专利名称：：一种药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物制剂的医药用途，属于食品和药品领域，具体涉及以赶黄草和丹参为原料的药物制剂用于制备制备治疗黄褐斑疾病药物的用途。
背景技术：
：黄褐斑(Chloasma,Melasma)也称为肝斑，是面部黑变病的一种，是发生在颜面的色素沉着斑，目前以中医药对症治疗为主。黄褐斑的发生与肝、脾、肾三脏失调有关，中医分型有肝郁气滞型、治宜疏肝解郁、调理气血；肝脾不和型，治宜调理肝脾，化痰祛瘀；肾气不足型，治宜补肾调经，养血活血；瘀血不畅型，治宜活血化瘀，行气疏肝。目前已获批准用于黄褐斑的药品有景天祛斑胶囊、调经祛斑胶囊、化瘀祛斑胶囊，气血和胶囊、疏肝颗粒等，其处方用药主要有红景天、当归、白芍、红花、黄芪、熟地等，但价格相对昂贵。赶黄草为虎耳科植物PenthorumchinensePursh.的干燥全草，丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎。本发明采用赶黄草和丹参组合的药物制剂用于治疗黄褐斑，目前尚未见报道，且该药物组合物经试验证明可以达到活血化瘀，疏肝健脾退黄、降低细胞黑素生成之功效。
发明内容本发明的目的在于提供一种赶黄草和丹参的组合药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途，组合药物制剂具有优于单方赶黄草或单方丹参更好的效果，所述组合药物制剂的制备方法如下取丹参300g，加90%(V/V)乙醇回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇至稠膏；丹参药渣与赶黄草835g，加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%(V/V)乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏；合并上述两种稠膏，备用。进一步将上述合并后的稠膏加适当的辅料如淀粉、糊精、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、滑石粉、交联聚维酮、硬脂酸镁、包衣粉、乙醇、蜂蜜或矫味剂，制备为片剂、颗粒剂、胶囊剂或丸剂等。本发明通过赶黄草提取物、丹参提取物、赶黄草丹参组合提取物三种浸膏给予黄褐斑模型小鼠灌胃后，对小鼠全血粘稠度及黑色素生成水平的影响试验发现，组合提取物组具有更好的降低正常小鼠的全血粘度作用，可以降低黑色素的生成。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的保护范围。具体实施例方式实施例1药效学试验1.1摘要浸膏以2.83、5.67g、ll.34g生药/kg灌胃给予黄褐斑模型小鼠，每天给药1次，连续给药30天，末次给药后小鼠眼眶取血测定全血粘度值，处死小鼠后取背部皮肤进行皮肤黑色素细胞的病理形态学观察。试验结果表明，赶黄草丹参组合提取物有更优的降低黄褐斑小鼠全血粘度值，改善血液粘稠度，降低皮肤黑素的生成。1.2试验目的观察赶黄草丹参组合提取物灌胃给予黄褐斑模型小鼠后对小鼠全血粘稠度及黑色素生成水平的影响。1.3试验材料1.3.l受试药物赶黄草丹参组合提取物(浸膏)深棕色，质粘稠，5g生药/ml。由成都力思特制药股份有限公司提供，批号090601。临用前将浸膏用蒸馏水配制成0.283g、0.567g、1.134g生药/ml的药液供试验用。赶黄草提取物(浸膏)深棕色，质粘稠，3.5g生药/ml。由成都力思特制药股份有限公司提供，批号090601。临用前将浸膏用蒸馏水配制成0.208g、0.417g、0.833g生药/ml的药液供试验用。丹参提取物(浸膏)红棕色，质粘稠，3.2g生药/ml。由成都力思特制药股份有限公司提供，批号090601。临用前将浸膏用蒸馏水配制成0.075g、0.150g、0.300g生药/ml的药液供试验用。赶黄草丹参组合提取物浸膏制备方法取丹参300g，加90X乙醇回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇至稠膏；药渣与赶黄草835g，加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏；合并上述两种稠膏，备用。