专利名称：一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种治疗类风湿性关节炎的药物组合物其制备方法和用途，属于药物领域。
背景技术：
类风湿关节炎(Rheumatiod Arthritis,简称RA)是ー种常见的以慢性多关节炎病变为主要表现的全身性免疫性疾病，全世界共有上亿病人。据统计，RA国外的患病率为I 2%，个别地区高达5% ;我国发病率约为O. 74%，现有病人1000万人左右。据调查表明，在正常人群中，类风湿性关节炎的发病率占正常人群的O. 35%左右。本病致残率高，未及时诊治的类风湿性关节炎患者ニ年致残率50%，三年致残率达70%。而已经患类风湿性关节炎的患者，平均寿命缩短10 15年，所以RA严重影响劳动能力，研制RA的治疗药物，对于缓解该类疾病的临床症状，提高病人的生存质量，保障生产力，具有积极的意义。藏药翼首草，为川续断科植物匙叶翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke)Hoeck的干燥全草，具有清热解毒、祛风湿、止痛功效。翼首草为藏医常用藏药，又名“榜姿毒乌”，为藏药特征明显的典型民族药物，用药历史悠久，藏医历来将其主要用于治疗风湿性等疾病，除藏医及其密切相关的蒙医外，中医药和其它传统医药基本没有应用翼首草的历史。在藏医药理论指导下，以翼首草的临床应用为依据，对翼首草提取物抗风湿性关节炎作用及机理进行了试验研究，结果表明翼首草提取物抗RA作用是肯定的，对于实验性佐剂关节炎动物模型原发性炎症及继发性关节炎均有较好的抗炎效果，井能减轻滑膜的病理改变，同时也有明显的镇痛作用，这与藏医临床以翼首草治疗风湿、类风湿关节炎应用相吻合。(沈芄，藏药翼首草抗类风湿性关节炎作用与机理研究，成都中医药大学，2002年.)对翼首草的化学成分研究表明，翼首草中主要含有齐墩果烷型三萜类皂苷、环烯醚萜苷类化合物、生物碱、多糖等成分。对翼首草有效成分的研究表明，采用大鼠急性足肿胀实验、小鼠棉球肉芽肿实验、小鼠急性耳肿胀实验和小鼠急性滲出实验等方法，证明了翼首草正丁醇部位总皂苷提取物具有显著的抗炎活性[关昕璐，等.翼首草的抗炎作用与急毒实验研究.北京中医药大学学报.2004，27 (2) :71 73]。翼首草中环烯醚萜苷类的主要成分马钱素，具有明显的抗炎药理作用，但其结构类似物具有免疫增强作用。[庞伟.藏药翼首草的研究与应用.中国民族医药杂志.2007，(5) :63-65]。专利申请号200910196870.X，该发明中提供了翼首草总皂苷提取物有效部位提取物，其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，总皂苷提取物含量50-90 %，该总皂苷提取物能显著抑制肿瘤细胞増殖，该总皂苷提取物中直接采用大孔树脂分离得到，提取物中含有环烯醚萜苷。综合现有文献可知，目前仅有翼首草中总皂苷提取物及马钱素具有抗炎镇痛作用、以及总皂苷提取物抗肿瘤的报道，还未见将翼首草总皂苷提取物和环烯醚萜苷联合使用治疗类风湿性关节炎的报道
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物及其制备方法。本发明提供了一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，它是由翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物为活性成分制备而成的制剂，其中，所述的总皂苷提取物、总环烯醚萜苷提取物的重量配比为总皂苷提取物1-10份、总环烯醚萜苷提取物1-10份。其中，所述的总皂苷提取物、总环烯醚萜苷提取物的重量配比为总皂苷提取物10份、总环烯醚萜苷提取物I份；或总皂苷提取物5份、总环烯醚萜苷提取物5份。进一步地，所述翼首草总皂苷提取物中，皂苷含量大于50% w/w ;所述翼首草总环烯醚職苷提取物中，环烯醚職苷含量大于50% w/w。更进一步地，所述翼首草总皂苷提取物中，皂苷含量大于80% w/w，优选为80-90% w/w ;所述翼首草总环烯醚職苷提取物中，环烯醚職苷含量大于80% w/w,优选为80-90% w/w。其中，所述翼首草为川续断科植物匙叶翼首草Pterocephalus hookeri (C.B. Clarke)Hoeck的干燥全草。