针对her2表位的单克隆抗体的制作方法

专利名称：针对her2表位的单克隆抗体的制作方法
技术领域：
本发明涉及针对人表皮生长因子受体2(HER2)的单克隆抗体，和这类抗体的用途，尤其是它们在治疗癌症中的用途。
背景技术：
HER2是185-kDa的细胞表面受体酪氨酸激酶，是表皮生长因子受体(EGFR)家族的成员，该家族包括四种不同的受体:EGFR/ErbB-l，HER2/ErbB_2，HER3/ErbB_3和HER4/ErbB-4。EGFR家族的四个成员形成同源和异源二聚体，HER2是对于其他ErbB受体优选并且最有效的二聚体伴侣(Graus-Porta 等，Embo J1997 ;16:1647-1655 ;Tao 等，J Cell Sci2008 ；121:3207-3217)。可以通过过表达或者通过与可以被配体结合而活化的其他ErbBs的异源二聚化而活化 HER2 (Riese 和 Stern, Bioessaysl998 ；20:41-48)。对于 HER2,没有鉴别到任何配体。HER2活化导致受体磷酸化，这通过多种信号通路如MAPK、磷酸肌醇3-激酶/AKT、JAK/STAT和PKC触发下游信号的级联，这最终导致多种细胞功能如生长、生存和分化的调控(Huang 等，Expert Opin Biol Ther2009 ；9:97-110)。对HER2在肿瘤中的很多注意力集中在其在乳腺癌中的作用，其中报道了 HER2在约20%的病例中过表达并且HER2过表达与预后较差相关(Reese等，Stem Cellsl997 ；15: 1-8 ；Andrechek 等，Proc Natl Acad Sci U S A2000 ；97:3444-3449 ；和 Slamon等，Sciencel987 ;235:177-182)。除了乳腺癌，HER2表达还与其他人肿瘤类型，包括前列腺癌，非小细胞肺癌，膀胱癌，卵巢癌，胃癌，结肠癌，食管癌和头部和颈部的鳞状细胞癌相关(Garcia de Palazzo 等，Int J Biol Markers 1993 ；8:233-239 ；Ross 等，0ncologist2003 ；8:307-325 ；Osman 等，J Urol2005 ；174:2174-2177 ；Kapitanovic 等，Gastroentero1gy 1997 ；112:1103-1113 ；Turken 等，Neoplasma2003 ；50:257-261 ；和Oshima 等，Int J Biol M arkers200I；16:250-254)。曲妥珠单抗(Hcrccptin )是重组的人源化的单克隆抗体,其针对HER2蛋白的结
构域IV，从而在高HER2过表达的细胞中阻断配体非依赖性HER2同源二聚化，导致在更小的程度上HER2与其他家族成员的异源二聚化(Cho等，Nature2003 ；421 =756-760和Wehrman等，Proc Natl Acad Sci U S A 2006;103:19063-19068)。在具有适度 HER2 表达水平的细胞中，发现曲妥珠单抗(trastuzumab)抑制HER2/EGFR异源二聚体的形成(Wehrman等，(2006)，同上；Schmitz 等.，Exp Cell Res2009 ；315:659-670)。曲妥珠单抗介导抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)并防止胞外结构域脱落，否则胞外结构域脱落可以导致HER2过表达细胞中截短的组成型活性的蛋白的形成。对于曲妥珠单抗也已经报道了表达高水平的HER2的肿瘤细胞的体外和体内增殖的抑制(Nahta和Esteva的综述，0ncogene2007 ；26:
3637-3643)。已经批准了Herceptin 用于HER2过表达的转移性乳腺癌第一线和辅助治
疗，或与化疗相结合，或作为遵循一个或多个化疗方案的单一药物。已经发现曲妥珠单抗仅在20-50%的HER2过表达的乳腺癌肿瘤患者中是有效的，许多初始应答者在几个月后表现复发(Dinh 等，Clin Adv Hematol 0ncol2007 ；5:707-717)。帕妥珠单抗(Omnitarg )是另一种针对HER2蛋白的结构域II的单克隆抗体,导致配体诱导的异源二聚化(即，HER2与配体已经结合的ErbB家族的另一个成员的二聚化)的抑制；据报道不严格地要求高HER2表达水平的机制(Franklin等.，Cancer Cell2004 ；5:317-328.)。尽管帕妥珠单抗也介导ADCC，帕妥珠单抗的作用的主要机制依赖于其二聚化阻断(Hughes等，Mol Cancer Ther2009 ；8:1885-1892)。此外，发现帕妥珠单抗增强EGFR内化并通过抑制EGFR/HER2异源二聚体的形成而增强下调，否则使EGFR拴系(tether)于质膜(Hughes等，2009，同上)。这与EGFR 二聚体比EGFR/HER2 二聚体更有效地内化这一观察结果相关(Pedersen等，Mol Cancer Res2009 ;7:275_284。据报道，当在以前的曲妥珠单抗治疗期间进展的患者中组合时，帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的作用的互补机制导致增强的抗肿瘤效果和有效性(Baselga等，J Clin 0ncol2010 ;28:1138-1144)，评价在以前未治疗的HER2阳性转移性乳腺癌中这种抗体与多西他赛(Docetaxel)共同组合的III期试验正在进行中。
改进靶向抗体治疗的另一种方法是通过将细胞毒性细胞或药物特异性递送至表达抗原的癌细胞。例如，所谓的三功能性抗体是双特异性抗体，具有一个靶向肿瘤细胞上的抗原的臂以及另一个靶向T细胞上的抗原例如CD3的臂。结合后，形成结合Fe的T细胞、肿瘤细胞和效应物细胞的复合物，导致杀死肿瘤细胞(Muller和Kontermann,BioDrugs2010 ；24:89-98)。Ertumaxomab就是这种针对HER2的三功能性抗体，其在低HER2表达的细胞系中诱导细胞毒性，在转移性乳腺癌的II期临床开发中(Jones等，Lancet 0ncol2009 ；10:1179-1187 和 Kiewe 等，Clin Cancer Res2006 ；12:3085-3091)。HER2抗体药物缀合物(ADC)目前在临床开发中。T-DM1由与真菌毒素maytansine缀合的曲妥珠单抗组成。(Krop等，2011，J Clin 0ncol2010 (在印刷前提前在线出版)和Lewis Phillips 等，Cancer Res2008 ；68:9280-9290)报道了在 II 期试验中，严重预处理患者组群(包括以前的曲妥珠单抗和/或拉帕替尼(Iapatinib)治疗)中的应答。