已经成为可能。以下的实施例用于更详细地举例说明本发明的主题实施例la)2，5，2'，4',6'-五甲基联苯-4-酚将23.0g(92.7mmol)4-碘-2,5-二甲基苯酚(AlfaChemicalsLtd.)溶解在175ml除去水分的四氢呋喃(THF)中。然后加入5.36g(4.64mmol)四(三苯基膦)钯(O)，将混合物加热至65X:。在此温度下，在30min内滴加186ml(186mmol)1M均三甲基苯溴化镁的THF溶液，在此温度下将混合物搅拌1h并在室温(RT)下搅拌过夜。抽滤该悬浮液并用THF洗涤，将溶液蒸发至干。将残余物在乙醚和1MHC1之间分配，分离各相，水相用乙醚萃取两次。有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(己烷/乙酸乙酯梯度98/2-80/20)。合并含产物的部分并蒸发。收率19.3g(理论值的86.7%)元素分析理论值C84.96H8.39测量值C85.17H8.21b)(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸叔丁酯将19.3g(80.3mmol)实施例la中所述的苯酚溶解在二甲基甲酰胺(DMF)中，加入22.2g(160.6mmol)磨细的碳酸钾。然后，在RT下滴加17.21g(88.23mmol)溴乙酸叔丁酯。在RT下搅拌过夜后，过滤除去盐并在真空中使溶液蒸发至干。将粗品溶解在乙酸乙酯中，用水洗涤有机相三次，经硫酸镁干燥，过滤并浓縮。收率25.4g(理论值的89.2%)元素分析理论值C77.93H8.53测量值C77.68H8.74c)(2,5,2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸将25g(70.5mmol)以上实施例lb中所述的酯溶解在500ml甲醇中，加入28.2g(705mmol)NaOH小球在250ml水中的溶液，混合物回流加热5h。将其在RT下搅拌过夜，然后蒸去甲醇，用盐酸将水性剩余物pH调节至5并用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗涤两次，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。收率6.2g(定量的)元素分析理论值C76.48H7.43测量值C76.14H7.20d)3-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸叔丁酯将1.00g(2mmol)氨基-dPEG8TM-叔丁酯(QuantaBiodesign，Ltd.)溶解在40mlDMF中，与0.72g(2.4mmol)(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸(实施例lc)混合，在加入0.78g(6mmol)N，N-乙基二异丙基胺和0.91g(2.4mmol)2-(lH-苯并三唑-l-基)四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)后，在RT下搅拌过夜并浓缩。剩余物溶解在二氯甲烷中并在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇18:2)。收率1.5g(理论值的96.4%)元素分析理论值C64.84H8.68N1.80测量值C64.67H8.73N1.69e)3-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2，5,2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基两酸将1.48g(1.9mmol)实施例ld中所述的叔丁酯溶解在60m1(4mmol)66.67mM的盐酸乙醚溶液中，在RT下搅拌过夜，浓縮，然后用乙醚蒸馏数次。剩余物不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率1.4g(定量的)f)二{2-[2，6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺将7.0g(7.5mmol)EP0836485的实施例lc中所述的Na，N^二(N，N'-二苄氧羰基赖氨酰基)赖氨酸("三赖氨酸")、1.2g(7.5mmol)1-羟基苯并三唑和2.4g(7.5mmol)2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU;PebocLimited,UK)溶解在DMF中并搅拌15min。然后，将该溶液与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙基胺和386mg(3.75mmol)二亚乙基三胺混合并在室温搅拌过夜。反应完成后，真空蒸发后的剩余物用乙酸乙酯/乙醇(2:1)在硅胶上进行色谱分离。收率5.8g(79.5%)元素分析理论值C64.21H6.89N10.80测量值C64.02H7.00N10.56g)得自3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2，5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸与二{2-[2,6-二(2,6-二(节氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺的羧酰胺将681mg(0,35mmol)二(2-[2，6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基)胺(实施例lf)溶解在10mlDMF中，加入253mg(0.35mmol)实施例le中所述的3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧萄乙氧基}乙氧基)丙酸。加入0.48ml(2.8mmol)N，N-乙基二异丙基胺和208mg(0.4mmol)苯并三唑-l-基氧基三吡咯烷基鳞六氟磷酸盐(PyBOP)，随后在RT下搅拌2天，浓縮，在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配剩余物。有机层用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。收率0.74g(79.8%)元素分析理论值C64.38H7.23N8.46测量ll::C64.13H6.88N8.56h)3-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2，5，2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸二{2-[2，6-二(2.6-二(苄氧羰基廣基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}酰胺将0.66g(0.25mmol)实施例lg中所述的被完全保护的胺溶解在50ml甲醇中，与0.5ml2N盐酸混合，在氮气下与0.2g钯催化剂(10。/。Pd/C)混合，并在氢气下搅拌20h。然后，抽滤除去催化剂，浓缩滤液，并将仍然为碱性的剩余物溶解在水中，用稀盐酸将pH调节到7，冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.41g(理论值的88。/。)i)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1，4，7,10-四氮杂环十二烷-l,4，7-三乙酸与树枝状八胺lh的八-Gd络合物酰胺在加热下将3.02g(4.8mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4，7,10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与0.56g(4.8mmo1)N-羟基丁二酰亚胺溶解在25ml二甲基亚砜(DMSO)中。冷却至RT后，加入1.0g(4.8mmol)N，N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将374mg(0.2mmol)实施例lh中所述的八胺盐酸盐和0.97g(9.6mmol)三乙胺于50mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5or搅拌过夜后，用乙酸乙酯使体积补足到约0.61并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌1h。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留l.OOODa)上进行超滤，截留物质在Lichroprep⑧RP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率0.74g(55%)含水量(Karl-Fischer):4.9%元素分析(基于无水物)理论值C42.70H5.70Gd19.44N12.12测量值C42.43H5.88Gd19.07N12.30实施例2a)5-[3-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2，5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基)乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基氨基]间苯二酸二甲酯将1.37g(1.9mmol)实施例le中所述的3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2，5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酸溶解在40mlTHF中，并加入0.48g(2.28mmol)5-氨基间苯二酸二甲酯(Aldrich)。