本发明还提供了一种制备上述药物组合物的方法，它包括如下步骤(I)制备翼首草总皂苷提取物a、取翼首草，加水提取，滤过，滤液浓缩后，采用非极性或弱极性大孔吸附树脂纯化,先以水洗去杂质后,弃去洗脱液；以60-85%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液后；b、取步骤a的乙醇洗脱液，减压回收溶剂后，加入醋酸铅溶液，搅拌，滤过，滤液备用，取沉淀，脱铅后，干燥，即得翼首草总皂苷提取物；(2)制备翼首草总环烯醚萜苷提取物取步骤b中加入醋酸铅溶液后的滤液，浓缩后，用正丁醇萃取，取正丁醇液，回收溶剂后，干燥，即得翼首草总环烯醚萜苷提取物；(3)药物组合物的制备按处方配比称取翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物，加入药学上常用的辅料制备成制剂。其中，步骤a中选用D101、AB-8或HPD-300型大孔吸附树脂；以65-75% v/v乙醇洗脱；步骤b中，取步骤a的乙醇洗脱液，减压回收溶剂后，复溶于30-95% v/v乙醇中，力口入饱和中性醋酸铅溶液，搅拌，滤过，滤液备用，取沉淀，悬浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氢气体或阳离子交换树脂脱铅，过滤，取滤液浓缩，干燥，即得翼首草总皂苷提取物。进一步地,步骤a中选用DlOl型大孔吸附树脂；以70% v/v乙醇洗脱；步骤b中，乙醇浓度为60-85% v/v。更进一步地,步骤b中，乙醇浓度优选为65-75% v/v。更进一步地，步骤a中大孔吸附树脂纯化的具体操作步骤如下将上样液的浓度配制为O. 1-0. 2g生药/ml，采用DlOl型大孔吸附树脂纯化，上样流速为l_3BV/h，上样量以药材计为药材树脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脱，流速为l_3BV/h，弃去洗脱液；以2-4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速为2_4BV/h。
进ー步优选地，将上样液的浓度配制为O. Ig生药/ml药液，采用DlOl型大孔吸附树脂室温下纯化，上样流速为2BV/h，上样量以药材计为药材树脂=I : 1，以4BV水洗脱，流速为2BV/h，弃去洗脱液；以3BV的70%こ醇洗脱，洗脱流速为3BV/h。本发明还提供了上述药 物组合物在制备抗炎、镇痛或治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。本发明药物组合物，将翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物配伍使用，其抗炎抗类风湿作用强于各单ー提取物，具有协同增效作用，尤其以翼首草总皂苷提取物翼首草总环烯醚萜苷提取物(10 I)作用最佳，疗效更稳定，为临床用药提供了新的选择。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进ー步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
图IAA大鼠后肢原发性肿胀症状，左为正常对照组，右为模型对照组；图2AA大鼠前肢继发性肿胀症状，左为正常对照组，右为模型对照组。
具体实施例方式实施例I本发明翼首草总皂苷提取物的制备取翼首草原药材IOOOg切段，加1600ml水润湿，再用6000ml水煎煮提取2次，每次I. 5h，滤过，滤液浓缩后，离心除去沉淀，水提物稀释至O. Ig生药/ml药液，采用DlOl型大孔吸附树脂室温下上样，上样流速为2BV/h，上样量为树脂用量的I倍(药材树脂=I I)，以4BV水洗脱，流速为2BV/h，弃去洗脱液；以3BV的70 % v/vこ醇洗脱，洗脱流速为3BV/h，洗脱液减压回收こ醇，溶于60% v/vこ醇中，加入过量饱和的中性醋酸铅溶液,搅拌，使得翼首草总皂苷提取物完全沉淀，滤过，取沉淀悬浮于70% v/vこ醇中，通入过量硫化氢气体脱铅，滤过，取滤液再通入空气脱去硫化氢气体，减压回收こ醇至稠膏状，干燥，即得总皂苷提取物。以齐墩果酸为对照品，采用比色法测定提取物中总皂苷提取物含量，结果见表I。表I
样品号_I_2_3 .
