专利名称：一种治疗肺癌的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及一种治疗肺癌的药物组合物。
背景技术：
肺癌是全世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，病死率高，多数患者在明确诊断时即有转移，5年生存率维持在15%左右。常规化疗药物治疗肺癌毒性大，容易导致肿瘤复发，寻找低毒性、特异型杀伤肺癌细胞的药物和方法具有重要意义。近年研究表明，抗疟疾药物青蒿素及其衍生物具有显著的抗肿瘤作用，其药理学作用研究受到广泛关注。蒿甲醚为青蒿素的主要衍生物之一，抗疟疾作用优于青蒿素。近年来越来越多的实验证明青蒿素类药物有更广泛的药理作用，尤其重要的是它不仅可以选择性抑制和/或杀灭多种肿瘤细胞，而且不良反应极少，甚至不产生耐药性。青蒿素类药物的抗肿瘤作用已经得到多方面的证实，其主要的作用机制有以下几个方面1、铁离子介导的细胞损伤恶性肿瘤细胞中Fe含量要比正常细胞大得多，青蒿素类药物可以通过铁离子介导形成内过氧化桥，并产生活性氧离子(ROS)和以碳为核心的自由基，后者使细胞发生巨大的分子损伤和细胞死亡；2、细胞周期阻滞青蒿琥酯可以使Kaposi’ s肉瘤细胞周期时间明显缩短，二氢青蒿素可以使人乳腺癌MCF-7细胞阻滞在G0+G1期；3、诱导细胞凋亡青蒿琥酯可以诱导Kaposi’ s肉瘤细胞发生凋亡，并呈现出剂量依赖性，而并不能诱导正常细胞发生凋亡。青蒿素可以诱导人红白血病K562细胞跨膜电位下降而发生凋亡；4、抗血管生成作用青蒿素类药物可以通过抑制VEGF和KDR/flk-Ι的表达从而阻止肿瘤新生血管的形成；5、青蒿素类药物可以调节肿瘤相关基因的表达，从而实现抗肿瘤的活性[；6、其它，如青蒿琥酯还具有对抗多药耐药的能力；青蒿素可以抑制星形细胞瘤 T67细胞中的核因子NF-κ B的合成。不仅如此，蒿甲醚可以引起嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的线粒体损伤，线粒体肿胀、嵴断裂、减少、消失，并抑制线粒体呼吸链复合酶I和IV的活性， 从而导致细胞死亡。顺钼是治疗肺癌中最常用的化疗药物之一，属于细胞周期非特异性药物，主要作用靶点是增殖细胞的DNA，有类似烷化剂双功能基团的作用，可和细胞内的碱基结合，使 DNA分子链内和链间交叉键联，从而使DNA失去功能。不能复制；高浓度时也抑制DNA和蛋白质的合成。顺钼除了与核DNA相互作用外，线粒体DNA(mtDNA)也是其重要的作用靶点。顺钼可引起肺腺癌A549细胞凋亡已被证实，并且试验结果表明经顺钼作用后肺腺癌A549细胞中细胞色素氧化酶亚单位I (CoxI)、核糖体12SrRNA基因以及半胱氨酸转运RNA(tRNA、 CyS)、天冬酰胺转运RNA(tR-NAAsa)基因表达显著上调，由此推测线粒体氧化磷酸化功能的增强是癌细胞对化疗药物的自然反应过程。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗肺癌的药物组合物，所述药物组合物的毒副作用少，疗效好。为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案一种治疗肺癌的药物组合物，包含蒿甲醚和顺钼。作为优选，本发明所述药物组合物还包含药学上可接受的辅料。更优选地，蒿甲醚与顺钼的重量比为1 0.01 1 0. 1，其中蒿甲醚与顺钼的重量比为1 0.02 1 0.05时，治疗肺癌的效果最佳。本发明还提供包含根据权利要求1所述的药物组合物的各种临床制剂。本领域技术人员可通过常规方法直接或间接加入药学上可接受的辅料，制备临床需要的各种剂型。经试验研究发现蒿甲醚与顺钼联用对体外培养的小鼠肺癌3LL细胞株有抑制作用。蒿甲醚与顺钼联用或单用的效应均呈浓度、时间依赖关系，两药联用的中效浓度明显小于单用的中效浓度，两药高浓度合用时合用指数CI < 1(表示协同)；倒置显微镜下可观察至IJ 3LL细胞典型的凋亡形态；流式细胞术显示两药联用时3LL细胞出现明显的凋亡峰，细胞周期被阻滞在G0/G1期，S期、G2/M期细胞数减少，两药联用凋亡率高于单用顺钼或蒿甲醚， 且两药联用的IC5tl值显著低于单用顺钼或蒿甲醚，说明本发明所述药物组合物不仅可减轻化疗的毒副反应，减少用药剂量，并能提高疗效。动物实验进一步证实，蒿甲醚与顺钼联用表现出较好的抑瘤作用，均较单用顺钼或蒿甲醚强。
图1为本发明所述药物组合物的量效曲线；图2为本发明所述药物组合物与对照药物给药过程中模型小鼠体重变化曲线；图3为本发明所述药物组合物与对照药物给药过程中模型小鼠肿瘤体积变化曲线。