加入1.63ml(9.5mmol)N，N-乙基二异丙基胺和1.19g(2.28mmol)PyBOP，然后在RT下搅拌过夜。反应完成后，真空蒸发后的剩余物首先用乙醚、随后用二氯甲垸/甲醇(19:l)在硅胶上进行色谱分离。收率1.0g(理论值的57.6%)元素分析理论值C63.14H7.51N3.07测量值C62.94H7.66N3.21b)5-[3-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2，5，2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基氨基]间苯二酸将0.91g(1mmol)以上实施例2a中所述的二甲酯溶解在30mlTHF中，与10ml(20nrnioI)2N氢氧化钠溶液混合并在RT下搅拌3h。随后用水稀释并通过加入AMBERLITE⑧离子交换剂IR120(lT)将pH调节到7，过滤除去交换剂，蒸馏除去滤液中剩余的THF。冷冻所得水溶液并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.8gc)得自5-[3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基氨基]邻苯二酸与二{2-[2,6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺的间苯二甲酰胺将3.89g(2mmol)实施例If中所述的被保护的树枝状高分子胺溶解在60mlDMF中，加入0.80g(0.9mmol)实施例2b中所述的二酸。加入1.29g(10mmol)N,N-乙基二异丙基胺和1.04g(2mmol)PyBOP，然后在RT下搅拌过夜。反应完成后，真空蒸发后的剩余物用二氯甲垸甲乙醇(18:2)在硅胶上进行色谱分离。收率1.45g(理论值的34。/。)元素分析-理论值C64.37H6.93N9.46测量值C64.22H7.03N9.59(1)5-[3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2,5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基氨基]间苯二酸二-〈N，N-二(2-[2，6-二(2,6-氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}->酰胺将1.4g(0.3mmol)实施例2c中所述的被完全保护的胺溶解在15ml冰醋酸中，与33%HBr的冰醋酸溶液混合并在RT下搅拌1h，所得悬浮液与250ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗漆。将剩余物溶解在水中并通过75mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.7g(理论值的90%)e)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸与树枝状十六胺5-[3-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2，5,2',4'，6'画五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙氧基)乙氧基)丙酰基氨基]间苯二酸二《N，N-二(2-[2，6-二(2，6-二氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基^酰胺的十六-Gd络合物酰胺在加热下将7.55g(12mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4，7，10-四氮杂环十二垸-l，4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与1.40g(12mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在60mlDMSO中。冷却至RT后，加入2.50g(12mmol)N，N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将0.65g(0.25mmol)实施例2d中所述的十六胺和2.43g(24mmol)三乙胺于60mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5(TC搅拌过夜并在RT下搅拌3d，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.6l并搅拌3h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率0.62g(20%)含水量(Karl-Fischer):3.5%元素分析(基于无水物)-理论值C41.72H5.52Gd20.32N12.67测量值C41.40H5.37Gd19.89N12.81实施例3a)得自(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸和二(2-[2,6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺的羧酰胺将1.95g(1mmol)二(2-[2，6-二(2,6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺(实施例lf)溶解在30mlDMF中，加入298mg(1mmol)实施例lc中所述的(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸。加入1.29g(10mmol)N,N-乙基二异丙基胺和676mg(1.3mmol)PyBOP，随后在RT下搅拌2天，浓縮，使剩余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配。有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。收率2.20g(98.8%)元素分析理论值C66.38H6.93N9.44测量值C66.17H6.81N9.65b)2,6-二氨基己酸[5-(2-{{2-[2,6-二(2,6-二氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}-[2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基]氨基}乙基氨基甲酰基>5-(2，6-二氨基己酰基氨基)戊基]酰胺将4.23g(1.9mmol)实施例3a中所述的被完全保护的胺溶解在50ml冰醋酸中，与33%HBr的冰醋酸溶液混合并在RT下搅拌1h，所得悬浮液与1000ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过75mlAMBERLITE离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率1.65g(理论值的75.4%)c)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷-l，4，7-三乙酸的Gd络合物与树枝状八胺3b的八-Gd络合物酰胺在加热下将11.32g(18mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l，4,7，10-四氮杂环十二烷-l，4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与2.10g(18mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在100mlDMSO中。冷却至RT后，加入3.71g(18mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将865mg(0.75mmol)实施例3b中所述的八胺和4.99ml(36mmol)三乙胺于100mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在50。C搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到约1.6l并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与2g活性碳一起搅拌1h。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率2,66g(55%)含水量(Karl-Fischer):6.3%元素分析(基于无水物)理论值C41.92H5.48Gd20.81N12.74测量值C41.88H5.31Gd20.22N12.49实施例4a)ll-(2,5,2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]十一酸甲酯使4.48g(15mmol)(2，5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸(实施例lc)禾口3.78g(15mmol)ll-氨基H""—酸甲酯盐酸盐(Chem.Ber.94,2470-2477(1961))溶解在125mlDMF中，加入6.47ml(37.8mmol)N，N-乙基二异丙基胺和6.26g(16.5mmol)HBTU后，在RT下搅拌过夜。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇19:1)。