专利名称：一种具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种降高血压的化合物，特别涉及一种具有 降高血压活性的呋喃香豆素类化合物及其制备方法。高血压是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一，是最常见的心 血管疾病，与心肌梗死、脑卒中、冠心病、心力衰竭、肾功能衰竭等关系密切。我国每年死于 心脑血管疾病近300万人，占我们国每年总死亡病因的51% ；而幸存下来的患者75%的人 不同程度丧失劳动能力，40%的人重残。心血管疾病已成为人类的第一大杀手。而防治心 脑血管疾病的关键是高血压病的防治。据报道，高血压的发病率是随着年龄的增长而呈上升趋势的，但伴随着近年来社 会压力、环境因素、生活条件的改善以及饮食构的改变，使高血压的发病年龄段日趋偏低， 30岁以上已变成高血压的重点防治人群，这表明高血压的发病正在日趋年轻化。高血压的化学药物治疗是高血压防治的基本手段之一，经过数十年的发展，用于 高血压治疗的化学药物研究取得了巨大的成功，得到了一大批具有不同作用机制的临床抗 高血压药物。但是由于化学药物本身不同程度的毒副作用，不同作用机制的高血压药物都 存在着不同的缺点，常常会使高血压的化学药物治疗达不到预期的效果；且增强抗高血压 药物的长效性和平稳性是提高抗高血压药物作用的有效方法。因此，新的降压药物的研究 与开发是目前药学领域的热点与难点问题之一。
发明内容
本发明解决的问题在于提供一种具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物及其 制备方法，该呋喃香豆素类化合物表现出舒张血管、抗高血压的活性，能够应用于抗高血压 药物的制备。本发明是通过以下技术方案来实现—种具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其化学结构式为 其中，n为1 4，R为氢原子、二甲基或者双取代氨基。所述的n为2 4个碳原子，末端的两个碳原子之间形成双键，R为氢原子。所述的n为2 4个碳原子，碳链为直连烷烃，R为二甲基或者双取代氨基。
背景技术：
所述的R为双取代氨基，其取代基为烷基、环烷基或环氧烷基。一种具有降高血压的呋喃香豆素类化合物的制备方法，包括以下步骤1)花椒毒素在三溴化硼的作用下脱去甲基，得到花椒毒酚；2)花椒毒酚的酚羟基发生醚化反应，与至少含有2个碳原子的侧链连接，得到呋
喃香豆素类化合物；其中，与酚羟基连接的侧链为 n为1 4，R为氢原子、二甲基或者双取代氨基，双取代氨基的取代基为烷基、环 烷基或环氧烷基。所述的花椒毒酚的制备为冰浴条件下，在将三溴化硼_ 二氯甲烷溶液滴加到花椒毒素_ 二氯甲烷溶液中，其 中，三溴化硼与花椒毒素的摩尔比为3 1，然后在室温条件下反应4h;反应完成后，将反应体系转移到饱和碳酸氢钠溶液中充分搅拌反应，然后再整体 转移到水中充分搅拌反应；抽滤，滤饼用水洗涤多次，滤液调至中性后再次产生沉淀；将产 生的沉淀抽滤后，合并两次滤饼，真空干燥过夜，得到花椒毒酚。所述的花椒毒酚的酚羟基发生的醚化反应为将花椒毒酚溶解于无水N，N-二甲基甲酰胺中，然后再加入过量的无水碳酸钾， 室温搅拌溶解后，再加入足量的与酚羟基发生醚化反应的提供侧链的化合物，氮气保护下， 80°C油浴控温反应10 30h。所述的至少含有2个碳原子的侧链为异戊烯基、异戊烷基、烯丙基、N，N_ 二甲基乙 基、乙烷基吗啉、N-苄基-N-甲基乙基、3- 二甲基氨基丙基或哌啶乙基。所述的具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物应用于抗高血压药物的制备。与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果本发明提供的呋喃香豆素类化合物是一种新的具有抗高血压活性的化合物，其是 在天然植物提取物欧前胡素的基础上进行结构修饰与优化，保留其药理活性的基础上，改 善其理化性质，增强其成药性。本发明提供的呋喃香豆素类化合物的制备方法，具有原料来源易得，反应条件温 和，反应过程操作简单，所用试剂便宜易得的优点。为获得具有抗高血压活性的药效成分， 本发明相较于天然植物提取获得作为抗高血压活性的欧前胡素，能够显著的降低成本。