专利名称：一种黄芪注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及黄芪制剂领域，具体涉及一种黄芪注射液及其制备方法。
背景技术：
黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根，已有药理学研究证实，黄芪具有强心、扩血管作用，且黄芪在改善心脏收缩功能的同时能够改善心脏舒张功能，除心力衰竭作用外尚有心肌保护作用，能保护缺血缺氧、缺血再灌注及感染病毒的心肌，并且能改善心肌细胞的电活动，并具有抗动脉硬化等作用。黄芪的化学成分主要有皂苷类、黄酮类、多糖类以及氨基酸类等，其中，皂苷类、黄酮类是黄芪的主要药效成分。黄芪总皂苷具有保护血管内皮，改善血液流变学等作用，在缺 血缺氧心肌、病毒感染心肌、阿霉素和异丙肾上腺素损伤心肌方面具有保护作用；黄芪总黄酮在心肌缺血再灌注、急性心肌梗死、病毒性心肌炎及氯化钡引起的心律失常方面具有保护作用。这两大类药效成分使黄芪在治疗心血管疾病方面具有显著的疗效。中药成方制剂第十七册中公开了黄芪注射液的制备方法黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤液浓缩，用乙醇沉淀处理二次，第一次溶液中含乙醇量为75%，第二次为85%，每次均冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每Iml相当于原药材10g，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材O. 75 Ig,冷藏放置12小时,滤过,滤液浓缩至每Iml相当于原药材5 6g,放冷，用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5，煮沸，加入O. 125%的活性炭，煮沸5分钟，趁热滤过，加注射用水使成1000ml,滤过,再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5,滤过,灌封,灭菌，即得。上述方法为传统的黄芪注射液制备工艺，检项中仅对黄芪甲苷进行检验，其含量最低限为O. 08mg/ml。近几年来，已有一些工艺技术改进方面的研究。水提醇沉(通常是制备总多糖和总皂苷的)CN200810045913. X的背景技术中写明，常规黄芪的制备方法为黄芪，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约I. 26，加乙醇使其含醇量为70%，搅匀，静置，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 36 (38°C)的清膏。黄芪醇提取物、黄芪水提取物、黄芪水提醇沉提取物、黄芪半仿生提取物、黄芪超临界萃取物CN200610000241. I提供了治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法，公开了黄芪总皂苷脂质体或前体脂质体中黄芪总皂苷可以是黄芪醇提取物、黄芪水提取物、黄芪水提醇沉提取物、黄芪半仿生提取物、黄芪超临界萃取物，但是并没有明确上述任一提取物的提取方法。贲永光等公开了纤维素酶解法提取总黄酮(纤维素酶法提取黄芪总黄酮的工艺研究，时珍国医国药，2009年10期)，称取纤维素酶8mg，用pH为4. 5的HAc-NaAc缓冲液IOml混合后与Ig黄芪粉末(过50目筛)混合均匀，在30°C下处理Ih后加95%的乙醇20ml，在70°C下浸提Ih过滤，用20ml体积分数85%的乙醇洗涤残渣过滤，合并滤液，回收乙醇，残渣溶于质量分数为85%的乙醇，定容至25ml，精密吸取Iml于25ml的容量瓶中，30%乙醇定容，得供试品溶液。CN200710012291. 6公开一种酶法水解黄芪皂苷糖基制备黄芪甲苷的方法，此方法中用酶处理黄芪或者黄芪总皂苷，使含三个或三个以上的糖基的黄芪皂苷转化为含两个糖基的黄芪甲苷，显著提高了黄芪甲苷的收率，但却降低了其它黄芪皂苷的收率，此种方法仅能单独制备黄芪甲苷。CN99106225. 6公开了一种精制黄芪注射液制备工艺，其取黄芪通过煎煮、过滤、浓缩、然后醇沉3次，浓度为70%、80%、85%，每次醇沉后冷藏O V放置数小时、回收乙醇并浓缩、用注射用水稀释，冷藏至0°C _4°C，放置24小时、过滤、用20%氢氧化钠溶液调节pH值、煮沸加入活性炭、再加20%氢氧化钠溶液，调节pH值、最后过滤、灌封、灭菌，即得。该方法使用3次醇沉，虽然可以除去较多杂质，但有效成分的含量也大量的损失。CN03114789. 5公开了一种制备方法，其采用水煎煮、醇沉、上柱洗脱等步骤制备黄芪制剂，该方法得到的制剂中黄芪甲苷的量不低于O. 032mg/ml,甲苷含量较低，且该方法采用先醇沉后上树脂柱的工艺，提取物中可能含有树脂的降解物等污染物。 黄芪甲苷常用的提取方法为，水提，碱处理，有机溶剂萃取，纯化，如CN200410007963. O公开了一种黄芪甲苷原料药的制备方法及其原料药和制剂，属于中药现代化领域。该方法如下1)提取以含黄芪甲苷的药材为原料，提取，滤过，得提取液；2)浓缩提取液浓缩为60°C下相对密度I. 05 I. 40的浓缩液；3)碱处理调溶液pH值为8 14或大于14 ；4)分离黄芪甲苷调碱处理液的pH值至5 9，用有机溶剂萃取，分取有机溶液层；5)纯化将有机溶剂层浓缩至干，转溶，调pH值为3 9，用有机溶剂萃取，挥去有机溶剂，白色沉淀析出；6)精制离心或过滤所得白色沉淀，洗涤，滤过，沉淀干燥，重结晶，得黄芪甲苷原料药。CN200710099116. 5公开了一种黄芪注射液的制备方法，其采用水煮、上柱洗脱、醇