合并含有产物的部分并进行蒸发。收率7g(理论值的94.P/。)元素分析理论值C75.11H9.15N2.83测量值C75.24H9.02N2.77b)1l-[2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]十一酸将6.94g(14mmol)实施例4a中所述的甲酯溶解在100mlTHF中，与35ml2N氢氧化钠溶液混合并在RT下搅拌20h。然后通过蒸馏除去THF，剩余溶液用水稀释，与乙酸乙酯混合并用2N盐酸洗涤数次，最后用半饱和的氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇18:2)。合并含有产物的部分并进行蒸发。收率5.1g(理论值的75.6%)元素分析理论值C74.81H9.00N2.91测量值C74.63H9.07N2.86c)得自11-[2-(2，5，2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]十一酸和二{2-[2,6-二(2,6-二(节氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺的羧酰胺将3.89g(2mmol)二(2-[2,6-二(2,6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺(实施例If)溶解在60mlDMF中，加入0.96g(2mmol)11-[2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨萄十一酸(实施例4b)。加入1.29g(10mmol)N，N-乙基二异丙基胺和1.09g(2.1mmol)PyBOP，然后在RT下搅拌2天，随后浓縮。使所得粗品吸附在Isolut^HM-N上并硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇18:2)。合并含有产物的部分并进行蒸发。收率4.40g(91.3%)元素分析理论值C66.81H7.28N9.30测量值C66.95H7.42N9.12d)ll-[2-(2，5,2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]十一酸二{2-[2,6-二(2，6-二氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}酰胺将2.05g(0.85mmol)实施例4c中所述的被完全保护的胺溶解在25ml冰醋酸中，与33%HBr的冰醋酸溶液混合并在RT下搅拌1h，所得悬浮液与500ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过50mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.7g(理论值的61.7%)e)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷-l，4，7-三乙酸的Gd络合物与树枝状八胺4d的八-Gd络合物酰胺在加热下将7.55g(12mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4,7，10-四氮杂环十二烷-l,4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与1.4g(12mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在70mlDMSO中。冷却至RT后，加入2.47g(12mmol)N，N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将0.67g(0.5mmol)实施例4d中所述的八胺和3.33ml(24mmol)三乙胺于70mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活话酯溶液中。在5(TC搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积增补足约1.4l并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与2g活性碳一起搅拌1h。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率2.22g(65.8%)含水量(Karl-Fischer):8.0%元素分析(基于无水物)理论值C42.80H5.66Gd20.19N12.59测量值C42.88H5.48Gd19.82N12.74实施例5a)[2-二(2-[2，6-二(2,6-二(节氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基〉氨基甲酰基)乙基]氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯简称Fmoc-(3-Ala-N[en2Lys6Z8])2将1.95g(1mmol)二{2-[2，6-二(2,6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺(实施例lf)溶解在30ml热DMF中。在冷却至室温后，将该溶液加入311mg(1mmol)Fmoc-卩-丙氨酸(FlukaChemie)、206mg(1mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺和320mg(2mmol)1-羟基苯并三唑在15mlDMF中的溶液中。在RT下搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到500ml并搅拌5h。抽滤滤出沉淀的物质，用乙醚洗涤并在3(TC真空干燥。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇18:2)。合并含有产物的部分并进行蒸发。收率2.15g(理论值的96。/0)元素分析理论值C65.46H6.66N10.01测量值C65.28H6.77N9.92b)2,6-二(节氧羰基)氨基己酸[5-(2-(3-氨基丙酰基)-{2-[2,6-二(2,6-二(节氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}氨基)乙基氨基甲酰蜀-5-(2,6-二(节氧羰基氨基己酰基氨基)戊基]酰胺简称p-Ala-N[en2Lys6Z8])2将1.90g(0.85mmol)以上实施例中所述的Fmoc化合物悬浮在200ml甲醇中，与42.5ml吡啶混合并在RT下搅拌过夜。抽滤滤出不溶的物质，用甲醇洗涤，然后用乙醚洗涤并在3(TC真空干燥。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率1.3g(理论值的75.9%)c)5-[2-(2,5,2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]间苯二酸二甲酯将7.46g(25mmol)(2，5,2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酸(实施例lc)溶解在125ml二氯甲烷中并与0.5mlDMF混合。向该溶液中滴加3.49g(2.38ml,27.5mmol)草酰氯，反应混合物先在回流下搅拌90分钟，然后冷却至(TC。随后，加入5.23g(25mmol)5-氨基间苯二酸二甲酯和5.57g(55mmol)三乙胺(于200ml二氯甲烷中)。混合物在冰中搅拌2h并在RT下搅拌过夜。有机相连续用碳酸氢钠溶液、2N盐酸和饱和NaCl溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。使剩余物吸附在硅胶上并用异丙醚/乙醚(4:l)进行色谱分离。收率8.7g(理论值的71.1%)元素分析理论值C71.15H6.38N2.86测量值C70.83H6.24N2.91d)5-[2-(2，5，2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]间苯二酸将7.34g(15mmol)实施例5c中所述的二甲酯溶解在100mlTHF中，与30ml(60mmol)2N氢氧化钠溶液混合，在RT下搅拌5h，然后用2N盐酸将pH调节到7。真空浓縮THF，将剩余的水溶液与乙酸乙酯混合。有机相用2N盐酸和饱和NaCl溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。剩余物悬浮在250ml异丙醚中并搅拌过夜，将该物质抽滤，用异丙醚洗涤并在40'C真空干燥。收率5.1g(理论值的73.7%)元素分析理论值C70.27H5.90N3.03测量值C70.32H5.88N3.16e)N,N'-二(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-叔丁氧羰基乙氧基)乙氧基]乙氧基)乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}-5-[2-(2,5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]间苯二酰胺(Me5联苯基联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-COOtBu)2将0.46g(1mmol)实施例5d中所述的二酸溶解在1.00g(2mmol)氨基画dPEG8叔丁酯(QUANTABiodesign,Powell,OH,USA,产品号10271)(于20mlTHF中)中，与1.02ml(2.1mmol)N，N-乙基二异丙基胺和0.80g(2.1mmol)HBTU混合，搅拌过夜并浓縮。剩余物在硅胶上进行色谱分离(二氯甲垸/甲醇19:1)。