专利名称：杉松三萜类化合物及其提取分离与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学，具体涉及杉松三萜类化合物及其提取分离与应用。尤其涉 及杉松三萜类化合物在制备抗癌药物中的应用。
背景技术：
肿瘤是引起人类死亡的主要原因之一。中国卫生部公布2006年城乡居民主要死 亡原因。统计显示，恶性肿瘤已成为首要死因。可见肿瘤的预防和治疗十分迫切。药物治 疗是肿瘤的主要治疗手段之一。目前，虽然开发出了数十种抗肿瘤药物，有效的延长了患者 的生命或者提高了患者的生存质量。但肿瘤的药物研究和开发还面临巨大挑战，如抗肿瘤 药物多为细胞毒药物，其副作用明显，限制了这些药物疗效的发挥。著名肿瘤病因学家、中 国工程院院士程书钧认为当今医学对于肿瘤的防治依然处于初级阶段。中药有几千年的 人体毒性实验的基础，从天然产物中寻找高效低毒的抗肿瘤活性的先导化合物一直是新药 研究的热点。冷杉属(Abies)是松科(Pinaceae)的一个重要属，约有50种，分布于亚洲、欧洲、 北美、中美及非洲北部的高山地带。中国有19种3变种。分布于东北、华北、西北、西南及浙 江、台湾各省区的高山地带。其中有些植物在一些地区当作民间药，用于感冒、胃痛、消化不 良及血管、肺和性病等的治疗。现代研究表明，从该属植物中分离得到的一些化合物及其衍 生物具有多种生物活性，包括昆虫保幼、抗肿瘤、抗菌、抗溃疡、抗炎、抗高血压、止咳以及 治疗中枢神经系统方面的疾病。由于该属植物大多具有广泛的生理活性，从1938年至今， 国际上对该属植物的研究比较多。杉松Abies holophylla是冷杉属植物。主要产于中国东北牡丹江流域山区，长白 山区及辽河东部山区。鉴于冷杉属植物较好的药理活性，本发明人对杉松进行了系统的化 学成分研究，发现其中杉松三萜类化合物具有良好的抗肿瘤活性，拟开发抗肿瘤药物。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于研究杉松三萜类化合物抗肿瘤活性，设计杉松三 萜类化合物的提取分离方法及其在制药中的应用。本发明提供了一种杉松三萜类化合物，包括下列化合物1、2、3、4、5 化合物1 25，26，27-降三碳-3 α -羟基环阿尔庭烷-24-羧酸；化合物2 25， 26，27-降三碳-3 α -甲氧基环阿尔庭烷_24羧酸；化合物3 :24，25，26，27-降三碳-3-羰 基-9 β氢-羊毛留烷-7-烯-23-羧酸；化合物4 :3，4-开环-9 β氢-羊毛留烷-4 (28)， 7，22，25-四烯-23，26-内酯_3_羧酸；化合物5 羊毛甾烷-7，9 (11)，24-三烯-26-羧酸化合物 1 -.25,26, 27-Trinor-3 α -hydroxycycloartan-24-oic acid25，26，27-降三碳_3 α -羟基环阿尔庭烷_24_羧酸
无定形粉末，旋光值+12. l(c 0.08，乙醇)，紫外最大吸收波长226nm;红外光谱 最大吸收波数3445，2928，2868，1715，1457，1383，1068,971cm_1, ESI-MS :415[Μ_ΗΓ，高分 辨质谱467· 3170 [M+Na] + (calcd for C27H44O3Na, 467. 3161)。2 :25,26,27-Trinor-3 α -methoxycycloartan-24-oic acid25，26，27-降三碳-3 α -甲氧基环阿尔庭烷-24羧酸
权利要求
1.杉松三萜类化合物，包括下列化合物1、2、3、4、5 化合物1 :25，26，27-降三碳-3 α -羟基环阿尔庭烷_24_羧酸
2.如权利要求1所述杉松三萜类化合物的提取分离方法，其特征在于，该方法包括下 列步骤(1)提取将杉松干燥枝叶粉碎，以75-95%乙醇8-20倍体积W/V回流提取1_3次，每 次2-3小时，合并提取液，提取液减压浓缩成流浸膏，流浸膏相当于Iml含杉松0. 9-1. lg，流 浸膏加水1-3倍量W/V稀释后，以氯仿0. 5-2倍量V/V萃取3-5次，得到氯仿萃取部份；所 述杉松采自东北长白山区，取其干燥松枝；(2)分离将上述氯仿萃取部份应用硅胶柱层析，以体积比为100 0-1 1的石油醚 /乙酸乙酯系统梯度洗脱，薄层层析检测，按洗脱次序分别收集含有化合物2、1、3、5、4的流 分；各流分的化合物分别经葡聚糖凝胶层析，以体积比为1 1的氯仿/甲醇洗脱，再经C18 反相柱层析，以体积比6 4-10 0的甲醇/水进行洗脱，薄层层析检测，最终得到5个化 合物。
3.如权利要求1所述杉松三萜类化合物在制备抗癌药物中的应用。
4.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述杉松三萜类化合物为25，26，27-降三 碳-3 α -羟基环阿尔庭烷-24-羧酸。
5.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述杉松三萜类化合物为25，26，27_降三 碳-3α_甲氧基环阿尔庭烷羧酸。
6.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述杉松三萜类化合物为M，25J6，27-降三 碳-3-羰基-9 β氢-羊毛留烷-7-烯-23-羧酸。
7.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述杉松三萜类化合物为3，4-开环-9β 氢-羊毛甾烷-4 08)，7，22，25-四烯-23，26-内酯_3_羧酸。
8.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述药物由杉松三萜类化合物作为活性成分 与常规药用载体组成。
9.根据权利要求3的应用，其特征在于，所述癌包括肺癌、小细胞肺癌、肠癌和乳腺癌。
全文摘要
本发明提供了一种杉松三萜类化合物，包括下列化合物1、2、3、4、5。本发明对所述化合物进行了细胞毒活性实验，结果显示，5个化合物对人肺癌细胞，人肠癌细胞，人小细胞肺癌细胞，人乳腺癌细胞均有较好的抑制活性，有很好的抗肿瘤作用。对小鼠S180肉瘤(实体型)的疗效实验，结果5个化合物有显著的抑瘤作用。可用于制备抗癌药物。本发明药物由杉松三萜类化合物作为活性成分与常规药用载体组成。本发明药物可按常规方法制成制剂。本发明药物为中药制剂，毒付作用小，疗效好，为临床提供新的抗癌药，有较大的实际应用价值和较好的社会效益。
文档编号A61K31/573GK102030800SQ20101056231
公开日2011年4月27日 申请日期2010年11月26日 优先权日2010年11月26日
发明者单磊, 张卫东, 徐希科, 李慧梁, 李永利, 杨献文, 柳润辉, 沈云亨, 苏娟 申请人:中国人民解放军第二军医大学