沉等步骤制备黄芪制剂。CN201110218898. 6公开了一种黄芪地上、地下部分综合开发利用的方法，首先将黄芪的地上或地下部分粗粉，然后用醇溶液进行超声循环提取，醇提液经脱醇后过通过离子交换树脂柱或聚酰胺树脂柱吸附、醇洗，醇洗液浓缩得到黄芪总黄酮；尾液经大孔吸附树脂柱吸附，醇解吸附，浓缩得到黄芪总皂苷。CN201210154465. 3将黄芪的根80%乙醇回流提取，浓缩，过DlOl树脂，依次用纯水、15-25%乙醇、60-95%乙醇洗脱，收集60-95%乙醇洗脱部分，减压回收即得。另外，也有一些通过萃取方法单独提纯黄芪总皂苷或黄芪总黄酮的研究方法，所得的组合物为纯度较高的单一类别，不能同时提高传统的黄芪制剂工艺中黄芪总皂苷及黄芪总黄酮的含量，且所获得的组合物或制剂已不具有两大类成分共同发挥疗效的作用。
发明内容
本发明目的在于提供一种含量较高、药效成分配比合理的黄芪注射液，该注射液对于辅助治疗心血管疾病具有更好的疗效。本发明还提供了该注射液的制备方法。本发明提供的一种黄芪注射液，含有黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷两种有效成分，每ml所述黄芪注射液含黄芪甲苷O. 08-0. 8mg，含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 02-0. 4mg，且黄芪甲苷占总固体的1%-10%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 20%-5% ；优选地，每ml所述黄芪注射液含黄芪甲苷O. 09-0. 6mg,含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 04-0. 3mg，且黄芪甲苷占总固体的1. 25%-7. 5%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 50%-3. 75%。进一步优选，每ml所述黄芪注射液含黄芪甲苷O. 12-0. 52mg，含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 05-0. 25mg,且黄芪甲苷占总固体的I. 5%_6. 6%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 60%-3. 05%ο本发明提供的注射液可以通过以下方法制备I)黄芪加水煎煮2-3次，合并煎液，滤过，浓缩，加入乙醇使含乙醇量为70-75%，滤过，回收乙醇，加水稀释，得水提液，回收药渣；2)回收的药渣用乙醇回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，加水稀释，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液，加入乙醇使含醇量为83%_87%，每次均冷藏放置，滤过，回收乙醇至无醇味，加水稀释，调节pH值，加入活性炭吸附，灌封，灭菌，即得。优选地，所述注射液由以下方法制备I)取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I. 5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材l_2g，加入95%乙醇使含乙醇量为70%_75%，冷藏放置12-36小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 5-4g，冷藏放置12-36小时，滤过，得水提液，回收药渣；2)回收的药渣加入黄芪体积6-10倍量的50%_95%乙醇回流提取2_3次，每次提取时间为I. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 5-4g,冷藏放置12-36小时,滤过,得醇提液；3)合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为83%_87%，冷藏放置12_36小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5-6g，放冷，用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 5-8. 5，煮沸，加入药材重量的1-2%的活性炭煮沸，趁热滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 0-8. O,滤过，灌封，灭菌，即得。优选地，所述注射液由以下方法制备I)取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I. 5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材I. 34-1. 44g，加入95%乙醇使含乙醇量为
73-75%，冷藏放置20-36小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味,用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 60-2. 80g，冷藏放置20-36小时，滤过，得水提液，回收药渣；2)回收的药渣加入黄芪体积6-10倍量的60-80%乙醇回流提取2次，每次提取时间为I. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 60-2. 80g，冷藏放置20-36小时，滤过，得醇提液；3)合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为84-87%，冷藏放置20_36小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5. 30-5. 70g，放冷，用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 6-8. 4，煮沸，加入药材重量的I. 5-2. 0%的活性炭煮沸，趁热滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 3-8. O,滤过，灌封，灭菌，即得。进一步优选，所述注射液由以下方法制备I)取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I. 5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材I. 36-1. 41g，加入95%乙醇使含乙醇量为
