专利名称：余甘子在制备抗h1n1流感的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药单方余甘子，具体涉及余甘子在制药中的用途。
背景技术：
流感是由流感病毒引发的ー种比普通感冒更为严重的急性呼吸道传染病，其特点为起病急、传染性强、发病率高、病程长。目前防治流感的最有效手段是接种流感疫苗，但由于流感病毒变异性强，可使现有疫苗失效，从而加大了防治的难度。目前，抗流感病毒的药物研究已取得初歩成果，已有病毒唑和达菲等四种药物在国外正式上市。但是，流感病毒发生变异，对这些药物产生了不同程度的耐药性，且大多数的西药都可能导致严重的副作用。而天然产物在抗病毒方面有其独特作用，具有阻止病毒·致细胞病变、抑制病毒复制、调节免疫功能、改善肺循环等综合功效，特别是毒副作用相对低，不易形成耐药性的优点，所以从天然产物及其提取单体化合物中筛选新型抗病毒药物具有潜在的优势。流行感冒属于中医温病学的风温、春温的范畴，流感病毒相当于温病学的温邪。当气候突变，寒暖失常，机体腠理疏松，卫外不顾，易为温邪乘虚而入。“温邪上受，首先犯肺，逆传心包”，温邪从皮毛ロ鼻而入，肺卫首当其冲。若失治误治，病情发展，可传入气分，或热毒炽盛病邪直入气分，表现出高热头痛，咽痛咳嗽，周身酸痛。若进ー步恶化，热入营血，出现热扰心神或热盛动风等危急症候。总结流感的证候特点热毒炽盛，传变迅速，以肺系病变为主。中医治疗流感，通过辨证辨识病因病机，根据温病学理论，制订治疗法则和方案。病初、中期多采取辛凉解表、清热解毒的治疗原则；病后期则采用清营凉血、壮水制火、扶正祛邪的治则，临床在预防时则用扶正的中草药进行组方、用药。近年来，国内外开展了很多中医药抗流感病毒的实验研究。Nagai等报道，黄芩中提取的黄酮类化合物通过抑制病毒包涵体/溶酶体膜的融合，能減少流感病毒感染小鼠的病毒复制。Utsunomiya等报道，甘草皂苷可以提高流感病毒感染小鼠生存率，延长生存时间，降低肺病毒滴度；但体外实验表明，甘草皂苷对于病毒生存和复制无影响。李氏等报道，小儿热速清ロ服液对流感病毒感染小鼠具有一定的保护作用。Kobayashi等研究表明，银翘散及甘草、牛蒡子提取物治疗流感病毒感染小鼠，均能使生存时间延长、生存率提高。Nagai等研究表明，小青龙汤可以抑制流感病毒感染小鼠的肺内病毒复制，抑制病毒从鼻向肺传播，増加支气管肺泡灌冼液中IgA抗体含量。中药新药连花清瘟胶囊，对流感病毒甲三、副流感病毒I型、呼吸道合胞病毒、腺病毒三型和七型、单纯疱疹病毒一和ニ型均显示出一定的抑制作用；对流感病毒甲三、副流感病毒I型、呼吸道合胞病毒抑制作用強大；近期研究显示其还具有一定的抗禽流感(H5N1)病毒作用。余甘子是大戟科植物油柑的果实，分布于我国的福建、广东、广西、云南等省及东南亚、印度等地。其营养价值丰富。经分析，发现含12种维生素、18种氨基酸、16种宏量和微量元素，富含鞣质、有机酸、酚类等，果仁中还含有不饱不ロ脂肪酸。余甘子的价值不仅体现在营养上，更重要的是还有药用价值，它是卫生部颁布的既是食品又是药品的ー种果品。我国古代药膳《异物志》、《唐本草》、《本草拾遺》及《本草纲目》中对其药用价值均有论述。现全世界有17个国家或民族在自己的传统药中使用余甘子。在这些药中，余甘子与35种治疗功效有关(便秘，止血，消化不良，肠胃炎，止湾，健胃，眼科疾病，镇咳，保肝，利尿,癌症,肿瘤,哮喘,解热,皮肤病，高血压,贫血,疟疾,胆囊疾病,黄疸,生殖系统疾病,妇科疾病，坏血病，鼻炎，感冒等)。通过现代医药学研究，发现余甘子具有抗氧化、抗衰老、降脂减肥、抗癌、降血糖、抗菌和抗こ肝病毒的作用，但未见余甘子及其提取物抗流感病毒的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供余甘子的新用途，即在制药中的应用。具体是，提供余甘子在制备抗HlNl流感的药物中的应用。 本发明所述的应用，其中所述的药物是余甘子黄酮提取物与常规用量的医学上可接受的辅料混合制成的临床上可接受的常见的制剂，如，片剂、胶囊、滴丸、软胶囊。本发明所述的余甘子黄酮提取物可采用常见的从植物中分离黄酮的方法获得，本发明人推荐的方法如下ー种余甘子黄酮提取物的制备方法，该方法由以下步骤组成取余甘子原料药，カロ入7 10倍(质量体积倍)的水提取I 3次，滤过，收集滤液，浓缩至相当于每毫升(ml)药液中含余甘子原料药0. 8 I. 2g,加入盐酸溶液调节pH值至2 5，过滤；滤液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至流出液的酸碱度为中性(PH=7)，再用体积浓度为70 80%的こ醇洗柱，收集こ醇洗脱液并浓缩至每毫升药液中含余甘子原料药0. 8 I. 2g，浓缩液用正丁醇萃取，浓缩萃取液，干燥，得粉末状余甘子黄酮提取物。本发明所述的药物对HlNl型流感病毒致细胞病变(CPE)具有明显的抑制作用，在临床上可显著降低感染者肺指数，减轻感染者病毒性肺炎症状。为了公众能更好地理解本发明的有益效果，下面将通过实施例和药理实验进一歩阐明。附图