收率1.2g(理论值的84.5%)元素分析-理论值C61.71H8.30N2.96测量值C61.44H8.38N3.06f)N，N'-二(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-羧基乙氧基)乙氧基]乙氧基〉乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}-5-[2-(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]间苯二酰胺(Me5联苯基联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-COOH)2将1.14g(0.8mmol)实施例5e中所述的二叔丁酯溶解在60mlHCl/乙醚(4.5M)中，与20mlTHF混合，在RT下搅拌过夜，浓縮，然后用乙醚和THF蒸馏数次。剩余物用乙腈/水梯度在LichroprepRP-18上进行色谱分离，将产物部分冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.27gg)得自二酸5f和(3-丙氨酰基-Z8树状高分子5b的双酰胺(Me5联苯基联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-j3-Ala-N[en2Lys6Z8])2将0.26g(0.2mmol)实施例5f中所述的二酸和1.01g(0.5mmol)实施例5b中所述的胺溶解在50mlDMF中。加入0.41g(3.2mmol)N，N-乙基二异丙基胺和0.26g(0.5mmol)PyBOP，然后在RT下搅拌过夜。反应完成后，将真空蒸发后的剩余物溶解在二氯甲垸中并搅拌过夜，滤出不溶的物质，用二氯甲烷洗漆并真空干燥。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率1.10gh)得自被完全保护的苄氧羰基树状高分子5h的脱保护的16胺(Me5联苯基联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-P-Ala-N[en2Lys6H8])2将1.06g(0.2mmol)实施例5g中所述的被完全保护的胺溶解在15ml冰醋酸中，与33%HBr的冰醋酸溶液混合并在RT下搅拌1h，所得悬浮液与250ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过约40mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.65gi)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1，4,7，10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸的Gd络合物与树枝状十六胺5h的十六-Gd络合物酰胺(Me5联苯基联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-p-Ala-N[en2Lys6Gd8])2在加热下将6.04g(9.6mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4，7，10-四氮杂环十二垸-l，4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与1.12g(9.6mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在50mlDMSO中。冷却至RT后，加入2.0g(9.6mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将631mg(0.2mmol)实施例5h中所述的十六胺和1.94g(19.2mmol)三乙胺在50mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在50。C搅拌过夜并在RT下搅拌3d，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.61并搅拌3h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌1h。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在Lichroprep⑧RP-18上用水/乙腈梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率0.6g(23%)含水量(Karl-Fischer):8.5%元素分析(基于无水物)理论值C42.21H5.64Gd19.43N12.44测量值C41.99H5.84Gd19.04N12.86实施例6a)5-[(联苯基-4-羰基)氨基]间苯二酸二甲酯将10.36g(47.8mmol)4-联苯基甲酰氯(Aldrich)溶解在300ml二氯甲烷中，加入IO.Og(47.8mmol)5-氨基间苯二酸二甲酯和8.71ml(50mmol)N，N-乙基二异丙基胺。反应混合物在RT下搅拌5h，然后用碳酸氢钠溶液、稀盐酸和饱和NaCl溶液洗涤数次。有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。收率15.1g(理论值的81.1%)元素分析理论值C70.94H4.92N3.60测量值C70.72H5.05N3.72b)5-[(联苯基-4-羰基)氨基]间苯二酸将5.84g(15mmol)实施例6a中所述的二甲酯溶解在100mlTHF中，与30ml(60mmol)2N氢氧化钠溶液混合，在RT下搅拌5h，然后用2N盐酸将pH调节到7。真空浓縮THF，将剩余的水溶液与乙酸乙酯混合。有机相用2N盐酸和饱和NaCl溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。剩余物悬浮在250ml异丙醚中并搅拌过夜，将该物质抽滤，用异丙醚洗涤并在40。C真空干燥。收率3.8g(理论值的70.7%)元素分析理论值C69.80H4.18N3.88测量值C69.78H4.29N3.71c)N，N'-二(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-叔丁氧羰基乙氧基)乙氧基]乙氧基〉乙氧基)乙氧萄乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}-5-[(联苯基-4-羰基)氨萄间苯二甲酰胺(联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-COOtBu)2将361mg(1mmol)实施例6b中所述的二酸与1.00g(2mmol)氨基-dPEG8叔丁酯(QUANTABiodesign，Powell，OH，USA，产品号10271)—起溶解于20mlTHF中，与1.02ml(2.1mmol)N,N-乙基二异丙基胺和0.80g(2.1mmol)HBTU混合，搅拌过夜并浓縮。剩余物在硅胶上进行色谱分离(二氯甲垸/甲醇9:1)。收率1.15g(理论值的87.0%)元素分析理论值C60.94H8.01N3.18测量值C60.69H7.88N3.29d)N,N'-二(2-[2-(2-(2-[2-(2-(2-[2-(2-羧基乙氧基)乙氧基]乙氧基〉乙氧基)乙氧萄乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}-5-[(联苯基-4-羰基)氨基]间苯二甲酰胺(联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-COOH)2将1.06g(0.8mmol)实施例6c中所述的二叔丁酯溶解在60mlHCl/乙醚(4.5M)中，与20mlTHF混合，在RT下搅拌过夜，浓縮，然后用乙醚和THF蒸馏数次。剩余物用乙腈/水梯度在LichroprepRP-18上进行色谱分离，将产物部分冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.32ge)得自二酸6d和Z8树状高分子lf的双酰胺(联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-N[en2Lys6Zs])2将0.24g(0.2mmol)实施例6d中所述的二酸和0.97g(0.5mmol)实施例lf中所述的胺溶解在50mlDMF中。加入0.41g(3.2mmol)N，N-乙基二异丙基胺和0.26g(0.5mmol)PyBOP，然后在RT下搅拌过夜。反应完成后，将真空蒸发后的剩余物溶解在二氯甲垸中并搅拌过夜，滤出不溶的物质，用二氯甲烷洗涤并真空干燥。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.99gf)得自被完全保护的苄氧羰基树状高分子6e的脱保护的16胺(联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-N[en2Lys6H8])2将1.01g(0.2mmol)实施例6e中所述的被完全保护的胺溶解在15ml冰醋酸中，与33%HBr的冰醋酸溶液混合并在RT下搅拌1h，所得悬浮液与250ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过约40mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-),将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.58gg)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7，10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸的Gd络合物与树枝状十六胺6f的十六-Gd络合物酰胺(联苯基-CO-NHC6H3(CONH-PEG8-CO-N[en2Lys6Gd8])2在加热下将6.04g(9.6mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l，4,7,10-四氮杂环十二垸-l,4,7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与1.12g(9.6mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在50mlDMSO中。