74-75%，冷藏放置24-30小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味,用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 68-2. 70g，冷藏放置24-30小时，滤过，得水提液，回收药渣；2)回收的药渣加入黄芪体积6-10倍量的65-75%乙醇回流提取2次，每次提取时间为I. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 65-2. 75g，冷藏放置24-30小时，滤过，得醇提液；3)合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为85-87%，冷藏放置24_30小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5. 45-5. 65g,放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 8-8. 2，煮沸，加入药材重量的I. 5-2. 0%的活性炭煮沸，趁热滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5-7. 8，滤过，灌封，灭菌，即得。本发明还提供了上述注射液的制备方法，包括以下步骤 I)黄芪加水煎煮2-3次，合并煎液，滤过，浓缩，加入乙醇使含乙醇量为70-75%，滤过，回收乙醇，加水稀释，得水提液，回收药渣；2)回收的药渣用乙醇回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，加水稀释，得醇提液；3)合并水提液和醇提液，加入乙醇使含醇量为83%_87%，每次均冷藏放置，滤过，回收乙醇至无醇味，加水稀释，调节pH值，加入活性炭吸附，加水至配制量，滤过，灌封，灭菌，即得。本发明还提供了上述黄芪注射液在制备治疗心肌炎、心肌缺血、心力衰竭、心肌梗死、心律失常的药物中的应用。本发明提供的黄芪注射液具有以下优点I、制备方法现有方法单独使用水提或醇提，不能同时提高黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。I)本发明的提取方法中使用水提与醇提相结合的方法，通过调整醇沉步骤、醇沉参数以及对PH值的调节，能够同时提取出含量较高的黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷，与现有技术相比，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量提高2-50倍；2 )与现有技术相比，未使用除乙醇外的任何有机试剂，产品质量安全。3)提取方法简单，易操作。2、本发明提供的注射液，在治疗心肌炎、心肌缺血、心力衰竭、心肌梗死、心律失常方面均具有较好的辅助治疗作用，效果优于现有技术。3、本发明提供的注射液有效成分含量高，同时对其有效成分占总固体的量的控制，使得配比更合理，疗效好，质量稳定。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。如无特殊说明，本发明所述乙醇浓度均为体积比，如70%乙醇是用95%乙醇配制，95%乙醇与水的体积比为70:25。实施例I :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮2次，分别加入黄芪重量10倍量、8倍量的水，每次煎煮2小时,合并煎煮液,滤过,滤液浓缩至745ml (每Iml相当于原药材I. 34g)，加入95%乙醇使含乙醇量为73%，冷藏放置20小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味,加入注射用水稀释至385ml (每Iml相当于原药材2. 60g)，冷藏放置20小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，每次加入黄芪体积8倍量的60%乙醇，提取时间为每次I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味,加入注射用水稀释至380ml (每Iml相当于原药材2. 63g)，冷藏放置20小时，滤过，得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为84%，冷藏放置20小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至188ml(每Iml相当于原药材5. 32g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 6，煮沸，加入20g (占药材重量的2. 0%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至8. 0，滤过，灌封，灭菌，即