III期试验正在进行中，其中评价T-DMl比卡培他滨+拉帕替尼在以前接受曲妥珠单抗治疗的HER2-阳性的局部晚期或转移性乳腺癌的患者中的疗效和安全性。尽管许多因素参与选择用于HER2靶向治疗的合适的抗体，如果HER2-抗体复合物在抗体结合后有效地内化，这对于ADC方法通常是一种优势。对于小鼠HER2抗体的研究显示，抗体的某些组合促进HER2内吞作用(Ben-Kasus等，PNAS2009 ；106:3294-9)。已经报道人HER2抗体F5和Cl相对于它们自身迅速地内化并结合相同的表位(W0 99/55367和WO2006/116107)。然而，与EGFR相比，HER2的内化受损。事实上，EGFR同源二聚体的内化效率远远高于 HER2 同源二聚体(Dinh 等，Clin Adv Hematol 0ncol2007 ；5:707-717)。EGFR,也还有HER3，可以分别通过形成EGFR/HER2和HER3/HER2异源二聚体而增加HER2的内吞作用(Baulida等，J Biol Cheml996 ；271:5251-5257 ；Pedersen NM，等，Mol Cancer Res2009 ；7:275-84)。调节HER2的功能的复杂机制需要进一步研究针对这种原癌基因的新的并且优化的治疗策略。因此，对于治疗HER2相关的疾病如癌症，仍然需要有效和安全的产品。发明概述本发明的一个目的是提供用于医疗用途的新的高度特异的、有效的单克隆HER2抗体。本发明的抗体显示与本领域中已有描述的抗体不同的HER2结合特性。具体而言，本发明的抗体结合HER2的不同区段，因为它们彼此阻断与HER2的结合，但不阻断曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或F5/C1与HER2的结合。此外，与已知抗体相反，本发明的抗体可以在不促进细胞增殖的情况下有效地内化进表达HER2的细胞。在优选的实施方案中，本发明的抗体是完全人的，结合新的表位，和/或对于人患者中的治疗用途具有其他有利的特性。示例性的特性包括但不限于，与以高或低水平表达人HER2的癌细胞的有利的结合特性，特异性结合表达HER2直接同源物的猕猴上皮细胞，结合HER2后有效内化，当作为抗体药物缀合物(ADC)施用时杀死表达高或低水平HER2的癌细胞的高能力，对表达HER2的癌细胞的增殖没有显著的激动效果并提供表达HER2的细胞的有效的ADCC-介导的杀死，以及上述特性的任何组合。下面进一步详细描述了本发明的这些和其他方面。附图简要说明

图1:HuMab重链可变区(VH)序列与种系(参照)序列的比对(A-D)。在每个VH序列中，在特定位置与种系(参照)的那些氨基酸不同的氨基酸突出显示。显示共有VH序列，其中“X”表示可能有其他氨基酸(选自在指明位置比对的那些氨基酸)的位置。在每个VH序列中，⑶R1、⑶R2和⑶R3序列用下划线表示。在表4中进一步定义了共有⑶R序列。图2 =HuMab轻链可变区(VL)序列与种系(参照)序列的比对(A-B)。在每个VL序列中，在特定位置与种系(参照)的那些氨基酸不同的氨基酸突出显示。在图2A中，所有VL序列源自相同的V-区段(IgKV3-20-01)，但抗体间最接近的J-区段不同。显示共有VL序列，其中“X”表示可能有其他氨基酸(选自在指明位置比对的那些氨基酸)的位置。在每个VL序列中，⑶R1XDR2和⑶R3序列用下划线表示。在表4中进一步定义了共有⑶R序列。图3:如实施例12中所述测定的，HER2抗体与(A)高(AU565)和(B)低(A431)表达HER2的细胞系的结合曲线。显示数据是每种细胞系的一次代表性实验的平均荧光强度(MFI)。EC5tl值表示表观亲和力。图4:HER2抗体与上皮细胞上表达的HER2的结合。显示数据是实施例13中所述的一次代表性实验的平均荧光强度(MFI)。图5:HER2抗体的铬-释放(ADCC)测定，显示在与HER2抗体孵育后51Cr-标记的SK-BR-3细胞的PBMC-介导的裂解。显示的值是来自用SK-BR-3细胞的一次代表性的体外ADCC实验的平均最高百分比51Cr-释放土标准偏差。详细信息见实施例15。图6:与未处理的细胞(设置为100% )相比，HER2抗体对AU565细胞的增殖的影响。显示数据是在三次独立的实验中测定的与未处理的细胞相比的AU565细胞的百分比增殖土标准偏差。详细信息见实施例16。图7 =ADC测定， 显示通过抗- K -ETA'-缀合的HER2抗体的AU565细胞(A)或A431细胞⑶的杀死。㈧显示数据是使用以未缀合的和抗-K -ETA'-缀合的HER2抗体处理的AU565细胞的一次代表性实验的平均荧光强度(MFI)。(B)显示数据是使用以未缀合的和抗-K -ETA1-缀合的HER2抗体处理的A431细胞的一次代表性实验的平均荧光强度(MFI)。详细信息见实施例17。图8:HER2的抗体诱导的下调。用10 μ g/mL mAb孵育3天后AU565细胞裂解物中表达的HER2的相对百分比。用HER2特异性捕获ELISA定量HER2的量并表示为相对于未处理的细胞的百分比。显示数据是三次实验的平均值土标准偏差。详细信息见实施例19。图9:HER2抗体(FITC)与溶酶体标记LAMPl (Cy5)的共定位分析，显示对于各种单特异性HER2抗体的与Cy5重叠的FITC像素强度。对于每种抗体绘制三个不同的图像的LAMP I/Cy 5阳性像素的FITC像素强度。抗体005表现出与抗体Herceptin和帕妥珠单抗相比LAMP1/Cy5阳性区域中更高的FITC像素强度。详细信息见实施例20。图10:借助流式细胞仪分析的HER2抗体与用不同的HER2E⑶构建体转染的CHO-S细胞的结合。HU-HER2 =完全人HER2，Hu-HER2_ch (I) CRl =具有鸡结构域I的hu_HER2，Hu-HER2-ch(II)=具有鸡结构域 II 的 hu_HER2，hu-HER2_ch(III)=具有鸡结构域 III 的hu-HER2和Hu-HER2-ch (IV)=具有鸡结构域IV的hu_HER2。显示数据是一种代表性抗体106的平均荧光强度(MFI)。详细信息见实施例21。图11:在雌性CB.17重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠中NC1-N87人胃癌异种移植物模型中HER2-HuMab005的体内效果。显示数据是每组(n = 10只小鼠/组)的平均肿瘤大小土S.E.M.(A)和生存(B)。详细信息见实施例22。