冷却至RT后，加入2.0g(9.6mmol)N，N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将583mg(0.2mmol)实施例6f中所述的十六胺和1.94g(19.2mmol)三乙胺于50mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活话酯溶液中。在50。C搅拌过夜并在RT下搅拌3d，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.6l并搅拌3h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在Lichroprep②RP-18上用水/乙腈梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率0.70g(25%)含水量(Karl-Fischer):10.0%元素分析(基于无水物)理论值C41.88H5.58Gd19.80N12.46测量值C41.43H5.77Gd19.21N12.72实施例7a)12-[叔丁氧基-(2，5,2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)磷酰基氧基]十二垸酸甲酯在RT在氮气下于10ml乙腈中搅拌1.05g(4.36mmol)实施例la中所述的2，5,2',4',6'-五甲基联苯基-4-酚与1.72g(5.66mmol)双(二异丙基氨基)(叔丁氧基)膦(tert隱butyltet.raisopropylphosphordiamidite)(Aldrich)禾口0.97g(5.66mmol)四唑二异丙基胺(diisopropylammoniumtetrazolide)(Chem-ImpexInternational,Inc.)。悬浮液真空浓縮，剩余物与20ml乙醚一起搅拌，过滤除去不溶物，浓縮溶液。所得粗品立即在硅胶上进行色谱分离(己垸/乙酸乙酯梯度9:l)。合并含有产物的部分并进行蒸发。收率1.16g。在干燥的玻璃仪器中用0.50g(2.17mmol)12-羟基十二烷酸甲酯(于15ml二氯甲垸中)溶解以这种方式制备的亚磷酰胺，在0'C加入3g4人分子筛和8.6ml浓度为3%的四唑乙腈溶液，混合物在0。C搅拌1h并在RT下搅拌3h。然后加入0.72ml浓度为80%的叔丁基过氧化氢，混合物在RT下搅拌过夜。过滤并浓縮溶液。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(乙醚/二氯甲垸1:1)，合并含产物的部分并迸行蒸发。所得无色产物不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率1.05g。b)12-[羟基-(2，5,2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)磷酰基氧基]十二烷酸钠(Me5联苯基联苯基-0-PO(ONa)OCuH22COOH)将0.33g(0.62mmol)实施例7a中所述的酯溶解在30ml甲醇中，与5ml(10mmol)2N氢氧化钠溶液混合并在RT搅拌过夜。然后用稀盐酸将pH调节至7，使溶液蒸发至干。将粗品溶解在乙酸乙酯中，用柠檬酸溶液洗涤有机相，用水洗涤有机相直到达到中性，经硫酸钠干燥。收率250mg(理论值的74.5%)元素分析理论值C64,43H7.83Na4.25P5.73测量值C64.31H8.04Na2.80P5.82c)得自12-[羟基-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)磷酰基氧基]十二烷酸钠和二{2-[2,6-二(2,6-二(节氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺的羧酰胺(Me5联苯基联苯基-0-PO(ONa)OCnH22CON[en2Lys6Zs])2)将3.6g(1.85mmol)二(2-[2,6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}胺(实施例lf)溶解在50mlDMF中，加入0.96g(1.85mmol)实施例7b中所述的十二烷酸衍生物。加入1.0ml(5.84mmol)N，N-乙基二异丙基胺和0.96g(1.84mmol)PyBOP，随后在RT下搅拌2天，浓縮，将剩余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配。有机相用水洗涤，经硫酸钠干;t喿，过滤并浓縮。收率3.04g(67.1%)元素分析理论值C64.73H7.07N8.51Na0,93P1.26测量值C65.00H7.20N8.68Na0.68P1.09d)1l-(二(2-[(S)-2，6-二((S)-2，6-二氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}氨基甲酰基)十一垸基2,5,2',4',6'-五甲基联苯-4-基磷酸酯(Me5联苯基联苯基-OP03CuH22CON[en2Lys6H8])2)将3.0g(1.23mmol)实施例7c中所述的被完全保护的胺溶解在300ml甲醇中，与0.5ml浓盐酸混合，在氮气下加入1.5g钯催化剂(10n/。Pd/C)混合，混合物在氢气下搅拌20h。然后，抽滤除去催化剂，浓縮滤液，并将仍然为碱性的剩余物溶解在水中，用稀盐酸将pH调节到7,冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率2.0ge)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4，7，10-四氮杂环十二垸-l,4，7-三乙酸的Gd络合物与树枝状八胺7d的八-Gd络合物酰胺在加热下将3.02g(4.8mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4,7,10-四氮杂环十二垸-l,4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与0.56g(4.8mmo1)N-羟基丁二酰亚胺溶解在25ml二甲基亚砜(DMSO)中。冷却至RT后，加入1.0g(4.8mmol)N，N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将325mg(0.2mmol)实施例7d中所述的八胺盐酸盐和0.97g(9.6mmol)三乙胺于50mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5(TC搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.61并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在Lichr0prepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率132mg(10%)含水量(Karl-Fischer):5.1%元素分析(基于无水物)理论值C42.21H5.59Gd20.00N12.25Na0.37P0.49测量值C42.09H5.68Gd19.46N12,41Na0.41P0.30实施例8a)N-(4-碘苯基)-2-(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰胺(Mes联苯基-NH-C6H4-I)将11.94g(40mmol)实施例lc中所述的酸和8.76g(40mmol)4-碘苯胺(Aldrich)溶解在400mlDMF中，与15.51g(120mmol)N，N-乙基二异丙基胺和22.卯g(44mmol)PyBOP混合，在RT下搅拌2天，然后真空浓縮。剩余物在硅胶上进行色谱分离(己烷/乙酸乙酯梯度98/2-80/20)。合并含产物的部分并进行蒸发。收率14.7g(理论值的73.6%)元素分析理论值C60.13H5.25125.41N2.80测量值C59.97H5.36124.88N2.67b)2-(2，5，2',4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)-N-(4-三甲基硅烷基乙炔基苯基)乙酰胺(Me5联苯基-NH-C6H4-CC-SiMe3)将3g(6mmol)实施例8a中所述的碘化合物溶解在30ml二乙胺中，注入氮气后，加入1.13ml(8mmol)三甲代甲硅垸基乙炔(Fluka)。加入84mg(0.12mmol)二(三苯基膦)氯化钯(II)和11mg(0.06mmol)碘化亚铜(I)，随后在RT下搅拌，浓缩，剩余物在硅胶上进行色谱分离(己烷/乙酸乙酯梯度98/2-80/20)。合并含产物的部分，不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率2.15g。