通过细胞膜色谱(CMC)技术对欧前胡素进行了深入研究离体血管环张力实验研 究表明欧前胡素对大鼠不同组织和脏器的微血管都有舒张作用，且对其作用机制的研究也 表明它是抑制外钙内流和内钙释放的；细胞水平的研究结果表明欧前胡素在血管平滑肌细 胞膜色谱上的保留与抗高血压药物维拉帕米有相似的保留置换作用，且欧前胡素能够明显 抑制大鼠的血管平滑肌细胞的增值、迁移即能够抑制血管壁的增厚，它能够关闭电压依赖 性钙离子通道，降低心肌和血管平滑肌细胞内Ca2+浓度，且从而表现出其降压作用；整体动 物实验研究表明欧前胡素对于原发性高血压大鼠及肾性高血压大鼠有明显的降压作用并 伴随着抑制左心室肥大、降低心肌纤维化程度和血管壁厚度，保护肾脏的作用，且这些作用 都表现出它的剂量依赖性。推测欧前胡素是一种新型的钙离子拮抗剂，期望以其为药物先 导物可以被开发成为一种新型的降压药物。
本发明所制备的呋喃香豆素类抗高血压类化合物是欧前胡素的衍生物，具有和欧 前胡素相类似的作用，离体血管环张力研究表明呋喃香豆素类化合物对大鼠肠系膜微血管 有舒张作用，可应用于抗高血压药物的制备。图1为具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物的合成路线图；其中，化合物1为 花椒毒素，化合物2为花椒毒酚，化合物3为呋喃香豆素类化合物。图中标注的反应条件具 体为a 为 BBr3，CH2C12 ；b 为 DMF，K2C03。图2为血管环的舒张量效图对比结果图，其中，图2-1 图2-9为不同的呋喃香豆 素类化合物与欧前胡素、Control (空白对照)的舒张量效图对比，横坐标为浓度的对数，纵 坐标为最大舒张率。
具体实施例方式本发明提供一种具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物，该呋喃香豆素类化合 物具有与欧前胡素相似的性质，在离体血管环张力研究中表现出其舒张血管的活性，能够 应用于抗高血压药物的制备。下面结合附图和实施例对本发明做详细说明，所述是对本发 明的解释而不是限定。本发明提供具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其化学结构式为 其中，n为1 4，R为氢原子、二甲基或者双取代氨基。所述的n为2 4个碳原子，末端的两个碳原子之间形成双键，R为氢原子。所述 的n为2 4个碳原子，碳链为直连烷烃，R为二甲基或者双取代氨基。所述的R为双取代 氨基，其取代基为烷基、环烷基或环氧烷基。下面结合图1所示的合成路线和具体的合成实施例来详细说明具有抗高血压活 性的呋喃香豆素类化合物的制备方法。实施例1结构式中n为2且形成双键、R为二甲基的化合物，通过以下步骤制备1)花椒毒素(1)通过三溴化硼脱去甲基得到化合物花椒毒酚(2)取4. 32g (20. OOmmol)花椒毒素置于250ml茄形瓶中，加入73ml无水二氯甲烷，摇 勻使其溶解，氮气保护下将其置于冰浴中，搅拌10 15min ；同时，将6. 88ml三溴化硼溶解 于73ml无水二氯甲烷中，配制成lmol/L的三溴化硼-二氯甲烷溶液待用。待茄形瓶内温度恒定时，将配制好的三溴化硼_ 二氯甲烷溶液置于恒压滴液漏斗 中，缓滴于冰浴中搅拌着的茄形瓶中，30min中滴完。滴完后撤去冰浴，室温反应4h。室温反应完成后，将反应体系倒入搅拌着的饱和碳酸氢钠溶液160ml中搅拌lh， 然后再整体转移到160ml水中搅拌lh ；抽滤，滤饼用水洗涤多次，滤液用2mol/L的盐酸调
至中性后再次产生沉淀，将产生的沉淀抽滤后，合并两次滤饼，真空干燥器干燥过夜后，得 到白色固体产物3. 64g(18. OOmmol)，产率90. 0%。2)花椒毒酚与异戊烯基溴发生醚化反应，异戊烯基作为侧链与其连接，制备异戊 烯基溴发生醚化反应得到化合物9-(3-甲基-2-丁烯氧基)-7H-呋喃[3，2-g]色烯_7_酮 (IMP-1)取0. 81g (4. OOmmol)化合物(2)溶解于重蒸的无水N，N_ 二甲基甲酰胺 (DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾1. 66g(12. OOmmol)，室温搅拌30min,再加入异戊烯基溴 0. 