发明的详细说明定义当本文中使用时，术语“HER2” (也被称为ErbB_2，NEU，HER-2和CD340)是指人表皮生长因子受体2 (SwissProt P04626)，包括细胞(包括肿瘤细胞)天然表达的或用HER2基因转染的细胞上表达的HER2的任何变体、同种型和物种同源物。物种同源物包括猕猴HER2(猕猴；GenBank 登录号 G1:109114897)。术语“免疫球蛋白”是指一类结构上相关的糖蛋白，由两对多肽链(一对轻(L)低分子量链和一对重(H)链)组成，所有四条链通过二硫键内部连接。免疫球蛋白的结构已经得到充分表征。见例如 Fundamental Immunology 第 7 章(Paul, ff.，ed., 2nd ed.RavenPress, N.Y.(1989))。简而言之，每条重链典型地由重链可变区(本文缩写为Vh或VH)和重链恒定区组成。重链恒定区典型地由三个结构域(CH1，(^和^^)组成。每条轻链典型地由轻链可变区(这里缩写为'或VL)和轻链恒定区组成。轻链恒定区典型地由一个结构域Q构成。Vh和'区可以进一步再分成超可变性区(或超变区，其在结构限定环的序列和/或形式中具有高度可变性)，也称作互补决定区(CDRs)，它们之间散布着更保守的、称作框架区(FRs)的区域。每个Vh和八典型地由3个CDR和4个FR组成，从氨基末端向羧基末端以下列顺序排列:FR1, CDRl, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4 (另见Chothia和Lesk T.Mol.Biol.196,901-917 (1987)) 0除非上下文另外指明或与之矛盾，根据MGT规则鉴别本文的 CDR 序列(Brochet X.，Nucl Acids Res.2008 ；36:W503-508 和 LefrancMP., Nucleic Acids Research 1999 ；27:209-212 ;也参见因特网 http 地址 imgt.cines.fr/IMGT_vquest/vquest Iivret = 0&0ption = humanlg。然而，也可以通过 Kabat 等，Sequences of Proteins of Immunological Interest,5thEd.Public Health Service,National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991)中所述的方法进行抗体序列中氨基酸残基的编号(本文中短语如“如Kabat中可变结构域残基编号”，“Kabat位置”或“根据Kabat”是指这种编号系统)。具体而言，对于恒定区中氨基酸的编号，可以使用根据同上的Kabat等的EU索引编号系统。对于给定抗体，可以通过在该抗体序列与“标准”Kabat编号序列的同源区的 比对而确定残基的Kabat编号。
在本发明的上下文中，术语“抗体”(Ab)是指免疫球蛋白分子，免疫球蛋白分子的片段，或其二者中任一种的衍生物，其在典型的生理条件下具有与抗原特异性结合的能力，具有显著时间期间的半衰期，如至少约30分钟，至少约45分钟，至少约I小时，至少约2小时，至少约4小时，至少约8小时，至少约12小时，约24小时或者更长，约48小时或者更长，约3、4、5、6、7或更多天等，或者任何其他相关的功能上定义的期间(如足够诱发、促进、提高和/或调节和抗体与抗原的结合关联的生理应答的时间，和/或足以供抗体招募效应物活性的时间)。免疫球蛋白分子的重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合结构域。抗体(Abs)的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包括免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)和补体系统的组分，如补体活化经典途径中的第一组分Clq。HER2抗体也可以是双特异性抗体、双抗体(diabody)或类似分子(双抗体的描述见例如PNASUSA90 (14), 64448(1993)).事实上，本发明提供的双特异性抗体、双抗体等除了结合HER2的一部分以外，还可以结合任何合适的目标。如前所述，除非上下文另外指明或与之明显矛盾，本文的术语抗体包括抗体的片段，该抗体片段是抗原结合片段，即保持与抗原特异性结合能力。已经显示，可以由全长抗体的片段行使抗体的抗原结合功能。术语“抗体”中涵盖的抗原结合片段的例子包括(i)Fab’或Fab片段，由\，VH, Cl和ChI结构域组成的单价片段，或者如W02007059782 (Genmab)中描述的单价抗体；(ii) F (ab' )2片段，包含通过在铰链区中的二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)基本上由Vh和ChI结构域组成的Fd片段；(iv)基本上由抗体的单一臂的\和Vh结构域组成的Fv片段；(V) dAb片段(Ward等，Nature341, 544-546 (1989)),其基本上由Vh结构域组成，也称作结构域抗体(Holt等；Trends Biotechnol.2003Nov:21 (11):484-90) ； (vi)胳马它抗体(came I id)或纳米抗体(nanobodies) (Revets 等；Expert Opin Biol Ther.2005Jan ；5(1):111-24),和(vii)分离的互补决定区(CDR)。而且，尽管Fv片段的两个结构域'和Vh是由分别的基因编码，但是可以通过合成的接头用 重组方法将它们连接起来，该合成的接头能够使它们作为单一蛋白链制造出来，其中\和Vh区配对形成单价分子(被称为单链抗体或单链Fv (scFv)，见例如 Bird 等.，Science242,423-426 (1988)和 Huston 等.，PNAS USA85,5879-5883(1988))。除非上下文另外指出或明显指明，这种单链抗体涵盖在术语抗体中。尽管这种片段通常包括在抗体的意义内，它们共同地并且各自独立地是本发明的独特特征，显示不同的生物学特性和效用。本文进一步讨论了在本发明的上下文中的这些和其他有用的抗体片段以及这种片段的双特异性形式。还应当理解的是，除非另外指出，术语抗体还包括通过任何已知的技术如酶切割(enzymatic cleavage)、肽合成和重组技术提供的多克隆抗体、单克隆抗体(mAbs)、抗体样多肽，如嵌合抗体和人源化抗体，以及保留与抗原特异性结合能力的抗体片段(抗原结合片段)。产生的抗体可以具有任何同种型。如本文所使用的，“同种型”是指由重链恒定区基因编码的免疫球蛋白类型(例如IgGl，IgG2，IgG3，IgG4，IgD, IgA, IgE，或 IgM)。