专利名称：一种治疗癌症的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种治疗癌症的药物组合物。
背景技术：
恶性肿瘤是人类生命健康的头号杀手。肿瘤需要功能性的血管网络提供氧气、养 料并清除代谢产物。肿瘤除了通过与宿主血管融合而获得部分血管外，还必须通过形成新 生血管网构建自己的血管系统，这样才能持续地生长和发展。如果没有血管系统提供氧气 和养料，实体瘤的增长不会超过1mm3。鉴于其在肿瘤发生、发展中的重要作用，肿瘤血管已 成为抗肿瘤治疗的一个重要靶点。血管内皮生长因子(fvascular endothelial growth fact or, VEGF)可直接作用 于血管内皮细胞，刺激其发生有丝分裂。VEGF的过度表达已被证实与肿瘤的进展相关，且在 不同类型的肿瘤，如鼻咽癌和多发性骨髓瘤中均是预后不良的相关分子指标。此外，在结直 肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌和黑色素瘤中也起着重要作用。VEGF是目前所 知作用最强的促血管生长因子，还是最强的增加血管通透性的因子，它主要与内皮细胞上 的两种受体Fh-l、Flk-2结合发挥促进内皮细胞的分裂增殖、迁移和血管重建的作用。由于 VEGF在血管新生中发挥主导性的作用，因此多数研究将VEGF或其受体作为治疗的靶点。尽管抗血管生成药物已取得一定的成功，但仍面临许多问题。与其他多数治疗方 案一样，在临床试验及动物肿瘤模型中抗血管生成药物很少达到持续完全的疗效，几乎都 会出现药物抵抗现象，尤其是在动物肿瘤模型中抗VEGFR治疗方案出现初期有效、后期无 效的状况。抗血管生成药物发生药物抵抗的具体机制尚不清楚，可能与抗血管生成药物的 持续作用使肿瘤产生持续性低氧和营养缺乏有关，低氧和营养缺失均能刺激自噬启动，使 肿瘤细胞通过自噬对胞内物质的降解和循环利用而改变新陈代谢，从而对应激作出适应性 反应而得以生存。研究证实抑制自噬能提高营养缺乏和乏氧导致的细胞凋亡。因此自噬的 激活为肿瘤在低氧和营养缺失情况下作出的适应性改变(如重新产生各种血管生成因子， 促进血管生成)赢得了时间。安维汀(Avastin)是一种重组单克隆抗VEGF抗体，由瑞士制 药商罗氏公司(ROCHE)研发，于2004年3月获得了美国F DA批准上市，可与VEGF各种亚 型结合，能抑制VEGF介导的肿瘤血管生成，所以是一种抗血管生成药物。氯喹是一种抗疟 疾药，目前被证实是一种自噬抑制剂。但至今未见将安维汀和氯喹组成药物组合物用于治 疗癌症的报道。
发明内容
本发明提供一种治疗癌症的药物组合物，由抗血管生成药物和自噬抑制剂组成， 所说的抗血管生成药物为安维汀；自噬抑制剂为氯喹。药物组合物是临用时按安维汀和氯 喹各自的给药剂量混合而成，它们给药剂量按体重计算分别为安维汀7. 6mg/kg氯喹60mg/kg
使用时将安维汀和氯喹按给药剂量混合，用生理盐水稀释到200 μ 1，然后按常规 通过腹膜内注射给药。动物实验结果表明，本发明药物组合物能够明显抑制皮肤癌、肝癌细胞在小鼠体 内的生长，种植瘤体积及重量减少显著，抑制肿瘤效果明显高于单独使用安维汀或氯喹。本发明药物组合物制备方法简单，使用方便，治疗肿瘤的效果好。
图1.本发明药物组合物对皮肤癌细胞种植瘤小鼠体重的影响比较图。图2.本发明药物组合物抑制小鼠皮肤癌细胞种植瘤的生长比较图。图3.本发明药物组合物抑制小鼠皮肤癌细胞种植瘤的增殖比较图。图4.本发明药物组合物对肝癌细胞种植瘤小鼠体重的影响比较图。图5.本发明药物组合物抑制小鼠肝癌细胞种植瘤生长比较图。图6.本发明药物组合物抑制小鼠肝癌细胞种植瘤增殖比较图。
具体实施例方式现结合实施例和附图对本发明作详细描述。实施例1.制备本发明药物组合物安维汀(Roche公司，批号S20100023)，用生理盐水配制成一定浓度的安维汀溶 液；氯喹(SIGMA公司.批号C6628-25G)，用生理盐水配制成一定浓度的氯喹溶液；
根据体重按给药剂量安维汀7. 6mg/kg+氯喹60mg/kg将安维汀溶液和氯喹溶液于 临用前混合即成。动物实验实验1.本发明药物组合物对小鼠黑色素瘤疗效观察实验60只C57小鼠，由第二军医大学动物实验中心提供(下同)，雄性，平均体重 20g,随机分成六组，每组10只，按常规腋下接种小鼠黑色素瘤细胞B16，接种量2X106个 /200 μ 1，接种9天后，种植瘤长至约150立方毫米，第10天开始给药处理。空白对照组种植瘤成瘤后，小鼠不接受任何给药处理。生理盐水组腹膜内注射生理盐水200 μ 1，每天一次，连续注射10天；安维汀组按小鼠体重给药，安维汀给药剂量为7. 6mg/kg，所需安维汀用生理盐 水稀释到200μ 1，腹膜内注射，每天一次，连续给药10天。氯喹组按小鼠体重给药，氯喹给药剂量为60mg/kg，所需氯喹用生理盐水稀释到 200 μ 1，每天一次，连续给药10天。本发明药物组合物组按小鼠体重给药，安维汀剂量为7.6mg/kg，氯喹剂量为 60mg/kg，所需药物组合物用生理盐水稀释到200 μ 1，每天一次，按体重，连续给药10天。每次给药时，测量小鼠瘤体的体积大小(V = l/2aXb2 ；其中V为肿瘤体积，a为肿 瘤最短径长度，b为肿瘤最长径长度)，给药10天后，第11天处死C57小鼠，观测各组之间 小鼠体重、种植瘤重量和体积的差异。