锗与氨基酸和羧酸的配合物及其制备方法

锗与氨基酸和羧酸的配合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及式Ge[OH]a[AA]b[CA]c(I)的锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物，其中AA是氨基酸，CA是羧酸，a＝0-3，b＝1-3，с＝0-3，且1≤b+c≤4，其中在该配合物中的AA和CA可以相同或不同，且本发明涉及该配合物的制备方法。该方法在于制备α-二氧化锗的水性混悬液，向所生产的二氧化锗的水性混悬液中加入氨基酸和羧酸，将产生的混合物在搅拌下在40-100℃的温度下加热2-14小时，然后过滤，除去水，产生固体形式的配合物。该方法能够制备具有可控组成和可控的锗与氨基酸和羧酸之比的稳定的配合物，其在固体形式下是稳定的且可以用于医药。
【专利说明】锗与氨基酸和羧酸的配合物及其制备方法 发明领域
[0001] 本发明涉及新的锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物及其制备方法。
[0002] 更具体地，本发明涉及式（I)的锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物的制备方 法，
[0003] Ge[0H]a[AA]b[CA]c (I)
[0004] 该方法包括使氨基酸或氨基酸和羧酸的混合物的水溶液与二氧化锗反应。由此生 产的锗配位化合物可以用于不同的工程学领域，优选医药领域。

【背景技术】
[0005] 包含锗的化合物广泛应用于不同的科学和工程学领域，例如作为半导体和生产聚 酯类和聚烯烃类的催化剂，用于制备用于远程通信设施的光纤和用于IR光谱学的透镜和 眼镜。
[0006] 近来，锗化合物因其药理学活性还取得了在医药中的应用。锗化合物的生物学特 性包括确保氧在身体组织内运输的能力和增强身体的免疫状态和抗肿瘤活性。
[0007] 锗化合物以两种主要形式使用，即有机形式（包含Ge-c键）或无机形式（作为 盐、氧化锗及其配位化合物）。例如，美国专利US4271084(1981，IPC:C 07F 7/30)要求保 护包含锗的有机聚合物，即羧乙基锗倍半氧化物，其通过聚合3-三氯甲锗烷基丙酸生产。 原料是二氧化锗，其被次磷酸（Η 3Ρ02)在盐酸的存在下还原，由此产生氯化锗-磷酸配合 物。通过与丙烯酸（CH2 = CHC00H)反应将由此生产的配位化合物转化成3-三氯甲锗烷 基丙酸。美国专利US5386046(1995，IPC:C07F 7/30)公开了羧乙基锗倍半氧化物，其使 用四氯化锗、四甲基二硅氧烷和丙烯酸生产。现有技术的包含锗的有机聚合物有效地治疗 神经精神性障碍（参见美国专利US4281015，1981，IPC:A61K 31/28)、眼病（参见美国专 利 US4296123,1981，IPC:A61K 31/28)、肝病（参见美国专利 US4309412,1982, IPC:A61K 31/74)、肺纤维化（参见美国专利US4321273,1982, IPC:A61K 31/28)、过敏性疾病（参见 美国专利 US4322402,1982, IPC:A61K 31/74)和肝炎（参见美国专利 US5340806,1994， IPC:A61K 31/79)。它们还促进人体内的干扰素产生（参见美国专利US4473581，1984， IPC:A61K 31/28)并且防止其受到感冒影响（参见美国专利US4898882,1990, IPC:A61K 31/28)。