具体实施例方式本发明公开了一种治疗肺癌的药物组合物，本领域技术人员可以借鉴本文内容， 适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。下面结合实施例，进一步阐述本发明实施例1 测定蒿甲醚和顺钼单用与联用对3LL细胞的抑制作用实验材料DMEM/F12培养基购自美国Hyclone公司；胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司；噻唑蓝(MTT)购自美国AMRESC0公司。主要仪器二氧化碳培养箱(美国Forma3164型)、酶标仪(美国Bio-Rad公司550 型)。细胞株及细胞培养小鼠肺癌细胞株3LL，用含10%胎牛血清、青霉素和链霉素 (各100u/ml)的DMEM/F12培养基，在37°C、5% C02孵箱中常规培养。
药物蒿甲醚(Artemether，ART)由昆明制药集团股份有限公司提供；顺钼(DDP) 购自山东省德州制药厂实验方法四甲基偶氮唑盐法(MTT法)取对数生长期的3LL细胞，调整细胞悬液浓度为2 XlO5Ail，每孔100 μ 1接种于96 孔板，CO2培养箱中孵育24小时。设单用ART组、单用DDP组、两药联用组、对照组(加生理盐水)，实验组各设 6 个浓度梯度(ART :500、250、125、62. 5,31. 25、15. 625 μ g/ml，DDP :20、 10、5、2. 5、1.25、0. 625yg/ml)，每个浓度设3个复孔，每孔加药100μ 1，两药联用按1 1 比例各加药50 μ 1，对照组加生理盐水。分别继续培养24h、48h、72、96h后，每孔加入5mg/ ml的MTT20 μ 1，培养4小时，弃上清液，每孔加入150 μ 1 DMSO,置37°C培养箱中15分钟， 使结晶充分溶解，在酶联免疫检测仪上测定490nm处各孔的吸光值(OD)，并计算各组细胞抑制率(抑制率=1-实验组OD值/对照组OD值)。两药联用时间先后次系依赖关系设同时给药组、先给ART24小时后再给DDP组、先给DDP24小时后再给ART组，共培养48小时，490nm测吸光值。中效原理判定两药联用效应根据中效方程式fa/fu = (D/Dm)m，两边取对数得 lgfa/fu = mlgD-mlgDm。设 Y = lgfa/fu，X = lgD，a = _mlgDm，b = m，带入上述方程式中得Y = bX+a。其中fa为细胞抑制率=1-实验组平均OD值/对照组平均OD值；fu为细胞生存率=实验组平均OD值/对照组平均OD值；D为药物浓度；Dm为中效浓度即IC5(1。两药联用时在各种效应时的合用指数CI = Dl/DXl+D2/DX2+a (D1D2/DX1DX2)(注D1、D2为合用时产生X效应时两药各自浓度，DX1、DX2为两药单独使用时各自所需浓度)当α =0为两种相互排斥性药物，α = 1为两种相互非排斥性药物。CI < 1协同，CI = 1相加，CI > 1拮抗。实验结果两药单用及联用时不同浓度的效应两药单用及联用时随着药物浓度增加对细胞抑制率也增加，见表1。表1、不同浓度的药物单用及联用对3LL细胞的抑制率(48h)
权利要求
1.一种治疗肺癌的药物组合物，包含蒿甲醚和顺钼。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，还包含药学上可接受的辅料。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，蒿甲醚与顺钼的重量比为 1 0. Ol 1 0. 1。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，蒿甲醚与顺钼的重量比为 1 0. 02 1 0. 05。
5.包含根据权利要求1所述的药物组合物的临床制剂。
全文摘要
本发明涉及医药领域，具体公开了一种治疗肺癌的药物组合物，包含蒿甲醚和顺铂。细胞试验显示蒿甲醚与顺铂联用可协同抑制小鼠肺癌3LL细胞株生长，两药单用和联用的效应均呈浓度、时间依赖关系，两药高浓度合用时CI＜1；倒置显微镜下可观察到3LL细胞典型的凋亡形态；流式细胞术显示两药联用时3LL细胞出现明显凋亡峰，两药联用凋亡率高于单用蒿甲醚或顺铂。动物实验表明，蒿甲醚与顺铂联用表现出较好的抑瘤作用，均较单用顺铂或蒿甲醚强。
文档编号A61K31/357GK102247404SQ20101018257
公开日2011年11月23日 申请日期2010年5月19日 优先权日2010年5月19日
发明者刘一丹, 刘国光, 杨兆祥, 杨旭娟, 陈云建 申请人:昆明制药集团股份有限公司