术语“单价抗体”在本发明的上下文中意味着抗体分子能够结合单个抗原分子，因此不能够抗原交联。“效应物功能缺陷的抗体”或“效应物功能缺陷抗体”是指如下抗体，其具有显著降低的活化一种或多种效应物机制(如补体活化或Fe受体结合)的能力或者没有该能力。因此，效应物功能缺陷抗体具有显著降低的介导抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(ADCC)和/或补体依赖的细胞毒性(CDC)的能力或者没有该能力。这种抗体的一个例子是IgG4。“HER2抗体”或“抗-HER2抗体”是如上所述的抗体，其与抗原HER2特异性结合。如本文所使用的，术语“人抗体”意图包括具有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包括不是由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外随机或定点诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，如本文所使用的，术语“人抗体”并不意图包括如下抗体，其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)种系的CDR序列被接枝到人框架序列上。如本文所使用的，如果抗体是从使用人免疫球蛋白序列的系统获得的(例如通过免疫携带人免疫球蛋白基因的转基因小鼠或者通过筛选人免疫球蛋白基因文库)，并且其中选择的人抗体在氨基酸序列与由该种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列具有至少90 %，如至少95 %，例如至少96 %，如至少97 %，例如至少98 %，或者如至少99 %相同，则人抗体“源自”特定的种系序列。典型地，除了重链CDR3，源自特定人种系序列的人抗体与由该种系免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列相比，显示不超过20个氨基酸的差异，例如不超过10个氨基酸的差异，例如不超过9、8、7、6或5个，例如不超过4、3、2或I个氨基酸的差
巳在一个优选实施方案中，本发明的抗体是分离的。如本文所使用的，“分离的抗体”意图是指如下抗体， 其基本上不含其他具有不同抗原特异性的抗体(例如，特异性结合HER2的分离抗体基本上不含特异性结合除HER2以外的抗原的抗体)。然而，特异性结合HER2的表位、同种型或变体的分离的抗体可以与其他相关抗原，例如来自其他物种的抗原(例如HER2种间同源物)具有交叉反应性。而且，分离的抗体可以基本上不含其他细胞材料和/或化学剂。在本发明的一个实施方案中，两种或多种具有不同抗原结合特异性的“分离的”单克隆抗体被组合在良好定义的组合物中。当本文中在两种或更多种抗体的上下文中使用时，术语“与...竞争”或“与...交叉竞争”表明，两种或更多种抗体竞争结合HER2，例如在实施例14中所述的测定中竞争结合HER2。如果抗体竞争一种或多种其他抗体25%或更高时，抗体“阻断”或“交叉阻断”一种或多种其他抗体结合HER2，25% -74%代表“部分阻断”，75% -100%代表“完全阻断”，优选使用实施例14的测定来确定。对于一些抗体对，实施例的测定中的竞争或阻断只有在将一种抗体包被在平板上，而用另一种进行竞争时才能观察到，但反之则不行。除非上下文另外定义或否定，当在本文中使用时，术语“与...竞争”，“与...交叉竞争”，“阻断”或“交叉阻断”还意图涵盖这种抗体对。术语“表位”是指能够特异性结合抗体的蛋白决定簇。表位通常由分子的表面基团如氨基酸或糖侧链组成，通常具有特定的三维结构特征，以及特定的带电特征。构象表位和非构象表位的区别在于，在变性剂存在的情况下，与前者的结合消失，而与后者的结合不消失。表位可以包括直接参与结合的氨基酸残基(也称作表位的免疫显性组分(immunodominant component)),和其他不直接参与结合的氨基酸残基,如可以被特异性抗原结合肽有效阻断的氨基酸残基(换言之，这些氨基酸残基位于特异抗原结合肽的足迹(footprint)内)。如本文所使用的，术语“单克隆抗体”是指具有单一分子组成的抗体分子的制备物。单克隆抗体组合物显示对特定表位的单一的结合特异性和亲和力。因此，术语“人单克隆抗体”是指显示单一结合特异性的抗体，其具有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区。人单克隆抗体可以通过杂交瘤产生，杂交瘤包括与永生化细胞融合的、从转基因或转染色体非人类动物(例如转基因小鼠)获得的B细胞，该动物具有包含人重链转基因和轻链转基因的基因组。如本文所使用的，在抗体与预定抗原的结合的上下文中，术语“结合”典型地是其以对应于约10_7M或者更小，如约10_8M或者更小，如约10_9M或者更小，约ΙΟ,Μ或者更小，或者约10_ηΜ或者甚至更小的Kd的亲和力结合(当通过例如在BIACore3000设备中用抗原作为配体、以抗体作为分析物通过表面等离子体共振(SPR)技术进行测定时)，并且与除预定抗原或密切相关的抗原之外的非特异性抗原(例如BSA或酪蛋白)结合的其亲和力相t匕，其与预定抗原结合的亲和力对应的Kd低至少10倍，如至少低100倍，例如至少低1，000倍，如至少低10，000 倍，例如至少低100，000倍。亲和力低出的量取决于抗体的KD，因此当抗体的Kd非常低时(即抗体是高度特异性的)，对抗原的亲和力低于对非特异性抗原的亲和力的量可以是至少10，000倍。如本文所使用的，术语“kd” (sec-1)是指特定抗体-抗原相互作用的解离速率常数。所述值也称作I^ff值。如本文所使用的，术语“k/’W X sec-1)是指特定抗体_抗原相互作用的结合速率常数。如本文所使用的，术语“KD” (M)是指特定抗体-抗原相互作用的解离平衡常数。如本文所使用的，术语“KA” (Μ-1)是指特定抗体-抗原相互作用的结合平衡常数，并且通过ka除以kd获得。如本文所使用的，术语“抑制增殖”(例如涉及细胞，如肿瘤细胞)意图包括当与HER2抗体接触时，和不与HER2抗体接触的相同细胞的增殖相比，细胞增殖的任何明显的降低，例如，抑制细胞培养物增殖至少约10%，至少约20%或至少约30%，或至少与参照抗体如曲妥珠单抗一样，例如，通过实施例中的测定所确定的。如本文所使用的，术语“促进增殖”(例如涉及细胞，如肿瘤细胞)意图包括当与HER2抗体接触时，和不与HER2抗体接触的相同细胞的增殖相比，细胞增殖的任何明显的增力口，例如，促进细胞培养物增殖至少约10%，至少约20%或至少约30%，或至少与参照抗体如F5 —样，例如，通过实施例中的测定所确定的。