得黄芪注射液。实施例2 :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮2次，第一次加入黄芪重量8倍量的水煎煮2小时，第二次加入6倍量的水煎煮I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至675ml (每Iml相当于原药材I. 48g)，加入95%乙醇使含乙醇量为70%，冷藏放置18小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至392ml (每Iml相当于原药材2. 55g),冷藏放置18小时,滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，每次加入黄芪体积8倍量、6倍量的50%乙醇，提取时间分别为2小时、I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至387ml (每Iml相当于原药材2. 58g),冷藏放置18小时,得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为83%，冷藏放置18小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至194ml (每Iml相当于原药材5. 15g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至8. 5，煮沸，加入IOg (占药材重量的1%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至8. 0，滤过，灌封，灭菌，即得黄芪注射液。实施例3:黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮3次，分别加入黄芪重量10倍量、8倍量、8倍量的水，每次煎煮I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至688ml (每Iml相当于原药材I. 45g)，加入95%乙醇使含乙醇量为72%，冷藏放置12小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至396ml (每Iml相当于原药材2. 53g)，冷藏放置12小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，每次加入黄芪体积的10倍量、8倍量的95%乙醇，提取时间为I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至377ml (每Iml相当于原药材2. 65g)，冷藏放置12小时，滤过，得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为82%，冷藏放置12小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至199ml (每Iml相当于原药材5. 03g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 5，煮沸，加入IOg (占药材重量的1%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 0，滤过，灌封，灭菌，即得黄芪注射液。
实施例4 :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮3次，分别加入黄芪重量10倍量、8倍量、6倍量的水，每次煎煮I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至693ml (每Iml相当于原药材I. 44g)，加入95%乙醇使含乙醇量为75%，冷藏放置36小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至362ml (每Iml相当于原药材2. 76g)，冷藏放置36小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，分别加入黄芪体积10倍量、8倍量的80%乙醇，提取时间为2小时 ，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味,加入注射用水稀释至357ml(每Iml相当于原药材2. 80g)，冷藏放置36小时，滤过，得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为87%，冷藏放置36小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至178ml(每Iml相当于原药材5. 62g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至8. 4，煮沸，加入15g (占药材重量的I. 5%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 3，滤过，灌封，灭菌，即得。实施例5 :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮2次，分别加入黄芪重量8倍量、6倍量的水，分别煎煮2小时、I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至733ml (每Iml相当于原药材I. 36g)，加入95%乙醇使含乙醇量为75%，冷藏放置24小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至373ml (每Iml相当于原药材2. 68g)，冷藏放置24小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，分别加入黄芪体积8倍量、6倍量的65%乙醇，提取时间为I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至377ml(每Iml相当于原药材2. 65g)，冷藏放置24小时，滤过，得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为85%，冷藏放置24小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至177ml(每Iml相当于原药材5. 