69ml (6. OOmmol)，氮气保护下，80°C油浴(甲基硅油)控温反应10h。待反应冷却至室温后，将整个体系倒入冰水中，静止至冰融化，有淡黄色针状晶体 析出，抽滤，用水少量多次洗涤，干燥后得到淡黄色固体0. 90g (3. OOmmol)产率83. 3%。其理化性质为:m.p. 88-92 °C ；质谱为:EI_MS(m/z) 270. 09([M+H]+)；核磁共振 氢谱为:1H-WR(400MHz，CDC13) 8 :7. 77 (d, J = 10. 00Hz, 1H)，7. 70 (d, J = 1. 60Hz, 1H)， 7. 37 (s, 1H) ,6. 82 (d, J = 2. 00Hz, 1H) ,6. 37 (d, J = 9. 60Hz, 1H)，5. 61 (t, J = 7. 00Hz，2H)， 5. 00 (d, J = 3. 20Hz，2H)，1. 73 (d, J = 8. 80Hz，6H)，1. 63 (s, 1H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(3_甲基-2-丁烯氧基)-7H_呋喃[3，2_g]色 烯-7-酮相当于图1所示的化合物(IMP-1)，其结构式如下 实施例2结构式中n为2，R为二甲基的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与异戊烷基溴发生醚化反应，具体为取0.40g(2.00mmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N-二甲基甲酰胺 (DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾0. 83g(6. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入异戊烷基溴 0. 37ml (3. OOmmol)，氮气保护下80°C油浴控温反应20h。待反应冷却至室温后将整个体系 倒入冰水中，静止至冰融化，用乙酸乙酯少量多次萃取至乙酸乙酯层无色，TLC显示水相没 有产物后，用 2mol/LHCl(3X30ml)、饱和 NaHC03(3X30ml)饱和 NaCl (3X 30ml)分别洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸去溶剂，残留物有0. 57g ；经硅胶柱层析分离洗脱(洗脱 剂石油醚乙酸乙酯=5 1)得到白色针状晶体0.39g(1.4mmOl)，产率72.2%。其理化性质为m.p.73-75 °C ；质谱为EI_MS(m/z) :272. 10 ([M+H]+)； 1H-NMR (300MHz, CDC13) 8 :7.76(d，J = 9. 00Hz, 1H) ,7. 69 (s, 1H) ,7. 35 (s, 1H) ,6. 82 (s, 1H) ,6. 37 (d, J = 9. 00Hz, 1H), 4. 52 (t, J = 7. 50Hz，2H)，1. 91-2. 04 (m, 1H)，1. 80-1. 74 (q, 2H)，1. 0(d，J = 6. 00Hz，6H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(异戊氧基)-7H_呋喃[3，2_g]色烯_7_酮相当于图 1所示的化合物(IMP-2)，其结构式如下 实施例3结构式中n为2且形成双键，R为氢原子的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与烯丙基溴发生醚化反应，具体为取0. 40g (2. OOmmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲酰胺 (DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾0. 83g (6. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入烯丙基溴 0. 251111(3.0011101)，氮气保护下801油浴控温反应19h。