如本文所使用的，当本文中在HER2抗体的上下文中使用时，“内化”包括其中所述抗体从细胞表面和/或从周围培养基内化进表达HER-2的细胞的任何机制，例如，通过内吞作用。可以使用测量内化抗体的量的直接测定(如，例如，实施例18中所述的fab-CypHer5E测定)或其中测定内化的抗体-毒素缀合物的作用的间接测定(如，例如，实施例17的抗-K -ETA,测定)评价抗体的内化。本发明还提供了包括实施例抗体的 '区、Vh区、或一个或多个⑶R的功能变体的抗体。在HER2抗体的上下文中使用的\、\或CDR的功能变体仍然允许该抗体保留母体抗体(parent antibody)的亲和力(affinity)/亲合力(avidity)和/或特异性/选择性的至少相当部分(至少约50 %，60%，70%，80%，90%，95%或更多)，在一些情况下，与母体抗体相比，这种HER2抗体可以与更大的亲和力、选择性和/或特异性相关。这些功能变体典型地保留与母体抗体的显著的序列同一性。两条序列之间的百分比同一性是序列所共享的相同位置的数量的函数(即，％同源性=相同位置数/位置的总数X 100)，同时考虑缺口的数量和每个缺口的长度，需要引入缺口是为了在两条序列间进行最佳比对。可以通过 E.Meyers 和 W.Miller, Comput.Appl.Biosci4,11-17 (1988)的算法(其已经被引入到ALIGN程序(2.0版)中)，使用PAM120加权残基表、12的缺口长度罚分和4的缺口罚分确定两条核苷酸或氨基酸序列之间的百分比同一性。此外，可以使用Needleman和Wunsch, J.Mol.Biol.48,444-453 (1970)算法确定两个氛基酸序列之间的百分比同一'I"生。示例性的变体包括在一个或更多个“变体”氨基酸位置(在对应的共有序列表示为“X”)与图1和2所示的母体抗体VH和/或VL序列不同的那些。优选的变体是其中的新的氨基酸选自在图1或2中比对序列之一的对应位置的那些氨基酸(关于CDR序列变体的详细信息，见表4)。另外地或额外地，VH，VL或CDR变体的序列可以主要通过保守的取代而与母体抗体序列的VH，VL或⑶R序列不同；例如变体中的至少10个，如至少9、8、7、6、5、4、3、2或I个取代是保守的氨基酸残基替换。在本发明的上下文中，可以通过下列表格中反映的氨基酸类型内的取代定义保守取代。对于保守取代的氨基酸残基类型
权利要求
1.单克隆抗体，任选地当如实施例14中所述测定时，所述单克隆抗体阻断参照抗体与可溶性人表皮生长因子受体2 (HER2)的结合，其中所述参照抗体包含选自如下的重链可变(VH)区和轻链可变(VL)区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)； b)包含序列SEQID NO:8的VH区和包含序列SEQ ID NO:12的VL区(006)； c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)； d)包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)； e)包含序列SEQID NO:29的VH区和包含序列SEQ ID NO:33的VL区(106);和 f)包含序列SEQID NO:36的VH区和包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)。
2.权利要求1的抗体，所述抗体阻断(a)至(f)中的至少两种，优选至少3种参照抗体的结合。
3.权利要求1的抗体，所述抗体阻断(a)至(f)中的参照抗体的结合。
4.权利要求1的抗体，所述抗体阻断(a)中的参照抗体、(f)中的参照抗体或两者的结口 o
5.权利要求1-4中任一项的抗体，其中所述参照抗体是固定化的。
6.权利要求1-5中任一项的抗体，所述抗体完全阻断所述参照抗体的结合。
7.前述任一权利要求的抗体，所述抗体与包含选自如下的VH和VL区的参照抗体结合HER2上相同的表位: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)； b)包含序列SEQID NO:8的VH区和包含序列SEQ ID NO:12的VL区(006)； c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)； d)包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)； e)包含序列SEQID NO:29的VH区和包含序列SEQ ID NO:33的VL区(106)； f)包含序列SEQID NO:36的VH区和包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)； g)包含序列SEQID NO:43的VH区和包含序列SEQ ID NO:44的VL区(041)； h)包含序列SEQID NO:45的VH区和包含序列SEQ ID NO:46的VL区(150)； i)包含序列SEQID NO:47的VH区和包含序列SEQ ID NO:48的VL区(067)； j)包含序列SEQ ID NO:49的VH区和包含序列SEQ ID NO:50的VL区(072)； k)包含序列SEQ ID NO:51的VH区和包含序列SEQ ID NO:52的VL区(163)；I)包含序列SEQ ID NO:53的VH区和包含序列SEQ ID NO:54的VL区(093);和 m)包含序列SEQ ID NO:55的VH区和包含序列SEQ ID NO:56的VL区(044)。
8.权利要求7的抗体，所述抗体与(a)或(f)中的参照抗体结合HER2上相同的表位。
9.前述任一权利要求的抗体，所述抗体包含VH区，所述VH区包含选自如下的⑶R3序列 a)SEQ ID NO:59，如选自 SEQ ID No:4、25 和 32 (005、060、106)的序列；b)SEQID NO:62，如 SEQ ID NO:11(006)；c)SEQID NO:65，如 SEQ ID NO:18(059);和d)SEQ ID NO:67 JBSEQ ID NO:39(111)。
10.抗体，所述抗体包含VH区，所述VH区包含选自如下的CDR3序列a)SEQ ID N0:59，如选自 SEQ ID No:4、25 和 32 (005、060、106)的序列；b)SEQID NO:62，如 SEQ ID NO:11(006)； c)SEQID NO:65，如 SEQ ID NO:18(059);和d)SEQ ID NO:67，如 SEQ ID NO:39(111)。