65g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至8. 2，煮沸，加入15g (占药材重量的I. 5%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 8，滤过，灌封，灭菌，即得黄芪注射液。实施例6 :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮3次，分别加入黄芪重量8倍量、8倍量、6倍量的水，每次煎煮I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至718ml (每Iml相当于原药材I. 39g)，加入95%乙醇使含乙醇量为74%，冷藏放置28小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至370ml (每Iml相当于原药材2. 70g)，冷藏放置28小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，分别加入黄芪体积10倍量、8倍量的75%乙醇，提取时间为2小时、I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至364ml (每Iml相当于原药材2. 75g),冷藏放置28小时,滤过,得醇提液；3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为87%，冷藏放置28小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至181ml (每Iml相当于原药材5. 52g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 8，煮沸，加入20g (占药材重量的2%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 6，滤过，灌封，灭菌，即
得黄芪注射液。实施例7 :黄芪注射液I、取黄芪lOOOg，加水煎煮2次，每次加入黄芪重量10倍量的水，每次煎煮I. 5小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至709ml(每Iml相当于原药材I. 41g)，加入95%乙醇使含乙醇量为74%，冷藏放置30小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，加入注射用水稀释至377ml(每Iml相当于原药材2. 65g)，冷藏放置30小时，滤过，得水提液，回收药渣；2、回收的药渣用乙醇回流提取2次，每次加入黄芪体积8倍量的70%乙醇，提取时间为2小时、I. 5小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味,加入注射用水稀释至370ml(每Iml相当于原药材2. 70g)，冷藏放置30小时，滤过，得醇提液；
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3、合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为86%，冷藏放置30小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至183ml(每Iml相当于原药材5. 45g),放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至8. 0，煮沸，加入15g (占药材重量的I. 5%)的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成500ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5，滤过，灌封，灭菌，即得黄芪注射液。对比例I :黄芪注射液参考中药成方制剂第十七册中黄芪注射液的制备方法，具体制备方法为黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤液浓缩，用乙醇沉淀处理二次，第一次溶液中含乙醇量为75%，第二次为85%，每次均冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每Iml相当于原药材10g，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材O. 75g,冷藏放置12小时,滤过,滤液浓缩至每Iml相当于原药材6g，放冷，用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5，煮沸，加入O. 125%的活性炭，煮沸5分钟，趁热滤过，加注射用水使成1000ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5，滤过，灌封，灭菌，即得。对比例2 :黄芪注射液参考CN99106225. 6的实施例1，具体制备方法为I、取黄芪2000g，分别加入10倍量、8倍量水煎煮2次，每次I. 5小时，合并滤液经滤器过滤，滤液常压加热浓缩至每Iml相当于原药材Ig ；2、用乙醇沉淀处理3次，第一次在滤液中加入含量为70%的乙醇3升，醇沉后，冷藏0°C放置6小时，第二次再加入含量为80%的乙醇2升，醇沉后，冷藏0°C放置6小时，第三次再加入含量为85%的乙醇3升，醇沉后，冷藏0°C放置6小时；3、回收乙醇浓缩至Iml相当于原药材的IOg,用注射用水稀释至每Iml相当于原药材的O. 8g,冷藏至0°C,放置24小时,过滤、滤液浓缩至每Iml相当于原药材的5. 5g,冷却，用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 3，煮沸加入O. 125%的活性炭搅拌均匀，并煮沸5分钟，冷却至50°C用滤器趁热过滤，加注射用水使成1000ml，再加20%氢氧化钠溶液2mol/L，调节pH值至7. 