待反应冷却至室温后将整个体系 倒入冰水中，静止至冰融化，有浅褐色晶体析出，抽滤，用水少量多次洗涤，干燥后得到褐色 固体，用硅胶柱层析分离洗脱(洗脱剂石油醚乙酸乙酯=3 1)得到白色片絮状晶体 0. 45g(l. 90mmol)产率 93. 0%。其理化性质为:m.p. 80-81 °C ；质谱为:EI_MS (m/z) 242. 06 ([M+H] +)；核磁共 振氢谱为lH-WR(400MHz，CDC13) S :7. 77 (d，J = 9. 6Hz，1H)，7. 69 (s，1H)，7. 37 (s， 1H)，6. 82 (d, J = 1. 60Hz, 1H)，6. 38 (d, J = 9. 60Hz, 1H)，6. 15-6. 17 (m, 1H)，5. 43 (d, J = 17. 20Hz, 1H)，5. 25 (d, J = 10. 40Hz, 1H) 5. 03 (d, J = 5. 20Hz,2H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(异戊氧基)-7H_呋喃[3，2_g]色烯_7_酮相当于图 1所示的化合物(IMP-3)，其结构式如下 实施例4结构式中n为1，R为烷基双取代氨基的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与N，N- 二甲基氯乙胺盐酸盐发生醚化反应，具体为取0. 81g(4. OOmmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲 酰胺(DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾2. 21g(16. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入 0. 86g(6. OOmmol) N, N-二甲基氯乙胺盐酸盐，氮气保护下，80°C油浴控温反应25h。待反应 冷却至室温后，将整个体系倒入冰水中，静止至冰融化，用氯仿少量多次萃取后，有机相无 水硫酸钠干燥后，减压蒸除溶剂，用硅胶柱层析分离洗脱(洗脱剂氯仿甲醇=30 1) 得到微黄色固体粉末，用少量石油醚洗涤色素后得到乳白色固体0.61g(2. 20mmol)产率 56. 0%。其理化性质为:m.p.77-78 °C ；质谱为:EI-MS(m/z) 273. 10([M+H]+)；核磁共振 氢谱为lH-WR(400MHz，CDC13) S :7. 77 (d，J = 9. 6Hz，1H)，7. 69 (s，1H)，7. 37 (s，1H)， 6. 82 (s，1H) ,6. 37 (d, J = 10. 0Hz, 1H)，4. 57 (t, J = 5. 4Hz，2H)，2. 84 (t, J = 5. 6Hz, 2H)2. 40(s，6H)。
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所得呋喃香豆素类化合物9-(2_( 二甲氨基)乙氧基)-7H_呋喃[3，2_g]色 烯-7-酮相当于图1所示的化合物(IMP-4)，其结构式如下 实施例5 结构式中n为1，R为环氧烷基取代的双取代氨基的化合物，通过以下 步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与氯代乙烷吗啉盐酸盐发生醚化反应，具体为取0. 53g(2. 62mmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲 酰胺(DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾2. 17g(15. 72mmol)，室温搅拌30min，再加入 0. 98g(5. 25mmol)氯代乙烷吗啉盐酸盐，氮气保护下，80 °C油浴控温反应22h。待反应 冷却至室温后，过滤，滤除碳酸钾后将体系倒入冰水中，静止至冰融化，用乙酸乙酯少量 多次萃取后，部分产物仍溶在水相中，分别减压蒸除水和乙酸乙酯，合并两部分所得的 固体物，用硅胶柱层析分离洗脱(洗脱剂氯仿甲醇=10 1)得到白色絮状晶体， 0. 58g(l. 80mmol)产率 68. 7%。其理化性质为:m.p. 87-89 °C ；质谱为:EI_MS(m/z) 315. 