c)N-(4-乙炔基苯基)-2-(2,5，2',4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰胺(Me5联苯基-NH-QH4-CCH)将1.41g(3mmol)实施例8b中所述的三甲代甲硅烷化合物悬浮在60ml甲醇中，与4.5ml(4.5mmol)IN氢氧化钾水溶液混合并在RT下搅拌过夜。反应混合物真空浓縮，使剩余物在乙酸乙酯和水之间分配，有机相用饱和NaCl溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，滤液浓縮。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/乙酸乙酯梯度98/2-80/20)。合并含产物的部分并进行蒸发。收率0.95g(理论值的79.7%)元素分析理论值C81.58H6.85N3.52测量值C81.31H6.98N3.30d)4-(4-[2-(2，5,2'，4',6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]苯基乙炔基〉苯甲酸Me5联苯基-NH-C6H4-CC-C6H4COOH将358mg(0.9mmol)实施例8c中所述的乙炔化合物溶解在223mg(0.9mmol)4-碘苯甲酸(于9ml二乙胺中)中，在RT在氮气下加入15mg二(三苯膦)氯化钯(II)和3mg碘化亚铜(I)。卯min后用10ml二氯甲烷稀释所得悬浮液，在总共2.5h后浓縮。使剩余物在二氯甲烷和拧檬酸水溶液之间分配，用饱和NaCl溶液洗涤有机相，经硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇梯度)。合并含产物的部分并进行蒸发。收率370mg(理论值的79.4%)元素分析理论值C78.89H6.04N2.71测量值C78.60H6.21N2.88e)N，N-二(2-[2，6-二(2，6-二(苄氧羰基)氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}一4-{4-[2-(2，5，2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰基氨基]苯基乙炔基}苯甲酰胺Me5联苯基-NH-C6H4-CC-C6H4CON[en2Lys6Z8])2将311mg(0.6mmol)实施例8d中所述的酸溶解在15mlDMF中，加入1.17g(0.6mmol)实施例If中所述的Z8化合物。加入0.51ml(3mmol)N,N-乙基二异丙基胺和0,34g(0.66mmol)PyBOP后，在微波中使混合物在12(TC反应15min。浓缩反应混合物并使剩余物在硅胶上进行色谱分离(二氯甲烷/甲醇梯度)。合并含产物的部分并进行蒸发。收率1.05g(理论值的71.6%)元素分析理论值C67.80H6.68N9.17测量值C67.53H6.77N9.34f)N,N-二{2-[2，6-二(2，6-二氨基己酰基氨基)己酰基氨基]乙基}_4-{4-[2-(2，5，2'，4'，6'-五甲基联苯-4-基氧基)乙酰氨基]苯基乙炔基}苯甲酰胺Me5联苯基-NH-C6H4-CC-C6H4CON[eri2Lys6H8])2将0.49g(0.2mmol)实施例8e中所述的Z8化合物溶解在10ml冰醋酸中，与10ml33%的HBr冰醋酸溶液混合，在RT下搅拌1h，用乙醚补足到200ml。混合物搅拌2h，抽滤滤出沉淀，用乙醚洗涤并真空干燥。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.41gg)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4，7,10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸的Gd络合物与树枝状A胺9f的八-Gd络合物酰胺Me5联苯基-NH-C6H4-CC-C6H4CON[eri2Lys6Gd8])2在加热下将3.02g(4.8mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l，4,7,10-四氮杂环十二烷-l，4,7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与0.56g(4.8mmo1)N-羟基丁二酰亚胺溶解在25ml二甲基亚砜(DMSO)中。冷却至RT后，加入1.0g(4.8mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将0.2mmol实施例8f中所述的八胺氢溴酸盐和0.97g(9.6mmol)三乙胺于60mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5(TC搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.61并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性碳一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMICONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率0.55g(理论值的41.0%)含水量(Karl-Fischer):6.5%元素分析(基于无水物)理论值C43.32H5.44Gd20.08N12.52测量值C42.96H5.68Gd19.57N12.21实施例9a)环己基羟基乙酰甘氨酸苄酯将50g(148mmol)甘氨酸节酯甲苯-4-硫酸酯(Aldrich)在500ml乙酸乙酯和250ml饱和碳酸钠溶液之间分配。有机相用水洗涤到中性，经硫酸钠干'燥，过滤并真空浓缩。收率16.7g淡黄色油。然后，将13.32g(84.2mmol)环己基羟基乙酸(JoumaloftheAmericanChemicalSociety103，1566(1981))溶解在100mlDMF中，加入羟基苯并三唑后，加入16.7g(101mmol)被释放的甘氨酸苄酯。在0"C保持30min后，加入N，N'-二环己基碳二亚胺在50mlDMF中的溶液，混合物在0'C搅拌30min并在RT下搅拌过夜。然后过滤除去沉淀的脲，滤液真空浓縮。剩余物在硅胶上进行色谱分离(己烷/乙酸乙酯梯度)。合并含产物的部分并进行蒸发。收率7.04g(理论值的27.4%)元素分析理论值C66.86H7.59N4.59测量值C66.52H7.78N4.50b)(2-环己基-2-三氟甲磺酰氧基乙酰基)甘氮酸节酯在-6(TC，将6.45g(21,12mmol)实施例9a中所述的醇和2,6-二甲基吡啶于30ml二氯甲烷中的溶液慢慢滴加至6.56g(23.23mmol)三氟甲磺酸酐在50ml二氯甲垸中的溶液中。在-60'C保持2h后，将混合物温热至-5T:，加入100ml冰水，分离各相。有机层再次用冰水洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓縮。所得粘性油不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率9.0g。c)10-(4-节氧羰基-l-环己基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7-三(乙酸叔丁酯)溴化钠络合物将7.44g(43.21mmol)1,4,7,10-四氮杂环十二烷(cyclen)溶解在80ml氯仿中，加入9.0g(20.57mmol)实施例9b中所述的三氟甲基磺酸酯(于20ml氯仿)中。在RT下搅拌过夜后，有机相用每次150ml水洗涤数次，然后经硫酸镁干燥，过滤，浓縮滤液。将剩余物溶解在70ml乙腈中，加入7.5g(70.8mmol)碳酸钠。滴加13.82g(70.85mmol)乙酸叔丁酯，反应混合物在6(TC搅拌6h并在RT下搅拌过夜。过滤除去固体，滤液蒸发至干。所得粗品在硅胶上进行色谱分离(乙酸乙酯/乙醇梯度20/1-1/1)。合并含产物的部分并进行蒸发。所得油不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率2.8g(理论值的21.9%)d)10-(4-羧基-l-环己基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l，4,7,10-四氮杂环十二烷-l，4,7-三乙酸溴化钠络合物将1.(^(1.25腿01)实施例9(;中所述的酯溶解在201111甲醇中，与1.0g(25mmol)氢氧化钠于10ml水中的溶液混合，回流加热4h并在RT下搅拌过夜。随后浓縮，然后使剩余物溶解在水中，并通过加入AMBERLITE离子交换剂IR120(HT)将pH调节到3，过滤除去交换剂，溶液冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率0.7g(定量的)e)10-(4-羧基-1-环己基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-l,4，7-三乙酸的钆络合物用稀盐酸将6.52g(12mmol)实施例9d中所述的络合剂酸的pH调节至3，加入2.17g(6mmol)氧化礼后，在8(TC搅拌30min。冷却至RT后，将pH调节至7并将溶液真空浓縮。剩余物在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率5.77g(63.3%)含水量(Karl-Fischer):8.1%元素分析(基于无水物)理论值C41.31H5.49Gd22.53N10.04测量值C41.22H5.61Gd21.98N10.23f)得自10-(4-羧基-1-环己基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7，10-四氮杂环十二垸-l,4,7-三乙酸的Gd络合物与树枝状八胺4d的八-Gd络合物酰胺在加热下将8.37g(12mmol)实施例9e中所述的钆络合物和1.4g(12mmol)N-羟基丁二酰亚胺溶解在70mlDMSO中。