专利名称：一种苄丝肼缓释微球组合物及其制备方法
一种苄丝肼缓释微球组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及的是一种药物制剂技术领域的组合物及其制备方法，尤其是一种苄丝 胼缓释微球组合物及其制备方法。
背景技术：
制药行业从药物发现，到临床的应用，最后一个环节是药物制剂。其中相当一部分 药物需要长期频繁的给药才能治愈；还有一部分需要局部给药由于系统给药的毒性大。要 达到这些目的，原料药必须要制备成相应的剂型。例如需要长期给药但在体内的半衰期短 的药物，宜制备成缓释或控释剂型；对于一些肿瘤的治疗，需要一些药物靶向于病照，例如 靶向于肿瘤血管的栓塞微米球制剂等；对帕金森病，症状性帕金森综合症由于现有的口服 制剂，每日需要服用三次，但是对于这类病人来说，是十分不便的，因为他们本来行动和记 忆有问题，如果能用一次药可以达到一个星期甚至一个月的效果，这对于他们来说是非常 好的一件事情；我们基于这个药物存在的这类问题开发了具有长期疗效的左旋多巴缓释制 剂，但是由于苄丝胼在体内非常容易被酶代谢，需要酶抑制剂的帮助，才能达到理想的治疗 效果。经对现有技术文献的检索发现，目前没有相关文献报道制备苄丝胼的微球的方法。
发明内容本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种苄丝胼缓释微球组合物。本发明的再一的目的是，提供一种苄丝胼缓释微球组合物制备方法。为实现上述目的，本发明采取的技术方案是一种苄丝胼缓释微球组合物，按重量 百分比该组合物由以下组分组成可降解的疏水聚合物40%-99%苄丝胼1%-60%。所述的可降解的疏水聚合物选自聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸、聚己内酯一种或其 混合物。所述的苄丝胼缓释微球组合物粒径为0. 4-500 μ m。
所述的苄丝胼缓释微球组合物粒径为50-160 μ m。为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是制备权利要求1所述的苄丝胼缓释微球组合物的方法，该方法包括以下步骤a,将苄丝胼颗粒加入到可降解的疏水聚合物有机溶液后，形成混悬液；b，将步骤a得到的混悬液加入到重量百分比浓度为0% -10%的氯化钠溶液和重 量百分比浓度为聚乙烯醇表面活性剂中乳化；C，将步骤b得到的复乳加入到重量百分比浓度为-10%的氯化钠溶液固化；d，将步骤c得到的微球进行离心收集，除去表面活性剂和氯化钠，得到苄丝胼缓释微球组合物。步骤a中所述的可降解的疏水聚合物选自聚乳酸_羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯 一种或其混合物，可降解的疏水聚合物有机溶液中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙 腈、庚烷、氯仿或丙酮。所述的聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯的分子量的大小分别为 6000-500，000,6000-1, 000，000 或 10，000-5，000，000。所述的聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸、聚己内酯或它们的任意混合物的有机溶液重 量百分浓度为3% -30%。所述的苄丝胼颗粒的粒径大小为0. 1-10 u m。步骤b中所述的乳化时间l-5min，步骤c中所述的固化时间1_4小时。本发明优点在于本发明克服苄丝胼在贮存的过程的不稳定性、提高病人用药的治疗效果；用这种 方法制备成微球组合物，可以避免用常规的W/0和W/0/W的包封率不高，及S/0/0的严重突 释，造成的环境污染的缺点；采用该方法制备微米球组合物，其粒径的大小可以根据不同需 要，进行控制，不污染环境；可以避免对苄丝胼的治疗的作用影响。微粒的表面光滑圆整，颗 粒规整无粘连，粒径可以根据需要进行调控从1 y m到500 u m,其冻干粉剂为白色细腻、疏 松，不会塌陷、不粘连，再分散性良好。
图1苄丝胼PLA缓释微球组合物扫描电镜图。图2苄丝胼PLA缓释微球组合物体外释放曲线图。
具体实施方式下面结合附图对本发明提供的具体实施方式
作详细说明。实施例1①将lOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 iim，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 u m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140, 000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或 超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量 为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液10mL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的lOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-120i!m如图1所述)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为75%和苄丝胼为25%、在37°C和
4PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为10. 63%,7天后 的累积释放98. 34%，释放曲线如图2所述。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约28-48%。实施例2①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 495mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为30%的二氯甲烷 的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混 悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和2%的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为15%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约70-100 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为99%和苄丝胼为1%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为10. 63%、4天后 的累积释放95. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5% -30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-1%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-46%。实施例3①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 37. 5mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得 混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为75%和苄丝胼为25%、在37°C 和PH为2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为32. 88%, 4天后的累积释放95. 25%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 9%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-49%。实施例4①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 25mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为6000)配制成重量百分比浓度为10%的二氯甲烷的有 机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬 液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为50%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和的聚乙二醇 (PVA的分子量为110，000-124，000，醇解度为醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或 超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约50-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为50%和苄丝胼为50%、在37°C 和PH为2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为45. 78%, 4天后的累积释放95. 83%。 本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约28-48%。实施例5①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 25mg 的聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA，d，I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为59，000-80，000)配制成重量百分比浓度为10%的二氯 甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻 得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为39%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为61%和苄丝胼为39%、在37°C 和PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为18. 