5,最后过滤、灌封、灭菌、质检、包装而成。对比例3 :黄芪注射液参考CN200710099116. 5的实施例1，具体制备方法为I、黄芪切片，加入生药8倍量的水，60°C温浸30分钟，煮沸1. 5小时，滤出，加生药6倍量的水，煮沸I小时；2、合并滤液，冷却，静置I小时，过滤，冷却至30°C以下；上树脂柱浸30分钟，以18升/分钟的流速过柱吸附，以树脂3倍量的纯化水冲柱，然后以树脂I倍量的30%乙醇冲柱，再以树脂I倍量的纯化水冲柱，最后以树脂4倍量的70%乙醇浸30分钟，以15升/分钟流速洗脱；收集洗脱液，过滤，回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度I. 16±0. 02(80°C ±2测)。加入高醇使含醇量达85%，室温静置12小时，O. 45 μ m滤膜过滤，回收乙醇至无醇味；加注射用水至每Iml含原生药2g，搅拌溶解，调pH值至3. 2，灌装，115 °C高压灭菌40分钟，冷冻至结冰，(TC冷藏7天；3、将冷藏液经O. 45 μ m微孔滤膜过滤，用氢氧化钠调pH9. 0，加O. 1%活性炭煮15分钟，待温度下降至50°C以下，过滤，经115°C灭菌40分钟。冷冻至结冰后及时取出缓化， 于阴凉干燥处或室温放置半个月；4、用200目絹布过滤，再经O. 2 μ m微孔滤膜过滤，经6000分子量超滤器超滤后得超滤液。再将其与40°C以下的超滤后的注射用水合并，用10%Na0H调pH值9. 5，再补加超滤后的注射用水至每Iml含原生药2g。待药液冷却至30°C以下经O. 2 μ m微孔滤膜、简式除菌滤器精滤，灌装灭菌即得。实验例I :含量检测对实施例1-7和对比例1-3提供的黄芪注射液进行含量检测，主要检测黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。I、含量检测方法如下I)黄芪甲苷色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(70:30)为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数以黄芪甲苷峰计应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 2mg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备取本品作为供试品溶液。测定法精密吸取对照品溶液4 μ 1、8 μ I、16 μ 1，供试品溶液5 10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，以外标三点法对数方程计算，即得。2)毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相Α，以水为流动相B，按表I进行梯度洗脱；流速为每分钟I. Oml ;检测波长为260nm。柱温为30°C，理论板数按毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰计算应不低于3000。表I :梯度洗脱
权利要求
1.一种黄芪注射液，其特征在于，该注射液含有黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷两种有效成分，每ml黄芪注射液含黄芪甲苷O. 08-0. 8mg，含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 02-0. 4mg,且黄芪甲苷占总固体的1%_10%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 20%-5%。
2.根据权利要求I所述的注射液，其特征在于，所述黄芪注射液中，每ml黄芪注射液含黄芪甲苷O. 09-0. 6mg,含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 04-0. 3mg,且黄芪甲苷占总固体的1.25%-7. 5%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 50%-3. 75%。
3.根据权利要求I所述的注射液，其特征在于，每ml所述黄芪注射液含黄芪甲苷0.12-0. 52mg，含毛蕊异黄酮葡萄糖苷O. 05-0. 25mg，且黄芪甲苷占总固体的I. 5%_6. 6%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的O. 60%-3. 05%。
4.根据权利要求1-3任一项所述的注射液，其特征在于，该注射液由以下方法制备 1)黄芪加水煎煮2-3次，合并煎液，滤过，浓缩，加入乙醇使含乙醇量为70-75%，滤过，回收乙醇，加水稀释，得水提液，回收药渣； 2)回收的药渣用乙醇回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，加水稀释，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液,加入乙醇使含醇量为83%-87%，每次均冷藏放置，滤过，回收乙醇至无醇味，加水稀释，调节pH值，加入活性炭吸附，加水至配制量，滤过，灌封，灭菌，即得。