[0008] 美国专利US3825546 (1974, IPC :C07D 29/28)描述了包含锗的氮杂螺烷 (azaspirans)(含氮的杂环化合物）的制备，称作螺锗。生产螺锗的方法是多步合成，其中 起始化合物是二烷基锗，即二甲基-或二乙基锗（R 2GeH2)。在两步中使用丙烯酸甲酯、叔丁 醇钾和20%硫酸溶液将二烷基锗转化成4, 4-二烷基-4-甲锗烷基-环己酮。此后，螺锗在 几个步骤中得自4, 4-二烷基-4-甲锗烷基-环己酮。
[0009] 美国专利US4468393(1984, IPC :A61K 31/555)显示螺锗化合物、尤其是二乙基螺 锗及其盐用于通过注射或口服给药治疗关节炎。螺锗的静脉内注射剂量为50-80mg/m 2体表 面积。用于治疗具有严重类风湿症状的关节炎的推荐的螺锗治疗剂量为肌内1.5mL水溶液 (30mg/mL)。将这种疗法在前6周过程中每周进行2次，在实现消退后每周1次。该疗程通 常需要3-6个月的期限。当每日2次给予包含200mg螺锗的胶囊2周、然后每日1次持续 6周时，口服治疗可能是有效的。
[0010] 上述制备包含锗的有机化合物的方法是多步和复杂的方法。它们需要有机溶剂用 于分离和纯化目标化合物。例如，3-三氯甲锗烷基丙酸的水解和缩合依赖于方法的期限和 其他因素且这影响终产物的质量。螺锗的合成包括5步，其结果是基于起始化合物的终产 物收率极低。
[0011] 已知用于制备包含锗的有机化合物的方法，所述包含锗的有机化合物是锗酸或偏 锗酸的碱金属盐与一些氨基酸或有机酸反应的产物。例如，美国专利US3674823 (1972, IPC : C07F 7/00)提出了一项发明，其仅涉及锗酸和半胱氨酸的1:1摩尔比的化合物。该化合物 具有治疗肝炎、风湿病和渗出性湿疹（hydro eczema)的活性。通过将二氧化锗的水溶性形 式溶于热水由此形成锗酸、然后过滤该溶液、将pH调整至4并且向锗酸水溶液中加入半胱 氨酸制备该化合物。此后，将该溶液加热2小时，然后过滤，通过蒸馏浓缩。在冷却时从浓 溶液中分离产物。还可以通过向溶液中加入乙醇或丙酮分离产物。美国专利US3674823未 公开使用其他氨基酸得到锗化合物的可行性。
[0012] 如专利DE3212817,1983, IPC :C07F 7/30中所公开的，为偏锗酸的钾或钠盐与一 些羧酸或氨基酸反应产物的锗化合物的制备方法构成了用于我们要求保护的方法的大部 分现有技术相关内容并且我们照此采用。如专利DE3212817中所公开的锗化合物的制备方 法在于加热氧化锗与氢氧化钾或氢氧化钠的浓水溶液，以便将二氧化锗转化成偏锗酸的可 溶性钾或钠盐；浓缩、冷却且然后将该混合物在加热下与羧酸、羧酸混合物或氨基酸一起混 悬于水。得到备用溶液形式的产物或通过加入醇从溶液中沉淀。有用的氨基酸例如为天冬 氨酸和谷氨酸；有用的羧酸包括柠檬酸、异柠檬酸、琥珀酸、酮戊二酸和富马酸；还可以使 用羟基羧酸（乳酸或抗坏血酸）。得到的化合物为偏锗酸的碱金属盐与上述举出的酸和氨 基酸反应的产物，其充分溶于水且具有生物学和药理学特性。
[0013] 在专利DE3212817中，用Litchfield和Wilcockson的方法在小鼠中研究了锗与琥 珀酸和柠檬酸形成的锗化合物的毒性。对于腹膜内给药，LD50分别为275mg/kg和>2500mg/ kg。对上述化合物进行洋葱试验。将洋葱种子（洋葱（Allium c印a))在培育皿上温育。当 发芽的洋葱根达到lcm长时，将它们转移到包含测试化合物水溶液的培养皿中，其中锗浓 度为0. 0625%、0. 125%、0. 25%和0. 5%。结果清楚地显示锗化合物具有抑制细胞效应，其 与有丝分裂周期减少相关。在被诊断为卵巢癌和子宫恶性肿瘤的6位住院患者中测试锗与 天冬氨酸形成的锗化合物。患者口服接受l〇〇mg 10%溶液形式的该物质，每日2次。手术 切除肿瘤。全部患者显示健康方面显著的改善。此外，5位患者未显示腹腔或体内骨盆腔中 的渗出物。无毒性副作用。无一患者在1个月后进行术后检查中显示渗入。
[0014] 专利DE3212817中公开的方法存在如下缺陷：
