专利名称：一种色钉菇多糖的提取方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及从色钉菇[Chroogomphus rutilus]中提取的多糖及其在抗运动病中的应用，属于食品保健和药物开发技术领域。
背景技术：
运动病是晕车、晕船、晕机和宇航病的总称，症状上表现为头昏、眩晕、恶心、呕吐、 面色苍白、出冷汗等一系列植物神经性反应。其诱因主要是异常的运动和低频噪音使前庭、 听觉和视觉传入与储存于中枢神经系统内的经验信息相异，产生植物神经功能紊乱和感觉不适的症状。尽管该病症对于一般人群只是感觉和精神上的不适，恢复后对健康、精神状态及以后的工作并无多大影响，但对于乘车、船作战的战士、飞行员和航天员则有严重的危害。因为上述人员在乘坐相应的运输工具中必须保持清醒的头脑和应急能力，否则将有性命之忧和招致巨大的损失。当前预防和治疗运动病的药物主要有抗胆碱药、抗组胺药、拟交感药、钙拮抗剂、胃动剂等，其中东莨菪碱是目前防治运动病效果最好的。这些药物中多数具有难以消除的副作用，如抗胆碱药、抗组胺药有抑制中枢神经系统活动，出现口干、嗜睡、 视力模糊、记忆力受损等不良反应；拟交感药有成瘾副作用；生姜中药合剂可使胃运动过速；钙离子拮抗剂强烈抑制前庭功能等。所以这些药物均不能满足航天员、飞行员和战士抗运动病的需要。真菌多糖是一类活性高分子化合物，具有增强机体免疫力、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、降血糖、降血脂等多种功效。近年来的研究发现，向小鼠胃内灌入松茸，能明显促进小鼠胃的排空；临床上也证实，口服蜜环菌片能有效治疗眩晕、恶心、呕吐等症状。推测这种抑制眩晕、恶心、呕吐的作用可能与真菌多糖有关。色钉菇(Chroogomphus rutilus)，又称血红铆钉菇，俗称红蘑、肉蘑、松树伞、松蘑等，在真菌分类上属于担子菌亚门层菌纲、伞菌目、铆钉菇科。是针叶树木重要的外生菌根真菌。色钉菇是中国向日本出口最多的食用真菌，也是烹制蘑菇清汤的主要原料。研究发现，蘑菇清汤能有效地预防空间运动病的发生，但其作用成分和机制、蘑菇清汤中对抗运动病的有效物质未曾见诸报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种色钉菇多糖的提取方法。本发明的目的还在于提供一种色钉菇多糖在抗运动病中的应用。本发明的目的是这样实现的本申请认为蘑菇清汤中对抗运动病的主要物质可能是真菌多糖，因为蘑菇的水相提取物中最多的是多糖。所以本申请人以大鼠为实验动物，对色钉菇多糖的抗运动病作用进行了较深入的研究，结果表明该多糖有显著抗运动病作用。具体的，本发明的内容包括一、色钉菇多糖的提取二、色钉菇多糖抗运动病效果的检测实验及其应用。本发明所说的色钉菇多糖的提取方法包括以下步骤
⑴热水浸提以蒸馏水清洗采集到的色钉菇真菌子实体，洗涤三次，放入烘箱中，45°C烘干，将子实体粉碎、称重，以水子实体=IOml Ig的加水比例于80°C水浴锅中进行水浴加热， 并搅拌，浸提时间10h，离心，取上清浸提液，回收离心后得到的子实体沉淀，再重复上述步骤2次，将3次所得的浸提液合并，浓缩至所得浸提液总体积的1/3 ；(2)乙醇沉淀将浓缩后的浸提液加入浸提液3倍体积的质量浓度为95%的乙醇，于4°C沉淀IOh 以上，沉淀物用无水乙醇洗涤数次，再加入少许去离子水溶解，然后真空冷冻干燥，即得色钉菇多糖。经计算，用此种方法提取所得色钉菇多糖的得率为6. 73%。本发明所说的色钉菇多糖在抗运动病中的应用通过以下实验完成。以下是色钉菇多糖抗运动病效果实验以SD大鼠为实验动物，用偏离垂直轴旋转刺激复制大鼠运动病模型，旋转刺激前通过灌胃方式给予大鼠不同浓度该色钉菇多糖溶液，通过行为学观察、糖精水厌恶实验、旷场实验检测，以及血清中5-HT和胃动素含量的检测，评价该多糖是否有防治运动病的作用。复制成功的运动病模型大鼠，在行为上表现为活动少，活动范围小，行动迟缓，有转圈行走现象，还表现出颤抖、竖毛、大小便失禁、过多的修饰活动等。在给予糖精水后进行旋转刺激，使大鼠产生内脏不适症状，以建立对糖精水的厌恶性条件反射，使其饮用的糖精水显著减少。运动病模型大鼠血清中的多种生物活性物质的含量会发生显著变化，其中常用的判断指标是5-HT和胃动素，5-HT水平会显著升高，胃动素的水平会显著下降。在旋转刺激前给予各组大鼠不同剂量的色钉菇多糖，通过上述指标的测定来检测色钉菇多糖是否有抗运动病作用。糖精水厌恶实验、旷场实验的行为学检测①动物分组雄性SD大鼠，体重200_250g，购于河北医科大学实验动物中心。动物购入后随机分为5组，按照实验步骤进行适应饲养和实验。表1动物分组
权利要求
1.一种色钉菇多糖的提取方法，其特征在于包括以下步骤(1)热水浸提以蒸馏水清洗采集到的色钉菇真菌子实体，洗涤三次，放入烘箱中，45°C烘干，将子实体粉碎、称重，以水子实体=IOml Ig的加水比例于80°C水浴锅中进行水浴加热，并搅拌，浸提时间为10h，离心，取上清浸提液，回收离心后得到的子实体沉淀，再重复上述步骤 2次，将3次所得的浸提液合并，浓缩至所得浸提液总体积的1/3 ；(2)乙醇沉淀将浓缩后的浸提液加入3倍体积的质量浓度为95%的乙醇，于4°C沉淀IOh以上，沉淀物用无水乙醇洗涤数次，再加入少许去离子水溶解，然后，真空冷冻干燥即得色钉菇多糖。
2.一种色钉菇多糖的应用，其特征在于用于制备抗运动病药物。
全文摘要
本发明公开了一种具有抗运动病效果的色钉菇多糖的提取方法及其应用。该多糖是以色钉菇为原料，经水提醇沉法制备的。应用于运动病的防治，经行为学实验及激素水平检测，结果均显示，胃内给予200mg/kg色钉菇多糖有很好的抗运动病效果。不但能显著减轻内脏不适、大小便失禁、竖毛、震颤等运动病症状，还可以降低血清中5-HT水平、提高胃动素水平，最重要的是大鼠精神状态良好，无精神萎靡和其他的副作用症状。表明200mg/kg色钉菇多糖是该多糖抗运动病较为理想的剂量。本发明为进一步研制高效、无毒副作用的抗运动病新药提供了新的物质和参考剂量。
文档编号A61K31/715GK102532341SQ201210035838
公开日2012年7月4日 申请日期2012年2月17日 优先权日2012年2月17日
发明者刘亚宁, 王宇辰, 王微, 王立安, 王艳芹, 管振龙 申请人:河北师范大学