11([M+H]+)；核磁共振 氢谱为:1H-WR (300MHz，CDC13) 8 7. 77 (d, J = 9. 6Hz，1H)，7. 69 (d，J = 1.74Hz，lH)， 7. 38 (s, 1H)，6. 83 (d, J = 1. 86Hz, 1H)，6. 37 (d, J = 9. 6Hz, 1H)，4. 65(s，2H)，4. 13 (t，J = 7. 10Hz，4H)，3. 75(s，2H)，1. 25 (t, J = 7. llHz，4H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(2-吗啉基乙氧基)-7H_呋喃[3，2_g]色烯_7_酮相 当于图1所示的化合物(IMP-5)，其结构式如下 实施例6结构式中n为1，R为烷基双取代氨基的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素(1)到化合物花椒毒酚(2) 的制备步骤相同；步骤2)为N-苄基-N-甲基乙醇胺与氯化亚砜反应得到化合物N-苄 基-2-氯-N-甲基乙胺(b)，之后化合物(2)的酚羟基与N-苄基-2-氯-N-甲基乙胺(b) 发生醚化反应，具体为取4. 88ml (3(kimol)N-苄基_N_甲基乙醇胺溶解于20ml甲苯中，力口入 1. 42ml (20mmol)氯化亚砜，回流反应2h，减压蒸除溶剂后，用丙酮乙醇3 1 (v/v)重结 晶后得到N-苄基-2-氯-N-甲基乙胺(b)的盐酸盐形式，将其溶解于20ml水中，加入等当量的NH3摇勻中和，使N-苄基-2-氯-N-甲基乙胺(b)释放出来，用甲苯少量多次萃取 分离，有机相用无水硫酸钠干燥后，减压蒸除溶剂，残余物用正己烷重结晶得到白色结晶 2. 20g(12mmol)，产率 40%。取0. 40g(2. OOmmol)花椒毒酚(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲 酰胺(DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾1. 10g(8. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入 0. 66g(3. OOmmol) N-苄基-2-氯-N-甲基乙胺(b)，氮气保护下，80°C油浴控温反应26h。待 反应冷却至室温后，将体系倒入冰水中，静止至冰融化，用氯仿少量多次萃取后，无水硫酸 钠干燥，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析分离洗脱(洗脱剂石油醚乙酸乙酯=10 1)得到 淡褐色针状晶体，0. 50g(l. 42mmol)产率72. 1%。
其理化性质为:m.p.119-121°C ；质谱为:EI-MS(m/z) 315. 11([M+H]+)；核磁共振 氢谱为:1H-WR(300MHz，CDC13) 8 :7. 75 (d, J = 9. 50Hz, 1H)，7. 69 (s, 1H)，7. 57 (s, 1H)， 7. 30-7. 36(m，5H)6. 81 (s, 1H) ,6. 37 (d, J = 9. 40Hz, 1H)，5. 55(s，2H)，4. 11-4. 13(m，2H)， 2. 05-2. 06 (m，2H)，1.61 (s，3H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(2-(苄基(甲基)氨基)乙氧基)_7H呋喃[3，2_g] 色烯-7-酮相当于图1所示的化合物(IMP-6)，其结构式如下 实施例7结构式中n为2，R为烷基双取代氨基的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与3-二甲基氨基丙基氯盐酸盐发生醚化反应，具体为取0. 81g(4. OOmmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲 酰胺(DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾2. 20g(8. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入 1.26g (6. OOmmol) 3-二甲基氨基丙基氯盐酸盐，氮气保护下，80°C油浴控温反应18h。待反 应冷却至室温后，将体系倒入冰水中，静止至冰融化，用氯仿少量多次萃取后，无水硫酸钠 干燥，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析分离洗脱(氯仿甲醇=10 1)得到淡褐色针状晶体， 0. 50g(l. 74mmol)产率 43. 9%。其理化性质为:m.p.188-191 °C ；质谱为:EI_MS(m/z) 287. 12([M+H]+)；核磁共 振氢谱为:1H-NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 81 (d, J = 9. 6Hz，1H)，7. 72 (s，1H)，7. 45 (s，1H)， 6. 85 (s, 1H)，6. 39 (d, J = 9. 60Hz, 1H)，4. 55(s，2H)，3. 58(s，2H)，2. 93(s，6H)2. 45(s，2H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(3_( 二甲氨基)丙氧基)_7H呋喃[3，2_g]色 烯-7-酮相当于图1所示的化合物(IMP-7)，其结构式如下 实施例8结构式中n为1，R为环烷基双取代氨基的化合物，通过以下步骤制备步骤1)与实施例1相同，也即从化合物花椒毒素⑴到化合物花椒毒酚⑵的制 备步骤相同；之后酚羟基与1-(2_氯乙基)哌啶盐酸盐发生醚化反应，具体为取0. 40g(2. OOmmol)化合物(2)溶解于处理过的无水N，N_ 二甲基甲 酰胺(DMF) 10ml中，加入无水碳酸钾1. 10g(8. OOmmol)，室温搅拌30min，再加入 0. 55g(3.00mmol)l-(2-氯乙基)哌啶盐酸盐，氮气保护下，80°C油浴控温反应30h。待反 应冷却至室温后，将体系倒入冰水中，静置至冰融化，用氯仿少量多次萃取后，无水硫酸钠 干燥，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析分离洗脱(氯仿甲醇=30 1)得到淡褐色针状晶体， 0. 42g(l. 34mmol)产率 67%。其理化性质为:m.p.198-199 °C ；质谱为:EI_MS(m/z) 313. 13([M+H]+)；核磁共 振氢谱为1H-WR(400MHz，CDC13) 6 7. 80 (d, J = 9. 20Hz，1H)，7. 71 (s，1H)，7. 45 (s，1H)， 6. 85 (s, 1H)，6. 39(d, J = 9. 40Hz, 1H)，5. 01(t，J = 9. 40Hz，2H)，3. 82(d, J = 11. 60Hz，2H)， 3. 06-3. 14 (m, 2H)，2. 26-2. 36 (m, 2H)，1. 92-1. 99 (m, 3H)，1. 52-1. 71 (m, 3H)。所得呋喃香豆素类化合物9-(2_(哌啶-1-基)乙氧基)_7H呋喃[3，2_g]色 烯-7-酮相当于图1所示的化合物(IMP-8)，其结构式如下 呋喃香豆素类化合物的舒张血管、抗高血压活性验证实验本发明提供的呋喃香豆素类化合物具有抗高血压作用，对大鼠肠系膜微血管有舒 张作用，可用于高血压的治疗；与阳性对照药欧前胡素相比，个别化合物显示了更高的抗高 血压活性。抗高血压验证采用血管环张力法检测待测呋喃香豆素类化合物对肠系膜微血管 的舒张l)Kreb，s溶液的配制(1)制备新鲜的超纯水1000mL。(2)精确称取氯化钙0. 617g，加入少量超纯水超声振荡溶解，溶解完全后待用。(3)按照表1所示配制出氯化钙的缓冲盐体系，将其溶于超纯水总量的2/3中，用 干净的玻璃棒搅拌使其全部溶解。(4)将(2)中配制好的待用溶液加入至(3)中，搅拌后加入水定容至终体积，配制 成终浓度。