[0015] ?不仅使用氢氧化钾和氢氧化钠通过形成偏锗酸的钾或钠盐将二氧化锗转化为 可溶性形式使得该方法复杂化，而且该方法还导致终产物中出现碱金属阳离子，而这是得 到的化合物的药理学应用中不期望的；
[0016] ?锗与酸形成的锗配位化合物通常仅在水溶液中保持稳定且在进行从水中分离 的尝试时被破坏；在专利DE3212817中，仅在实施例1中分离了锗与琥珀酸形成的锗化合 物；其他实例产生了锗与天冬氨酸和羧酸形成的溶液，而这可以用作它们在固体形式下不 稳定且不能从水溶液中分离的证据；
[0017] ?鉴于如下事实：实施例2-4中得到的终产物是溶液，得到的包含有机锗化合物 的水溶液是包含偏锗酸的钾或钠盐、羧酸和锗与羧酸形成的锗化合物的混合物；这种包含 目标产物的水溶液的医学应用是困难的，这归因于其中出现上述举出的污染物；
[0018] ?锗与氨基酸形成的有机锗化合物的制备因使用天冬氨酸而是费力耗时的（参 见实施例3)。
[0019] 发明目的
[0020] 本发明的一个目的在于研发用于制备锗与化学上不同的氨基酸和羧酸形成的锗 配位化合物的简单方法，使得所述配位化合物是稳定的且易于转移到水溶液中。
[0021] 本发明的另一个目的在于研发用于制备锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物 的方法，使得可以提供对锗与氨基酸和羧酸在配位化合物中的比例的控制并且控制该配合 物的组成。
[0022] 本发明的另一个目的在于提供锗与化学上不同的氨基酸和羧酸形成的锗配位化 合物，使得所述配位化合物是稳定的且易于转移到水溶液中。
[0023] 本发明的另一个目的在于提供具有期望的组成和期望的配合物中锗与氨基酸和 羧酸之比的锗配位化合物。
[0024] 发明概述
[0025] 所要求的目标因请求保护的锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物的制备方法 而得以实现，该方法包括：混合二氧化锗与水，由此得到二氧化锗的水性混悬液；向得到的 二氧化锗混悬液中添加至少一种氨基酸或至少一种氨基酸和至少一种羧酸的混合物；在 40-100°C的温度下将得到的混合物加热2-14小时，以便产生目标产物，其为锗与氨基酸或 与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物；和除去水，得到粉状产物。
[0026] 由此产生的锗与氨基酸或与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物是白色无定形粉 末，充分溶于水，具有如下结构式：
[0027] Ge[0H]a[AA]b[CA]c ⑴
[0028] 其中AA是选自如下的氨基酸：大量已知的α-氨基酸，例如（但不限于）丙氨酸、 氨基丁酸、精氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、正缬氨酸、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨 酸、正亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸和苯丙氨酸；和/ 或其他氨基酸，例如Υ-氨基丁酸；
[0029] CA是选自如下的羧酸：一元羧酸，例如（但不限于）乙酸、二氯乙酸和异戊酸；二 元羧酸，例如（但不限于）壬二酸、丙二酸、草酸、苯二甲酸和琥珀酸；羟基羧酸，例如（但不 限于）酒石酸、柠檬酸、乳酸和苹果酸；轻基苯甲酸，例如（但不限于）水杨酸；和吡啶一元 羧酸，例如（但不限于）烟酸；且
[0030] a = 0-3, b = 1-3, c = 0-3,其中 1 < b+c < 4 ;
[0031] 且其中配位化合物中所有的AA相同或不同，且
[0032] 配位化合物中所有的CA相同或不同。