88%、5天 后的累积释放为99.21%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-47%。实施例6①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 25mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为59，000-80, 000)配制成重量百分比浓度为5%的二氯 甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻 得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为20%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和2. 0%的聚乙二醇 (PVA的分子量为13，000-23, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5 分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为80%和苄丝胼为20%、在37°C和pH7. 4的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为20. 48%,4 天后的累积释放99. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约28-48%。实施例7①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取495mg的聚乳酸(PLA，分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为 30%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分 钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为缓释 微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-140 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为99%和苄丝胼为1%、在37°C和 PH7. 4的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为31. 88%,4天 后的累积释放91. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约26-45%。实施例8①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取25mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)配制成重量百分比 浓度为5%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声 1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为 45%缓释微球。
(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(C)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约50-125 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为55%和苄丝胼为45%、在37°C和 PH7. 4的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为32. 48%,7天 后的累积释放99. 78%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-45%。实施例9①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ； ②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取595mg的聚己内酯(PCL分子量为10，000)配制成重量百分比浓度为 30%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分 钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为缓释 微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1 %的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-140 μ m)。制备的微球组合物其实际PCL的重量百分比为99%和苄丝胼为1%、在37°C和 PH7. 4的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为30. 18%,7天 后的累积释放94. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约29-48%。
实施例10①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚己内酯(PCL分子量为250，000)配制成重量百分比浓度为 15%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5 分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为25% 缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PCL的重量百分比为75%和苄丝胼为25%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为25. 47%、10天后 的累积释放99. 93%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约26-48%。实施例11①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取25mg的聚己内酯(PCL分子量为500，000)配制成重量百分比浓度为 5%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分 钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为50%缓 释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约50-125 μ m)。
制备的微球组合物其实际PCL的重量百分比为50%和苄丝胼为50%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1天的释放量占总的苄丝胼的百分比为8. 92%,60天后的 累积释放99. 83%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约24-45%。实施例12①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取15mg的聚乳酸(PLA,分子量为90，000-140，000)和IOmg的聚羟基 乙酸-聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为 59, 000-80, 000)配制成重量百分比浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝 胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液； 将制备成苄丝胼的理论百分含量为50%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-125 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为30和PLGA为20%和苄丝胼为 50%、在37°C和pH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为 12. 68%、12天后的累积释放98. 93%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-43%。实施例13①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备