(5)测定 Kreb，s 溶液的 PH 值，用 lmol/LHCl 调节 PH = 7. 4。表lKreb，s溶液配制 Kreb ’ s溶液配制完成后，在4 °C冰箱保存，且现配现用，在一天内用完，不可放置 过夜后再次使用。2)供试液的配制(1)精密量取去甲肾上腺素(NE)注射液适量，加生理盐水配制成3X 10_6mol/L的 储备液，4°C冰箱中避光保存。(2)精密量取欧前胡素，用水或DMS0稀释，确定欧前胡素的终浓度为lXlCTmol/ L、3X l(T7mol/L、l X l(T6mol/L、3 X l(T6mol/L、1 X l(T5mol/L、3 X l(T5mol/L、1 X l(T4mol/L 的 系列溶液，4°C冰箱中避光保存。(3)呋喃香豆素类化合物溶液的配制，精密量取呋喃香豆素类化合物，用水或 DMS0稀释，确定呋喃香豆素类化合物的终浓度为IX l(Tm0l/L、3X l(Tm0l/L、lX 10_6mOl/ L、3X10_6mol/L、lX10_5mol/L、3X10_5mol/L、lX10_4mol/L 的系列溶液，4°C冰箱中避光保存。3)微血管的分离雄性SD大鼠，脱颈处死，迅速打开胸腔取出一段空肠，置于冰浴的Kreb’ s溶液中， 不断通入含有95%的氧气和5%的二氧化碳的混合气(体积比)，以维持它的活性。具体选 用的是肠系膜动脉的二级分支，取出肠系膜组织(空肠)，显微镜下剥离脂肪，分离肠系膜 动脉二级分支，剪成每段约3mm的血管环。4)实验测定(1)将分离好的血管环两端分别与浴槽内的两个灌流针连接，用尼龙线固定好即 挂于浴槽中，打开加热温度，设定温度37°C。调零稳定后，血管环静息负荷预张力约为3mN，平衡2h，20min更换Kreb，s液一次，2h后，浴槽内加入终浓度为3 X 10_6mOl/L去甲状肾上 腺素(NE)，以NE检验血管动脉环收缩性，两次收缩幅度相差小于10%者用于实验。(2)待血管环收缩稳定后依次加入待测药物的浓度梯度溶液(7个梯度)，考察欧 前胡素及呋喃香豆素类化合物对去甲肾上腺素所致的血管收缩的舒张作用，同时以DMS0 溶液空白对照作为Control。欧前胡素和呋喃香豆素类化合物的舒张血管活性实验结果如 表2和图2所示。表2半数有效浓度对数值(pEC5Q士SEM)和最大舒张率(Emax% 士SEM)检测结果 其中，半数有效浓度对数值是-logEC5(l，其代表的意义是化合物诱导血管环舒张 率达到50%时的浓度；最大舒张率是EmaX%，其代表的意义是欧前胡素或呋喃香豆素衍生 物诱导的血管环的最大舒张率；IMP1为欧前胡素，MP2 10分别为呋喃香豆素衍生物 9_(异戊氧基)_7H-呋喃[3，2-g]色烯-7-酮(IMP-2) ；9-(异戊氧基)-7H-呋喃[3，2_g] 色烯-7-酮(IMP-3) ；9-(2-( 二甲氨基)乙氧基)-7H-呋喃[3,2-g]色烯_7_酮(IMP-4)； 9-(2_吗啉基乙氧基)-7H-呋喃[3，2-g]色烯-7-酮(IMP-5) ；9_(2_(苄基(甲基)氨基)乙 氧基)_7H呋喃[3,2-g]色烯-7-酮(IMP-6) ；9-(3-( 二甲氨基)丙氧基)_7H呋喃[3,2-g] 色烯-7-酮(IMP-7) ；9-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)_7H 呋喃[3,2-g]色烯 _7_ 酮(IMP-8)；9-(2-(氮杂环庚-1基)乙氧基)_7H呋喃[3,2-g]色烯-7-酮(IMP-9) ；9_(1_( 二甲氨基) 丙烷-2-氧基)-7H呋喃[3，2-g]色烯-7-酮(IMP-10)。可以看出呋喃香豆素类化合物IMP2 10对大鼠肠系膜微血管细胞具有不同程度 的舒张血管作用。而检测7 个浓度梯度 lXl(T7mol/L、3Xl(T7mol/L、lXl(r6mol/L、3Xl(r6mol/L、 lX10_5mol/L、3X10_5mol/L、lX10_4mol/L 的 IMP1、待测的呋喃香豆素类化合物(IMP2 10) >Control (空白对照)的舒张量效图对比结果分别如图2_1 图2_9所示，其中横坐标 为半数有效浓度的对数值、纵坐标为最大舒张率，可以看出IMP2 10与Control相比均有 明显的舒张量，并且IMP2、IMP3、IMP 4、IMP 6、IMP 7的舒张效果与欧前胡素相当，而IMP8、 IMP9的舒张效果强于欧前胡素。