冷却至RT后，加入2.47g(12mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺，混合物搅拌60min。将0.67g(0.5mmol)实施例4d中所述的八胺和3.33ml(24mmol)三乙胺于70mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5(TC搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到约1.41并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与2g活性碳一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMIC0N⑧YM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率1.53g(42.8%)含水量(Karl-Fischer):5.5%元素分析(基于无水物)理论值C46.45H6,16Gd18.57N11.58测量值C46.11H6.37Gd18.10N11.75实施例10a)联苯基-4-羧酸(2-氨基乙基滩胺在(TC将溶解在50ml二氯甲垸中的2.16g(9.98mmol)联苯基-4-甲酰氯(Aldrich)加至于600ml二氯甲烷中的60g(998mmol)乙二胺中)，混合物边搅拌边用冰浴冷却2小时并在RT下搅拌过夜。随后，加入300ml水，分离各相。有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，用二氯甲烷萃取水相，合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。收率1.61g(理论值的67.2%)元素分析理论值C74.97H6.71N11.66测量值C74.53H6.88N11.90b)得自联苯基-4-羧酸(2-氨基乙基)酰胺和Boc保护的G3-(羧酸)dendron的羧酰胺将84.1mg(0.35mmol)实施例10a中所述的联苯基-4-羧酸(2-氨基乙基)酰胺溶解在10mlDMF中，加入963mg(0.35mmol)C72ew/j/r少-爿/owma/7，幼6，f2卯"中所述的Boc-保护的G3-(羧酸)dendron。加入0.48ml(2,8mmol)N，N-乙基二异丙基胺和208mg(0.4mmol)PyBOP，随后在RT下搅拌2天，浓縮，剩余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配。有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。收率740mg(理论值的71.1%)元素分析理论值C58.94H6.50N14.12测量值C58.61H6.83N13.94c)得自10b的脱保护的八胺树状高分子将893mg(0.3mmol)实施例10b中所述的被完全保护的胺溶解在15ml三氟乙酸中，在RT下搅拌lh，然后250ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过75mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率540mgd)树状高分子胺10c的八-DTPA衍生物将435mg(0.2mmol)实施例10c中所述的八胺溶解在50ml水中。然后，分批加入1.94g(4.8mmol)固体形式的DTPA单酐单乙酯(EP0331616的实施例13a)，通过加入2N氢氧化钠溶液使溶液的pH保持在8-9。然后，混合物在此pH和在RT下搅拌1h，之后，通过加入更多氢氧化钠溶液将pH调节至12。混合物再搅拌5h，通过加入浓盐酸将pH调节到7以后，溶液通过AMICONYM1(截留1.000Da)进行超滤，截留物质在Lichroprep②RP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离。冻干产物部分，不进行进一步鉴定，用于以下络合反应。收率1.0ge)树枝状配体10d的八-GdDTPA络合物将1.0g(0.2mmol)实施例10d中所述的八-DTPA溶解在20ml水中，与290mg(0.8mmol)氧化钆混合并在80。C搅拌3min。溶液与活性炭混合，过滤，滤液用乙腈冰梯度在Lichroprep⑧RP-18上进行色谱分离，将产物部分冻干。收率924mg(65.3%)含水量(Karl-Fischer):6.9%元素分析(基于无水物)理论值C39.75H4.04Gd19.10N11.48Na2.79测量值C39.31H4.22Gd18.61N11.79Na2.24实施例11a)得自联苯基-4-羧酸(2-氨基乙基)酰胺和(Boc)r[G3]-C02H的羧酰胺将84.1mg(0.35mmol)实施例10a中所述的联苯基-4-羧酸(2-氨基乙基)酰胺溶解在10mlDMF中，加入831mg(0.35mmol)Jow"a/o/Ogam'cCfem/W/y,(2M"(通过水解其中所述的化合物22)中所述的(Boc)8-[G3]-C02H。加入0.48ml(2.8mmol)N，N-乙基二异丙基胺和208mg(0.4mmol)PyBOP，随后在RT下搅拌2天，浓縮，剩余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配。有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓縮。收率748mg(理论值的82.3%)元素分析理论值C61.05H6.91N8.63测量值C60.77H7.05N8.44b)得自lla的脱保护的八胺树状高分子将649mg(0.25mmol)实施例lla中所述的被完全保护的胺溶解在15ml三氟乙酸中，在RT下搅拌lh，然后与250ml乙醚混合，抽滤并用乙醚彻底洗涤。将剩余物溶解在水中并通过75mlAMBERLITE⑧离子交换剂IRA410(OH-)，将碱性洗脱液冷冻并冻干。所得无色粉末不进行进一步鉴定，用于以下反应。收率430mgc)得自10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4，7，10-四氮杂环十二烷-l,4,7-三乙酸的Gd络合物与树枝状八胺lib的八-Gd络合物酰胺在加热下将3.02g(4.8mmol)10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-l,4,7，10-四氮杂环十二垸-l，4，7-三乙酸的钆络合物(EP0946525的实施例lf)与0.56g(4.8mmo1)N-羟基丁二酰亚胺溶解在25ml二甲基亚砜(DMSO)中。冷却至RT后，加入1.0g(4.8mmol)N,N，-二环己基碳二亚胺，将混合物搅拌60min。将359mg(0.2mmol)实施例lib中所述的八胺和0.97g(9.6mmol)三乙胺于50mlDMSO中的混合物加入以这种方式原位制备的羟基丁二酰亚胺活化酯溶液中。在5(TC搅拌过夜，然后用乙酸乙酯使体积补足到约0.61并搅拌24h，然后抽滤滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥。剩余物溶解在水中并与0.5g活性炭一起搅拌lh。过滤该悬浮液，滤液在AMCONYM1(截留1.000Da)上进行超滤，截留物质在LichroprepRP-18上用乙腈/水梯度进行色谱分离，将产物部分冻干。收率963mg(69.0%)含水量(Karl-Fischer):5.0%元素分析(基于无水物)理论值C43.82H5.09Gd18.97N11.61测量值C43.43H5.21Gd18.39N11.42实施例12化合物2e和4e对大鼠静脉给药后的血浆动力学以50jxmol总轧/kg体重的剂量对大鼠静脉给药实施例2e和4e的标题物质，与来自EP0836485实施例1的标题物质进行比较。然后，在各时间点(注射后1、3、5、10、15、30、60、90、120、240、360min和24h)通过在颈总动脉中的导管采集血样，通过原子发射光谱法(ICP-AES)测定金属含量，并使用换算因子(0.625)将其换算为血浆水平。由血浆浓度计算(软件WinNonlin)动力学数据(表1，2)。表l:示例性物质的实验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage79</column></row><table>权利要求1.通式(I)的级联聚合物络合物R-L-A-{X-[Y-(Z-{W-Kw}z)y]x}a-1(I)其中R＝HAS-结合单元，L＝连接基或键，A＝基本分枝数为a的含氮级联核，X和Y＝相互独立地为直接键或伸长分枝数分别为x和y的级联伸长单元，Z和W＝相互独立地为直接键或伸长分枝数分别为z和w的级联伸长单元，K＝络合剂的残基，a＝2-12的数字，并且x、y、z和w＝相互独立地为1-4的数字，条件是所述级联核A的a个基本分枝中刚好一个分枝代表刚好一个与L连接的点，并且条件是所述级联聚合物络合物在所述络合剂残基K中总共包含至少4个原子序数为20-29、39、42-44或57-83的元素的离子，并且适当时包含无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子。2.权利要求1的化合物，其特征在于，下式适用于分枝数的积4^(a-1)*x*y*z*wS64。3.权利要求1或2的化合物，其特征在于，下式适用于分枝数的积:8S(a-1)*x*y*z*w^48。4.权利要求l-3的化合物，其特征在于R选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>5.