说图I为测定总黄酮的标准曲线，其中，图例为用实际检测结果绘制的曲线，图例——为回归后的标准曲线。
具体实施例方式例I( I )余甘子黄酮提取物的制备取余甘子药材2000g，加入10倍量水提取3次，滤过，收集滤液，浓缩至2500ml，カロ入盐酸液调pH至3 4，滤过；滤液过D-101大孔吸附树脂柱，先用水洗至流出液的酸碱度为中性，再用加入体积浓度为70%的こ醇洗柱，收集こ醇洗脱液并浓缩至每毫升药液中含余甘子原料药lg，浓缩液用正丁醇萃取，浓缩萃取溶液，得，干燥，得粉末状余甘子黄酮提取物。(II)余甘子黄酮提取物中总黄酮的測定
I.仪器与试剂I. I 仪器SPECTRONIC GENESYSTM 2紫外一可见光分光光度计(美国SPECTR0NIC公司)，CP225电子天平(德国赛多利斯公司)。I. 2试剂与样品槲皮素对照品(广州中医药大学新药中心提供)，余甘果提取物(广州中医药大学新药中心提供)，亚硝酸钠(分析纯，天津市大茂化学试剂厂)，硝酸铝(分析纯，天津市大茂化学试剂厂)，氢氧化钠(分析纯，天津市福晨化学试剂厂)，こ醇(分析纯，天津市大茂化学试剂厂)，甲醇(分析纯，天津市大茂化学试剂厂)。2 方法 2. I余甘子黄酮提取物样品处理称取步骤(I )所得到的余甘子黄酮提取物lOOmg，精密称定，置IOOml容量瓶中，60%こ醇50ml，超声溶解，放冷，定容，待用。2. 2可见分光光度法标准曲线的绘制2. 2. I对照品溶液的配备精密称取120°C干燥恒重的槲皮素对照品O. 05013g，用体积分数60%微热こ醇定容至IOOmL,摇匀，即得质量浓度为O. 5013mg / mL的应用母液。2. 2. 2质量分数5%NaN02溶液的配制称取亚硝酸钠5g，置IOOml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得。2. 2. 3质量分数10%A1 (NO3) 3溶液的配制称取硝酸铝10g，置IOOml容量瓶中，
加蒸馏水定容至刻度摇匀，即得。2. 2. 4ImoI/LNaOH溶液的配制称取氢氧化钠颗粒4g，置IOOml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度摇匀，即得。2. 2. 5こ醇(60%)溶液的配制移取63mlこ醇(95%)置IOOml容量瓶中，加蒸馏水
定容至刻度，摇匀，即得。2. 2. 6こ醇(30%)溶液的配制移取32mlこ醇(95%)置IOOml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得。2. 3标准曲线的绘制2. 3. I精密移取槲皮素对照品母液0，1,2,3,4,5ml分别于6只IOml容量瓶中，各加体积分数60%こ醇至5ml，然后再各自加质量分数5%NaN02溶液0. 3ml，摇匀，放置6min。加质量分数10%A1 (N03) 3溶液0. 3ml,摇匀，放置6min。加Imol/LNaOH溶液4ml,加水
0.4ml，摇匀，放置10 — 15min。每管不同质量浓度的槲皮素对照品总体积均为10ml。于510nm波长处測定光谱吸收比，结果见表I。表I对照品槲皮素与吸光度
权利要求
1.余甘子在制备抗HlNl流感的药物中的应用。
2.根据权利要求I所述的应用，其特征在于，所述的药物是余甘子黄酮提取物与常规用量的医学上可接受的辅料混合制成的临床上可接受的制剂。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的药物是片剂、胶囊、滴丸或软胶囊。
4.一种权利要求2或3所述的余甘子黄酮提取物的制备方法，该方法由以下步骤组成 取余甘子原料药，加入7 10倍的水提取I 3次，滤过，收集滤液，浓缩至相当于每毫升药液中含余甘子原料药0. 8 I. 2g，加入盐酸溶液调节pH值至2 5，过滤；滤液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至流出液的酸碱度为中性，再用体积浓度为70 80%的こ醇洗柱，收集こ醇洗脱液并浓缩至每毫升药液中含余甘子原料药0. 8 I. 2g，浓缩液用正丁醇萃取，浓缩萃取液，干燥，得粉末状余甘子黄酮提取物。
全文摘要
本发明涉及余甘子在制药中的用途，具体涉及余甘子在制备抗H1N1流感的药物中的应用。本发明所述的抗H1N1流感的药物是余甘子黄酮提取物与常规用量的医学上可接受的辅料混合制成的临床上可接受的制剂。本发明所述的药物对H1N1型流感病毒致细胞病变(CPE)具有明显的抑制作用，在临床上可显著降低感染者肺指数，减轻感染者病毒性肺炎症状。
文档编号A61P31/16GK102836200SQ20121032811
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月6日 优先权日2012年9月6日
发明者许仕杰, 李耿, 赖小平, 姚海燕 申请人:广东松山湖臻德生物医药科技有限公司