5)呋喃香豆素类化合物具有舒张血管的作用，应用于抗高血压药物的制备所述的抗高血压的药物的制备为具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物或其药物可接受的盐、衍生物、前药或 立体异构体，应用于抗高血压的药物的制备；或者具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物或其药物可接受的盐、衍生物、前 药或立体异构体作为药物组合物之一，结合药物可接受的赋形剂或稀释剂应用于抗高血压 的药物的制备。应用于抗高血压的药物的制备时，通过制药领域常用的手段可以制备成多种剂 型，可以是口服剂型和注射剂，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、分散片、软胶囊、注射液、注射用 冻干粉或注射用无菌分装粉。
权利要求
一种具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其特征在于，其化学结构式为其中，n为1～4个碳原子，R为氢原子、二甲基或者双取代氨基。FDA0000022692350000011.tif
2.如权利要求1所述的具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其特征在于，所述 的n为2 4个碳原子，末端的两个碳原子之间形成双键，R为氢原子。
3.如权利要求1所述的具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其特征在于，所述 的n为2 4个碳原子，碳链为直连烷烃，R为二甲基或者双取代氨基。
4.如权利要求1所述的具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物，其特征在于，所述 的R为双取代氨基，其取代基为烷基、环烷基或环氧烷基。
5.一种具有降高血压的呋喃香豆素类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤1)花椒毒素在三溴化硼的作用下脱去甲基，得到花椒毒酚；2)花椒毒酚的酚羟基发生醚化反应，与至少含有2个碳原子的侧链连接，得到呋喃香 豆素类化合物；其中，与酚羟基连接的侧链为n为1 4个碳原子，R为氢原子、二甲基或者双取代氨基，双取代氨基的取代基为烷 基、环烷基或环氧烷基。
6.如权利要求5所述的具有降高血压的呋喃香豆素类化合物的制备方法，其特征在 于，所述的花椒毒酚的制备为冰浴条件下，在将三溴化硼_ 二氯甲烷溶液滴加到花椒毒素_ 二氯甲烷溶液中，其中， 三溴化硼与花椒毒素的摩尔比为3 1，然后在室温条件下反应4h;反应完成后，将反应体系转移到饱和碳酸氢钠溶液中充分搅拌反应，然后再整体转移 到水中充分搅拌反应；抽滤，滤饼用水洗涤多次，滤液调至中性后再次产生沉淀；将产生的 沉淀抽滤后，合并两次滤饼，真空干燥过夜，得到花椒毒酚。
7.如权利要求5所述的具有降高血压的呋喃香豆素类化合物的制备方法，其特征在 于，花椒毒酚的酚羟基发生的醚化反应为将花椒毒酚溶解于无水N，N- 二甲基甲酰胺中，然后再加入过量的无水碳酸钾，室温搅 拌溶解后，再加入足量的与酚羟基发生醚化反应的提供侧链的化合物，氮气保护下，80°C油 浴控温反应10 30h。
8.如权利要求5所述的具有降高血压的呋喃香豆素类化合物的制备方法，其特征在 于，所述的至少含有2个碳原子的侧链为异戊烯基、异戊烷基、烯丙基、N，N-二甲基乙基、乙 烷基吗啉、N-苄基-N-甲基乙基、3- 二甲基氨基丙基或哌啶乙基。
9.权利要求1 4任何一项所述的具有降高血压活性的呋喃香豆素类化合物应用于抗 高血压药物的制备。
全文摘要
本发明公开了一种具有抗高血压活性的呋喃香豆素类化合物及其制备方法，该呋喃香豆素类化合物具有与欧前胡素相似的性质，在离体血管环张力研究中表现出其舒张血管的活性，能够应用于抗高血压药物的制备。本发明提供的呋喃香豆素类化合物的制备方法，具有原料来源易得，反应条件温和，反应过程操作简单，所用试剂便宜易得的优点。
文档编号A61K31/5377GK101857598SQ20101020938
公开日2010年10月13日 申请日期2010年6月25日 优先权日2010年6月25日
发明者卢闻, 周楠, 张彦民, 张 杰, 李娜, 李西玲, 王嗣岑, 贺建宇, 贺怀贞, 贺浪冲 申请人:西安交通大学