权利要求l-4的化合物，其特征在于L选自:直接键，國0-CH2-CO-NH-(CH2.CH2.0)wo画CH2-CH2國CO-，-0-CH2-CO-，-O-CHrCO-NH-CwrCO-,-CO-，-OP(02)0画Cw2-CO國，-0-CH2-CO-Pro4-，-0-012國(:0-:^國芳基誦0(:画芳基-(:0陽，-0-012-(:0-顺-芳基-000(:-芳基^0-,-CO-NH-CH2-CH2-，其中，Pro是氨基酸脯氨酸。6.权利要求l-5的化合物，其特征在于A选自氮原子，UU,N—CH2—(Oy'mN——CH2——(CH2);r-11-uu—NPUN——CH.;~CH。—N「2(CH。),CH2(CH,),乂N——CH,~CH,~N、I2Pu2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中m和n是l-10的数字，p是0-10的数字，X^是(^或E，其中E代表基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>中其o是l-6的数字，Q'是氢原子或Q2，并且Q2是直接键，M1、M2、M3、]V^相互独立地为直接键、任选地插入1-3个氧原子和/或任选地被1-2个氧代基取代的d-C,。-亚烷基链，R。是分枝的或未分枝的C,-C,o-垸基、硝基、氨基、羧酸基，或者是、u2，其中，(^的数量对应所述基本分枝数a，并且条件是刚好一个(52代表与L的连接。7.权利要求l-6—的化合物，其特征在于A选自三(氨乙基)胺，三(氨丙基)胺，二亚乙基三胺，三亚乙基四胺，四亚乙基五胺，1,3,5-三(氨甲基)苯，1,3，5-苯三酰胺，氨基间苯二甲酰胺，3，5-二(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3，5-二(3-氨基丙氧基傳甲酰胺，3，5-二(2-氨基乙氧基)苯胺，3,5-二(3-氨基丙氧基)苯胺，3，4,5-三(2-氨基乙氧基)苯甲酰胺，3，4，5-三(3-氨基丙氧萄苯甲酰胺，3,4,5-三(2-氨基乙氧基)苯胺，3,4，5-三(3-氨基丙氧基)苯胺，3，5-二氨基-1-苯甲酰胺，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage0</formula>U!是QJ或E，W是(^或E，其中E代表基团一(CH2)0—CH2—N2Q，其中o是l-6的数字，Q1是氢原子或Q2，(52是直接键，U3是d-C2o-亚烷基链，其任选地插入1-10个氧原子和/或1-2个-N(CO)q-R2-、1-2个亚苯基和/或1-2个亚苯氧基，和/或任选地被1-2个氧代基、硫代、羧基、Q-C5-垸基羧基、d-Cs-烷氧基、羟基、d-Cs-烷基取代，其中q是数字0或l，并且W是氢原子、任选地被l-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，B是氢原子或以下基团1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage0</formula>V是次甲基一CH，同时，1/是直接键或基团M，并且US具有l/的一I含义，或者<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>v是以下基团之一同时，1/和US相同并且是直接键或基团M，其中M是任选地插入1-3个氧原子和/或任选地被1-2个氧代基取代的d-dcr亚垸基链。8.<image>imageseeoriginaldocumentpage11</image>9.权利要求l-8的化合物，其特征在于，所述级联伸长单元X、Y、Z和W相互独立地选自-CH2CH2NH-;-CH2CH2N<;-CO-(CH2)2-NH-;-CO-(CH2)rNH-;-CO-(CH2)4-NH-;-CO-(CH2)5-NH-;-CO-(CH2)6-NH-;-CO-(CH2)2-N<;-CO-(CH2)rN<;-CO-(CH2)4-N<;-CO-(CH2)5-N<;-CO-(CH2)6-N<;-COCH(NH-)(CH2)4NH-;-COCH(N<)(CH2)4N<;-COCH2OCH2CON(CH2CH2NH-)2;-COCH2OCH2CON(CH2CH2N<)2;-COCH2N(CH2CH2NH-)2;-COCH2N(CH2CH2N<)2;-COCH2NH-;-COCH2N<;-COCH2CH2CON(CH2CH2NH-)2;-COCH2CH2CON(CH2CH2N<):-COCH2OCH2CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2;-COCH2OCH2CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N<)2]2;-COCH2CH2CO-NH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2;-COCH2CH2CO-NH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N<)2]2;-CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2;-CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N<)2]2;-COCH(NH-)CH(COOH)NH-；-COCH(N<)CH(COOH)N<;CON(CH2CH2NH-):CON(CH2CH2NH-):CON(CH2CH2N<)2CON(CH2CH2N<)2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>N—,CON(CH2CH2NH-)2-CON、CON(CH2CH2NH-)2,CON(CH2CH2N<)2■CONH-、CON(CH2CH2N<)2,CON(CH2CH2NH-)2COCH2CH2CONH、CON(CH2CH2NH-)2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>和n—ch2—ch2—nch，n—ch2——ch2——n1chrcoorchr2-coor1R'OOC-H.,CCH墨CO-aCH。-C0OR'N——C^CH9——N—CH^CH-NR'OOC-H。CCH2-C00R'COOR1CH,CO-aN+C——C-N+C—C+N—C—C~|~ILH。H，IJnH，H，LlH，H,JmCHR2COOR1CHR2COOR1CHR2COOR1CHR2INCHR2COOR1(ia)，(ib)，(ic)，其中n和m各自是数字0、1、2、3或4，其中n+m的和不大于4，R相互独立地是氢原子或原子序数为20-29、39、42-44或57-83的金属离子等价物，W是氢原子、任选地被l-2个羟基或1个羧基取代的甲基或乙基，R3是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>~CH—CHOH-C—N-U6—T—基，H2R"是异丙基、环己基、任选地插入1-10个氧原子、1个亚苯基、1个亚苯氧基和/或任选地被1-5个羟基、l-3个羧基、l个苯基取代的直链的、支链的、饱和的或不饱和的CpC30-烷基链，RS是氢原子或R4，if是直链的、支链的、饱和的或不饱和的Q-C2()-亚烷基，其任选地包含1-5个亚氨基、1-3个亚苯基、1-3个亚苯氧基、1-3个亚苯基亚氨基、1-5个酰胺、l-2个酰肼、l-5个羰基、l-5个亚乙氧基、l个脲、l个硫脲、1-2个羧烷基亚氨基、l-2个酯基、1-10个氧、l-5个硫和域l-5个氮原子，和/或任选地被1-5个羟基、l-2个巯基、l-5个氧代基、l-5个硫代、1-3个羧基、l-5个羧垸基、l-5个酯基和/或l-3个氨基取代，其中，所述任选地存在的亚苯基可以被1-2个羧基、1-2个砜或1-2个羟基取代，T是-CO-a、-NHCO-a或-NHCS-a基，并且a是与最后一级级联伸长单元W的末端氮原子连接的点。10.<image>imageseeoriginaldocumentpage16</image>11.权利要求1-10的化合物，其特征在于，式IA、IB或IC的络合剂K的定义中的基团R4选自异丙基、环己基、-CH3、-C6H5、-CH2-COOH，-CHrC6H5、-CH2-0-(CH2CH2-0)6CH3、-CH2-OH。12.药物组合物，其包含权利要求1-11的化合物，适当时与制药工艺学中常规的添加剂一起。13.权利要求l-ll的化合物用于制备用于NMR诊断的药剂的用途。14.制备权利要求12的药物组合物的方法，其特征在于，使溶解或悬浮在水或生理盐水中的权利要求1-11中任一项的化合物适当时与制药工艺学中常规的添加剂一起形成适合肠内和肠胃外给药的形式。全文摘要本发明涉及新型的级联聚合物络合物、包含所述化合物的药剂、所述络合物在NMR诊断中的用途和制备所述化合物和药剂的方法。本发明的形成络合物的级联聚合物络合物可以用以下通式(I)来描述R-L-A-{X-[Y-(Z-{W-K_w}_z)_y]_x}_a-1，其中R代表HAS-结合单元，L代表连接基或键，A代表基本分枝数为a的含氮级联核，X和Y相互独立地代表直接键或伸长分枝数为x或y的级联伸长单元，Z和W相互独立地代表直接键或伸长分枝数为z或w的级联伸长单元，K代表络合剂的基团，a代表2-12的数字，并且x、y、z和w相互独立地代表1-4的数字，条件是所述级联核A的a个基本分枝中刚好一个分枝代表刚好一个与L连接的点，并且条件是所述级联聚合物络合物在所述络合剂基团K中总共包含至少4个原子序数为20-29、39、42-44或57-83的元素的离子，并且任选地包含无机碱和/或有机碱、氨基酸或氨基酰胺的阳离子。文档编号A61K49/12GK101657219SQ200880002489公开日2010年2月24日申请日期2008年1月16日优先权日2007年1月18日发明者B·米赛尔维茨,H·席尔默,H·施密特-维利希,H-J·魏因曼,P·卡拉万申请人:拜耳先灵医药股份有限公司;艾佩斯制药公司