[0033] 本发明的详细公开内容
[0034] 为了制备稳定的锗与广泛氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物，本发明提出了一种 简单方法，其包括最少的步骤数量，使得其易于作为粉末分离并且通过溶于水再转移到水 溶液中。该方法提供了具有不同比例的锗与氨基酸和羧酸的锗配位化合物。该化合物不含 不期望的离子且适用于药物活性剂。
[0035] 本发明的方法的特征在于混合二氧化锗与水，得到水性混悬液，在搅拌下向二氧 化锗的水性混悬液中加入氨基酸或氨基酸和羧酸，在40-100°C的温度下将该混合物搅拌 2-14小时，得到目标产物的溶液，然后除去水，得到目标产物，为无定形白色粉末。
[0036] 所用的二氧化锗可以是水不溶性的α多晶型物或水溶性的β多晶型物。更优选 水不溶性的α -二氧化锗，当与水混合时，其产生二氧化锗在水中的混悬液。
[0037] 根据该方法可以加入几种氨基酸和几种羧酸。
[0038] 用于本发明方法的氨基酸（ΑΑ)包括：来自广泛已知的α -氨基酸的氨基酸，例如 (但不限于）丙氨酸、氨基丁酸、精氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、正缬氨酸、组氨酸、甘氨酸、谷氨 酸、异亮氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨 酸、苯丙氨酸；和其他氨基酸，例如氨基丁酸。还可以使用不同氨基酸的混合物、特别是 上述举出的氨基酸的混合物。优选α_氨基酸用于上下文中的方法。
[0039] 用于本发明方法的羧酸（CA)包括一元羧酸、二元羧酸、羟基羧酸、羟基苯甲酸或 这些酸的混合物。有用的一元羧酸包括（但不限于）乙酸、二氯乙酸和异戊酸。有用的二 元羧酸包括（但不限于）壬二酸、丙二酸、草酸、苯二甲酸和琥珀酸。有用的羟基羧酸包括 (但不限于）酒石酸、柠檬酸、乳酸和苹果酸。有用的羟基苯甲酸包括（但不限于）水杨酸。 有用的吡啶一元羧酸包括（但不限于）烟酸。
[0040] 锗配位化合物中锗与酸之比取决于加入到二氧化锗水性混悬液中的氨基酸和羧 酸的量。控制加入的酸与二氧化锗的量之间的比例，可以得到具有不同比例的酸与二氧化 锗的配位化合物。当将酸与二氧化锗以化学计算量混合时，形成配位化合物，其中锗与酸的 摩尔比为1:1。当以相对于化学计算量2倍、3倍或4倍量加入酸时，得到的配位化合物分 别具有2:1、3:1或4:1的酸与锗的摩尔比。
[0041] 本申请上下文中的术语"酸"是指氨基酸或氨基酸的混合物、羧酸或羧酸的混合 物、或全部的氨基酸和羧酸。
[0042] 进行反应以产生目标锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物时的温度为 40-100°C。优选的温度为80-100°C，更优选的温度为85-100°C。
[0043] 反应时间为2-14小时。优选的反应时间为4-10小时，更优选的反应时间为4-6 小时。
[0044] 通过完全溶解二氧化锗（当使用不溶性的二氧化锗时）和形成澄清溶液表明包含 锗的配位化合物形成。其他方法也可以用于监测产物形成，例如涉及采样和分析样品的那 些方法。
[0045] 为了分离包含锗的化合物，过滤溶液，然后通过一些公知方法从溶液中除去水。任 意已知的方法适合于该目的，例如水蒸发、真空蒸馏或冻干（冷冻干燥）。
[0046] 可以将不同的氨基酸和羧酸作为酸的混合物同时加入到二氧化锗的水性混悬液 中，否则，可以采用连续添加不同的氨基酸和羧酸。
[0047] 该方法的一种变化形式是这样的方法，其中将氨基酸加入到二氧化锗的水性混悬 液中，将得到的混合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热5-10小时期限，直到形成澄清溶 液为止，然后将羧酸加入，并且在80-KKTC下继续加热1-2小时，过滤该溶液，除去水，得到 固体形式的配位化合物。