实验结果如图1 3所示。由图1可见，各组小鼠体重变化无明显差异，说明小鼠对本实验的不同给药方案具有良好的耐受性。由图2可见，本发明组合物组能够显著抑制小鼠皮肤癌细胞移植瘤重量的增加， 与空白对照组及生理盐水组相比有显著差异(P < 0.01)，空白对照组及生理盐水组的肿瘤 重量为5克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量为2克左右；本发明组合物组与单独使用氯 喹组或安维汀组相比，抑制肿瘤重量增加的作用具有显著性差异(P <0.05)，氯喹组或安 维汀组肿瘤的重量分别为3. 9克和3. 8克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量仅为2左右， 差异显著。这说明氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。由图3可见，在治疗周期中，伴随着时间的推移，本发明组合物能够显著减缓小鼠 皮肤癌细胞移植瘤体积的增长，与空白对照组及生理盐水组比有显著差异(P <0.01)；治 疗结束时，空白对照组及生理盐水组的肿瘤体积为5000立方毫米左右，而本发明组合物组 的肿瘤体积为2000立方毫米左右；而且本发明组合物组与氯喹组或安维汀组相比，同样具 有显著性差异(P <0.05)；氯喹组或安维汀组肿瘤的体积为4000立方毫米左右，而本发明 组合物组的肿瘤体积仅为2000立方毫米，差异显著。这说明本发明组合物中氯喹和安维汀 具有协同抑制肿瘤生长的作用。实验2.本发明药物组合物对小鼠肝癌细胞瘤抑制效应实验60只C57小鼠，雄性，平均重量20g，随机分成六组，每组10只，按常规腋下接种小 鼠肝癌细胞H印1-6，接种量5X106个/300 μ 1，接种10天后，种植瘤长至约150立方毫米， 第11天开始给药处理。分组与给药同实验1，连续给药12天。每次给药时，测量瘤体体积大小(V = l/2aXb2 ；其中V为肿瘤体积，a为肿瘤短径 长度，b为肿瘤长径长度)，给药12天，第13天处死C57小鼠，观测各组小鼠的体重、瘤体体 积和重量的差异。实验结果如图4 6所示。由图4可见，各组小鼠体重变化无明显差异，说明小鼠对本实验的不同给药方案 具有良好的耐受性。由图5可见，本发明组合物能够显著抑制小鼠肝癌细胞移植瘤重量的增加，与空 白对照组及生理盐水组比有显著差异(P < 0. 05)，空白对照组及生理盐水组的肿瘤重量为 1. 5克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量为0. 5克左右；本发明组合物与氯喹组或安维 汀组相比同样具有显著性差异(P < 0. 05)，氯喹组或安维汀组肿瘤的重量分别为1. 3克和 1. 2克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量仅为0. 5克左右，差异显著。这说明氯喹和安维 汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。由图6可见，在治疗周期中，伴随着时间的推移，本发明组合物能够显著减缓小鼠 肝癌细胞移植瘤体积的增长，与空白对照组及生理盐水组比有显著差异(P < 0.01)，治疗 结束时，空白对照组及生理盐水组的肿瘤体积分别为1100和1000立方毫米左右，而本发明 组合物组的肿瘤体积为500立方毫米左右；本发明组合物组与氯喹组和安维汀组相比，抑 制肿瘤体积增长的作用同样差异显著(P < 0. 05)，在治疗结束后，氯喹组和安维汀组肿瘤 的体积分别为800和750立方毫米左右，而本发明组合物组的肿瘤体积仅为500立方毫米 左右。这说明本发明组合物中氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。
权利要求
一种治疗癌症的药物组合物，由抗血管生成药物和自噬抑制剂组成，所说的抗血管生成药物为安维汀；自噬抑制剂为氯喹，临用时将安维汀和氯喹按各自的给药剂量混合而成。
2.按权利要求1所述的一种治疗癌症的药物组合物，其特征在于各组分的给药剂量按 体重计算分别为安维汀 7.6mg/kg 氯喹 60mg/kg。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，是一种由抗血管生成药物安维汀和自噬抑制剂氯喹组成的治疗癌症的药物组合物，临用时按安维汀和氯喹各自的给药剂量混合而成，它们给药剂量按体重计算分别为安维汀7.6mg/kg；氯喹60mg/kg。动物实验结果表明，本发明药物组合物能够明显抑制皮肤癌、肝癌细胞在小鼠体内的生长，抑制肿瘤效果显著高于单独使用安维汀或氯喹，说明安维汀和氯喹具有协同抑制肿瘤生长的作用，因此可用于治疗肿瘤。本发明药物组合物制备方法简单，使用方便，治疗肿瘤的效果好。
文档编号A61P35/00GK101920015SQ20101025712
公开日2010年12月22日 申请日期2010年8月13日 优先权日2010年5月25日
发明者卫立辛, 吴孟超, 宋建瑞, 李丁, 郭献灵 申请人:中国人民解放军第二军医大学