11.权利要求9或10的抗体，所述抗体包含VH区，所述VH区包含选自如下的⑶RUCDR2、CDR3 序列:a)分别地，SEQID NO:57、58和59，其中所述VH区任选地源自IgHV5_51_l种系；b)分别地，SEQID NO:60,61和62，其中所述VH区任选地源自IgHV3_23_l种系； c)分别地，SEQID NO:63,64和65，其中所述VH区任选地源自IgHVl-18-l种系；和d)分别地，SEQID NO:66,38和67，其中所述VH区任选地源自IgHV1-69-4种系。
12.权利要求11的抗体，所述抗体包含VH区，所述VH区包含选自如下的⑶R1、⑶R2、CBR3序列: a)分别地，SEQID NO:2、3 和 4(005)； b)分别地，SEQID NO:23,24 和 25(060)； c)分别地，SEQID NO:30,31 和 32(106)； d)分别地，SEQID NO:9,10 和 11(006)； e)分别地，SEQID NO:16、17 和 18(059);和 f)分别地，SEQID NO:37,38 和 39(111)。
13.权利要求12的抗体，所述抗体包含选自如下的VH区和VL区: a)包含分别地SEQID NO:2、3和4的CDR1、CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:6、GAS 和 SEQ ID NO:7 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(005)； b)包含分别地SEQID NO:9,10和11的CDR1、CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:13、DAS 和 SEQ ID NO:14 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(006)； c)包含分别地SEQID NO:16,17和18的CDRl、CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:20, GAS 和 SEQ ID NO:21 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(059)； d)包含分别地SEQID NO:23,24和25的CDRU CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:27, GAS 和 SEQ ID NO:28 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(060)； e)包含分别地SEQID NO:30、31和32的CDRU CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:34,GAS 和 SEQ ID NO:35 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(106);和 f)包含分别地SEQID NO:37,38和39的CDRU CDR2和CDR3序列的VH区；以及包含分别地 SEQ ID NO:4U GAS 和 SEQ ID NO:42 的 CDR1、CDR2 和 CDR3 序列的 VL 区(111)。
14.前述任一权利要求的抗体，所述抗体包含选自如下的VH区和VL区a)包含序列SEQID NO:1的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)；b)包含序列SEQID NO:8的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:11的VL区(006)；c)包含序列SEQID NO: 15的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO: 19的VL区(059)；d)包含序列SEQID NO:22的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)；e)包含序列SEQID NO:29的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:33的VL区(106)；f)包含序列SEQID NO:36的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)；g)包含序列SEQID NO:43的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:44的VL区(041)h)包含序列SEQID NO:45的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:46的VL区(150)， i)包含序列SEQID NO:47的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:48的VL区(067)， j)包含序列SEQ ID NO:49的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:50的VL区(072)， k)包含序列SEQ ID NO:51的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:52的VL区(163)， I)包含序列SEQ ID NO:53的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:54的VL区(093)， m)包含序列SEQ ID NO:55的VH区和，优选地，包含序列SEQ ID NO:56的VL区(044)，和 η)所述抗体中任一种的变体，其中所述变体优选地具有最多1、2或3个氨基酸修饰，更优选氨基酸取代，如保守的氨基酸取代，以及其中新的氨基酸是在图1或2中比对的序列的相同位置处，尤其是在对应的共有序列中通过“X”表示的位置处的氨基酸的取代。
15.人抗体，当如实施例14中所述测定时，所述抗体不阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，其中参照抗体包含曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、Fl和C5中任一种的VH和VL序列。