[0048] 该方法的另一种变化形式是这样的方法，其中将羧酸加入到二氧化锗的水性混悬 液中，将得到的混合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热5-10小时期限，直到形成澄清溶 液为止，然后将氨基酸加入，并且在80-KKTC下继续加热1-2小时，过滤该溶液，除去水，得 到固体形式的配位化合物。
[0049] 该方法的另一种变化形式是这样的方法，其中将氨基酸和羧酸的混合物加入到二 氧化锗的水性混悬液中，将得到的混合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热2-10小时期 限，直到形成澄清溶液为止，过滤该溶液，除去水，得到固体形式的配位化合物。
[0050] 得到产物，为白色无定形粉末，其易溶于水。
[0051] 对通过本发明方法生产的不同的锗与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物研究NMR 和IR光谱并且对这些配位化合物进行元素分析。由此得到的数据显示包含锗的化合物具 有如下一般结构式：
[0052] Ge[0H]a[AA]b[CA]。⑴
[0053] 其中AA是选自如下的氨基酸：大量已知的α-氨基酸，例如（但不限于）丙氨酸、 氨基丁酸、精氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、正缬氨酸、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨 酸、正亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸和苯丙氨酸；和/ 或其他氨基酸，例如Υ-氨基丁酸；
[0054] CA是选自如下的羧酸：一元羧酸，例如（但不限于）乙酸、二氯乙酸和异戊酸；二 元羧酸，例如（但不限于）壬二酸、丙二酸、草酸、苯二甲酸和琥珀酸；羟基羧酸，例如（但不 限于）酒石酸、柠檬酸、乳酸和苹果酸；轻基苯甲酸，例如（但不限于）水杨酸；和吡啶一元 羧酸，例如（但不限于）烟酸；且
[0055] a = 0-3, b = 1-3, c = 0-3,其中 1 < b+c < 4。
[0056] 上述举出的水溶液中的酸与二氧化锗形成配位化合物，其不仅在水溶液中是稳定 的，而且可以以纯的形式分离。这一结果通过在氮与锗原子（N - Ge)或羟基羧酸的0H氧 与锗（HO -Ge)之间形成配位键得以强化。
[0057] 根据本发明生产的优选化合物II-XI的具体结构式如下所示。
[0058]

【权利要求】
1. 下式的锗与氨基酸或与氨基酸和羧酸形成的锗配位化合物： Ge[OH]a[AA]b[CA]c (I) 其中AA是氨基酸； CA是羧酸； a = 0-3, b = 1-3, c = 0-3,且 1 < b+c < 4 ; 且其中配位化合物中所有的AA相同或不同，且 配位化合物中所有的CA相同或不同。
2. 权利要求1的锗配位化合物， 其中氨基酸选自：α -氨基酸，例如丙氨酸、氨基丁酸、精氨酸、天冬氨酸、缬氨酸、正缬 氨酸、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、丝 氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸和苯丙氨酸；和非α-氨基酸的氨基酸，例如 Υ-氨基丁酸； 且 羧酸选自：一元羧酸，例如乙酸、二氯乙酸和异戊酸；二元羧酸，例如壬二酸、丙二酸、 草酸、苯二甲酸和琥珀酸；羟基羧酸，例如酒石酸、柠檬酸、乳酸和苹果酸；羟基苯甲酸，例 如水杨酸；和吡啶一元羧酸，例如烟酸。