总皂苷提取物含量占浸膏的比例 84.44 88. 73 82.69(%) _翼首草总皂苷提取物中，皂苷含量以齐墩果酸计，不应低于50% w/w，本发明中选用皂苷含量不低于80% w/w的翼首草总皂苷提取物。同时，未检测到翼首草总皂苷提取物中含有环烯醚萜苷，以中药新药研究指南中“对空白试验干扰允许在5%以下”的规定，设定翼首草总皂苷提取物中总环烯醚萜苷提取物含量为0-5% w/w。实施例2本发明翼首草总环烯醚萜苷提取物的制备
取翼首草原药材IOOOg切段，加1600ml水润湿，再加6000ml水煎煮提取2次，每次I. 5h，滤过，滤液浓缩，离心除去沉淀，水提物稀释至O. Ig生药/ml药液，采用DlOl型大孔吸附树脂室温下上样，上样流速为2BV/h，上样量为树脂用量的I倍(药材树脂=1:1)，以4BV水洗脱，流速为2BV/h，弃去洗脱液；以3BV的70 %乙醇洗脱，洗脱流速为3BV/h，洗脱液减压回收乙醇，溶于80% v/v乙醇中，加入过量饱和的中性醋酸铅溶液，搅拌，使得翼首草总皂苷提取物完全沉淀，滤过，取滤液，减压回收乙醇至稠膏状，加水溶解，正丁醇萃取三次，取正丁醇液，减压回收溶剂至稠膏状，干燥，即得总环烯醚萜苷提取物。
以马钱苷为对照品，采用比色法测定提取物中总环烯醚萜苷提取物的含量，结果见表2。表权利要求
1.一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物为活性成分制备而成的制剂，其中，所述的总皂苷提取物、总环烯醚萜苷提取物的重量配比为 总皂苷提取物1-10份、总环烯醚萜苷提取物1-10份。
2.根据权利要求I所述的药物组合物，其特征在于所述的总皂苷提取物、总环烯醚萜苷提取物的重量配比为 总皂苷提取物10份、总环烯醚萜苷提取物I份；或总皂苷提取物5份、总环烯醚萜苷提取物5份。
3.根据权利要求I或2所述的药物组合物，其特征在于所述翼首草总皂苷提取物中，皂苷含量大于50% w/w ;所述翼首草总环烯醚萜苷提取物中，总环烯醚萜苷提取物含量大于 50% w/w。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述翼首草总皂苷提取物中，皂苷含量大于80% w/w ;所述翼首草总环烯醚職苷提取物中，环烯醚職苷含量大于80% w/w。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的药物组合物，其特征在于所述翼首草为川续断科植物匙叶翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke) Hoeck的干燥全草。
6.一种制备权利要求1-5任意一项所述的药物组合物的方法，它包括如下步骤 (1)制备翼首草总皂苷提取物 a、取翼首草，加水提取，滤过，滤液浓缩后，采用非极性或弱极性大孔吸附树脂纯化，先以水洗去杂质后,弃去洗脱液；以60-85%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液后； b、取步骤a的乙醇洗脱液，减压回收溶剂后，加入醋酸铅溶液，搅拌，滤过，滤液备用，取沉淀，脱铅后，干燥，即得翼首草总皂苷提取物； (2)制备翼首草总环烯醚萜苷提取物 取步骤b中加入醋酸铅溶液后的滤液，浓缩后，用正丁醇萃取，取正丁醇液，回收溶剂后，干燥，即得翼首草总环烯醚萜苷提取物； (3)药物组合物的制备 按处方配比称取翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物，加入药学上常用的辅料制备成制剂。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于步骤a中选用D101、AB-8或HPD-300型大孔吸附树脂；以65-75% v/v乙醇洗脱；步骤b中，取步骤a的乙醇洗脱液，减压回收溶剂后，复溶于30-95% v/v乙醇中，加入饱和中性醋酸铅溶液，搅拌，滤过，滤液备用，取沉淀，悬浮于30-95% v/v乙醇中，用硫化氢气体或阳离子交换树脂脱铅，过滤，取滤液浓缩，干燥，即得翼首草总皂苷提取物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于步骤a中选用DlOl型大孔吸附树脂；以70% v/v乙醇洗脱；步骤b中，乙醇浓度为60-85% v/v。
9.根据权利要求6-8任意一项所述的方法，其特征在于步骤a中大孔吸附树脂纯化的具体操作步骤如下 将上样液的浓度配制为O. 1-0. 2g生药/ml，采用DlOl型大孔吸附树脂纯化，上样流速为l_3BV/h，上样量以药材计为药材树脂=(O. 5-1. 5) I w/w,以3-5BV水洗脱，流速为l-3BV/h，弃去洗脱液；以2-4BV的70%乙醇洗脱，洗脱流速为2_4BV/h。
10.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备抗炎、镇痛或治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
全文摘要
本发明提供了一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，它是由翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物为活性成分制备而成的制剂，其中，所述的总皂苷提取物、总环烯醚萜苷提取物的重量配比为总皂苷提取物1-10份、总环烯醚萜苷提取物1-10份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物，将翼首草总皂苷提取物和总环烯醚萜苷提取物配伍使用，其抗炎抗类风湿作用强于各单一提取物，具有协同增效作用，疗效肯定，为临床用药提供了新的选择。
文档编号A61P19/02GK102614230SQ20121006116
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月9日 优先权日2011年3月9日
发明者古锐, 孟宪丽, 张艺, 赖先荣 申请人:成都中医药大学