5.根据权利要求4所述的注射液，其特征在于，该注射液由以下方法制备 O取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I. 5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材l_2g，加入95%乙醇使含乙醇量为70_75%，冷藏放置12-36小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2.5-4g，冷藏放置12-36小时，滤过，得水提液，回收药渣； 2)回收的药渣加入黄芪的6-10倍量50%-95%乙醇回流提取2-3次，每次提取时间为1.5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 5-4g，冷藏放置12-36小时，滤过，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液，加入乙醇使含醇量为83%-87%，冷藏放置12-36小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5-6g，放冷，用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 5-8. 5，煮沸，加入药材重量的1-2%的活性炭煮沸，趁热滤过，加注射用水使成1000ml，滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 0-8. O,滤过，灌封，灭菌，即得。
6.根据权利要求4所述的注射液，其特征在于，该注射液由以下方法制备 1)取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I.5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材I. 34-1. 44g，加入95%乙醇使含乙醇量为73_75%，冷藏放置20-36小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 60-2. 80g，冷藏放置20-36小时，滤过，得水提液，回收药渣； 2)回收的药渣加入黄芪体积6-10倍量的60-80%乙醇回流提取2次，每次提取时间为I. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 60-2. 80g，冷藏放置20-36小时，滤过，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为84-87%，冷藏放置20-36小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5. 30-5. 70g，放冷，用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 6-8. 4，煮沸，加入药材重量的I. 5-2. 0%的活性炭煮沸，趁热滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 3-8. O,滤过，灌封，灭菌，即得。
7.根据权利要求4所述的注射液，其特征在于，所述注射液由以下方法制备 1)取黄芪，加水煎煮2-3次，每次加入6-10倍量的水，每次煎煮I.5-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每Iml相当于原药材I. 36-1. 41g，加入95%乙醇使含乙醇量为74_75%，冷藏放置24-30小时，滤过，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 68-2. 70g，冷藏放置24-30小时，滤过，得水提液，回收药渣； 2)回收的药渣加入黄芪体积6-10倍量的65-75%乙醇回流提取2次，每次提取时间为I.5-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材2. 65-2. 75g，冷藏放置24-30小时，滤过，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液，加入95%乙醇使含醇量为85-87%，冷藏放置24-30小时，滤过，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每Iml相当于原药材5. 45-5. 65g,放冷,用20%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 8-8. 2，煮沸，加入药材重量的I. 5-2. 0%的活性炭煮沸，趁热滤过，再用20%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 5-7. 8，滤过，灌封，灭菌，即得。
8.一种制备权利要求1-7任一项所述的注射液的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤 1)黄芪加水煎煮2-3次，合并煎液，滤过，浓缩，加入乙醇使含乙醇量为70-75%，滤过，回收乙醇，加水稀释，得水提液，回收药渣； 2)回收的药渣用乙醇回流提取2次，合并提取液，回收乙醇，加水稀释，得醇提液； 3)合并水提液和醇提液,加入乙醇使含醇量为83%-87%，每次均冷藏放置，滤过，回收乙醇至无醇味，加水稀释，调节pH值，加入活性炭吸附，加水至配制量，滤过，灌封，灭菌，即得。
9.权利要求1-7任一项所述的注射液在制备治疗心肌炎、心肌缺血、心力衰竭、心肌梗死、心律失常的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种黄芪注射液及其制备方法，该注射液含有黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷两种有效成分，每ml黄芪注射液含黄芪甲苷0.08-0.8mg，含毛蕊异黄酮葡萄糖苷0.02-0.4mg，且黄芪甲苷占总固体的1%-10%，毛蕊异黄酮葡萄糖苷占总固体的0.20%-5%。本发明提供的注射液，在治疗心肌炎、心肌缺血、心力衰竭、心肌梗死、心律失常方面均具有较好的辅助治疗作用，效果优于现有技术。
文档编号A61K36/481GK102895294SQ201210422499
公开日2013年1月30日 申请日期2012年10月30日 优先权日2012年10月30日
发明者方同华 申请人:黑龙江珍宝岛药业股份有限公司