(a)将称取70mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)和30mg的聚羟基 乙酸-聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为 59, 000-80, 000)配制成重量百分比浓度为12. 5%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄 丝胼微粒IOmg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳 液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为6%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-125 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为65%和PLGA为29%和苄丝胼为 6%、在37°C和pH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为 14. 48%、14天后的累积释放99. 83%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-45%。实施例14①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ； ②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取60mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)和40mg的聚羟基 乙酸-聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为 59, 000-80, 000)配制成重量百分比浓度为12. 5%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄 丝胼微粒IOmg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳 液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为8%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-125 μ m)制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为55%和PLGA为37%和苄丝胼为 8%、在37°C和pH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为 11. 58%、14天后的累积释放99. 83%。
12
本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用Wo和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-40%。实施例15①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用电子显微镜观察是否在0.05-0. 1 μ m，如果不在可以用粉碎 机粉碎成再过筛选出0. 05-0. 1 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 37. 5mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA，d，I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为3%的二氯甲烷 的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得 混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和2%的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约0. 4-40 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为82. 18%和苄丝胼为17.82%、 在37°C和pH为2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为 38. 88%,4天后的累积释放98. 25%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-11%，而微球几乎不变约0-0. 9%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约22-39%。实施例16将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取25mg的聚己内酯(PCL分子量为5，000，000)配制成重量百分比浓度为 30%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分 钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为50%缓 释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和0. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约200-500 μ m)。制备的微球组合物其实际PCL的重量百分比为50. 83%和苄丝胼为49. 17%、在 37°C和pH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1天的释放量占总的苄丝胼的百分比为7. 96%,60 天后的累积释放99. 83%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。本发明解决了现有的、传统的给药方式(目前只有口服剂型的状态)及现有的技 术长期制备微球不足初期突释、及不完全释放等难题，利用水包油一油包固体(s/0/w)制 备微球方法把上述苄丝胼进一步微囊包在具有缓释的高分子材料中。使其制备的微球表面 光滑圆整，均勻度好，颗粒规整无粘连；包封率高，突释小，载药量高。这种微球不仅可以用 来皮下注射给药、肌肉，而且可以口服等给药的方式。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-38%。实施例17 平行实验为了科学评价以下各组药物的性能，我们用平行试验的方法，同时检测下列各组 的稳定性、体内血药浓度和包封率。各组药物分组情况如下A组苄丝胼缓释微球采用本发明的(S/0/W)方法制备得到，其中苄丝胼含量为 5%，高分子辅料含量为95%。B组司来吉兰缓释微球采用中国专利申请号200910201414. X专利文献报道的 01/02乳化液中干燥方法制备得到司来吉兰缓释微球，其中司来吉兰缓释微球中的卡巴拉 汀含量为5 %，高分子辅料含量为95 %。C组卡巴拉汀缓释微球采用中国专利申请号200910201416. 9专利文献报道的 01/02乳化液中干燥方法制备得到卡巴拉汀缓释微球，其中卡巴拉汀缓释微球中的卡巴拉 汀含量为5 %，高分子辅料含量为95 %。D组左旋多巴纳米制剂采用中国专利申请号200410030559. 5专利文献报道的方 法制备得到左旋多巴纳米制剂。各组药物实验结果如下 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
权利要求
一种苄丝肼缓释微球组合物，按重量百分比该组合物由以下组分组成可降解的疏水聚合物40％-99％苄丝肼1％-60％。
2.根据权利要求1所述的苄丝胼缓释微球组合物，其特征在于所述的可降解的疏水 聚合物选自聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯一种或其混合物。
3.根据权利要求1或2所述的苄丝胼缓释微球组合物，其特征在于所述的苄丝胼缓 释微球组合物粒径为0. 4-500 μ m。
4.根据权利要求3所述的苄丝胼缓释微球组合物，其特征在于所述的苄丝胼缓释微 球组合物粒径为50-160 μ m。
5.制备权利要求1所述的苄丝胼缓释微球组合物的方法，其特征在于该方法包括以 下步骤a,将苄丝胼颗粒加入到可降解的疏水聚合物有机溶液后，形成混悬液； b，将步骤a得到的混悬液加入到重量百分比浓度为0%-10%的氯化钠溶液和重量百 分比浓度为聚乙烯醇表面活性剂中乳化；c，将步骤b得到的复乳加入到重量百分比浓度为-10%的氯化钠溶液固化； d，将步骤c得到的微球进行离心收集，除去表面活性剂和氯化钠，得到苄丝胼缓释微 球组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于步骤a中所述的可降解的疏水聚合 物选自聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯一种或其混合物，可降解的疏水聚合物有机 溶液中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、氯仿或丙酮。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸或 聚己内酯的分子量的大小分别为6000-500，000,6000-1, 000, 000或10，000-5, 000, 000。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述的聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸、 聚己内酯或它们的任意混合物的有机溶液浓度为3% -30%。
9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于步骤b中所述的乳化时间l-5min，步 骤c中所述的固化时间1-4小时。
全文摘要
本发明涉及一种苄丝肼缓释微球组合物，所述的苄丝肼缓释微球组合物按重量百分比由以下组分组成可降解的疏水聚合物，40％-99％，苄丝肼1％-60％。本发明还提供了苄丝肼缓释微球组合物的制备方法。本发明可以克服苄丝肼在贮存的过程的不稳定性、提高病人用药的治疗效果；用这种方法制备成微球组合物，可以避免用常规的W/O和W/O/W的包封率不高，及S/O/O的严重突释，造成的环境污染的缺点；采用该方法制备微米球组合物，其粒径的大小可以根据不同需要，进行控制，不污染环境；可以避免对苄丝肼的治疗的作用影响。微粒的表面光滑圆整，颗粒规整无粘连，粒径可以根据需要进行调控从1μm到500μm，其冻干粉剂为白色细腻、疏松，不会塌陷、不粘连，再分散性良好。
文档编号A61K47/34GK101884622SQ20101023063
公开日2010年11月17日 申请日期2010年7月20日 优先权日2010年7月20日
发明者刘振国, 杨新新, 袁伟恩, 郑瑞媛, 陈伟 申请人:上海交通大学医学院附属新华医院