赶黄草提取物浸膏制备方法取赶黄草835g，加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏;丹参提取物浸膏制备方法取丹参300g，加90%乙醇回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇至稠膏；药渣加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏；维生素C片来源于四川福瑞药业有限公司，批号090513。1.3.2实验动物雌性昆明种小鼠，体重20士3g，由简阳市简城比尔动物养殖场提供。1.3.3试剂黄体酮注射液每支10mg/ml，批号090311，浙江仙琚制药股份有限公司。考马斯亮兰，批号20060731。试剂盒均为南京建成生物工程研究所。鼠抗人单克隆抗体HMB45(melanoma黑素瘤)即用型试剂盒MAB_0098、SP超敏试剂盒Kit9710，福建迈新生物技术开发有限公司；浓縮型DAB试剂盒ZLI_9032，北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3.4仪器R-80A型全自动血液粘度仪(北京中勤世帝科学仪器有限公司)，01ympus-BX50型光学显微镜(日本01ym2pus)，MIAS2000型计算机图像分析系统(四川大学智胜软件股份有限公司)。1.3.5方法雌小鼠120只，随机分为12组。正常组按2ml/kg体重肌肉注射灭菌注射用水；其余5组以黄体酮注射液于小鼠后腿肌肉注射，两腿交替，剂量为20mg/kg黄体酮(相当于人临床等效剂量的8倍)。每周注射6d，连续30d。造模同时开始灌服治疗药物或蒸馏水0.lml/10g，每天1次，连续30d。赶黄草、丹参浸膏低、中、高剂量分别为0.283g、0.567g、1.134g生药/ml(相当于临床用量5、10、20倍)的药液供试验用；赶黄草浸膏低、中、高剂量分别为O.198g、0.396g、0.794g生药/ml的药液供试验用；丹参浸膏低、中、高剂量分别为0.085g、0.170g、0.340g生药/ml的药液供试验用。维生素C剂量0.lg/kg(相当于人临床用量的10倍)。末次给药lh后，各组小鼠眼眶采血lml，盛于含有肝素(已干燥)的加盖塑料管内，测定全血粘度值。剥取小鼠背部皮肤一±央，去毛，10%中性甲醛固定。常规石腊包埋，连续5ym厚切片，HE染色。黑色素标记采用免疫组织化学方法-链霉菌素，生物素法。一抗选用鼠抗人单克隆抗体HMB45(melano2ma黑素瘤)，DAB显色，苏木素复染。用PBS代替一抗做阴性对照。黑色素阳性目标计算机图象分析各组随机选取8只小鼠的皮肤，各制成1张病理切片，每片观察5个互不重叠的视野，找到阳性目标后，MIAS2000型计算机图像分析系统对目标图象进行定量分析，得出每张切片5个视野及每组8只动物黑色素阳性目标的平均面积、平均光密度、积分光密度。1.4结果1.4.1对小鼠全血粘度的影响从表1可见，与正常对照组比较，模型对照组小鼠不同切变率全血粘度均比正常对照组小鼠有明显升高。与模型对照组比较，赶黄草、丹参高剂量组可明显降低全血粘度值，说明赶黄草、丹参浸膏能够明显改善黄褐斑小鼠的血液流变性，降低血液粘稠度；赶黄草组和维生素C组对黄褐斑小鼠的血液流变性和血液粘稠度几无改变作用；丹参高剂量组具有明显的改善血液流变性和血液粘稠度的作用。表1赶黄草、丹参浸膏对小鼠全血粘度的影响(x士s)5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与模型组比较*P<0.05，**P<0.01(下同)1.4.2小鼠皮肤黑色素细胞的病理形态学观察HE染色光镜下不能发现黑色素细胞。HMB45标记观察正常组毛囊、皮脂腺基底细胞中可见少量黑色素细胞。模型组黑色素细胞成簇分布于毛囊、皮脂腺基底细胞中，表皮基底细胞和棘细胞层中亦有散在分布。赶黄草、丹参提取物组表皮基底层及毛囊基底细胞中仅散见黑色素细胞。赶黄草组、丹参组和维生素C组黑色素细胞少量分布于毛囊、皮脂腺基底细胞中，表皮基底细胞和棘细胞层中有少量分布，但明显少于模型组。1.4.3对小鼠皮肤黑色素细胞的影响从表2可见，与正常对照组比较，模型对照组小鼠皮肤黑色素细胞阳性目标面积、平均光密度、积分光密度值均比正常对照组小鼠有明显升高。