16.前述任一权利要求的抗体，当如实施例12中所述测定时,所述抗体对于结合表达HER2的细胞具有低于0.80 μ g/ml，优选低于0.50 μ g/ml的EC5tl值，优选地，所述抗体阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区 a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)； b)包含序列SEQID NO:8的VH区和包含序列SEQ ID NO: 11的VL区(006);和 c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)。
17.前述任一权利要求的抗体，当如实施例13中所述测定时,所述抗体特异性结合HER2阳性的猕猴上皮细胞，优选地`，所述抗体阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)； b)包含序列SEQID NO:8的VH区和包含序列SEQ ID NO:11的VL区(006)； c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)； d)包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)； e)包含序列SEQID NO:29的VH区和包含序列SEQ ID NO:33的VL区(106);和 f)包含序列SEQID NO:36的VH区和包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)。
18.前述任一权利要求的抗体，当如实施例16中所述测定时,所述抗体特异性结合表达HER2的AU565细胞，但是对于细胞的配体-非依赖性增殖的促进要弱于F5，优选地，所述抗体阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005);和 b)包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)。
19.前述任一权利要求的抗体，其中，当如实施例17中所述测定时，当所述抗体缀合于治疗部分如假单胞菌-外毒素A的截短形式时，所述抗体杀死至少60%，优选至少70%的表达HER2的肿瘤细胞系，优选地，所述抗体阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005) b)含有包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区的抗体(060)c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)，和 d)包含序列SEQID NO:36的VH区和包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)。
20.权利要求19的抗体，其中所述表达HER2的肿瘤细胞系表达少于平均约30000HER2分子/细胞，其中所述抗体优选地阻断参照抗体与可溶性HER2的结合，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005);和 b)含有包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区的抗体(060)。
21.前述任一权利要求的抗体，其中当如实施例18中所述测定时，与曲妥珠单抗相比，更高量的所述抗体被表达HER2的肿瘤细胞系内化，其中所述抗体优选地交叉阻断参照抗体，所述参照抗体包含选自如下的VH和VL区: a)包含序列SEQID NO:1的VH区和包含序列SEQ ID NO:5的VL区(005)； b)包含序列SEQID NO:8的VH区和包含序列SEQ ID NO: 11的VL区(006)； c)包含序列SEQID NO:15的VH区和包含序列SEQ ID NO:19的VL区(059)； d)包含序列SEQID NO:22的VH区和包含序列SEQ ID NO:26的VL区(060)； e)包含序列SEQID NO:29的VH区和包含序列SEQ ID NO:33的VL区(106);和 f)包含序列SEQID NO:36的VH区和包含序列SEQ ID NO:40的VL区(111)。
22.权利要求16-21中任一项的抗体，所述抗体完全阻断所述参照抗体与可溶性HER2的结合，优选地，其中所述抗体与所述参照抗体结合相同的表位。
23.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是二价抗体。
24.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是抗原结合片段。
25.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是全长抗体，优选IgGl抗体，尤其是IgGl，K 抗体。
26.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是效应物功能缺陷抗体，例如稳定化的人IgG4抗体，如其中用赖氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸或亮氨酸,优选赖氨酸取代人IgG4的重链恒定区409位的精氨酸的抗体,和/或其中铰链区包含Cys-Pro-Pro-Cys序列的抗体。
27.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是单价抗体。
28.权利要求27的抗体，其中所述单价抗体包含 (i)权利要求1-25的抗体的可变区或所述区的抗原结合部分，和 ( )免疫球蛋白Ch区或其包括Ch2和Ch3区的片段，其中所述Ch区或其片段已经修饰，使得对应于铰链区的区域，以及，如果所述免疫球蛋白不是IgG4亚型，Ch区的其它区域，如Ch3区，不包含任何如下氨基酸残基:在多克隆人IgG存在的情况下，所述氨基酸残基能够与相同的Ch区形成二硫键或者与相同的Ch区形成其它共价的或稳定的非共价重链间键。
29.权利要求28的抗体，其中步骤ii)中涉及的免疫球蛋白是IgG4亚型的。
30.权利要求29的抗体，其中所述重链已经修饰，使得整个铰链区已经缺失。
31.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体是双特异性抗体，其包括如前述权利要求中任一项所定义的抗体的第一抗原结合区，和具有不同结合特异性，如对人效应细胞、人Fe受体或B细胞受体或HER2的非阻断表位的结合特异性，的第二抗原结合位点。