3. 权利要求1的锗配位化合物，具有结构式ΙΙ-ΧΙ :

其中Ri表示相应的α -氨基酸部分；R2和R3表示相应的羟基羧酸部分；且R4表示相应 的二元羧酸部分。
4.权利要求3的锗配位化合物，具有： 结构式Π ，其中所述氨基酸是精氨酸；或 结构式III，其中所述氨基酸是赖氨酸；或 结构式IV，其中所述氨基酸是苏氨酸；或 结构式VII，其中所述氨基酸是精氨酸或苏氨酸，且所述羧酸是壬二酸或富马酸；或 结构式VI，其中所述氨基酸是赖氨酸，且所述羧酸是柠檬酸；或 结构式VIII，其中所述氨基酸是甘氨酸或谷氨酸，且所述羧酸是柠檬酸或苹果酸；或 结构式V，其中所述氨基酸是赖氨酸，且所述羧酸是水杨酸；或 结构式IX，其中所述氨基酸是苏氨酸，且所述羧酸是烟酸；或 结构式X，其中所述羧酸是二氯乙酸，且所述氨基酸是苏氨酸；或 结构式XI，其中所述氨基酸是甘氨酸，且所述羧酸是柠檬酸和苹果酸。
5. 锗与精氨酸和壬二酸形成的锗配位化合物。
6. 制备权利要求1的化合物的方法，包括： 提供α-二氧化锗的水性混悬液； 向α-二氧化锗的水性混悬液中加入至少一种氨基酸或至少一种氨基酸和至少一种 羧酸； 将得到的混合物在搅拌下在40-100°C的温度下加热2-14小时，然后过滤，并除去水， 从水溶液中分离配位化合物。
7. 权利要求6的方法，其中所述加热在80-100°C的温度下进行4-10小时。
8. 权利要求7的方法，其中所述加热在85-100°C的温度下进行4-6小时。
9. 权利要求6的方法，其中将加热在搅拌下进行至形成澄清溶液为止。
10. 权利要求6的方法，其中将所述氨基酸和所述羧酸连续加入或作为混合物加入。
11. 权利要求10的方法，其中将氨基酸加入到α -二氧化锗的水性混悬液中，将得到的 混合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热5-10小时，直到形成澄清溶液为止，然后将羧酸 加入,并且在80-100°C下继续加热1-2小时，将溶液过滤，并将水除去，得到固体形式的配 位化合物。
12. 权利要求10的方法，其中将羧酸加入到α -二氧化锗的水性混悬液中，将得到的混 合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热5-10小时，直到形成澄清溶液为止，然后将氨基酸 加入,并且在80-100°C下继续加热1-2小时，将溶液过滤，并将水除去，得到固体形式的配 位化合物。
13. 权利要求10的方法，其中将氨基酸和羧酸的混合物加入到α-二氧化锗的水性混 悬液中，将得到的混合物在搅拌下在80-100°C的温度下加热2-10小时，直到形成澄清溶液 为止，将溶液过滤，并将水除去，得到固体形式的配位化合物。
14. 权利要求6-13任一项的方法，其中通过选自蒸发、在加热下真空蒸馈和冻干（冷冻 干燥）的方法将水除去。
15. 药物组合物或药剂，包含权利要求1-5任一项的锗配位化合物作为活性成分。
16. 药物组合物或药剂，包含锗与精氨酸和壬二酸形成的锗配位化合物作为活性成分。
17. 权利要求16的药物组合物或药剂，适合于治疗由痤疮丙酸杆菌 (Propionibacterium acnes)导致的疾病。
18. 权利要求1-5任一项的化合物作为活性成分在制备用于医学、药学、化妆品或兽医 学应用的活性剂中的用途。
19. 权利要求18的用途，其中所述化合物是锗与精氨酸和壬二酸形成的锗配位化合 物。
【文档编号】A61K31/28GK104203965SQ201280071062
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2012年11月9日 优先权日:2012年1月25日
【发明者】A·D·伊萨耶夫, T·O·曼纳舍罗夫, I·V·安波罗索夫, S·K·马特洛 申请人:Wds医药有限责任公司