与模型对照组比较，赶黄草、丹参组高、中剂量组可明显降低小鼠皮肤黑色素细胞阳性细胞的平均光密度、积分光密度值(P<0.01;P<0.05)，赶黄草高剂量组和丹参高剂量组也有一定的降低皮肤黑色素细胞阳性细胞的平均光密度、积分光密度值的作用(P<0.05)，其效果略逊于复方组。维生素C组可略微降低皮肤黑色素细胞阳性细胞的平均光密度、积分光密度值，与模型组比较无显著性差异。表2赶黄草、丹参浸膏对小鼠皮肤黑色素细胞的影响(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>黄褐斑是一种多因素、多系统、多环节所致的色素性皮肤病，发病机理复杂，真正的发病原因目前尚不十分清楚。其作为一种色素增加性皮肤病，黑素生成过多是其根本原因，黑素细胞合成黑素是一个非常复杂的过程，受到多种因素的影响。黄褐斑患者存在血流动力学指标异常，认为血液流变学改变与黄褐斑关系密切。与中医学中气滞血瘀、脉络瘀阻相符合，因此血瘀是黄褐斑的病因之一。本实验研究结果显示，复方赶黄草、丹参浸膏具有疏肝健脾、活血化瘀的作用，能够显著降低黄褐斑小鼠全血粘度值，改善血液粘稠度，此外复方赶黄草、丹参浸膏还能明显降低皮肤黑素的生成。1.6结果与讨论从上述试验结果可见，复方赶黄草、丹参浸膏对正常小鼠的全血粘度有一定降低作用，同时可以降低黑色素的生成，从本组方的功能主治分析，其具有疏肝健脾，活血化瘀，治疗黄褐斑的作用，因此我们认为采用赶黄草、丹参组合物制剂具有改善人体血液循环，降低人体黑素水平，具有治疗黄褐斑的临床价值。实施例2稠膏制备丹参300g，加90%乙醇回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇至稠膏；丹参药渣与赶黄草835g，加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏；合并上述两种稠膏，备用。实施例3片剂取实施例2的稠膏膏，加入适量淀粉、糊精、微晶纤维素、硬脂酸镁等，混匀，制粒干燥、整粒，压片，即得。并可根据所加辅料种类的不同，将其制成普通片、分散片、泡腾片。实施例4固体颗粒剂取实施例2的稠膏，加入适量淀粉、糊精、蔗糖粉，混匀，制粒干燥，整粒，包装，即得。实施例5胶囊剂取实施例2的稠膏，加入适量淀粉、微晶纤维素、滑石粉、硬脂酸镁等，混匀，制粒干燥后分装或浸膏直接干燥后打成粉末直接分装，即得。实施例6丸剂取实施例2的稠膏膏，直接干燥粉碎成细粉或加入适量辅料干燥后粉碎成细粉，加入一定浓度乙醇或蜂蜜水泛成丸剂即得。8权利要求一种药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途。2.—种如权利要求1所述药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途，其特征在于所述药物制剂是由赶黄草835g和丹参300g制得的稠膏。3.如权利要求2所述的药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途，其特征在于所述稠膏的制备方法为取丹参300g，加90%乙醇回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇至稠膏；丹参药渣与赶黄草835g，加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.151.18(6065°C)的清膏，冷却，加乙醇使含醇量达60%，搅拌，静置，滤过，沉淀用60%乙醇洗涤三次，合并洗液与滤液，回收乙醇并浓縮成相对密度1.301.32的稠膏；合并上述两种稠膏，备用。4.如权利要求2或3所述的药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途，其特征在于所述稠膏经加入淀粉、糊精、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、滑石粉、交联聚维酮、硬脂酸镁、包衣粉、乙醇、蜂蜜或矫味剂，即可得到片剂、颗粒剂、胶囊剂、或丸剂。全文摘要本发明提供了一种药物制剂用于制备治疗黄褐斑疾病药物的用途，该药物制剂是由赶黄草835g和丹参300g制得的稠膏。文档编号A61K36/537GK101711794SQ20091026522公开日2010年5月26日申请日期2009年12月17日优先权日2009年12月17日发明者张浩,张玲,黄绍渊申请人:成都力思特制药股份有限公司