32.前述权利要求中任一项的抗体，其中所述抗体与另一个部分如细胞毒性部分、放射性同位素、药物或细胞因子相缀合。
33.权利要求32的抗体，其中所述细胞毒性部分选自紫杉醇；细胞松弛素B;短杆菌肽D ;溴化乙锭；依米丁 ；丝裂霉素；依托泊苷；鬼白噻吩苷；长春新碱；长春花碱；秋水仙碱；多柔比星；柔红霉素；二羟炭疽菌素二酮；微管蛋白抑制剂如美登素I或其类似物或衍生物；米托蒽醌；光神霉素；放线菌素D ；1-去氢睾酮；糖皮质激素；普鲁卡因；丁卡因；利多卡因；普萘洛尔；嘌呤霉素；卡里奇霉素或其类似物或衍生物；抗代谢物如氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、氟达拉宾、5-氟脲嘧唆、达卡巴嗪、羟基脲、天冬酰胺酶、吉西他滨或克拉屈滨；烷化剂如氮芥、thioepa、苯丁酸氮芥、美法仑、卡氮芥(BSNU)、洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露醇、链脲佐菌素、达卡巴嗪(DTIC)、丙卡巴肼、丝裂霉素C、顺钼、卡钼、duocarmycin A>duocarmycin SA、雷查霉素(CC-1065)或其类似物或衍生物；抗生素如放线菌素D、博来霉素、柔红霉素、阿霉素、伊达比星、光神霉素、丝裂霉素、米托蒽醌、普卡霉素、安曲霉素(AMC));抗有丝分裂剂如monomethyl auristatin E或F或其类似物或衍生物；白喉毒素和相关分子如白喉A链及其活性片段和杂合分子、蓖麻毒蛋白毒素如蓖麻毒蛋白A或脱糖基化蓖麻毒蛋白A链毒素、霍乱毒素、志贺样毒素如SLT 1、SLTII>SLT IIV、LT毒素、C3毒素、志贺毒素、百日咳毒素、破伤风毒素、大豆Bowman-Birk蛋白酶抑制剂、假单胞菌外毒素、alorin、皂苷、蒴莲素、gelanin、相思豆毒蛋白A链、蒴莲素A链、α-帚曲霉素、油桐蛋白、石竹素蛋白、美洲商陆蛋白如PAP1、PAPII和PAP S、苦瓜抑制剂、麻风树毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草抑制剂、白树毒素、mi toge 11 in、局限曲霉素、酚霉素和依诺霉素毒素；核糖核酸酶(RNase) ；DNase 1、葡萄球菌内毒素A ;美洲商陆抗病毒蛋白；白喉毒素；和假单胞菌内毒素。
34.权利要求32的抗体，所述抗体与选自如下的细胞毒性部分缀合:美登素1、卡里奇霉素、duocarmycin、雷查霉素(CC-1065)、monomethyl auristatin E或其任一种的类似物、衍生物或前药。
35.权利要求32的抗体，所述抗体与选自如下的细胞因子缀合:IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-10、IL-12、IL-13、IL-15、IL-18、IL-23、IL-24、IL-27、IL_28a、IL_28b、IL-29、KGF、IFNa、IFN^、IFN γ、GM-CSF、CD40L、Flt3 配体、干细胞因子、安西司亭和 TNFa。
36.权利要求32的抗体，所述抗体与放射性同位素缀合。
37.核酸序列，其编码选自如下的氨基酸序列中的一种或多种:SEQIDN0:l、5、8、12、15、19、22、26、29、33、36、40、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55 和 56。
38.表达载体，其包含权利要求37的核苷酸序列，其中所述载体进一步编码可操作连接的抗体的轻链恒定区、重链恒定区、或轻链和重链二者的恒定区。
39.重组的真核生物或原核生物宿主细胞，其产生权利要求1-31中任一项定义的抗体。
40.药物组合物，其包含权利要求1-31中任一项定义的抗体和药学上可接受的载体。
41.药物，其包含权利要求32-36中任一项定义的抗体和药学上可接受的载体。
42.权利要求1-31中任一项的抗体，其用作药物。
43.权利要求32-36中任一项的抗体，其用作药物。
44.权利要求1-31中任一项的抗体，其用于癌症的治疗中。
45.权利要求32-36中任一项的抗体，其用于癌症的治疗中。
46.抗体，其用于权利要求44和45中任一项中的用途，其中所述癌症选自:乳腺癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、结肠直肠癌、食道癌、头部和颈部的鳞状细胞癌、子宫颈癌、胰腺癌、睾丸癌、恶性黑色素瘤和软组织癌。
47.抗体，其用于权利要求44-46中任一项中的用途，其中所述抗体用于和一种或多种进一步的治疗剂如化疗剂组合以治疗癌症。
48.权利要求1-36中任一项的抗体在制备用于治疗癌症的药物中的用途，其任选地包括权利要求46和/或47的进一步的特征。
49.用于抑制一种或多种表达HER2的肿瘤细胞的生长和/或增殖的方法，包括将权利要求1-36中任一项的抗体施用于需要其的个体。
50.权利要求49的方法，其中所述抗体包括权利要求31-36中任一项的特征，所述一种或多种肿瘤细胞共表达HER2和EGFR和/或HER3。
51.治疗癌症的方法，包括 a)选择患有癌症的受试者，所述癌症包括共表达HER2和EGFR和/或HER3的肿瘤细胞，和 b)将权利要求1-36中任一项的抗体施用于所述受试者。
52.权利要求51的方法，其中癌症选自乳腺癌、结肠直肠癌、子宫内膜/子宫颈癌、肺癌、恶性黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、软组织肿瘤如滑膜肉瘤和膀胱癌。
53.用于产生权利要求1-36中任一项的抗体的方法，所述方法包括下列步骤 a)培养权利要求39的 宿主细胞，以及 b)从培养基纯化所述抗体。
54.用于检测样品中HER2的存在的方法，包括: -在允许抗体与HER2之间形成复合物的条件下，将所述样品与权利要求1-36中任一项的抗体接触；和 -分析是否已经形成了复合物。
55.用于检测样品中HER2的存在的试剂盒，包括 -权利要求1-36中任一项的抗体；以及 -所述试剂盒的使用说明书。
全文摘要
本发明公开了结合人表皮生长因子受体2(HER2)的分离的单克隆抗体，以及基于相关抗体的组合物和分子。本发明还公开了包含该抗体的药物组合物和使用该抗体的治疗和诊断方法。
文档编号A61K39/395GK103153339SQ201180036931
公开日2013年6月12日 申请日期2011年5月27日 优先权日2010年5月27日
发明者B.d.戈艾杰, E.N.v.d.布林克, S.海杰, T.里德尔, R.霍埃特, O.巴德斯加尔德, D.萨蒂恩, J.v.d.温克尔, P.帕伦 申请人:根马布股份公司